黑茶散茶金花菌胶囊的制备方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及生物医药领域，具体是一种黑茶散茶金花菌胶囊的制备方法。
【背景技术】
[0002]以前黑茶主要做成茯砖茶，该茶的优点是别于储存，但缺点是食用不方便，因为一般需要用刀等尖锐器具切割。现在黑茶散茶因食用更为方便而引起人们广泛关注，已有成熟的产品上市，将成为以后黑茶市场的主流。黑茶散茶的关键工艺也在于发花，通过接种，在适当的温度和湿度的条件下使黑茶散茶金花菌生长繁殖，从而使该茶叶具备独特的品质风味。黑茶具有公认的提高人体免疫力、降糖、降血脂和抗肿瘤等多方面有益健康的作用，还有助于人体排毒。
[0003]金花菌是黑茶中的有益真菌，是黑茶表现上述生物活性的主要因素。因此，利用黑茶散茶中的金花菌，制成有保健功能的胶囊，能提高金花菌的使用效率，方便食用，也为黑茶散茶的升级提供更大的空间。
【发明内容】
[0004]本发明的目的在于提供一种黑茶散茶金花菌胶囊的制备方法，通过对黑茶散茶进行系统的处理，使其成为繁殖过程中的优势菌，得到干粉后，制成质量稳定的胶囊，该胶囊具有提高人体免疫力、降糖、降血脂和抗肿瘤等多方面人体排毒功效。
[0005]为实现上述目的，本发明提供如下技术方案:
[0006]黑茶散茶金花菌胶囊的制备方法，具体步骤为:
[0007](I)黑茶散茶的处理；
[0008](2)黑茶散茶金花菌发酵液的制备；
[0009](3)黑茶散茶金花菌培养基的制备；
[0010](4)黑茶散茶金花菌的培养、纯化；
[0011](5)黑茶散茶金花菌的保存；
[0012](6)黑茶散茶金花菌干粉的制备；
[0013](7)黑茶散茶金花菌胶囊的制备。
[0014]作为本发明进一步的方案:所述的黑茶散茶的处理，步骤为:用小型植物粉碎机粉碎黑茶散茶，过200目筛，65 °C干燥，2h后称取2g黑茶散茶样品，定容20ml，分别用10倍、100倍、1000倍、10000倍、10000倍梯度稀释为20ml，取1000倍、10000倍、10000倍梯度稀释的黑茶散茶样品改良PDA平板。
[0015]作为本发明进一步的方案:所述的黑茶散茶金花菌发酵液的制备，步骤为:接种实验室已经分离纯化的黑茶金花菌于PDA液体培养基中，28 °C培养至OD值为0.6-0.8，用0.2μΜ过滤膜进行过滤灭菌，即为制备好的黑茶散茶金花菌发酵液。
[0016]作为本发明进一步的方案:所述的黑茶散茶金花菌培养基的制备，步骤为:该黑茶散茶金花菌培养基是改良的PDA固体培养基，改良的方法为按照常规方法配制TOA固体培养基，灭菌后冷却至50°C左右，按照培养基量和黑茶散茶金花菌发酵液体积比10:1添加制备好的黑茶散茶金花菌发酵液，趁热倒平板。
[0017]作为本发明进一步的方案:所述的黑茶散茶金花菌的培养、纯化，步骤为:取1000倍、10000倍、10000倍梯度稀释的黑茶散茶样品各0.5ml涂布于黑茶散茶样品改良PDA平板超净台上吹干，28°C培养2-3天，挑取金黄色优势菌落，画线接种至同样的黑茶散茶样品改良的PDA平板上，同样条件继续培养直到纯化;判断方法:当黑茶散茶金花菌落呈现金黄色，菌落形态相同、大小一致，无其它杂菌生长即表示黑茶散茶金花菌已经纯化分离。
[0018]作为本发明进一步的方案:所述的黑茶散茶金花菌的保存，步骤为:用改良PDA斜面管保存于4 0C冰箱中或用改良PDA液体培养基制成孢子悬液加体积浓度为50 %灭菌甘油于-70°C冰箱保存。
[0019]作为本发明进一步的方案:所述的黑茶散茶金花菌干粉的制备，步骤为:
[0020]61)渥堆:用喷雾器在干燥的黑毛茶原料上喷洒少量水，水分控制在14_16wt%，温度控制在22-25°C，空气相对湿度至少80%，渥堆10-15h;
[0021]62)蒸茶:用 100-106°C 的蒸汽蒸 4min;
[0022]63)喷洒黑茶散茶金花菌:将一定量保存好的黑茶散茶金花菌喷洒在经蒸汽处理后的茶叶上，添加量为0.25ml/100g ；
[0023]64)烘茶:将黑茶散茶金花菌喷洒过的黑毛茶用保鲜袋密封，再用100_115°C的蒸汽进行蒸汽杀菌15min ；
[0024]65)茶叶发花:蒸汽杀菌后的茶叶含水量控制在20_24wt%范围内，温度控制在30-35°C，空气相对湿度控制在70-85% ；
[0025]66)高温盐水固定金花:将保鲜膜撕掉，向发花后茶叶均匀喷洒质量分数为1%的食盐水，放入灭菌器中150°C高压蒸汽1min;
