复方枸橼酸铋钾甲硝唑制剂的质量控制方法

专利名称：复方枸橼酸铋钾甲硝唑制剂的质量控制方法
技术领域：
本发明涉及一种复方枸橼酸铋钾甲硝唑制剂的质量控制方法，特别是用于抗溃疡的复方枸橼酸铋钾甲硝唑制剂的质量控制方法，属于对药品进行质量控制的技术领域。
背景技术：
溃疡病的发病原因和发病机理比较复杂，迄今尚无定论。近一百年以来，世界各国对溃疡病的发病原因和发病机理都在进行不断地研究和探讨，并已有数十种学说，但仍未取得一致的认识。国内溃疡病发病率为0.84‰，年复发率为6.8％。根据标准化人口推测，我国约有100余万的溃疡病发病人群，每年需花需数十亿元医疗费用。由于溃疡病属易复发的慢性病，其治疗费用有逐年上升趋势。人们从医药市场上抗溃疡药不断“推陈出新”而销路始终畅旺的现象，可以看到两大趋势一是溃疡病患者不断增加；二是研发溃疡药前景广阔。随着医学界对溃疡病研究的不断深入，发病机理已基本揭示，找到了病因，治疗就有的放矢了。目前市场上的溃疡药物，大致可分为三大类抑酸剂、黏膜保护剂和抗菌剂。本发明的抗溃疡药主要由枸橼酸铋钾、甲硝唑、盐酸雷尼替丁、维生素B6组成。其中，枸橼酸铋钾为胃黏膜保护药，甲硝唑为抗厌氧药、抗滴虫药，盐酸雷尼替丁为H2受体阻滞药，维生素B6具有抗菌作用，由上述药材制成的药物具有很好的抗溃疡作用。
药品如果没有严格的质量控制标准，得到的产品质量可靠性不高，治疗效果不明显；所以为提高药物的治疗作用，减少药物副作用，制定一个严格可靠的质量标准成为保证药品质量的基本要求。现代仪器分析技术的发展提供了高效液相色谱法，气相色谱法等，可以有效的控制药物的质量，保证用药的安全。

发明内容
本发明的目的在于提供一种复方枸橼酸铋钾甲硝唑制剂的质量控制方法，本发明针对现有技术的不足，增加了维生素B6含量测定，提供了一种能够有效地控制由枸橼酸铋钾、甲硝唑、盐酸雷尼替丁g、维生素B6制成的复方制剂质量的检测方法，保证了质量检测标准的准确性和先进性。
本发明所述复方枸橼酸铋钾甲硝唑制剂是由枸橼酸铋钾30～90重量份(含铋21.38份)、甲硝唑60～180重量份、盐酸雷尼替丁10～30重量份、维生素B610～30重量份，再加以适量辅料按照现有技术或药典公开的技术制成的。本发明所述质量控制方法主要包括性状、检查，以及鉴别、含量测定项目中的部分或全部；其中鉴别包括本制剂与氢氧化钠和稀盐酸、与醋酸铅的特征反应，与高氯酸的沉淀反应法；含量测定包括以甲硝唑对照品、维生素B6对照品为对照和滴定法测枸橼酸铋钾的含量测定方法。
具体的鉴别方法包括以下项目的部分或全部(1)取相当于甲硝唑50mg的本发明制剂适量，加20～40ml氯仿超声5～20分钟，滤过至蒸发皿中，水浴挥干，加氢氧化钠试液约2～5ml，洗至试管中，微温，即显紫红色；滴加稀盐酸至成酸性后，即变为黄色；再滴加过量氢氧化钠试液，则变成橙红色；(2)取本发明制剂约1～3g，置试管中，用小火缓缓加热，产生的气体能使湿润的醋酸铅试纸显黑色斑点；(3)取相当于枸橼酸铋钾20mg的本发明制剂适量，置小烧杯中，加入3～8ml水，搅拌，滤过至试管中，滴加1→10高氯酸3～5滴，即产生沉淀或浑浊。
甲硝唑、维生素B6的含量测定方法是以甲硝唑对照品、维生素B6对照品为对照、以甲醇∶0.002～0.1mol/L磷酸二氢钾溶液＝5～20∶95～80为流动相的高效液相测定方法。
具体的含量测定方法包括(1)甲硝唑、维生素B6采用高效液相色谱法测定色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇∶0.002～0.1mol/L磷酸二氢钾溶液＝5～20∶95～80为流动相；检测波长为291nm，理论板数按甲硝唑峰计算应不低于3000～5000；对照品溶液的制备 取甲硝唑、维生素B6对照品适量，精密称定，加流动相制成每1ml含甲硝唑0.02～0.08mg、维生素B60.002～0.008mg的溶液；供试品溶液的制备 取本发明制剂的内容物取本发明制剂的内容物，混匀，精密称取相当于维生素B610mg的内容物置50～100ml量瓶中，加流动相50ml超声处理20分钟，放冷，加流动相稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液1～5ml置25～100ml量瓶中，用流动相定容，摇匀，即得；测定法 分别吸取对照品溶液与供试品溶液各5～15μl，注入高效液相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积计算含量，即得；(2)枸橼酸铋钾取本发明制剂的内容物，混匀，精密称取相当于枸橼酸铋钾337mg的内容物置50～100ml量瓶中，加水25～50ml，再加入1→5硝酸溶液10～25ml，振摇使溶解，加水至刻度，摇匀，滤过；精密量取续滤液25～50ml至锥形瓶中，滴加3滴二甲酚橙指示液，用0.05mol/L的乙二胺四醋酸二钠滴定液滴定至黄色；每1ml 0.05mol/L的乙二胺四醋酸二钠滴定液相当于10.45mg的铋。
本发明所述质量控制方法包括性状
