专利名称：一种地塞米松棕榈酸酯冻干乳剂及其制备方法
技术领域：
本发明涉及医药技术领域，确切地说它是一种地塞米松棕榈酸酯冻干乳剂及其制备方法。
背景技术：
类风湿关节炎(Rheumatoid arthritis，RA)、骨性关节炎是一种常见的慢性炎性关节疾病。目前治疗这类疾病的药物主要为甾体类和非甾体类，由于甾体类药的疗效确切，为重症病人的治疗必备品，其作用是非甾体类药物不可代替的。目前，市场上的甾体类药物的剂型主要为两大类，一类为溶液型(包括冻干粉针)的针剂，另一类为混悬针剂。前者能“静脉注射”、“肌肉注射”、“关节腔注射”，但消除速度快，不能在血液中、组织中长时间维持有效浓度，且无靶向性；而后者不能“静脉注射”给药，由于混悬型中药物属晶体性，微粒大小不一致，粒子表面粗糙不平，故而在关节腔注射时，对局部刺激性较大，注射4～6小时后可引起局部症状加剧，部分病人会感不适，临床应用受限。(赵云猛 王翠琴利美达松与醋酸泼尼松龙局部注射治疗类风湿性关节炎的比较《疾病控制杂志》2000年第1期第4卷)，地塞米松是目前临床上应用最广的一类甾体激素类药物，其剂型亦包括两大类，如地塞米松磷酸酯钠的水针和醋酸地塞米松混悬针，日本吉富制药(Yoshitomi Pharm)将地塞米松进行棕榈酸酯化后，制成脂质微球乳注射剂，商品名为利美达松，给药途径广，可“静脉注射”、“肌肉注射”、“关节腔注射”，“硬膜外腔注射”，同时该剂型具有靶向性。有研究者对地塞米松磷酸钠(DP)和地塞米松棕榈酸酯脂质微球(Lipo-Dpal)的消炎作用、体内分布与疗效等进行了动物与临床试验。动物试验实验动物用雄性Wistar大鼠，分别作如下试验1.于鼠右后脚爪处皮下注射1％角叉莱胶盐水液0.1ml诱发水肿，30min后于尾静脉注射入不同剂量的Lipo-Dpal或DP，5h后检测水肿的抑制百分率；2.于鼠背皮下植入了7％甲醛浸渍的滤纸片(直径6mm)，于第5，6，7天分别经尾静注药物，第8天取下芽肿与滤纸片秤重，由抑制百分率标出ED50；3.于鼠背注入6ml空气以造成气囊，24h后于气囊中注入2％角叉菜胶盐水液诱发肉芽肿，于第5，6，7天注射Lipo-Dpal或DP，第8天切下肉芽肿秤重，以肉芽肿的抑制率标出ED50；4.在雌鼠后右脚侧表面注入0.05ml佐药(含乳酪分支杆菌0.6mg的液状石蜡悬液)诱发关节炎后，于第11天静注药物，隔天一次，共三次，第18天后测量左脚，标出ED50。结果表明，Lipo-Dpal与DP二者对角叉菜胶水肿急性发炎模型的疗效相同，但前者对甲醛水肿的疗效大2倍，对角叉莱胶肉芽肿的消炎作用大5.3倍。对关节炎的疗效大3.3倍。为了阐明Lipo-Dpal的疗效，进一步研究了Lipo-Dpal和DP在大鼠关节炎区的分布、吞噬细胞的摄取与对吞噬细胞功能，以及超氧化物阴离子释放等的影响。结果表明，Lipo-Dpal在关节炎受损连接处有较高含量的分布，在2～6h比DP高1.5倍；在24h内高约2倍，说明Lipo-Dpal浓集于炎性组织中。鼠腹水吞噬细胞与Lipo-Dpal或DP在体外培养30min后，摄取Lipo-Dpal比DP高7.8倍，被吞噬细胞摄取的Lipo-Dpal很快水解成D(地塞米松)。Lipo-Dpal可显著抑制吞噬细胞释放超氧化物阴离子，且强烈抑制吞噬细胞的趋药性与吞噬作用，Lipo-Dpal具有显著抗炎作用的原因有二点①本品浓集于发炎受损部位，即靶向性；②强烈影响吞噬细胞的功能。在人吞噬细胞中，进入发炎部位后的Dpal迅速水解为地塞米松。