专利名称：治疗类风湿性关节炎和免疫性疾病的含青蒿提取物药物组合物的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种用于治疗类风湿性关节类和自身免疫性疾病伴关节炎症状的药物，特别是用于治疗类风湿性关节炎和自身免疫性疾病伴关节炎症状的含有青蒿素或青蒿素衍生物(双氢青蒿素，青蒿琥酯，蒿甲醚，蒿甲醚等)的药物组合物。
背景技术：
类风湿性关节炎(以下简称RA)是自身免疫性疾病的一种，是一种世界范围内的原因不明的全身性自身免疫性疾病，其发病率0.4～1％，其主要特征是以慢性，对称性及末梢关节弥漫性滑膜炎、末期出现各种程度的进行性关节破坏，变性及关节功能丧失，严重地影响着患者的劳动及生活能力，给社会造成巨大的负担。而其他的自身免疫性疾病也通常伴有相类似的关节症状，对该类疾病的治疗尚没有特效药物，多采用非甾类消炎镇痛剂及免疫抑制剂治疗，不但不能完全控制病情，且有较大的毒付作用。
近年来中医药对类风湿性关节炎及自身免疫性疾病研究受到国内外专家及患者的重视，开发了一些治疗RA的药物，例如中国专利申请02137816公开了一种RA的治疗药物组合物，其中含有中药成份赤茯苓12％，当归12％，地肤子12％，五加皮10％，枇杷叶10％，海桐皮9％，白薇9％，黄芩8％，川黄连7％，广藿香6％，木通5％。再如中国专利申请01117709公开了一种治疗类风湿性关节炎的药物，它是以何首乌、党参、当归、黄芪、黄精、白术、狗脊、全蝎、乌梢蛇、地龙、蚂蚁、丹参、桑枝、桂枝、苍术、羌活、独活、防风、秦艽、桑寄生、杜仲、川牛膝、黄柏、千年健、钻地枫、乳香、没药、青风藤、天南星、鸡血藤、桑葚子、元胡、川芎、枣仁、知母、茯苓、草乌、川乌、仙灵脾、红花、续断、丹皮、忍冬藤、赤芍、薏苡仁、海桐皮、络石藤、甘草为原料，根据每味中药的不同特性，针对类风湿性关节炎的不同症状，按比例配制成基本药剂、寒甚或热甚者相适应的药剂。
上述这些中药组合物一般都是中药的常规用药，使用时医生还必须根据中医辨证论治的原则按照患者的情况进行组方；也有一些中成药成分较多，制备复杂，实际应用还不能完全满足临床医生及患者的需要。
青蒿素是我国学者自主开发且被国际公认的中药提取物，青蒿素及其衍生物是一类有效的抗疟药和抗疟药物组合物。系从我国中药黄花蒿中提取的有效单体成分，已被世界卫生组织推荐为抗疟疾新药。近年来随着国家及各研究单位对青蒿素研究的继续深入，开发了一些以青蒿素为主要成分的新的复方制剂的抗疟剂，如中国专利申请00113134公开了一种治疗疟疾的复方制剂；同时还不断发现了在其他新领域中的应用，如中国专利申请99103346公开了一种治疗红斑狼疮和光敏性疾病的含双氢青蒿素的药物组合物等。现有文献报道可以将青蒿油搽剂应用于癣病的治疗，通过对青蒿素的体外抗真菌作用的研究，证实青蒿素的抗菌普及作用与目前常用的广谱抗真菌药酮康唑相似，且对某些真菌的作用强于酮康唑，即其抗真菌作用效果良好。
发明内容
本发明的目的，是提供一种安全有效的治疗类风湿性关节类和免疫性疾病的含青蒿提取物药物组合物。
本发明的技术方案如下。
一种治疗类风湿性关节炎和免疫性疾病的含青蒿提取物药物组合物，为含有有效剂量的青蒿素或青蒿素衍生物的药物组合物。
所述的蒿素衍生物包括双氢青蒿素，青蒿琥酯，蒿甲醚和蒿甲醚。
该组合物中青蒿素或青蒿素衍生物的含量为1～99％。
所述的药物组合物含有青蒿素或青蒿素衍生物的有效剂量为20～200mg/日。
该药物组合物可以单独使用，也可以与现有治疗RA和自身免疫性疾病的其他药物联合使用。
所述的药物组合物为可以是任何常用的药物形式，如固体制剂，流体，或膏状等。
本发明是基于这样的事实完成的。本案发明人在长期的临床治疗RA和自身免疫性疾病及各种关节炎的过程中发现中药青蒿具有较好的清热解毒，消肿，止痛功效。而青蒿素又是我国自70年代开始研究的中药一类新药，为此我们在免疫和自身免疫性疾病方面对青蒿素或其衍生物以及含青蒿素的药物组合物进行了研究，表明青蒿素在具有免疫调节的基础上，从药效学及临床研究均证明青蒿素或青蒿素衍生物对RA和自身免疫性疾病伴关节症状的具有较好的疗效，具有消炎、镇痛、免疫调节的疗效。且具有见效快，无明显的毒副作用的优势。