对于胶囊剂其内容物为白色或淡黄色粉末或颗粒；对于片剂为淡黄色包衣片；对于分散片为淡黄色包衣片；对于软胶囊剂为黄色或淡黄色软胶囊；对于颗粒剂为白色或淡黄色颗粒；对于散剂为白色或淡黄色细粉；对于微丸剂为白色或淡黄色包衣微丸；对于滴丸剂为白色或淡黄色滴丸；对于口服液体制剂为黄色或淡黄色液体；鉴别(1)取相当于甲硝唑50mg的本发明制剂适量，加20～40ml氯仿超声5～20分钟，滤过至蒸发皿中，水浴挥干，加氢氧化钠试液约2～5ml，洗至试管中，微温，即显紫红色；滴加稀盐酸至成酸性后，即变为黄色；再滴加过量氢氧化钠试液，则变成橙红色；(2)取本发明制剂约1～3g，置试管中，用小火缓缓加热，产生的气体能使湿润的醋酸铅试纸显黑色斑点；(3)取相当于枸橼酸铋钾20mg的本发明制剂适量，置小烧杯中，加入3～8ml水，搅拌，滤过至试管中，滴加1→10高氯酸3～5滴，即产生沉淀或浑浊。
检查干燥失重取本发明制剂装量差异项下内容物约1～2g，以五氧化二磷为干燥剂，60℃下减压干燥4小时，减失重量不得过2％。
其他 应符合《中国药典》2005年版二部附录I各制剂项下的有关规定；含量测定(1)甲硝唑、维生素B6采用高效液相色谱法测定色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇∶0.002～0.1mol/L磷酸二氢钾溶液＝5～20∶95～80为流动相；检测波长为291nm，理论板数按甲硝唑峰计算应不低于3000～5000；对照品溶液的制备 取甲硝唑、维生素B6对照品适量，精密称定，加流动相制成每1ml含甲硝唑0.02～0.08mg、维生素B60.002～0.008mg的溶液；供试品溶液的制备 取本发明制剂的内容物，混匀，精密称取相当于维生素B610mg的内容物置50～100ml量瓶中，加流动相50ml超声处理20分钟，放冷，加流动相稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液1～5ml置25～100ml量瓶中，用流动相定容，摇匀，即得；测定法 分别吸取对照品溶液与供试品溶液各5～15μl，注入高效液相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积计算含量，即得；
(2)枸橼酸铋钾取本发明制剂的内容物，混匀，精密称取相当于枸橼酸铋钾337mg的内容物置50～100ml量瓶中，加水25～50ml，再加入1→5硝酸溶液10～25ml，振摇使溶解，加水至刻度，摇匀，滤过；精密量取续滤液25～50ml至锥形瓶中，滴加3滴二甲酚橙指示液，用0.05mol/L的乙二胺四醋酸二钠滴定液滴定至黄色；每1ml 0.05mol/L的乙二胺四醋酸二钠滴定液相当于10.45mg的铋。
与现有技术相比，本发明增加了维生素B6含量测定，并采用高效液相色谱法测定制剂中甲硝唑、维生素B6的含量，具有分离效果好、灵敏、准确等优点；提高了复方枸橼酸铋钾甲硝唑制剂的质量控制标准，从而保证了本制剂的临床疗效。
为了验证本发明中含量测定方法的合理性，进行了以下实验。
(一)甲硝唑、维生素B6照高效液相色谱法(中国药典2005版年二部附录VD)测定。
1.药品与试剂甲硝唑对照品(中国生物制品所提供；批号191-9401)；维生素B6对照品(中国生物制品所提供；批号0116-9801)；磷酸二氢钾(分析纯)；甲醇(分析纯)；水为重蒸馏水。
2.仪器与分析条件 仪器为LC-10Avp日本岛津高效液相色谱仪；SPD-10AM二极管阵列检测器；CLASS-VP色谱工作站；色谱柱为大连依利特ODS色谱柱(柱号E1423925；4.6mm×250mm)。
3.系统适用性试验所用甲硝唑、维生素B6对照品均为中国药品检定所提供含量测定用，故不需做纯度检查。在标准操作条件下，分别制备本处方除“甲硝唑”和“维生素B6”外其余各原料制成的制剂，用二极管阵列检测器检测。阴性对照未见甲硝唑和维生素B6的吸收峰，样品中甲硝唑和维生素B6的吸收峰及光谱纯度与对照品完全一致。
4.线性关系(1)维生素B6精密称取维生素B6对照品0.01021g置50ml量瓶中，流动相定容。精密量取0.5ml置25ml量瓶中，用流动相定容，得到浓度为4.084ug/ml的对照品溶液。分别吸取4、8、12、16、20μl进样，记录色谱，以峰面积(mAU.s)对进样量(μg)回归计算，得到的直线方程，回归方程为C＝4.84708×10-6A-0.00337188；相关系数r＝0.999985。回归方程拟合成过原点方程时，C＝4.58618×10-7A结果表明，进样量在0.017μg～0.080μg范围内与峰面积线性关系良好。
表1维生素B6标准曲线

(2)甲硝唑 精密称取甲硝唑对照品0.01075g于10ml容量瓶中，用流动相定容。精密量取1ml至25ml容量瓶中，用流动相定容，得到浓度为43ug/ml的对照品溶液。分别吸取4、8、12、16、20μl进样，记录色谱，以峰面积(mAU.s)对进样量(μg)回归计算，得到直线方程，回归方程为C＝4.83067×10-7A-0.0101581；相关系数r＝0.999959。回归方程拟合成过原点方程时，C＝4.75383×10-7A结果表明，进样量在0.18μg～0.86μg范围内与峰面积线性关系良好。
表2甲硝唑标准曲线

5.样品含量测定计算法 本测定法采用外标法计算含量，其公式如下含量(Mr)＝Ax×Mr/Ar ………………………… (1)当对照品溶液以ug/ml表示时，Mr即表示对照品为ug/ml的浓度单位，同时测得样品的浓度也为ug/ml。拟定每粒含甲硝唑，维生素B6以mg单位表示，即mg/粒，代入下式计算即为样品的含量(mg/粒)。