[0026]67)干燥:干燥温度控制在38_42°C，先低后高，干燥至含水率14wt%以内；
[0027]68)黑茶散茶金花菌干粉的制备:在超净工作间，将干燥好的含金花菌的黑毛茶脱落金花菌，机械粉碎，然后过200目筛，65 °C干燥，即得。
[0028]作为本发明进一步的方案:所述的黑茶散茶金花菌胶囊的制备，硬胶囊剂是采用以下述制剂技术制备:将药物充填于空心胶囊中，步骤为:
[0029]71)空心胶囊由市场购得，选可塑性强，透明度好，并含有改性淀粉25_75wt%、卡拉胶10-30wt %、增塑剂(山梨醇)10-25wt %、水40-50wt %、增稠剂(海藻胶和羟丙甲纤维素)2-12wt% ；
[0030]72)将50-150mg的黑茶散茶金花菌干粉加辅料，辅料以15_20wt %改性淀粉为稀释剂，以0.1-3#%滑石粉为助流剂等制成均匀的粉末或颗粒；
[0031]73)取空心胶囊，单独填充。
[0032]作为本发明进一步的方案:上述黑茶散茶金花菌胶囊含黑茶散茶金花菌干粉的剂量为:每粒I OOmg和150mg两种规格。
[0033]上述技术方案中，所述的F1DA指Potato Dextrose Agar的简称，中文含义为:马铃薯葡萄糖琼脂培养基。
[0034]PDA平板指培养基灭菌后冷却至50 °C左右，在超净工作台上将培养基倒入事先已经灭菌并干燥的培养皿中，待冷却即为制得的PDA培养基平板。
[0035]改良PDA固体培养基:将马铃薯洗净去皮，称取200g，切成小块放入烧杯中，加适当的蒸馏水，煮沸Ih，稍冷后用双层纱布过滤，在滤液中加10ml制备好的茶汁，然后加入15g琼脂，加热融化，最后加入蔗糖20g，混匀，用量筒定容至1000ml，趁热分装在三角瓶中，在121°C温度下l.lkg/cm2压力中保持20min灭菌。灭菌结束后冷却至50°C左右，在超净工作台上将10wt%茶汁的PDA琼脂固体培养基倒入事先已经灭菌并干燥的培养皿中，待冷却即为制得的1wt %茶汁PDA琼脂固体培养基平板。
[0036]改良PDA固体培养基在黑茶散茶金花菌的分离:10wt%茶汁TOA琼脂固体培养基按照上述方法制备，灭菌结束后冷却至50°C左右，按照培养基量和黑茶散茶金花菌发酵液体积比10:1添加制备好的黑茶散茶金花菌发酵液。趁热到平板，即为黑茶散茶金花菌平板，SP为PDA固体培养基平板。
[0037]画线接种:用灭菌的接种针在超净台中将已经生长好的菌落挑取，在新的固体培养基平皿画线分离相应的微生物。
[0038]金花菌落:金花菌在10wt%PDA培养基平板上生长到一定时候形成的一个菌落集合体，菌落是指聚集在一起的微生物团。
[0039]茶汁的制备方法:按照Ig:30ml散茶样本与蒸馏水的比例称取20g散茶，加入600ml蒸馏水，100°C水浴2h，待稍冷却后用量筒定容至600ml即为制备好的茶汁。
[0040]黑茶散茶金花菌发酵液的制备:接种实验室已经分离纯化的黑茶散茶金花菌于添加1wt %茶汁的PDA液体培养基中，28 °C培养至OD值0.6-0.8，用0.2uM过滤膜进行过滤灭菌，即为制备好的黑茶散茶金花菌发酵液，OD值即为吸光值。
[0041]本研究能得到干燥好的含金花菌的黑毛茶脱落金花菌，产量为每I公斤毛茶得到至少5g的金花菌干粉。
[0042]与现有技术相比，本发明的有益效果是:本发明通过对黑茶散茶进行系统的处理，大量繁殖黑茶散茶金花菌有益菌，使其成为繁殖过程中的优势菌，得到干粉后，制成胶囊，该胶囊质量稳定，具有提高人体免疫力、降糖、降血脂和抗肿瘤等多方面人体排毒功效。
【具体实施方式】
[0043]下面将结合本发明实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
[0044]实施例1
[0045]本发明实施例中，黑茶散茶金花菌胶囊的制备方法，具体步骤为:
[0046](I)黑茶散茶的处理:将黑茶散茶用小型植物粉碎机粉碎，过200目筛，65°C干燥，2h后称取2g样品，定容20ml，10倍、100倍、1000倍、10000倍、10000倍梯度稀释为20ml，取1000倍、10000倍、10000倍梯度稀释的改良PDA平板；
[0047]其中改良PDA固体培养基的制备，步骤为:将马铃薯洗净去皮，称取200g，切成小块放入烧杯中，加适当的蒸馏水，煮沸Ih，稍冷后用双层纱布过滤，在滤液中加10ml制备好的茶汁，然后加入15g琼脂，加热融化，最后加入蔗糖20g，混匀，用量