本发明的药物组合物适用于风湿性关节炎和自身免疫性疾病伴关节表现的病症。
本发明的药物组合物可以是任何常用的药物形式，可以为固体制剂，如片剂、胶剂、栓剂、粉剂、颗粒剂、霜剂等；也可以为流体制剂，如口服液、注射液；或膏状等。
本发明的制备方法，为本领域普通技术人员所公知的常用制备方法。
按照本发明的药物组合物，优先是将其制成片剂或胶囊，每一片剂或胶囊含有10-100mg的青蒿素或青蒿素衍生物。
图1为药物组合物对大鼠佐剂性关节炎的影响(右后足)图2药物组合物对大鼠(左后足)佐剂性关节炎的影响
具体实施例方式本发明的药物组合物一般为口服给药，也可以其他途径给药，如治疗RA和自身免疫性疾病伴关节症状的可以使用外用制剂。用量一般为1-10mg/Kg体重/天，成年患者的用量优选为每人每天20-200mg。
本发明使用的青蒿素或青蒿素衍生物(双氢青蒿素，青蒿琥酯，蒿甲醚，蒿乙醚)的制备工艺是已知的，有关其制备方法可见于诸文献报道。
通过以下试验可以对本发明进行更进一步的说明。但应该说明的是本发明的实验内容只用于说明本发明，而不是限制本发明。
本发明的药物组合物对试验性一般关节炎及免疫性关节炎的影响实验材料动物①健康Wistar大白鼠，体重130±20g、180±20g和150±20g，雌雄均有。合格证编号依次为SCXK(京)2002-0003、SCXK(京)2002-0003和SCK(京)2002-0006；②健康昆明种小白鼠，体重20±20g和13g±2g，雌雄均有。合格证编号均为SCXK(京)2002-001。均由我所动物室供给。
主要药物①含有青蒿提取物包括青蒿素及青蒿素衍生物(双氢青蒿素，青蒿琥酯，蒿甲醚，蒿甲醚等)的药物组合物。以下简称[药物组合物]。
②强的松(5mg/片)，东北制药总厂生产，批号20031113；③角叉菜胶，美国Sigma公司产品，批号87F-0463；④Freund’s完全佐剂，用卫生部北京生物制品研究所提供的卡介苗(批号20030115)制备，内含结核杆菌0.7mg/0.07ml。
仪器鼠足容积测定仪，自制。
方法与结果一、对大鼠角叉菜胶性足肿胀的影响参照大鼠足趾浮肿毛细血管放大测量法，取大鼠72只，体重130±20g，雌雄各半，随机均分为五组，即空白对照组和模型组(给与给药大剂量组相当量的蒸馏水)，药物组合物大剂量组(54.0mg/Kg)、中剂量组(27.0mg/Kg)和小剂量组(5.4mg/Kg)及阳性对照组(强的松5.0mg/Kg)。均为口服灌胃给药，每日一次，连续14天。于末次给药后1小时测定鼠足容积(ml)，即将1％角叉菜胶生理盐水0.1ml注入大鼠左后肢足跖皮下致炎，分别于注入后1小时、2小时、4小时、及6及小时，用鼠足容积测定仪测定鼠足容积，计算出肿胀值，用T检验比较各时间给药组与对照组的差异情况。结果见表1。
表1.药物组合物对大鼠角叉菜胶性足肿胀的影响(X±SD)剂量 动物数 肿胀值(ml)组别 (mg/Kg) (只)正常1小时 2小时 4小时 6小时对照组 1229.00±1.88 30.00±1.90**30.17±2.16**30.17±2.17**30.17±2.17**模型组 1228.33±2.49 34.25±2.8638.67±3.6338.67±3.6338.67±3.63强的松组5 1229.08±2.47 33.75±2.8636.08±4.1036.08±4.1036.08±4.10大剂量组54 1228.33±3.22 33.91±3.6234.64±2.87**34.64±2.87**34.64±2.87**中剂量组27 1228.00±2.34 33.42±2.4736.58±3.0636.58±3.0636.58±3.06小剂量组5.41228.67±2.54 34.58±2.3536.33±3.5336.33±3.5336.33±3.53与模型组比较**P＜0.01由表1可见，药物组合物给药各组足肿胀值均低于模型组，其中大剂量组作用明显，以致炎后2、4、6小时足肿胀值与模型组比较P值均小于0.01，中、小剂量组足肿胀值虽无显著差异，但与强的松作用一致。说明药物组合物能抑制致炎剂角叉菜胶所致的足肿胀，即对致炎剂角叉菜胶引起的实验性关节炎肿胀具有抑制作用，且药物作用与药物剂量有关。