含量(mg/粒)＝Mx×p/(Wx/V) ………………………… (2)式中Wx为样品的称量(mg)，V为提取样品的溶剂量(ml)P为平均粒重(mg)。
合并(1)、(2)式，得到含量计算公式(3)含量(mg/粒)＝AxXMr×V×P/(Ar×Wx)……………………… (3)6.精密度试验 采用同一批样品(批号20020901)取甲硝唑，维生素B6混合对照品溶液10μl，各进样5次，记录色谱，相对标准偏差(RSD)分别为0.58％、1.68％，可看出精密度良好。结果见表3、表4。
表3甲硝唑精密度试验

表4维生素B6精密度试验

7.重现性试验(1)甲硝唑重现性取同一批号样品(批号20020901)5份，依法处理，进样，记录色谱图，计算得到甲硝唑平均值为484.77mg/g，RSD为0.91％，表明重现性良好。结果见表5。
表5甲硝唑重现性试验

(2)维生素B6重现性 取同一批号样品(批号20020901)5份，依法处理，进样，记录色谱图，计算得到维生素Bx平均值为76.576mg/g，RSD为1.55％，表明重现性良好。结果见表6。
表6维生素B6重现性试验

表7回收率试验

(2)维生素B6取与重现性试验同一批号的样品，精密称定，分别加入一定量的对照品(取浓度为1.01mg/ml维生素B6对照品溶液1.6ml，3.5ml，6.6ml)，依法处理，进样，记录色谱)，计算测得回收率。平均回收率为86.12％，89.26％，87.72％，RSD为1.60％，1.20％，0.99％，说明回收良好，结果见表8。
表8回收率试验

(二)枸橼酸铋钾 本发明制剂为复方制剂，主治胃、十二指肠溃疡，浅表性胃炎、萎缩性胃炎，慢性胃炎。起主要治疗作用的抗溃疡药枸橼酸铋钾在本发明制剂中含量较高，且含测方法为《中国药典》2005年版所记载，较简便直观，容易操作，故以测定枸橼酸铋钾作为本发明制剂的一个含测指标(参照中国药典2005年版二部“枸橼酸铋钾”的含量测定项)。
(注采用的原料枸橼酸铋钾中的含Bi量为35.63％。)线性关系精密称取枸橼酸铋钾(干燥至恒重)各56.13mg、112.26mg、168.40mg、224.53mg、280.66mg(理论含铋量各为20mg、40mg、60mg、80mg、100mg)，置锥形瓶中，加水50ml溶解；再加入7ml硝酸溶液(1→5)，滴加3滴二甲酚橙指示液，摇匀，用乙二胺四醋酸二钠滴定液(0.05mol/L)滴定至黄色。每1ml乙二胺四醋酸二钠滴定液(0.05mol/L)相当于10.45mg的铋。测得值见表9。
表9枸橼酸铋钾线性关系

以理论含铋量(mg)为横坐标，耗EDTA量(ml)为纵坐标作其标准曲线，并进行线性回归，回归方程V＝0.09475x+0.031，相关系数r＝0.99989；过零点的方程为V＝0.09517x。可知其线性良好。
2.重现性试验按拟定的含量测定方法，对同一批样品(批号20020901)进行测定，并计算含量，结果见下表。
表10样品重现性试验表

3.回收率试验取枸橼酸铋钾阴性样品约1.25g，精密称定5份，各精密加入枸橼酸铋钾以铋计90mg，按含量测定方法进行测定，结果见下表。
表11回收率试验表

4.样品含量测定按所拟订的含量测定方法，取10个批号的样品进行测定，其结果见下表，均符合规定。
表12样品含量测定表


具体实施例方式本发明的实施例1胶囊剂的质量控制性状其内容物为白色或淡黄色粉末或颗粒。
鉴别(1)取本发明制剂适量(约相当于甲硝唑50mg)，加30ml氯仿超声15分钟，滤过至蒸发皿中，水浴挥干，加氢氧化钠试液约3ml，洗至试管中，微温，即显紫红色；滴加稀盐酸至成酸性后，即变为黄色；再滴加过量氢氧化钠试液，则变成橙红色。
(2)取本发明制剂约2g，置试管中，用小火缓缓加热，产生的气体能使湿润的醋酸铅试纸显黑色斑点。
(3)取本发明制剂适量(约相当于枸橼酸铋钾20mg)，置小烧杯中，加入5ml水，搅拌，滤过至试管中，滴加高氯酸(1→10)4滴，即产生沉淀或浑浊。
检查干燥失重 取本发明制剂装量差异项下内容物约1g，以五氧化二磷为干燥剂，60℃下减压干燥4小时，减失重量不得过2％。
其他 应符合胶囊剂项下的有关规定(中国药典2005年版二部附录IE)。
含量测定(1)甲硝唑、维生素B6照高效液相色谱法(中国药典2005年版二部附录VD)测定。
色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-0.05mol/L磷酸二氢钾溶液(13∶87)为流动相；检测波长为291nm，理论板数按甲硝唑峰计算应不低于4000。
对照品溶液的制备 取甲硝唑、维生素B6对照品适量，精密称定，加流动相制成每1ml含甲硝唑0.05mg、维生素B60.005mg的溶液。
供试品溶液的制备 取本发明制剂的内容物，混匀，精密称取适量(约相当于维生素B610mg)置75ml量瓶中，加流动相50ml超声处理20分钟，放冷，加流动相稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液3ml置60ml量瓶中，用流动相定容，摇匀，即得。
测定法 分别吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入高效液相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积计算含量，即得。
