专利名称：具有抗病毒作用的药物组合物的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种具有抗病毒作用的药物组合物。
背景技术：
病毒引起的疾病是人类的主要传染病，严重危害人类健康。虽然抗病毒药物的种类较多，但由于其抗病毒范围窄，或是因为药物的毒副作用大等诸多原因，使抗病毒药物的临床应用受到了极大的限制。
莪术油是从中药莪术中提取的挥发油，体内外试验已证实其对流感病毒A1、A3、合胞病毒均具有明显的抗病毒作用，抗病毒范围广，且无毒副作用，莪术油的静脉滴注制剂被广泛用于治疗小儿肺炎、病毒性肺炎、急性上呼吸道感染、病毒性肠炎及病毒性心肌炎、脑炎等。
发明内容
本发明的目的是在上述研究的基础上，提供一种可具有更理想的广谱抗病毒作用的药物组合物。
本发明具有抗病毒作用的药物组合物，是以莪术油和薏苡仁油为有效药用成分，与药物中可以接受的辅助添加成分共同组成，其中莪术油/薏苡仁油的重量比例为1/0.2～1/5。其中，较好的是以莪术油/薏苡仁油的重量比例为1/0.5～1/2，并以莪术油/薏苡仁油的重量比采用1/0.5～1/1为优选。
如上述，在本发明的上述药物组合物中，莪术油是一种已有报道的具有抗病毒作用的成分。薏苡仁油则是从中药薏苡仁中提取的挥发油，目前有报道和试验表明，其可具有增强机体免疫功能，提供高能量营养、治疗心血管系统疾病、抑制恶性肿瘤的作用，已有将其用于对人体结肠癌、肝癌、肺癌等治疗的报道。本发明将该两种从天然药用原料中提取的有效药用成分相互配伍组合后，试验结果表明在抗病毒作用方面可产生出协同增效等更为满意的效果。
以上述组成形式的有效药用成分，与药物中可以接受的相应药用辅料或载体等辅助添加成分组合，并按相应的制药方法和工艺加工处理，即可制成为相应的口服型、注射型或其它可用形式的药物制剂。例如，与在口服制剂中可以被接受的崩解剂、赋形剂、润滑剂、粘合剂、填充剂等常用的辅助添加成份混合后，按相应的常规工艺方法处理，即可制成为片剂、滴丸剂、胶囊剂或适当形式的缓释剂、控释剂等固体制剂形式的口服药物；与常用的增溶剂、助溶剂、乳化剂、润湿剂等表面活性剂、pH调节剂、稀释剂、稳定剂、增稠剂等混合，按相应的常规工艺方法处理，即可制成为乳剂、喷雾剂、滴鼻剂等。按注射药物制剂中允许使用的适当溶剂和附加剂配合及相应的工艺操作处理后，可以制备成相应的乳剂或粉针等肌肉或静脉形式的注射制剂药物。
作为本发明上述药物有效药用成分的莪术油和/或薏苡仁油，其来源除可为市售的商品莪术油和/或商品苡仁中性油脂外，也可以采用以常规水蒸气蒸馏方法从中药原料莪术中提取得到的莪术挥发油成分，或是以目前常规的CO2超临界萃取技术从中药原料薏苡仁中提取薏苡仁油成分。
在制备口服药物制剂时，一般可以使用上述莪术油和/或薏苡仁油的粗品油为有效药用成分，但作为注射药物制剂应当对其进行精制。其中对莪术油可按目前已有的莪术油注射剂的方式进行处理外，使薏苡仁油达到注射用油标准时可以采用文献报道的方法精制在薏苡仁油中加入10％-20％(w/w)氢氧化钠溶液，充分搅拌下升温至60-70℃，以中和其中的游离脂肪酸。静置后分离油液，过滤，反复加注射用水煮洗，除去已皂化的成分及过剩的碱，至油液澄清为止，分离油液并将其加热至50-60℃，于搅拌下加入5-10％酸性陶土及0.5-1％活性炭，加热至80-90℃不断搅拌30-60分钟过滤，无水CaCl2等脱水，静置，过滤，处理得到符合文献报导标准的注射剂用薏苡仁油。
下述相关的抗病毒试验结果显示，本发明上述的抗病毒药物，可优先作为小儿肺炎、病毒性肺炎、病毒性感冒，急性上呼吸道感染、病毒性肠炎及病毒性心肌炎、脑炎等病毒性疾病等适应症的治疗药物。此外，在被用于对如肺癌、肝癌和结肠癌等恶性肿瘤的治疗上，其也可具有同样的意义和价值。
以下通过具体实施方式
的实例再对本发明的上述内容作进一步的详细说明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实例。在不脱离本发明上述技术思想情况下，根据本领域普通技术知识和惯用手段做出的各种替换或变更，均包括在本
具体实施例方式
实施例1组成注射用莪术油 50g注射用薏苡仁油50g