二、药物组合物对大鼠肉芽肿形成的影响取大鼠72只，体重180±20克，雌雄各半。实验前所有动物腹腔注射戊巴比妥钠30mg/kg麻醉，采用手术方法分别于每只动物背部皮下植入已消毒和称重的纽扣，缝合皮肤后，外部消毒。术后第二天，将成活动物均匀分为五组，即空白对照组(给与给药大剂量组相当量的蒸馏水)，药物组合物大剂量组(54.0mg/kg)、中剂量组(27.0mg/kg)和小剂量组(5.4mg/kg)以及阳性对照组(强的松5.0mg/kg)。各组动物均采用灌胃给药，每天给药一次，连续给药14天。于末次给药后第二天处死动物，取出植入的纽扣，仔细剥离附着组织，称重，减去纽扣重，即为肉芽肿组织重量，用T检验进行统计学处理。结果见表2。
表2药物组合物对大鼠肉芽肿形成的影响与空白对照组比较**P＜0.01由表2可见，药物组合物给药各组肉芽肿重量均明显低于空白对照组剂量动物数肉芽肿重量组别(mg/Kg)(只) (mg)对照组 11259.73±44.58强的松组5 12173.75±43.10**大剂量组54 12176.42±37.98**中剂量组27 12177.17±32.25**小剂量组5.4 12180.50±34.63**(P＜0.01)。说明该药物组合物对肉芽肿的形成有明显的抑制作用，提示该药具有很好的抗结缔组织增生炎症的作用。
三、对小鼠热板法疼痛反应的影响参照小鼠热板法加以改良，取小鼠80，体重20g±2g，雌雄各半，均分为五组，即空白对照组(给与给药大剂量组相当量的蒸馏水)，给药大剂量组(78.0mg/Kg)、中剂量组(39.0mg/Kg)和小剂量组(7.8mg/Kg)以及阳性对照组(阿斯匹林100.0mg/Kg)。均为口服灌胃给药，每天一次，连续14天。于末次给药后1小时，将各组小鼠分放在预先加热到55℃的铝盒内，以添后足作为疼痛反应的指标，记录小鼠自投入热板至出现舔后足反应的时间，用T检验进行统计学处理。结果见表3。
表3.药物组合物对小鼠热板法疼痛反映的影响(X±SD)剂量 动物数出现疼痛反应时间组别 (mg/kg) (n) (s)对照组 21 23.05±6.39阿司匹林组 100 19 36.74±11.79**大计量组 7820 38.15±8.82**中剂量组 3919 31.68±8.39**小计量组 7.8 21 29.29±6.63*与对空白对照组比较*P＜0.05，**P＜0.01由表3可见，与空白对照组比较，药物组合物给药各组疼痛反应出现时间均延长，具有显著性差异(P＜0.05-0.01)，与阿斯匹林作用一致，其中大剂量组作用最明显，中剂量组次之，小剂量组再次之。说明药物组合物对热刺激法引起的小鼠疼痛反应有明显的抑制作用，且药物作用与药物剂量有一定的关系。
四、对小鼠化学刺激法疼痛反应的影响按常规方法，取小鼠70只，体重13g±2g，雌雄各半，随机分为五组，即空白对照组(给与给药大剂量组相当量的蒸馏水)、给药大剂量组(78.0mg/Kg)、中剂量组(39.0mg/Kg)和小剂量组(7.8mg/Kg)以及阳性对照组(阿斯匹林100.0mg/Kg)。均为口服灌胃给药，每天一次，连续14 。于末次给药后1小时将0.6％的醋酸溶液注射于小鼠腹腔内，以引起深部的、大面积而持久的疼痛刺激，致使小鼠产生扭体反应，观察并记录各组小鼠出现扭体反应的时间(潜伏期)及20分钟内产生扭体反应的次数，用T检验进行统计学处理。结果见表4。
表4.药物组合物对小鼠化学刺激法疼痛反应的影响(X±SD)动物数剂量 扭体次数组别 (n) (mg/Kg)(次数/20min)对照组 15 38.87±8.48阿司匹林组 1210023.67±10.77**大剂量组 1378 28.85±14.09*中剂量组 9 39 26.89±16.68*小剂量组 117.837.82±10.88与空白对照组比较*P＜0.05，**P＜0.01注因小鼠体重过小，在实验过程中可能由于灌胃不当而死了部分，致每组数量参差不齐。