(2)枸橼酸铋钾的测定取本发明制剂的内容物，混匀，精密称取适量(约相当于枸橼酸铋钾337mg)置75ml量瓶中，加水35ml，再加入硝酸溶液(1→5)15ml，振摇使溶解，加水至刻度，摇匀，滤过；精密量取续滤液35ml至锥形瓶中，滴加3滴二甲酚橙指示液，用乙二胺四醋酸二钠滴定液(0.05mol/L)滴定至黄色。每1ml乙二胺四醋酸二钠滴定液(0.05mol/L)相当于10.45mg的铋(Bi)。
本发明的实施例2片剂的质量控制性状为淡黄色包衣片。
鉴别(1)取本发明制剂适量(约相当于甲硝唑50mg)，加20ml氯仿超声5分钟，滤过至蒸发皿中，水浴挥干，加氢氧化钠试液约2ml，洗至试管中，微温，即显紫红色；滴加稀盐酸至成酸性后，即变为黄色；再滴加过量氢氧化钠试液，则变成橙红色。
(2)取本发明制剂约1g，置试管中，用小火缓缓加热，产生的气体能使湿润的醋酸铅试纸显黑色斑点。
(3)取本发明制剂适量(约相当于构橼酸铋钾20mg)，置小烧杯中，加入3ml水，搅拌，滤过至试管中，滴加高氯酸(1→10)3滴，即产生沉淀或浑浊。
检查干燥失重 取本发明制剂重量差异项下内容物约1g，以五氧化二磷为干燥剂，60℃下减压干燥4小时，减失重量不得过2％。
其他 应符合片剂项下的有关规定(中国药典2005年版二部附录IA)。
含量测定(1)甲硝唑、维生素B6照高效液相色谱法(中国药典2005年版二部附录VD)测定。
色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-0.002mol/L磷酸二氢钾溶液(20∶80)为流动相；检测波长为291nm，理论板数按甲硝唑峰计算应不低于3000。
对照品溶液的制备 取甲硝唑、维生素B6对照品适量，精密称定，加流动相制成每ml含甲硝唑0.02mg、维生素B60.002mg的溶液。
供试品溶液的制备 取重量差异项下的内容物，混匀，精密称取适量(约相当于维生素B610mg)置50ml量瓶中，加流动相50ml超声处理20分钟，放冷，加流动相稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液1ml置25ml量瓶中，用流动相定容，摇匀，即得。
测定法 分别吸取对照品溶液与供试品溶液各5μl，注入高效液相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积计算含量，即得。
(2)枸橼酸铋钾的测定取重量差异项下的内容物，混匀，精密称取适量(约相当于枸橼酸铋钾337mg)置50ml量瓶中，加水25ml，再加入硝酸溶液(1→5)10ml，振摇使溶解，加水至刻度，摇匀，滤过；精密量取续滤液25ml至锥形瓶中，滴加3滴二甲酚橙指示液，用乙二胺四醋酸二钠滴定液(0.05mol/L)滴定至黄色。每1ml乙二胺四醋酸二钠滴定液(0.05mol/L)相当于10.45mg的铋(Bi)。
本发明的实施例3分散片的质量控制性状为淡黄色包衣片。
鉴别(1)取本发明制剂适量(约相当于甲硝唑50mg)，加40ml氯仿超声20分钟，滤过至蒸发皿中，水浴挥干，加氢氧化钠试液约5ml，洗至试管中，微温，即显紫红色；滴加稀盐酸至成酸性后，即变为黄色；再滴加过量氢氧化钠试液，则变成橙红色。
(2)取本发明制剂约3g，置试管中，用小火缓缓加热，产生的气体能使湿润的醋酸铅试纸显黑色斑点。
(3)取本发明制剂适量(约相当于枸橼酸铋钾20mg)，置小烧杯中，加入8ml水，搅拌，滤过至试管中，滴加高氯酸(1→10)5滴，即产生沉淀或浑浊。
检查干燥失重 取本发明制剂重量差异项下内容物约2g，以五氧化二磷为干燥剂，60℃下减压干燥4小时，减失重量不得过2％。
其他 应符合分散片项下的有关规定(中国药典2005年版二部附录IA)。
含量测定(1)甲硝唑、维生素B6照高效液相色谱法(中国药典2005年版二部附录VD)测定。
色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-0.1mol/L磷酸二氢钾溶液(5∶95)为流动相；检测波长为291nm，理论板数按甲硝唑峰计算应不低于5000。
对照品溶液的制备 取甲硝唑、维生素B6对照品适量，精密称定，加流动相制成每1ml含甲硝唑0.08mg、维生素B60.008mg的溶液。
供试品溶液的制备 取重量差异项下的内容物，混匀，精密称取适量(约相当于维生素B610mg)置100ml量瓶中，加流动相50ml超声处理20分钟，放冷，加流动相稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液5ml置100ml量瓶中，用流动相定容，摇匀，即得。
测定法 分别吸取对照品溶液与供试品溶液各15μl，注入高效液相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积计算含量，即得。
(2)枸橼酸铋钾的测定取重量差异项下的内容物，混匀，精密称取适量(约相当于枸橼酸铋钾337mg)置100ml量瓶中，加水50ml，再加入硝酸溶液(1→5)25ml，振摇使溶解，加水至刻度，摇匀，滤过；精密量取续滤液50ml至锥形瓶中，滴加3滴二甲酚橙指示液，用乙二胺四醋酸二钠滴定液(0.05mol/L)滴定至黄色。每1ml乙二胺四醋酸二钠滴定液(0.05mol/L)相当于10.45mg的铋(Bi)。