临床试验用双盲法交叉试验给风湿性关节炎病人分别静脉注射1ml的Lipo-Dpal或DP，按疗效与副作用评价，结果Lipo-Dpal组较DP组优。有文报道，关节腔内注射利美达松，每2周一次，4次为一疗程，一个疗程结束后，显效率达77％，改善率为23％，总有效率达100％，晨僵由平均13.5分钟降至3.2分钟，20米步行时间由33秒降至16秒，积液消失率达83％，而副作用几乎没有。另有文报道，肌肉注射每日一支，三天后改为口服强的松，疗程一周，治疗过敏性紫癜，痊愈率达80％，总有率为93.3％。北京同仁医院用该品1ml(内含氟美松2.5mg)以5％葡萄糖稀释成20-30ml后，静脉缓慢注射治疗强直性脊柱炎10例临床疗效的初步观察，每2周1次，4次为1个疗程。停药后2周复查血液指标，全疗程观察3个月。结果8周结束后10例均明显改善。晨僵由于均42分钟降至3.5分钟。20米步行时间由平均22.5秒降至10.5秒。关节疼痛点数由平均6.4个降至0个。四川省人民医院用本品4mg加入利多卡因0.5mg，甲状腺局部注射治疗慢性淋巴性甲状腺炎，每2周1次，6-12周为1疗程(A组)。对照组8例(B组)，口服强的松。6～12周，两组中甲低者，加服甲状腺素片20～80mg/d。结果两组病人用药后，甲状腺肿大体征均明显好转；甲状腺球蛋白抗体与甲状腺微粒体抗体结合率均明显下降；血T细胞亚群CT8水平有所下降；A组淋巴细胞浸润明显好转。B组均出现不同程度的药物性极兴综合征表现，并有1例血糖增高而中止治疗。表明A组均优于B组。另有报道，本品1ml(含氟美松2.5mg)静脉推注，每2周一次，3个月为一疗程治疗类风湿性关节炎，对照组为地塞米松，结果治疗组总有效率为95％，对照组总有效率为50％。本品硬膜外腔注射治疗腰腿痛的30例患者中21例痊愈，9例好转。硬膜外腔注射治疗腰椎间盘突出症，对35例患者进行了临床观察，结果表明利美达松优点明显多于得宝松。南京医科大学第二附属医院用本品局部注射治疗运动系统慢性损伤125例，治疗35天后进行疗效统计，利美达松组总有效率为95.4％，而强的松龙组总有效率为81.7％，两组差异显著(P＜0.05)。赵云猛等采用关节腔或关节周围组织内注射利美达松和醋酸泼尼松龙对37例类风湿性关节炎(RA)进行局部注射治疗研究，治疗4周后利美达松组治愈15.8％3例，显效52.6％，有效26.3％，总有效率94.7％，醋酸泼尼松龙组治愈5％，显效35％，有效40％，总有效率77.8％。利美达松组优于醋酸泼尼松龙组(赵云猛等 利美达松与醋酸泼尼松龙局部注射治疗类风湿性关节炎的比较《疾病控制杂志》2000年第1期第4卷)，在治疗慢性卡压周围神经损伤方面，利美达松优于糖皮质激素(利美达松等糖皮质激素对慢性卡压周围神经损伤后功能恢复的研究《中华麻醉学杂志》1999，19(11)668～671)。除此外，利美达松可用于“亚急性甲状腺炎”、“腰椎间盘脱出症”、“过敏性紫癜”、“运动系统慢性损伤”、“强直性脊柱炎”“骨性关节炎”等(利美达松局部注射治疗亚急性甲状腺炎疗效观察《天津医药》1999，27(1)39～40；两种新糖皮质激素对腰椎间盘脱出症疗效观察 重庆医科大学学报1998，23(2)184～185利美达松优点明显多于得宝松；利美达松与氢考治疗过敏性紫癜30例疗效观察《四川医学》1996，17(5)315；利美达松局部注射治疗运动系统慢性损伤125例分析《南京医科大学学报》1996，16(6)589；利美达松治疗突眼性甲状腺肿的疗效《新药与临床》1996，15(6)337～339；利美达松硬膜外腔注射治疗腰腿痛的临床观察《重庆医科大学学报》1996，21(1)71-72；利美达松治疗类风湿性关节炎疗效观察《滨州医学院学报》1994，17(4)336～337；慢性淋巴性甲状腺炎局部皮质醇治疗效观察《中华内科杂志》1994，33(10)692；利美达松治疗骨性关节炎30例临床疗效初步观察《首都医学院学报》1994，15(1)60～61；利美达松治疗强直性脊柱炎10例临床疗效的初步观察《北京医学》1993，15(6)326)。