由表4可见，与空白对照组比较，药物组合物大、中剂量组疼痛反应出现时间稍延长；20分钟内扭体次数则明显减少(P＜0.05)，与阿斯匹林作用相似。说明该药物组合物对热刺激法引起的小鼠疼痛反应有明显的抑制作用，且与药物剂量有一定的关系。
五、对大鼠佐剂性关节炎的影响参照藤村一及WAX等法，取大鼠72只，体重150±20g，雌雄各半，随机均分为5组，其中一组为模型组(给与给药大剂量组相当量的蒸馏水)；三组为阳性对照组(强的松5.0mg/Kg)；三组为肿立消给药组，剂量分别为54.0mg/Kg、27.0mg/Kg和5.4mg/Kg。均为口服灌胃，每天一次，于注射Frdund’s完全佐剂当天开始给药，直至实验结束。将Freund’s完全佐剂0.05ml(内含死结核杆菌0.5mg)皮内注射于大鼠右后足垫内。注射佐剂前及后26天内隔日用鼠足容积测量仪测定大鼠右、左后足容积(ml)，用T检验进行统计学处理。结果见表5、表6和图1药物组合物对大鼠佐剂性关节炎的影响(右后足)和图2药物组合物对大鼠(左后足)佐剂性关节炎的影响。
表5.药物组合物对大鼠佐剂性关节炎的影响(右后足)(X±SD)剂量 动物数 肿胀值(ml)组别 (mg/Kg)(只)注射前注射后第2天 第4天第6天第8天第10天模型组 12 29.17±1.27 39.92±2.64 43.00±3.69 41.00±5.3438.17±3.8139.33±2.49强的松组 512 28.75±1.66 39.00±3.13 39.42±2.54*36.92±2.91*35.66±2.9436.25±3.59*大剂量组 54 12 29.08±1.31 40.58±3.15 39.92±2.99*37.83±3.6135.67±3.8234.42±3.78**中剂量组 27 11 29.00±1.79 40.09±3.83 39.82±3.95 37.64±4.2135.55±2.8434.55±2.84**小剂量组 5.4 12 28.67±1.56 39.25±3.08 40.00±2.34*37.75±2.4534.42±2.23**34.92±2.50**表6药物组合物对大鼠佐剂性关节炎的影响(左后足)(X±SD)组别 剂量 动物数肿胀值(ml)(mg/Kg) (只)注射前 注射后第2天 第4天第6天 第8天 第10天模型组1226.17±1.75 29.08±0.99 29.17±1.12 28.83±0.94 28.58±1.08 30.50±1.93阳性药组 5 1226.25±2.05 28.58±1.73 29.25±1.87 28.42±1.73 28.50±1.51 30.08±1.73大剂量组 54 1226.00±1.65 28.75±1.66 28.83±2.21 28.75±1.55 28.42±1.88 29.33±2.06中剂量组 27 1125.91±1.45 29.45±1.92 28.18±1.47 28.18±1.40 28.46±1.75 29.18±1.60小剂量组 5.4 1226.50±2.07 29.17±1.47 29.25±1.77 28.58±1.83 28.08.±1.97 29.50±2.78肿胀值(ml)第12天 第14天 第16天 第18天第20天第22天第24天第26天29.92？.02 31.83？.99 31.42？.11 31.00？.95 30.58？.3531.25？.18 31.42？.73 31.00？.8629.17？.17 30.83？.21 29.58？.11*29.83？.82 29.25？.6029.92？.88 30.33？.78 30.33？.1528.25？.18 29.58？.64*28.83？.33**29.08？.64*29.00？.45*28.92？.35*29.17？.25*29.00？.49*29.09？.43 29.82？.23*28.82？.94**29.36？.91*28.55？.21*29.17？.25*29.27？.00*29.09？.17*29.17？.76 30.58？.08 29.17？.43 29.58？.0328.92？.68*29.17？.44*29.08？.19**29.33？.15与模型组比较*P＜0.05，**P＜0.01由表可见，大鼠右后足注射Freund’s佐剂后即早期炎症反应，于注射后次日即呈明显肿胀，逐渐加重，至第4天，足肿胀达高峰，然后逐渐减轻；于注射后第10天再度肿胀，至第18天发展成十分严重的肿胀状态，持续到观察期结束；因迟发性超敏反应，未注射佐剂的左后足于第10天开始肿大，且红肿明显，持续到观察期结束。