本发明的实施例4软胶囊剂的质量控制性状为黄色或淡黄色软胶囊。
鉴别(1)取本发明制剂适量(约相当于甲硝唑50mg)，加25ml氯仿超声10分钟，滤过至蒸发皿中，水浴挥干，加氢氧化钠试液约4ml，洗至试管中，微温，即显紫红色；滴加稀盐酸至成酸性后，即变为黄色；再滴加过量氢氧化钠试液，则变成橙红色。
(2)取本发明制剂约1.5g，置试管中，用小火缓缓加热，产生的气体能使湿润的醋酸铅试纸显黑色斑点。
(3)取本发明制剂适量(约相当于枸橼酸铋钾20mg)，置小烧杯中，加入4ml水，搅拌，滤过至试管中，滴加高氯酸(1→10)3滴，即产生沉淀或浑浊。
检查应符合软胶囊剂项下的有关规定(中国药典2005年版二部附录IE)。
含量测定(1)甲硝唑、维生素B6照高效液相色谱法(中国药典2005年版二部附录VD)测定。
色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-0.005mol/L磷酸二氢钾溶液(20∶95)为流动相；检测波长为291nm，理论板数按甲硝唑峰计算应不低于3500。
对照品溶液的制备 取甲硝唑、维生素B6对照品适量，精密称定，加流动相制成每1ml含甲硝唑0.03mg、维生素B60.003mg的溶液。
供试品溶液的制备 取本发明制剂的内容物，混匀，精密称取适量(约相当于维生素B610mg)置60ml量瓶中，加流动相50ml超声处理20分钟，放冷，加流动相稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液2ml置30ml量瓶中，用流动相定容，摇匀，即得。
测定法 分别吸取对照品溶液与供试品溶液各8μl，注入高效液相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积计算含量，即得。
(2)枸橼酸铋钾的测定取本发明制剂的内容物，混匀，精密称取适量(约相当于枸橼酸铋钾337mg)置60ml量瓶中，加水30ml，再加入硝酸溶液(1→5)20ml，振摇使溶解，加水至刻度，摇匀，滤过；精密量取续滤液30ml至锥形瓶中，滴加3滴二甲酚橙指示液，用乙二胺四醋酸二钠滴定液(0.05mol/L)滴定至黄色。每1ml乙二胺四醋酸二钠滴定液(0.05mol/L)相当于10.45mg的铋(Bi)。
本发明的实施例5颗粒剂的质量控制性状为白色或淡黄色颗粒。
鉴别(1)取本发明制剂适量(约相当于甲硝唑50mg)，加35ml氯仿超声12分钟，滤过至蒸发皿中，水浴挥干，加氢氧化钠试液约3ml，洗至试管中，微温，即显紫红色；滴加稀盐酸至成酸性后，即变为黄色；再滴加过量氢氧化钠试液，则变成橙红色。
(2)取本发明制剂约2g，置试管中，用小火缓缓加热，产生的气体能使湿润的醋酸铅试纸显黑色斑点。
(3)取本发明制剂适量(约相当于枸橼酸铋钾20mg)，置小烧杯中，加入6ml水，搅拌，滤过至试管中，滴加高氯酸(1→10)4滴，即产生沉淀或浑浊。
检查干燥失重取本发明制剂重量差异项下内容物约2g，以五氧化二磷为干燥剂，60℃下减压干燥4小时，减失重量不得过2％。
其他 应符合颗粒剂项下的有关规定(中国药典2005年版二部附录IN)。
含量测定(1)甲硝唑、维生素B6照高效液相色谱法(中国药典2005年版二部附录VD)测定。
色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-0.01mol/L磷酸二氢钾溶液(5∶80)为流动相；检测波长为291nm，理论板数按甲硝唑峰计算应不低于4000。
对照品溶液的制备 取甲硝唑、维生素B6对照品适量，精密称定，加流动相制成每1ml含甲硝唑0.04mg、维生素B60.004mg的溶液。
供试品溶液的制备取重量差异项下的内容物，混匀，精密称取适量(约相当于维生素B610mg)置70ml量瓶中，加流动相50ml超声处理20分钟，放冷，加流动相稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液5ml置40ml量瓶中，用流动相定容，摇匀，即得。
测定法 分别吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入高效液相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积计算含量，即得。
(2)枸橼酸铋钾的测定取重量差异项下的内容物，混匀，精密称取适量(约相当于枸橼酸铋钾337mg)置70ml量瓶中，加水40ml，再加入硝酸溶液(1→5)18ml，振摇使溶解，加水至刻度，摇匀，滤过；精密量取续滤液40ml至锥形瓶中，滴加3滴二甲酚橙指示液，用乙二胺四醋酸二钠滴定液(0.05mol/L)滴定至黄色。每1ml乙二胺四醋酸二钠滴定液(0.05mol/L)相当于10.45mg的铋(Bi)。
本发明的实施例6散剂的质量控制性状为白色或淡黄色细粉。
鉴别(1)取本发明制剂适量(约相当于甲硝唑50mg)，加25ml氯仿超声8分钟，滤过至蒸发皿中，水浴挥干，加氢氧化钠试液约4ml，洗至试管中，微温，即显紫红色；滴加稀盐酸至成酸性后，即变为黄色；再滴加过量氢氧化钠试液，则变成橙红色。
(2)取本发明制剂约1g，置试管中，用小火缓缓加热，产生的气体能使湿润的醋酸铅试纸显黑色斑点。