鉴于地塞米松棕榈酸酯乳注射液的独特剂型特点和疗效，该产品被批准为国家基本药物。考虑到现有的注射液稳定性差，乳滴易于聚集，高温灭菌会对药物及辅料造成破坏，我们将其制成冻干乳剂，实验结果显示，本发明制备的冻干乳剂大大提高了地塞米松棕榈酸酯的稳定性，见“实施例8”。
发明内容
本发明的目的是提供一种地塞米松棕榈酸酯冻干乳剂及其制备方法，其制备工序简单，药物含量更加可控，提高了药物及附加剂(辅料)的稳定性。为广大患者提供更安全、稳定、有效的冻干乳剂。其主要技术方案是该冻干乳剂的成分为药物(地塞米松棕榈酸酯)、注射用油、乳化剂、稳定剂、pH调节剂、冻干保护剂，其余为注射用水。药物∶注射用油＝1∶0～1∶20(w/w)，注射用油可以是任何种类的植物油，如豆油、茶油、橄榄油、红花油等中的一种或几种混合物。粒度为10nm-1000nm。
乳化剂磷脂、泊洛沙姆、HS15(聚乙二醇12-羟基硬脂酸酯、polyethyleneglycol 660 hydroxystearate as a nonionic solubilizer for injection solutions)、维生素E聚乙二醇琥珀酸酯(TPGS)(0％～5％)、吐温类等中的一种或几种混合物，用量为(0％～5％)(w/v)。
稳定剂无水亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、维生素C、氮气、二丁基羟基甲苯、α-生育酚、α-醋酸生育酚、氢醌等中的一种或几种混合物，用量为0.01％-1％(w/v)。
pH调节剂氢氧化钠、醋酸钠、醋酸、磷酸盐、盐酸、柠檬酸等中的一种或几种混合物，调节pH为4-9。
防腐剂尼泊金酯类，用量为0％-1％(w/v)。
冻干保护剂糖类物质，如葡萄糖、乳糖、甘露醇、山梨醇、木糖醇、蔗糖、海藻糖、右旋糖苷、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)等中的一种或几种混合物，冻干保护剂的含量为4％-40％(W/V)。其中最佳组合是葡萄糖与甘露醇，两者的配比为1∶0.01～0.01∶1，最佳配比为1∶0.2～0.2∶1注射用冻干乳剂的制造方法如下1)在配制设备中，将地塞米松棕榈酸酯溶解于注射用油中；
2)将乳化剂加入适量注射用水中，并加入稳定剂；3)将2)在搅拌的条件下加入1)中(或1)在搅拌的条件下加入2)中)，在20℃～80℃时搅拌、通过匀质仪，将溶液反复匀化，加入适量冻干保护剂，得到均匀的溶液；过0.22um微孔滤膜除菌，100级下无菌分装。
4)经冷冻干燥去除水分，得干燥的地塞米松棕榈酸酯冻干乳剂；5)将制得的冻干乳剂按需要量加水，水合振荡后复原成乳剂，注射给药。
冻干保护剂如甘露醇、海藻糖等随乳剂的冻结和结晶的生长，逐渐浓缩，并分布在乳滴周围，阻止乳滴的融合；可以抑制冰晶的生长，从而减少冰晶对乳滴的损伤；可以提高乳剂的玻璃化转变温度，并在一定的降温速率下，使乳剂实现部分玻璃化，避免了晶态固化，减少了在通常的平衡冻结方法中由于冰晶生长而引起的各种损伤；在乳剂冻结过程中，保护剂使溶液的粘性增加，从而弱化了水的结晶过程，达到了保护的目的。
