Ⅶa因子或Ⅶa因子等效物用于预防或减轻大脑内出血(ICH)后的出血进展和/或水肿形成...的制作方法

专利名称：：Ⅶa因子或Ⅶa因子等效物用于预防或减轻大脑内出血(ICH)后的出血进展和/或水肿形成...的制作方法
技术领域：
：本发明涉及预防ICH患者的并发症或使得ICH患者的并发症的严重度最小化。
背景技术：
：止血是复杂的生理过程，其最终造成了出血的停止。止血依赖于三种主要组分的正常功能血管(特别是内皮衬)、凝血因子、和血小板。一旦形成止血栓之后，对纤溶系统的及时激活是同样重要的，以防止进一步的不必要的止血活化。该系统的任何功能异常(因为止血组分的数目减少、或分子功能异常，或者纤溶组分的活化增多)都可以导致临床出血，例如不同严重度的出血素质。在绝大多数的生理状况中，通过在损伤部位TF暴露之后循环的活化凝血VII因子(FVIIa)与组织因子(TF)的相互作用触发止血。仅仅在与TF形成复合物之后，内源性FVIIa才能成为蛋白水解活性的。正常地，TF表达于血管壁的深层，并在损伤后暴露出来。这就保证了凝血的高度局限的活化并预防了弥漫性凝血。TF也似乎以非活性的形式存在，即所谓的加密(encrypted)TF。对加密TF相对于活化TF的调节仍不清楚。大脑内出血(ICH)是自发发生的并造成血液在脑组织实质内蓄积的神经系统病症。已经证实ICH的结果造成了显著高的发病率和死亡率。近年来，已经显示出ICH在最初发作后的数小时内体积增加。约38％的患有ICH的患者都出现了这种情况。出血体积增加的原因还不清楚，但是认为这可能是通过最初血肿的持续渗漏或者是通过再出血的复杂过程。在最初发作的数天，CT扫描可以鉴定出围绕在血肿的血液周围的水肿带。对水肿形成的机制也了解得很少，但是这可能是因为围绕在血块周围的组织中的炎症反应以及血块对周围脑组织施压的直接肿块效应的组合。孤立性水肿的影响可以是显著的，虽然没有在显著出血中进行评价，但是它可以影响ICH后的受损脑组织的体积，估计所述受损脑组织最大可以是血肿的实际体积的3倍。总的受累组织体积的重要性显示出其是ICH后结果的最强的预测因素之一。因此，对减轻任何出血扩大以及减少和/或最小化总病损体积(血液和所形成的水肿)存在临床关注。因此，本领域需要用于急性期治疗ICH以及用于预防和减轻ICH及用于治疗ICH患者的常用方式所造成的晚期并发症的改进方法和组合物。
发明内容本发明提供了VIIa因子或VIIa因子等效物(equivalent)用于生产预防或减轻ICH后的出血进展(haemorrhagegrowth)和/或水肿形成的药物的用途。这些药物应用的典型患者是患有凝血病性出血的患者，包括但不限于经历自发性或外伤性ICH的患者。本发明也提供了VIIa因子或VIIa因子等效物用于生产提高患者在开始治疗后第90天，优选地第15天的总生存率的药物的用途。在另一方面，本发明提供了VIIa因子或VIIa因子等效物用于生产减少ICH患者的住院天数，包括从开始治疗(SOT)到开始治疗后第90天(优选地在开始治疗后第15天)期间在重症监护病房(ICU)的住院天数、卧床天数、和/或经欧洲生活质量量表(EuroQOL)或相似工具所衡量出的生活质量，或用于降低ICH患者的死亡危险的药物的用途。在一个实施方式中，(i)在开始治疗时，给患者施用缓慢单次推注40、80或160μg/kg量的VIIa因子或VIIa因子等效物，但是这要依据于其他的危险因素(例如，接受抗凝剂或抗血小板药物治疗的患者可能需要进一步的给药)。本发明也提供了预防或减轻ICH的一种或多种并发症的方法，通过给患者施用有效量的VIIa因子或VIIa因子等效物来实施。代表性患者经历自发性或外伤性ICH。在一些实施方式中，在发生ICH的4个小时内实施初始施用步骤。在一些实施方式中，方法还包括给患者施用能增加所述VIIa因子或VIIa因子等效物效应的量的第二种凝血剂。优选地，第二种凝血剂是凝血因子(包括但不限于VIII因子、IX因子、V因子、XI因子、XIII因子、和它们的任何组合)或抗纤溶剂(包括但不限于PAI-1、抑肽酶、ε-氨基己酸、氨甲环酸、或它们的任何组合)。本发明也提供了用于减少ICH患者在ICH后的住院天数的方法，其中通过给患者施用能实现预防或减轻ICH后的出血进展和/或水肿形成的有效量的VIIa因子或VIIa因子等效物实施该方法。本发明也提供了用于降低ICH患者的死亡危险的方法，通过给患者施用一定量的VIIa因子或VIIa因子等效物以预防或减轻ICH后的水肿形成实施该方法。本发明也提供了用于预防或减轻大多数ICH患者的一种或多种ICH并发症的方法，通过(i)给一组ICH患者施用能实现预防或减轻作用的有效量的VIIa因子或VIIa因子等效物；和(ii)观察到接受了VIIa因子或VIIa因子等效物的患者组中一种或多种ICH并发症的发生频率相对于在没有接受所述VIIa因子或VIIa因子等效物的相同患者组中所预期的所述并发症的发生频率降低可以实施本方法。