(3)取本发明制剂适量(约相当于枸橼酸铋钾20mg)，置小烧杯中，加入7ml水，搅拌，滤过至试管中，滴加高氯酸(1→10)5滴，即产生沉淀或浑浊。
检查干燥失重 取本发明制剂重量差异项下内容物约2g，以五氧化二磷为干燥剂，60℃下减压干燥4小时，减失重量不得过2％。
其他 应符合散剂项下的有关规定(中国药典2005年版二部附录IP)。
含量测定(1)甲硝唑、维生素B6照高效液相色谱法(中国药典2005年版二部附录VD)测定。
色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-0.075mol/L磷酸二氢钾溶液(13∶80)为流动相；检测波长为291nm，理论板数按甲硝唑峰计算应不低于4500。
对照品溶液的制备 取甲硝唑、维生素B6对照品适量，精密称定，加流动相制成每1ml含甲硝唑0.06mg、维生素B60.006mg的溶液。
供试品溶液的制备 取本发明制剂的内容物，混匀，精密称取适量(约相当于维生素B610mg)置80ml量瓶中，加流动相50ml超声处理20分钟，放冷，加流动相稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液3ml置50ml量瓶中，用流动相定容，摇匀，即得。
测定法 分别吸取对照品溶液与供试品溶液各12μl，注入高效液相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积计算含量，即得。
(2)枸橼酸铋钾的测定取本发明制剂的内容物，混匀，精密称取适量(约相当于枸橼酸铋钾337mg)置80ml量瓶中，加水45ml，再加入硝酸溶液(1→5)20ml，振摇使溶解，加水至刻度，摇匀，滤过；精密量取续滤液45ml至锥形瓶中，滴加3滴二甲酚橙指示液，用乙二胺四醋酸二钠滴定液(0.05mol/L)滴定至黄色。每1ml乙二胺四醋酸二钠滴定液(0.05mol/L)相当于10.45mg的铋(Bi)。
本发明的实施例7微丸剂的质量控制性状为白色或淡黄色包衣微丸。
鉴别(1)取本发明制剂适量(约相当于甲硝唑50mg)，加30ml氯仿超声18分钟，滤过至蒸发皿中，水浴挥干，加氢氧化钠试液约5ml，洗至试管中，微温，即显紫红色；滴加稀盐酸至成酸性后，即变为黄色；再滴加过量氢氧化钠试液，则变成橙红色。
(2)取本发明制剂约2.5g，置试管中，用小火缓缓加热，产生的气体能使湿润的醋酸铅试纸显黑色斑点。
(3)取本发明制剂适量(约相当于枸橼酸铋钾20mg)，置小烧杯中，加入5ml水，搅拌，滤过至试管中，滴加高氯酸(1→10)3滴，即产生沉淀或浑浊。
检查干燥失重 取本发明制剂重量差异项下内容物约1g，以五氧化二磷为干燥剂，60℃下减压干燥4小时，减失重量不得过2％。
其他 应符微丸剂项下的有关规定(中国药典2005年版二部附录IH)。
含量测定(1)甲硝唑、维生素B6照高效液相色谱法(中国药典2005年版二部附录VD)测定。
色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-0.03mol/L磷酸二氢钾溶液(10∶90)为流动相；检测波长为291nm，理论板数按甲硝唑峰计算应不低于3000。
对照品溶液的制备 取甲硝唑、维生素B6对照品适量，精密称定，加流动相制成每1ml含甲硝唑0.07mg、维生素B60.007mg的溶液。
供试品溶液的制备 取重量差异项下的内容物，混匀，精密称取适量(约相当于维生素B610mg)置90ml量瓶中，加流动相50ml超声处理20分钟，放冷，加流动相稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液4ml置70ml量瓶中，用流动相定容，摇匀，即得。
测定法 分别吸取对照品溶液与供试品溶液各15μl，注入高效液相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积计算含量，即得。
(2)枸橼酸铋钾的测定取重量差异项下的内容物，混匀，精密称取适量(约相当于枸橼酸铋钾337mg)置90ml量瓶中，加水40ml，再加入硝酸溶液(1→5)15ml，振摇使溶解，加水至刻度，摇匀，滤过；精密量取续滤液40ml至锥形瓶中，滴加3滴二甲酚橙指示液，用乙二胺四醋酸二钠滴定液(0.05mol/L)滴定至黄色。每1ml乙二胺四醋酸二钠滴定液(0.05mol/L)相当于10.45mg的铋(Bi)。
本发明的实施例8滴丸剂的质量控制性状为白色或淡黄色滴丸。
鉴别(1)取本发明制剂适量(约相当于甲硝唑50mg)，加20ml氯仿超声10分钟，滤过至蒸发皿中，水浴挥干，加氢氧化钠试液约2ml，洗至试管中，微温，即显紫红色；滴加稀盐酸至成酸性后，即变为黄色；再滴加过量氢氧化钠试液，则变成橙红色。
(2)取本发明制剂约3g，置试管中，用小火缓缓加热，产生的气体能使湿润的醋酸铅试纸显黑色斑点。
(3)取本发明制剂适量(约相当于枸橼酸铋钾20mg)，置小烧杯中，加入6ml水，搅拌，滤过至试管中，滴加高氯酸(1→10)4滴，即产生沉淀或浑浊。
检查干燥失重 取本发明制剂重量差异项下内容物约2g，以五氧化二磷为干燥剂，60℃下减压干燥4小时，减失重量不得过2％。
其他 应符滴丸剂项下的有关规定(中国药典2005年版二部附录IH)。