地塞米松棕榈酸酯的含量测定用HPLC分析HPLC的色谱条件为色谱柱十八烷基硅烷键合硅胶流动相甲醇-水(95∶5)检测波长 238nm粒度测定仪本实验中应用PSS.NICOMPTM380作为测定粒径的仪器。
具体实施例方式实施例1处方组成地塞米松棕榈酸酯0.4g、大豆卵磷脂5g、无水亚硫酸氢钠0.01g，共成100ml。
工艺1)在配制设备中，将地塞米松棕榈酸酯0.4g溶解于适量乙醇中；2)将5g的注射用大豆卵磷脂与适量的注射用水混合均匀，并加入0.01g无水亚硫酸氢钠；3)将2)在搅拌的条件下加入1)中，在20□时搅拌后通过匀质仪，将溶液反复匀化，得到均匀的溶液。加入4％的甘露醇作为冻干保护剂，制得100ml的药液；过0.22um微孔滤膜除菌，100级下无菌分装。
4)经冷冻干燥去除水分，得干燥的地塞米松棕榈酸酯冻干乳剂；5)将制得冻干乳剂按需要量加入注射用水，水合振荡后复原成乳剂。粒径10～336nm。
实施例2处方组成地塞米松棕榈酸酯0.2g、蛋黄卵磷脂0.5g、注射用茶油0.2g、无水亚硫酸氢钠0.01g、0.01g尼泊金乙酯、5g葡萄糖和1g甘露醇，共成100ml。
工艺1)在配制设备中，将地塞米松棕榈酸酯0.2g溶解于0.2g注射用茶油中；2)将0.5g的注射用蛋黄卵磷脂与适量的注射用水混合均匀，并加入0.01g尼泊金乙酯，0.01g无水亚硫酸氢钠；3)将1)在搅拌的条件下加入2)中，在40□时搅拌后通过匀质仪，将溶液反复匀化，得到均匀的溶液。加入葡萄糖和甘露醇作为冻干保护剂，制得100ml的药液；过0.22um微孔滤膜除菌，100级下无菌分装。
4)经冷冻干燥去除水分，得干燥的地塞米松棕榈酸酯冻干乳剂；5)将制得冻干乳剂按需要量加注射用水，水合振荡后复原成乳剂。粒径10～625nm。
实施例3处方组成地塞米松棕榈酸酯0.2g、泊洛沙姆(F68)1g、注射用橄榄油1g、无水亚硫酸钠0.1g，共成100ml。
工艺1)在配制设备中，将地塞米松棕榈酸酯0.2g溶解于1g注射用橄榄油中；2)将1g的泊洛沙姆与适量的注射用水混合均匀；3)将2)在搅拌的条件下加入1)中，在60℃时搅拌后通过匀质仪，将溶液反复匀化，得到均匀的溶液。盐酸、氢氧化钠调节pH为4～5，加入40％的蔗糖作为冻干保护剂，注射用水加至100ml；过0.22um微孔滤膜除菌，100级下无菌分装。
4)冷冻干燥去除水分，得干燥的地塞米松棕榈酸酯地塞米松棕榈酸酯冻干乳剂；5)制得冻干乳剂按需要量加水，水合振荡后复原成乳剂。粒径20～731nm。
实施例4处方组成地塞米松棕榈酸酯0.2g、吐温-801g、注射用大豆油2g、维生素C0.1g、0.01g尼泊金乙酯和0.001g尼泊金丙酯，共成100ml。
工艺1)在配制设备中，将地塞米松棕榈酸酯0.2g溶解于2g注射用大豆油中；2)将1g的吐温-80与适量的注射用水混合均匀，并加入0.01g尼泊金乙酯和0.001g尼泊金丙酯；3)将2)在搅拌的条件下加入1)中，在40℃时搅拌后通过匀质仪，将溶液反复匀化，得到均匀的溶液。加入8％的海藻糖作为冻干保护剂，醋酸钠、醋酸调节pH为6～7，制得药液共100ml；过0.22um微孔滤膜除菌，100级下无菌分装。
4)经冷冻干燥去除水分，得干燥的地塞米松棕榈酸酯冻干乳剂；5)将制得冻干乳剂按需要量加水，水合振荡后，复原成乳剂；粒径80～960nm。
