专利名称：稀土杂多(同多)酸盐(蓝)类抗流感病毒药物及其合成方法
技术领域：
本发明属于化学合成药物及其合成方法，涉及到稀土杂多(同多)酸盐(蓝)类化学药物及其合成方法。
背景技术：
流行性感冒是由流感病毒引起的急性上呼吸道传染性疾病，具有传染性高，传播迅速，易发生流行等特点。若控制不及时将给人们的健康带来严重的损害。目前FDA批准用于防治流感的药物只有金刚烷胺(amantadine)和金刚烷乙胺(rimantadine)，但由于它们抗病毒作用谱相对较窄，且易很快产生耐药株，毒副作用较大，而使其应用受到限制。因此对现有的抗流感病毒药物进行化学修饰，以希开发高效、广谱、低毒的抗流感病毒药物已成为研究者十分关注的研究课题。
杂多(同多)化合物的药物化学研究自七十年代初就有报导，八十年代相继发现具有Keggin结构的中心原子为锗或硼的含钨系列杂多化合物体外对流感病毒有较强的抑制作用。九十年代末发现含稀土元素的杂多钨酸盐具有干扰病毒DNA及RNA转录酶的活性。近年来，日本的Shuichi Mori等报道杂多化合物[PriNH3]6H[PTi2W10O38(O2)]·H2O和抗流感病毒药物病毒唑联合用药可缩短治疗时间，且减少各自副作用，表明二者间具有协同作用。
本发明是利用多金属氧酸盐的特性，采用有机-无机杂化方法，对现有的抗流感病毒药物进行化学修饰，合成了叁类在现有报道中没有的含有通式AxBy[Lnz(XM12-mO40-m)g]·n(H2O)和Ap[MjOq]·n(H2O)的化合物作为抗流感病毒药物。
附图1-3为稀土杂多(同多)酸盐(蓝)类抗流感病毒药物合成工艺流程图。
附图4为稀土杂多(同多)酸盐(蓝)类抗流感病毒药物的化学结构图。
发明内容
本发明的目的之一在于提供叁类抗流感毒活性高、毒性低、价格低廉的药物。
本发明的目的之二在于提供叁种制备上述药物的方法。
本发明的抗流感病毒药物是以通式AxBy[Lnz(XM12-mO40-m)g]·n(H2O)和Ap[MjOq]·n(H2O)所表示，具有Keggin和Lindqvist等结构的多酸化合物，(A氨基酸离子，金刚烷胺，病毒唑等；B碱金属；X为周期表中IIIA-VA族或d区过渡元素中的一种，M为Mo，W；Ln为镧系元素中的一种，通常下，x＝0-5，y＝0-5，z＝0-1，m＝0-1，g＝1-2，p＝2-8，j＝6-8，q＝19-26，n＝2-15)，其中结构中X为杂原子，通常以四面体构型(XO4)与四个氧原子连接，M是配原子以八面体配位与周围六个氧原子连接，结构中共有四组三金属簇(M3O13)，它们之间共顶点连接。
本化合物易溶于有机溶液中，本发明的抗流感病毒药物溶液在pH＝3-8时化学性质是稳定的。
制备方法一将二水合钨酸钠(或钼酸钠)103g(0.31mol)溶于250g水中，搅拌溶解。将含IIIA-VA族的化合物(例如氧化锗、硼酸、硅酸钠等)27.24g(0.26mol)溶解在2mol/L26mL的NaOH溶液中，稀释至135mL后加入到钨酸钠的容液中。将混合液加热至80℃，反应1h，萃取过滤，放置，得无色晶体。将此晶体溶于100ml蒸馏水中并向其中加入一定量氨基酸盐或金刚烷胺盐等，在35-70℃下搅拌1-3h，得白色沉淀物。沉淀物用少量水洗涤得一定质量白色固体AxBy[[LnzXM12O40]·n(H2O)。
制备方法二将二水合钨酸钠(或钼酸钠)50g(0.207mol)溶解在200g蒸馏水中，向溶液中加入一定量氨基酸盐或金刚烷胺盐等(0.104mol)，在35-70℃下搅拌1-2h，得白色沉淀物。沉淀物用少量水洗涤，得一定质量白色固体Ap[MjOq]·n(H2O)。