注射用豆磷脂10g注射用甘油 25ml加注射用水至1000ml将豆磷脂与预热的(80℃)注射用水及甘油混合，于高速组织捣碎机内，以8000转/分钟的速度搅拌3分钟，反复三次，制成均匀的磷脂分散液。加入预热80℃的莪术油和薏苡仁油后，于同样条件下再进行三次高速搅拌，使成初乳液。加同样预热的注射用水至1000ml后，转入高压乳匀机，在3.089×104kPa(315kg/cm2)压力下，匀化至油滴粒径为1μm左右。经4号垂熔玻璃漏斗滤过后灌封于10ml安瓿内，充氮，熔封，105℃灭菌45分钟，即为所述的注射乳剂药物。
实施例2分别取淀粉120g、乳糖120g、糊精45g、低取代羟丙基纤维素90g混合均匀，备用。另取莪术油100g和薏苡仁油50g，加至上述辅料中混合均匀，再加2.5％羟丙甲纤维素适量，制成颗粒，干燥，加入羧甲基淀粉钠9g和硬脂酸镁4.5g，再次混合均匀。装入胶囊1000粒，或压制成1000片并包薄膜衣，即为所述的胶囊剂或片剂。
实施例3将莪术油100g和薏苡仁油200g预热至80℃，加入到PEG-6000熔融液中，搅拌混匀，在滴丸机中制成5000粒滴丸，即为所述的丸剂型药物。
实施例4将豆磷脂20g与预热的(80℃)水、吐温-80及甘油50ml混合，于高速组织捣碎机内，以8000转/分钟的速度搅拌3分钟，反复三次，制成均匀的磷脂分散液。加入预热至80℃的莪术油100g和薏苡仁油50g后，于同样条件下再进行三次高速搅拌，使成初乳液。加同样预热的水至500ml后，转入高压乳匀机，匀化至油滴粒径为5-10μm。分装，置塑料软瓶中，每支10ml，即为所述的滴鼻剂。或将其置于耐压容器中，加阀门、封帽，压入抛射剂，摇匀，即为所述的喷雾剂。
以上述由莪术油与薏苡仁油为有效药用成分组成的不同比例形式的药物组合物作为本发明的试验药物，以病毒唑为阳性对照药物，进行了抗病毒作用的药效学试验。本发明实验药物中有效药用成分(莪术油/薏苡仁油)的选择比例分别为1/0、1/0.5、1/1、1/2、1/4、0/1，按实施例1的方法制成注射乳剂，各组试验药物的浓度以莪术油计为0.4g/100ml。
一、实验方法采用组织细胞半数感染量(TCID50)的方法，根据药物对细胞病变的抑制效果，以确定试验药物对HSV-I和RSV的抗病毒效果。
1.药液配制用RPMI-1640对试验药物(4mg/ml)进行对倍稀释，其药液浓度分别为0.04mg/ml(1∶100)；0.02mg/ml(1∶200)；0.01mg/ml(1∶400)；0.005mg/ml(1∶800)；0.0025mg/ml(1∶1600)。病毒唑的浓度分别为0.062，0.031，0.015和0.008 mg/ml。
2.对Vero细胞和Hep-2细胞的最大无毒浓度测定在96孔细胞培养板的Vero单层细胞和Hep-2单层细胞中分别加入不同浓度的试验药物，置37℃和5％CO2培养箱中96小时，观察细胞病变，测定其对Vero细胞和Hep-2单层细胞的最大无毒浓度。
3.对HSV-I病毒致Vero细胞病变的抑制试验在96孔细胞培养板的Vero单层细胞内，每孔感染HSV-I 10TCID50(7LgTCID50)病毒液，2小时后倾去病毒液，每孔内再加入不同浓度的试验药物或病毒唑，培养96小时后观察细胞病变。
4、对RSV病毒致Hep-2细胞病变的抑制试验在96孔细胞培养板的Hep-2单层细胞内，每孔感染RSV 10TCID50(6LgTCID50)病毒液，2小时后倾去病毒液，每孔内再加入不同浓度的试验药物或病毒唑，培养96小时后观察细胞病变。
二、实验结果1.各试验药物对Vero细胞的最大无毒浓度，经CPE法测定，均小于0.04mg/ml(1∶100)，在正式药物试验中，则采用＜0.04mg/ml的药物进行体外抗病毒试验。
2.各试验药物对HSV-I病毒致Vero细胞病变的抑制作用，对RSV病毒致Hep-2细胞病变的抑制作用。试验结果如表1所示。
表1 不同组成的试验药物体外抗病毒作用
注“-”表示细胞无病变；“1+”约25％细胞发生病变、“2+”约50％细胞发生病变、“3+”约75％细胞发生病变，“4+”约100％细胞发生病变。
试验药物组为本发明药物组合物，以及单一成分的莪术油(1/0)或薏苡仁油(0/1)。