实施例5处方组成地塞米松棕榈酸酯0.2g、蛋黄卵磷脂1g、0.5g HS15、注射用大豆油4g、维生素C0.1g、0.01g尼泊金乙酯和0.001g尼泊金丙酯、5g甘露醇和5g葡萄糖，共成100ml。
工艺1)在配制设备中，将地塞米松棕榈酸酯0.2g溶解于4g注射用大豆油中；2)将蛋黄卵磷脂1g、0.5g HS15与适量的注射用水混合均匀；3)将1)在搅拌的条件下加入2)中，在40℃时搅拌后通过匀质仪，将溶液反复匀化，得到均匀的溶液。加入甘露醇和葡萄糖作为冻干保护剂，柠檬酸、氢氧化钠调节pH为7～8，制得药液共100ml；过0.22um微孔滤膜除菌，100级下无菌分装。
4)经冷冻干燥去除水分，充氮气，得干燥的地塞米松棕榈酸酯冻干乳剂；5)将制得冻干乳剂按需要量加水，水合振荡后复原成乳剂。粒径60～1000nm。
实施例6处方组成地塞米松棕榈酸酯0.2g、大豆卵磷脂1g、0.5g维生素E聚乙二醇琥珀酸酯(TPGS)、注射用红花油1g、α-生育酚0.1g、0.1g尼泊金乙酯、8g木糖醇，共成100ml。
工艺1)在配制设备中，将地塞米松棕榈酸酯0.2g溶解于1g注射用红花油、0.1gα-生育酚中；2)将大豆卵磷脂1g、0.5g维生素E聚乙二醇琥珀酸酯(TPGS)与适量的注射用水混合均匀；3)将2)在搅拌的条件下加入1)中，在40□时搅拌后通过匀质仪，将溶液反复匀化，得到均匀的溶液。加入木糖醇作为冻干保护剂，磷酸、氢氧化钠调节pH为8-9，制得药液共100ml；过0.22um微孔滤膜除菌，100级下无菌分装。
4)经冷冻干燥去除水分，得干燥的地塞米松棕榈酸酯冻干乳剂；5)将制得冻干乳剂按需要量加水，水合振荡后复原成乳剂。粒径10～810nm。
实施例7处方组成地塞米松棕榈酸酯0.2g、5g维生素E聚乙二醇琥珀酸酯(TPGS)、注射用大豆油1g、二丁基羟基甲苯0.1g、维生素C0.1g、1g甘露醇和5g葡萄糖，共成100ml。
工艺1)在配制设备中，将地塞米松棕榈酸酯0.2g溶解于1g注射用大豆油中；2)将5g维生素E聚乙二醇琥珀酸酯(TPGS)与适量的注射用水混合均匀；3)将2)在搅拌的条件下加入1)中，在40℃时搅拌后通过匀质仪，将溶液反复匀化，得到均匀的溶液。加入甘露醇和葡萄糖作为冻干保护剂，制得药液共100ml；过0.22um微孔滤膜除菌，100级下无菌分装。
4)经冷冻干燥去除水分，充氮气，得干燥的地塞米松棕榈酸酯冻干乳剂；5)将制得冻干乳剂按需要量加水，水合振荡后复原成乳剂。粒径10～360nm。
实施例8稳定性试验。将样品置于40℃恒温箱中考察3个月，用HPLC测定药物含量，结果见表1。
表1稳定性试验结果含量(％) 乳液实施例2 实施例3 实施例5 实施例70时间98.899.6 99.198.598.73月后89.398.9 99.298.898.3由此可知，冻干乳剂的稳定性优于普通注射液。
实施例9药理抗炎作用根据教材《糖皮质激素的抗炎实验》，经过预实验，发现致炎后4小时处死小鼠测肿胀度所得数据不理想，所以将致炎时间改为2小时。小鼠按体重随机分六组，雌雄各半，腹腔注射，剂量相当于地塞米松0.039ug/gA组，生理盐水；B组，实施例2组；C组，实施例3组；D组，实施例5组；E组，实施例7组。给药后40分钟用二甲苯涂于左耳前后两面致炎；各组在致炎后2小时将小鼠处死，然后用直径为8mm的打孔器在双耳对称处取下耳片称重，左右耳片重量差即为肿胀度。数据见表2。