含量测定(1)甲硝唑、维生素B6照高效液相色谱法(中国药典2005年版二部附录VD)测定。
色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-0.06mol/L磷酸二氢钾溶液(15∶85)为流动相；检测波长为291nm，理论板数按甲硝唑峰计算应不低于4000。
对照品溶液的制备 取甲硝唑、维生素B6对照品适量，精密称定，加流动相制成每1ml含甲硝唑0.05mg、维生素B60.005mg的溶液。
供试品溶液的制备 取重量差异项下的内容物，混匀，精密称取适量(约相当于维生素B610mg)置50ml量瓶中，加流动相50ml超声处理20分钟，放冷，加流动相稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液2ml置80ml量瓶中，用流动相定容，摇匀，即得。
测定法 分别吸取对照品溶液与供试品溶液各5μl，注入高效液相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积计算含量，即得。
(2)枸橼酸铋钾的测定取本发明制剂的内容物，混匀，精密称取适量(约相当于枸橼酸铋钾337mg)置50ml量瓶中，加水30ml，再加入硝酸溶液(1→5)10ml，振摇使溶解，加水至刻度，摇匀，滤过；精密量取续滤液25ml至锥形瓶中，滴加3滴二甲酚橙指示液，用乙二胺四醋酸二钠滴定液(0.05mol/L)滴定至黄色。每1ml乙二胺四醋酸二钠滴定液(0.05mol/L)相当于10.45mg的铋(Bi)。
本发明的实施例9口服液体制剂的质量控制性状为黄色或淡黄色液体。
鉴别(1)取本发明制剂适量(约相当于甲硝唑50mg)，加40ml氯仿超声15分钟，滤过至蒸发皿中，水浴挥干，加氢氧化钠试液约3ml，洗至试管中，微温，即显紫红色；滴加稀盐酸至成酸性后，即变为黄色；再滴加过量氢氧化钠试液，则变成橙红色。
(2)取本发明制剂约2g，置试管中，用小火缓缓加热，产生的气体能使湿润的醋酸铅试纸显黑色斑点。
(3)取本发明制剂适量(约相当于枸橼酸铋钾20mg)，置小烧杯中，加入8ml水，搅拌，滤过至试管中，滴加高氯酸(1→10)5滴，即产生沉淀或浑浊。
检查应符合液体口服制剂项下的有关规定(中国药典2005年版二部附录IO)。
含量测定(1)甲硝唑、维生素B6照高效液相色谱法(中国药典2005年版二部附录VD)测定。
色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-0.09mol/L磷酸二氢钾溶液(20∶90)为流动相；检测波长为291nm，理论板数按甲硝唑峰计算应不低于5000。
对照品溶液的制备 取甲硝唑、维生素B6对照品适量，精密称定，加流动相制成每1ml含甲硝唑0.08mg、维生素B60.008mg的溶液。
供试品溶液的制备 取本发明制剂的内容物，混匀，精密称取适量(约相当于维生素B610mg)置100ml量瓶中，加流动相50ml超声处理20分钟，放冷，加流动相稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液5ml置90ml量瓶中，用流动相定容，摇匀，即得。
测定法 分别吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入高效液相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积计算含量，即得。
(2)枸橼酸铋钾的测定取本发明制剂的内容物，混匀，精密称取适量(约相当于枸橼酸铋钾337mg)置100ml量瓶中，加水50ml，再加入硝酸溶液(1→5)12ml，振摇使溶解，加水至刻度，摇匀，滤过；精密量取续滤液30ml至锥形瓶中，滴加3滴二甲酚橙指示液，用乙二胺四醋酸二钠滴定液(0.05mol/L)滴定至黄色。每1ml乙二胺四醋酸二钠滴定液(0.05mol/L)相当于10.45mg的铋(Bi)。
权利要求
1.一种复方枸橼酸铋钾甲硝唑制剂的质量控制方法，所述制剂包括片剂、分散片、胶囊剂、软胶囊剂、颗粒剂、散剂、微丸剂、滴丸剂或口服液体制剂，其特征在于所述质量控制方法主要包括性状、检查，以及鉴别、含量测定项目中的部分或全部；其中鉴别包括与氢氧化钠和稀盐酸、与醋酸铅的特征反应，与高氯酸的沉淀反应法；含量测定包括以甲硝唑对照品、维生素B6对照品为对照和滴定法测枸橼酸铋钾的含量测定方法。
2.按照权利要求1所述复方枸橼酸铋钾甲硝唑制剂的质量控制方法，其特征在于鉴别方法包括以下项目的部分或全部(1)取相当于甲硝唑50mg的本发明制剂适量，加20～40ml氯仿超声5～20分钟，滤过至蒸发皿中，水浴挥干，加氢氧化钠试液约2～5ml，洗至试管中，微温，即显紫红色；滴加稀盐酸至成酸性后，即变为黄色；再滴加过量氢氧化钠试液，则变成橙红色；(2)取本发明制剂约1～3g，置试管中，用小火缓缓加热，产生的气体能使湿润的醋酸铅试纸显黑色斑点；(3)取相当于枸橼酸铋钾20mg的本发明制剂适量，置小烧杯中，加入3～8ml水，搅拌，滤过至试管中，滴加1→10高氯酸3～5滴，即产生沉淀或浑浊。
3.按照权利要求1所述复方枸橼酸铋钾甲硝唑制剂的质量控制方法，其特征在于甲硝唑、维生素B6的含量测定方法是以甲硝唑对照品、维生素B6对照品为对照、以甲醇∶0.002～0.1mol/L磷酸二氢钾溶液＝5～20∶95～80为流动相的高效液相测定方法。