上述试验结果表明本发明药物组各种组成比例的莪术油/薏苡仁油组合物(1/0.5、1/1、1/2、1/4)在0.01mg/ml浓度时，对HSV-1和RSV都具有显著的抑制作用，且强于单独使用形式的莪术油(1/0)。莪术油的有效抑制浓度为0.02mg/ml，而薏苡仁油(0/1)在所有的试验浓度下基本均无抑制作用。
在上述试验结果的基础上，以莪术油/薏苡仁油(1/1)为试验药物进一步进行了下述对流感病毒所致小鼠肺炎保护作用的试验。
取健康小鼠140只，随机分为病毒唑阳性药物对照组，本发明试验药物莪术油/薏苡仁油组合物(1/1)的高、低剂量组，单一莪术油的高、低剂量组，以及模型对照组和正常对照组，每组20只，雌雄各半。取10倍LD50量(10TCLD50)滴鼻感染小鼠肺部，正常对照组吸入生理盐水，30ul/只，感染后2小时，分别给予每只小鼠本发明试验药物20、40mg/kg(以莪术油计)，单一莪术油20、40mg/kg，病毒唑20mg/kg，im，模型对照组、正常对照组则均给予0.5ml生理盐水，每天给药3次，连续给药5天。从给药开始连续观察15天。每天记录小鼠感染流感病毒后的死亡数和死亡时间，以15天内每组动物死亡总数按以下公式计算出死亡保护率和延长生命率死亡保护率(％)＝(模型组死亡率-实验组死亡率)；延长生命率(％)＝(实验组平均生活日数-模型组平均生活日数)/(模型组平均生活日数)×100％。
试验结果如表2所示。小鼠感染病毒后给予高、低剂量的本发明试验药物，均能降低动物死亡率，延长平均生活日数，随着药物剂量增加，作用增大，且优于同等剂量的莪术油单用药物，而模型对照组动物在4天后明显消瘐，呼吸困难，开始死亡。与模型对照组比较，本发明药物的高、低剂量能显著降低动物死亡率(P＜0.05)，且优于病毒唑和莪术油。
表2 试验药物对小鼠病毒性肺炎的保护作用组别 剂量 死亡率 死亡保护率平均生活日延长生命率(mg/kg) (％) (％) (d) (％)对照组- - -15模型组- 100 -6.4±3.8病毒唑组 204060 10.1 ±4.0*89.1本发明药物组 203070 11.3±3.9* 76.6(莪术油/薏苡仁油＝1/1)401090 13.2±4.6* 106.3204060 9.8±3.1* 53.1莪术油组403070 11.5±3.3* 79.7与模型组比较*P＜0.05上述试验结果清楚显示，在本发明的上述药物的两种有效药用成分中，莪术油可具有抗病毒作用，而薏苡仁油则几无此作用，但采用以莪术油/薏苡仁油作为有效药用成分的本发明药物组合物，则在综合的抗病毒作用方面可具有显著的协同作用，其结果明显优于其中有效药用成分莪术油的单独作用，因而具有令人满意的开发前景和价值。
权利要求
1.具有抗病毒作用的药物组合物，其特征是以莪术油和薏苡仁油为有效药用成分，与药物中可以接受的辅助添加成分共同组成，其中莪术油/薏苡仁油的重量比例为1/0.2～1/5。
2.如权利要求1所述的具有抗病毒作用的药物组合物，其特征是所说有效药用成分莪术油/薏苡仁油的重量比例为1/0.5～1/2。
3.如权利要求2所述的具有抗病毒作用的药物组合物，其特征是所说有效药用成分莪术油/薏苡仁油的重量比例为1/0.5～1/1。
4.如权利要求1至3之一所述的具有抗病毒作用的药物组合物，其特征是所说的药物为口服型药物制剂。
5.如权利要求1至3之一所述的具有抗病毒作用的药物组合物，其特征是所说的药物为喷雾剂。
6.如权利要求1至3之一所述的具有抗病毒作用的药物组合物，其特征是所说的药物为滴鼻剂。
7.如权利要求1至3之一所述的具有抗病毒作用的药物组合物，其特征是所说的药物为注射型药物制剂。
全文摘要
本发明为一种具有抗病毒作用的药物组合物，以莪术油和薏苡仁油为有效药用成分，与药物中可以接受的辅助添加成分共同组成，其中莪术油/薏苡仁油的重量比例为1/0.2～1/5。该药物可以制成为具有广谱抗病毒作用的口服型或喷雾型、滴鼻型或注射型等多种制剂形式。可优先适用于小儿肺炎、病毒性肺炎、病毒性感冒，急性上呼吸道感染、病毒性肠炎及病毒性心肌炎、脑炎等病毒性疾病等适应症的治疗药物，在用于治疗如肺癌、肝癌和结肠癌等恶性肿瘤上也可具有同样的意义和价值。
文档编号A61K9/12GK1562193SQ20041002211
公开日2005年1月12日 申请日期2004年3月24日 优先权日2004年3月24日
发明者杨秀清, 陈刚, 周家明 申请人:成都厚发科技开发有限公司