药物组合物给药各组注射佐剂的右后足肿胀趋势与强的松组基本一致，与模型组比较P＜0.05-0.01；未注射佐剂的左后足肿胀趋势也与强的松组基本一致，与模型组比较，P值也＜0.05-0.01，且其作用的显著性还优于强的松，但药物组合物给药各组作用差异不明显。以上说明药物组合物对Freund’s佐剂所致的原发性非特异性炎症和续发性炎症损害均有明显的抑制作用，即对Frdund’s佐剂所致对大鼠佐剂性关节炎有明显的抑制作用。
上述试验结果表明药物组合物对对致炎剂角叉菜胶所致大鼠足肿胀即实验性关节肿胀具有明显的抑制作用；对大鼠实验性肉芽肿形成即对结缔组织增生性炎症有明显的抑制作用。
同时，该药物组合物对热刺激及化学刺激所引起的小鼠疼痛反应均有明显的抑制作用。
在上述实验的基础上，我们进一步进行并完成了佐剂性关节炎实验，结果说明，药物组合物对Freund’s完全佐剂所致大鼠佐剂性关节炎(系免疫性炎症模型)有明显抑制作用。且作用与强的松一致，甚至在还某些阶段还优于强的松。
大鼠佐剂性关节炎常作为类风湿性关节炎及免疫性关节炎的一种实验模型，上述实验结果说明并肯定该药物组合物对大鼠佐剂性关节炎的防治作用，为该药物组合物防治类风湿性关节及自身免疫性疾病伴关节炎提供了一定的基础和依据。
以上部分实验资料只在于对本发明进行了说明。但应该理解的事，对于本发明的实验技术人员来说，可以在不偏离本发明的精神实质的前提下，对本发明进行的修正和改进，都属于本发明的保护范围。
下面举数个配方例对本发明作进一步详细说明。
配方例一用20％的青蒿素或青蒿素衍生物的药物组合物，80％中药提取物组成配方。
配方例二用60％的青蒿素或青蒿素衍生物的药物组合物，40％中药或天然药提取物组成配方。
配方例三用90％的青蒿素或青蒿素衍生物的药物组合物，10％其他合成制剂组成配方。
需要说明的是中药提取物的原材料是一般技术人员或临床上可以使用的中药或天然药。该中药或天然药的提取物可以是单品种，也可以是多品种。其他合成制剂可以是化学合成药物，也可以是药物的载体。
本发明所述的制剂是将上述药物与多种药学上可以接受的赋形剂结合，采用混合，溶解，粒化，成片，糖包衣或膜包衣等已知方法制备成固态或液态形式的制剂，如片剂，胶囊，栓剂，颗粒剂及注射剂等。
权利要求
1.一种治疗类风湿性关节炎和免疫性疾病的含青蒿提取物的药物组合物，其特征在于为含有有效剂量的青蒿提取物如青蒿素或青蒿素衍生物的药物组合物。
2.如权利要求1所述的治疗类风湿性关节炎和免疫性疾病的含青蒿提取物的药物组合物，其特征在于所述的蒿素衍生物包括双氢青蒿素，青蒿琥酯，蒿甲醚和蒿甲醚。
3.如权利要求1所述的治疗类风湿性关节炎和免疫性疾病的含青蒿提取物的药物组合物，其特征在于该组合物中青蒿素或青蒿素衍生物的含量为1~99％。
4.如权利要求1所述的治疗类风湿性关节炎和免疫性疾病的含青蒿提取物的药物组合物，其特征在于所述的药物组合物含有青蒿素或青蒿素衍生物的有效剂量为20~200mg/日。
5.如权利要求1所述的治疗类风湿性关节炎和免疫性疾病的含青蒿提取物的药物组合物，其特征在于该药物组合物可以单独使用，也可以与现有治疗RA和自身免疫性疾病的其他药物联合使用。
全文摘要
本发明涉及一种用于治疗类风湿性关节类和自身免疫性疾病伴关节炎症状的药物，治疗类风湿性关节类和免疫性疾病的含青蒿提取物(双氢青蒿素，青蒿琥酯，蒿甲醚，蒿甲醚等)的药物组合物。该组合物中青蒿素或青蒿素衍生物的含量为1~99％。该药物组合物含有青蒿素或青蒿素衍生物的有效剂量为20~200mg/日。可以为任何常用的药物形式，如固体制剂，流体，或膏状等。
文档编号A61P19/00GK1561994SQ20041003073
公开日2005年1月12日 申请日期2004年4月2日 优先权日2004年4月2日
发明者齐岩, 宋靖钢 申请人:齐岩, 宋靖钢