4.按照权利要求1或3所述复方枸橼酸铋钾甲硝唑制剂的质量控制方法，其特征在于含量测定方法包括(1)甲硝唑、维生素B6 采用高效液相色谱法测定色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇∶0.002～0.1mol/L磷酸二氢钾溶液＝5～20∶95～80为流动相；检测波长为291nm，理论板数按甲硝唑峰计算应不低于3000～5000；对照品溶液的制备 取甲硝唑、维生素B6对照品适量，精密称定，加流动相制成每1ml含甲硝唑0.02～0.08mg、维生素B60.002～0.008mg的溶液；供试品溶液的制备 取本发明制剂的内容物取本发明制剂的内容物，混匀，精密称取相当于维生素B610mg的内容物置50～100ml量瓶中，加流动相50ml超声处理20分钟，放冷，加流动相稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液1～5ml置25～100ml量瓶中，用流动相定容，摇匀，即得；测定法 分别吸取对照品溶液与供试品溶液各5～15μl，注入高效液相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积计算含量，即得；(2)枸橼酸铋钾取本发明制剂的内容物取本发明制剂的内容物，混匀，精密称取相当于枸橼酸铋钾337mg的内容物置50～100ml量瓶中，加水25～50ml，再加入1→5硝酸溶液10～25ml，振摇使溶解，加水至刻度，摇匀，滤过；精密量取续滤液25～50ml至锥形瓶中，滴加3滴二甲酚橙指示液，用0.05mol/L的乙二胺四醋酸二钠滴定液滴定至黄色；每1ml0.05mol/L的乙二胺四醋酸二钠滴定液相当于10.45mg的铋。
5.按照权利要求1所述复方枸橼酸铋钾甲硝唑制剂的质量控制方法，其特征在于所述质量控制方法中的性状为对于胶囊剂其内容物为白色或淡黄色粉末或颗粒；对于片剂为淡黄色包衣片；对于分散片为淡黄色包衣片；对于软胶囊剂为黄色或淡黄色软胶囊；对于颗粒剂为白色或淡黄色颗粒；对于散剂为白色或淡黄色细粉；对于微丸剂为白色或淡黄色包衣微丸；对于滴丸剂为白色或淡黄色滴丸；对于口服液体制剂为黄色或淡黄色液体；鉴别(1)取相当于甲硝唑50mg的本发明制剂适量，加20～40ml氯仿超声5～20分钟，滤过至蒸发皿中，水浴挥干，加氢氧化钠试液约2～5ml，洗至试管中，微温，即显紫红色；滴加稀盐酸至成酸性后，即变为黄色；再滴加过量氢氧化钠试液，则变成橙红色；(2)取本发明制剂约1～3g，置试管中，用小火缓缓加热，产生的气体能使湿润的醋酸铅试纸显黑色斑点；(3)取相当于枸橼酸铋钾20mg的本发明制剂适量，置小烧杯中，加入3～8ml水，搅拌，滤过至试管中，滴加1→10高氯酸3～5滴，即产生沉淀或浑浊；检查干燥失重取本发明制剂装量差异项下内容物约1～2g，以五氧化二磷为干燥剂，60℃下减压干燥4小时，减失重量不得过2％；其他 应符合中国药典2005年版二部附录I各制剂项下的有关规定；含量测定(1)甲硝唑、维生素B6采用高效液相色谱法测定色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇∶0.002～0.1mol/L磷酸二氢钾溶液＝5～20∶95～80为流动相；检测波长为291nm，理论板数按甲硝唑峰计算应不低于3000～5000；对照品溶液的制备 取甲硝唑、维生素B6对照品适量，精密称定，加流动相制成每1ml含甲硝唑0.02～0.08mg、维生素B60.002～0.008mg的溶液；供试品溶液的制备 取本发明制剂的内容物取本发明制剂的内容物，混匀，精密称取相当于维生素B610mg的内容物置50～100ml量瓶中，加流动相50ml超声处理20分钟，放冷，加流动相稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液1～5ml置25～100ml量瓶中，用流动相定容，摇匀，即得；测定法 分别吸取对照品溶液与供试品溶液各5～15μl，注入高效液相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积计算含量，即得；(2)枸橼酸铋钾取本发明制剂的内容物取本发明制剂的内容物，混匀，精密称取相当于枸橼酸铋钾337mg的内容物置50～100ml量瓶中，加水25～50ml，再加入1→5硝酸溶液10～25ml，振摇使溶解，加水至刻度，摇匀，滤过；精密量取续滤液25～50ml至锥形瓶中，滴加3滴二甲酚橙指示液，用0.05mol/L的乙二胺四醋酸二钠滴定液滴定至黄色；每1ml0.05mol/L的乙二胺四醋酸二钠滴定液相当于10.45mg的铋。
全文摘要
本发明提供了一种复方枸橼酸铋钾甲硝唑制剂的质量控制方法，所述质量控制方法主要包括性状、检查，以及鉴别、含量测定项目中的部分或全部；其中鉴别包括与氢氧化钠和稀盐酸、与醋酸铅的特征反应，与高氯酸的沉淀反应法；含量测定包括以甲硝唑对照品、维生素B
文档编号A61K9/14GK1785180SQ20051020071
公开日2006年6月14日 申请日期2005年11月17日 优先权日2005年11月17日
发明者张芝庭, 郭宗华, 黄 俊, 雷蕾 申请人:贵州神奇集团控股有限公司