制备方法三将二水合钨酸钠100g(0.303mol)，含IIIA-VA族化合物或d区过渡元素的化合物0.16mol(例如硼酸，硅酸钠等)溶解在500g水中。加热搅拌下滴加3M HCL，反应1h，加入Ln(NO3)3溶液继续搅拌30min，用KAC调pH再继续搅拌20min，加入一定量的碱金属盐或金刚烷胺盐等，搅拌，滤去不溶物。0-5℃放置，析出晶体。60℃温水重结晶得纯品。
一、药效学实验(一)体外实验1、细胞病变法检测药物抗流感病毒的活性(1)实验材料细胞MDCK(狗肾细胞)病毒流感病毒A(H3N2/京科/30/95)培养液含10％胎牛血清的E-MEM培养液
(2)实验步骤I)CPE法测定病毒对MDCK细胞半数毒性浓度(TCID50)II)CPE法结合MTT法确定药物对细胞的无毒浓度III)CPE法测定药物抗流感病毒活性(3)实验结果I)病毒TCID50为7×10-5II)药物取5个浓度既1600、800、400、200、100μg/ml进行细胞毒性测定，每个浓度做4个复孔，同时设细胞对照。结果显示半数毒性浓度TC50为1064μg/mlIII)药物取8个浓度既800、400、200、100、50、25、12.5、6.25μg/ml进行抗病毒活性测定，每个浓度做4个复孔，同时设病毒对照，阳性对照，及细胞对照。结果显示半数抑制浓度IC50为11.5μg/ml。抗病毒指数TI为92.52、鸡胚实验法测定药物抗流感病毒的活性(1)实验材料鸡胚来源于长春生物制品研究所病毒流感病毒A(H3N2)京科30/95(2)实验步骤I)化合物对鸡胚半数致死量LD50II)病毒致鸡胚半数感染剂量EID50的测定III)抗流感病毒活性实验将20 EID50的流感病毒接种于10日龄鸡胚尿囊腔，每胚0.2ml，33℃温箱中孵育1h，化合物配制成浓度为2、1、0.5、0.25、0.125、0.0625mg/mL，每一浓度接种10只10日龄鸡胚，每胚0.2ml，设病毒对照，溶剂对照及阳性对照，置33-35℃温箱孵育，72h将鸡胚放置4℃冰箱内过夜，次日收集鸡胚尿囊液，检查鸡胚尿囊液的血凝性，如不出现血凝现象，说明化合物对病毒具有抑制作用。
(3)实验结果I)化合物对鸡胚半数致死量LD50为12mg/mLII)病毒致鸡胚半数感染计量EID50为10-5III)化合物抗流感病毒半数有效浓度ED50为0.17mg/mL(二)体内实验1、实验材料受试药物POMS-1
实验动物吉林大学实验动物部提供，昆明小鼠，体重18±2g，雌雄各半。
采用随机分组方式，每组10只。
病毒流感病毒FM1，由中国医学科学院医学生物技术研究所病毒室提供。
2、实验步骤(1)病毒FM1致小鼠的半数致死量LD50(2)药物对FM1型流感病毒感染小鼠治疗效果小鼠用乙醚麻醉，滴鼻感染4LD50的FM1病毒，每只0.04ml，感染后立刻给药，口服给药物剂量每次0.5ml。实验分三个剂量组，即200，100，50mg/kg，同时设阳性对照，病毒对照，正常对照。
3、实验结果(1)病毒FM1致小鼠半数致死量LD50为2.5×10-5(2)药物对FM1型病毒感染小鼠治疗效果表1.药物对FM1型感染小鼠死亡的治疗结果剂量 死亡数 生存数 死亡率 死亡保护率 平均生活日 延长生命率药物 mg/kg ％％ d ％POMS 200 010 0 100 14 105.9100 282080 13 94.150 464060 12 91.2病毒唑200 373070 12.888.2病毒对照 91906.8POMS对照 200 010正常对照 010 0 100EC50＝26.4mg/kg二、急性毒性实验昆明小鼠，体重18-22g，分6个剂量组，每组10只雌雄各半，采用完全随机法分组，最高剂量10000mg/kg，最低剂量1000mg/kg，公比为1.58。各剂量组等比稀释，按0.2mL/20g体重经口灌胃给药，实验前禁食12h，给药后观察小鼠中毒反应，记录小鼠死亡时间，并作尸体解剖，连续观察一周，采用改良寇氏法计算LD50结果见表。