表2 药理实验数据组别 左耳重(g) 右耳重(g) 肿胀度(g)A组0.0296+-0.0037 0.0156+-0.0043 0.0140B组0.0280+-0.0017 0.0179+-0.0019 0.0101C组0.0273+-0.0036 0.0180+-0.0034 0.0093D组0.0278+-0.0035 0.0190+-0.0029 0.0088E组0.0287+-0.0045 0.0181+-0.0022 0.0106由实验数据可见，地塞米松棕榈酸酯制剂有明显的抗炎作用。
权利要求
1.一种地塞米松棕榈酸酯冻干乳剂，其特征在于冻干品中含有效剂量的地塞米松棕榈酸酯作为有效成分，并含有油相、乳化剂、稳定剂、pH调节剂、防腐剂或不含防腐剂、冻干保护剂药用辅料。
2.根据权利要求1所述的一种地塞米松棕榈酸酯冻干乳剂，其特征在于药物∶注射用油＝1∶0～1∶20(w/w)，所述的注射用油可为豆油、茶油、橄榄油、红花油等任何种类的植物油或其混合物，用量为0～5％；乳化剂是0％～5％的蛋黄磷脂或大豆磷脂(w/v)、0％～5％的泊洛沙姆(w/v)、0％～5％的HS15(Polyethylene glycol 660 hydroxystearate)、0％～5％的维生素E聚乙二醇琥珀酸酯(TPGS)、0％～1％的吐温类(w/v)中的一种或几种；pH调节剂是盐酸、氢氧化钠、醋酸、醋酸钠、磷酸、磷酸钠、柠檬酸、柠檬酸钠等中的一种或几种，pH范围是4～9；稳定剂是亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、维生素C、氮气、二丁基羟基甲苯、α-生育酚、α-醋酸生育酚、氢醌等中的一种或几种；冻干保护剂是糖类物质，如葡萄糖、乳糖、半乳糖、果糖、右旋糖酐、甘露醇、山梨醇、木糖、木糖醇、蔗糖、海藻糖、聚乙烯吡咯烷酮等中的一种或几种，保护剂的用量为2％～40％(w/v)；防腐剂是尼泊金酯类(0％～0.5％)。所制乳剂的粒径范围是10nm～1um。
3.根据权利要求2所述的一种地塞米松棕榈酸酯冻干乳剂，其特征在于药物与注射用油的配比可以为药物∶注射用油＝1∶1～1∶10(w/w)。
4.根据权利要求2所述的一种地塞米松棕榈酸酯冻干乳剂，其特征在于冻干保护剂可以是葡萄糖与甘露醇的组合，两者的配比为1∶0.01～0.01∶1。
5.一种如权利要求1所述的地塞米松棕榈酸酯冻干乳剂的制备方法，其特征在于将药液通过加入保护剂冻干成固体，使用前，根据需要加注射用水，经水合振荡，复原成乳剂，其制备步骤如下1、在配制设备中，将地塞米松棕榈酸酯溶解于注射用油中；2、将乳化剂加入适量注射用水中，并加入稳定剂；3、将2)在搅拌的条件下加入1)中或1)在搅拌的条件下加入2)中，在20℃-60℃时搅拌、通过匀质仪，将溶液反复匀化，得到均匀的溶液；4、加入适量冻干保护剂，经冷冻干燥去除水分，得干燥的地塞米松棕榈酸酯冻干乳剂；5、将制得的冻干乳剂按需要量加入灭菌注射用水，水合振荡后复原成乳剂，注射给药。
全文摘要
本发明公开了一种地塞米松棕榈酸酯冻干乳剂，它提高了药物及附加剂的稳定性，并且制备工序简单，药物含量更加可控。它是在冻干品中含有效剂量的地塞米松棕榈酸酯作为有效成分，并含有油相、乳化剂、稳定剂、pH调节剂、冻干保护剂等药用辅料。将药液通过加入保护剂冻干成固体，使用前，根据需要加注射用水，经水合振荡，复原成乳剂。本发明为广大患者提供了更安全、稳定、有效的地塞米松棕榈酸酯冻干乳剂。
文档编号A61P19/00GK1596899SQ200410021568
公开日2005年3月23日 申请日期2004年7月28日 优先权日2004年7月28日
发明者邓意辉, 王绍宁, 吴琼 申请人:沈阳药科大学