表1杂多化合物的LD50统计计算方法组别剂量(mg/kg) 剂量对数 动物数 死亡数p q＝1-p pq610000.00 4.00 10 10 1.0 0.0 0.00
5 6309.57 3.80.10 9 0.9 0.1 0.094 3981.07 3.60 10 6 0.6 0.4 0.243 2511.89 3.40 10 5 0.5 0.5 0.252 1584.89 3.20 10 1 0.1 0.9 0.091 1000.00 3.00 10 0 0.0 1.0 0.00合计 3.1 2.9 0.67LD503044.33mg/kgLD5095％可信限2219.69～4141.90mg/kg四、结论药效学实验体外(1)CPE法测得半数毒性浓度TC50为1064μg/ml，半数抑制浓度IC50为11.5μg/ml，抗病毒指数TI为92.5。(2)鸡胚实验法测得半数致死量LD50为12mg/mL，病毒致鸡胚半数感染计量EID50为10-5，药物抗流感病毒半数有效浓度ED50为0.17mg/mL，抗病毒指数TI为70.6。体内(1)病毒FM1致小鼠半数致死量LD50为2.5×10-5(2)药物对FM1型病毒感染小鼠治疗效果EC50＝26.4mg/kg。
急性毒性实验小鼠体内急性毒性实验，半数致死量LD50为3375mg/kg。本发明对流感病毒抑制活性较高，毒性较低，价格低廉，如若顺利完成必将产生较大的经济效益和社会效益。
附图1为稀土杂多(同多)酸盐(蓝)类抗流感病毒药物合成工艺流程图。
附图2为稀土杂多(同多)酸盐(蓝)类抗流感病毒药物合成工艺流程图。
附图3为稀土杂多(同多)酸盐(蓝)类抗流感病毒药物合成工艺流程图。
附图4为稀土杂多(同多)酸盐(蓝)类抗流感病毒药物的化学结构图。
具体实施例方式
实施方式1将二水合钨酸钠103g(0.312mol)溶于250g水中，搅拌溶解。将氧化锗27.24g(0.26mol)溶解在2mol/L 26mL的NaOH溶液中，稀释至135mL后加入到钨酸钠的容液中。将混合液加热至80℃，反应1h，萃取过滤，放置，得无色晶体。将此晶体溶于100ml蒸馏水中并向其中加入金刚烷胺盐酸盐19g(0.101mol)，在35-70℃下搅拌1-3h，得白色沉淀物。沉淀物用少量水洗涤得一定质量白色固体(C10H18N)4[GeW12O40]·n(H2O)。
实施方式2将钼酸钠50g(0.207mol)溶解在200g蒸馏水中，用6.0M HCl酸化，向溶液中加入金刚烷胺盐3g(0.016mol)，在40℃下搅拌1-2h，得一定质量白色固体(C10H18N)4Mo8O26·n(H2O)。
实施方式3将二水合钨酸钠100g(0.303mol)，硼酸10g(0.16mol)溶解在500g水中。加热90°C在不断搅拌下滴加3M HCL调pH＝6.5，然后加入Ce(NO3)3溶液继续搅拌30min，用KAC调pH＝6再继续搅拌20min，加入一定量的碱金属盐或金刚烷胺盐等，搅拌，滤去不溶物。0-5℃放置，得K15[Ce(BW11O39)2]·n(H2O)。
权利要求
1.一种稀土杂多(同多)酸盐(蓝)类抗流感病毒药物，其特征是通式以AxBy[Lnz(XM12-mO40-m)g]·n(H2O)和Ap[MjOq]·n(H2O)所表示，具有Keggin和Lindqvist等结构的多酸化合物，(A氨基酸离子，金刚烷胺，病毒唑等；B碱金属；X为周期表中IIIA-VA族或d区过渡元素中的一种，M为Mo，W；Ln为镧系元素中的一种，通常下，x＝0-5，y＝0-5，z＝0-1，m＝0-1，g＝1-2，p＝2-8，j＝6-8，q＝19-26，n＝2-15)，其中结构中X为杂原子，通常以四面体构型(XO4)与四个氧原子连接，M是配原子以八面体配位与周围六个氧原子连接，结构中共有四组三金属簇(M3O13)，它们之间共顶点连接。
2.一种稀土杂多(同多)酸盐(蓝)类抗流感病毒药物的合成方法，其特征是将二水合钨酸钠(或钼酸钠)103g(0.31mol)溶于250g水中，搅拌溶解，将含IIIA-VA族的化合物(例如氧化锗、硼酸、硅酸钠等)27.24g(0.26mol)溶解在2mol/L 26mL的NaOH溶液中，稀释至135mL后加入到钨酸钠的容液中，将混合液加热至80℃，反应1h，萃取过滤，放置，得无色晶体，将此晶体溶于100ml蒸馏水中并向其中加入一定量氨基酸盐或金刚烷胺盐等，在35-70℃下搅拌1-3h，得白色沉淀物，沉淀物用少量水洗涤得一定质量白色固体AxBy[[LnzXM12O40]·n(H2O)。
3.一种稀土杂多(同多)酸盐(蓝)类抗流感病毒药物的合成方法，其特征是将二水合钨酸钠(或钼酸钠)50g(0.207mol)溶解在200g蒸馏水中，向溶液中加入一定量氨基酸盐或金刚烷胺盐等(0.104mol)，在35-70℃下搅拌1-2h，得白色沉淀物，沉淀物用少量水洗涤，得一定质量白色固体Ap[MjOq]·n(H2O)。
4.一种稀土杂多(同多)酸盐(蓝)类抗流感病毒药物的合成方法，其特征是将二水合钨酸钠100g(0.303mol)，含IIIA-VA族化合物或d区过渡元素的化合物0.16mol(例如硼酸，硅酸钠等)溶解在500g水中，加热搅拌下滴加3M HCL，反应1h，加入Ln(NO3)3溶液继续搅拌30min，用KAC调pH再继续搅拌20min，加入一定量的碱金属盐或金刚烷胺盐等，搅拌，滤去不溶物，0-5℃放置，析出晶体，60℃温水重结晶得纯品。
5.按照权利要求1所述的稀土杂多(同多)酸盐(蓝)类抗流感病毒药物的合成方法，其特征是液加热至80℃，反应1h，萃取过滤，放置，得无色晶体，将此晶体溶于100ml蒸馏水中并向其中加入金刚烷胺盐酸盐19g(0.101mol)，在35-70℃下搅拌1-3h，得白色沉淀物，沉淀物用少量水洗涤得一定质将二水合钨酸钠103g(0.312mol)溶于250g水中，搅拌溶解，将氧化锗27.24g(0.26mol)溶解在2mol/L 26mL的NaOH溶液中，稀释至135mL后加入到钨酸钠的容液中，将混合量白色固体(C10H18N)4[GeW12O40]·n(H2O)。
6.按照权利要求2所述的稀土杂多(同多)酸盐(蓝)类抗流感病毒药物的合成方法，其特征是将钼酸钠50g(0.207mol)溶解在200g蒸馏水中，用6.0M HCl酸化，向溶液中加入金刚烷胺盐3g(0.016mol)，在40℃下搅拌1-2h，得一定质量白色固体(C10H18N)4Mo8O26·n(H2O)。
7.按照权利要求3所述的稀土杂多(同多)酸盐(蓝)类抗流感病毒药物的合成方法，其特征是将二水合钨酸钠100g(0.303mol)，硼酸10g(0.16mol)溶解在500g水中，加热90℃在不断搅拌下滴加3M HCL调pH＝6.5，然后加入Ce(NO3)3溶液继续搅拌30min，用KAC调pH＝6再继续搅拌20min，加入一定量的碱金属盐或金刚烷胺盐等，搅拌，滤去不溶物，0-5℃放置，得K15[Ce(BW11O39)2]·n(H2O)。
全文摘要
本发明属于化学合成药物及其合成方法，涉及到稀土杂多(同多)酸盐(蓝)类化学药物及其合成方法。流行性感冒是由流感病毒引起的急性上呼吸道传染性疾病，具有传染性高，传播迅速，易发生流行等特点。若控制不及时将给人们的健康带来严重的损害。本发明是利用多金属氧酸盐的特性，采用有机－无机杂化方法，对现有的抗流感病毒药物进行化学修饰，合成了叁类含有通式A
文档编号A61K31/28GK1493277SQ03127148
公开日2004年5月5日 申请日期2003年9月9日 优先权日2003年9月9日
发明者王恩波, 李娟 , 李静, 齐燕飞, 王宏芳, 许林, 吴新宇 申请人:东北师范大学