发明详细描述本发明提供了可以有利地用于预防或减轻ICH后的出血进展和/或水肿形成的方法和组合物，其中患者可以在其损伤之后和/或因为可以被用于治疗其损伤的医疗干预而出现出血进展和/或水肿形成。通过以能有效地预防或减轻出血进展、水肿形成及与ICH相关的一种或多种并发症的方式给ICH患者施用VIIa因子或VIIa因子等效物实施本方法。能有效地预防或减轻出血进展、水肿形成及随后的并发症的方式可以包括施用预定量的VIIa因子或VIIa因子等效物，和/或利用特殊的给药方案、制剂、给药方式、与其他治疗的组合等。利用一种或多种常规的显像方法(例如CT、MRI扫描)或通过应用评价并发症的参数(见下)可以评价本发明的方法在减轻出血进展、水肿形成或预防ICH并发症方面的疗效。本发明的方法可以预防的或者可以减轻其严重性的并发症包括但不限于出血进展、水肿形成、和生活质量下降包括这些综合征中一种或多种所引起的死亡。患者选择通过应用本发明的方法所能获益的患者包括但不限于患有自发性或外伤性ICH的患者。自发性ICH包括患有常常与高龄、高血压、或淀粉样蛋白在脑血管内沉积的发生相关的大脑内出血的患者。ICH通常是单一血管破裂造成的，其引起了对邻近损伤血管的周围脑组织的广泛损伤。外伤性ICH可以与例如机动车事故或高空坠落造成的事故有关。所造成的头部挫伤可以导致一根或多根大脑内或大脑外(但在颅内)血管的破裂。在急性期，已经通过手术清除掉许多颅内(但为大脑外)出血，但是大脑内病损常常难以接近进行直接清除，因为清除本身将造成对脑组织的明显损伤。出血指的是血液由循环系统的任何组成外渗，包括与ICH有关的任何出血(包括但不限于过量的、不受控制的出血，即溢血)。在一组实施方式中，过量出血是由自发性ICH引起的，另一组实施方式中，它是由外伤性ICH引起的。本发明的方法可以被有利地应用于任何患有自发性或外伤性ICH的患者，如果不治疗，ICH将造成显著的出血进展以及伴随水肿和/或并发症。在一组实施方式中，本发明所治疗的患者不患有出血性疾病，无论是先天性或获得性的出血性疾病，例如血友病A、B、或C。在本发明的不同的实施方式中，如果患者被诊断有先天性出血疾病，该患者可以被排除出治疗。在本发明的不同的实施方式中，如果患者先前已经接受抗凝治疗，该患者可以被排除出治疗。VIIa因子和VIIa因子等效物在实践本发明中，可以使用当施用给ICH患者时能有效地预防并发症的任何VIIa因子或等效物。在一些实施方式中，VIIa因子是人VIIa因子，如在例如美国专利No.4,784,950中所述的(野生型VII因子)。术语“VII因子”预期包括未裂解(酶原)形式的VII因子多肽，以及那些已经被蛋白酶解加工生成其相应生物活性形式的VII因子多肽(可以称作VIIa因子)。通常在残基152和153之间裂解VII因子生成VIIa因子。VIIa因子等效物包括但不限于相对于人VIIa因子已经被化学修饰的VII因子多肽，和/或相对于人VIIa因子含有一个或多个氨基酸序列改变的VII因子多肽。这些等效物可以表现出相对于人VIIa因子的不同性能，包括稳定性、磷脂结合性、改变了的比活性等。在一组实施方式中，VIIa因子等效物包括表现出至少约10％、优选至少约30％、更优选地至少约50％、以及最优选地至少约70％的人VIIa因子的比生物活性的多肽。对于本发明的目的，通过用VII因子缺乏血浆和促凝血酶原激酶测定制剂促进血液凝固的能力可以定量出VIIa因子生物活性，如例如在美国专利No.5,997,864中所述的那样。在这个检测法中，生物活性被表达为相对于对照样品的凝固时间的缩短，并通过与含有1单位/mlVII因子活性的混合人血清标准相比较而转化成“VII因子单位”。或者，通过(i)测定VIIa因子或VIIa因子等效物在包括包埋于脂膜中的TF和X因子的系统内生成Xa因子的能力(Perssonetal.，J.Biol.Chem.27219919-19924，1997)；(ii)测定含水系统中的X因子水解(见，下面的实施例5)；(iii)用依据表面等离子共振的工具测定VIIa因子或VIIa因子等效物与TF的物理结合(Persson，FEBSLetts.413359-363，1997)和(iv)测定VIIa因子和/或VIIa因子等效物对合成底物的水解，可以定量出VIIa因子生物活性。VII因子等效物的示例包括但不限于野生型VII因子、L305V-FVII，L305V/M306D/D309S-FVII，L305I-FVII，L305T-FVII，F374P-FVII，V158T/M298Q-FVII，V158D/E296V/M298Q-FVII，K337A-FVII，M298Q-FVII，V158D/M298Q-FVII，L305V/K337A-FVII，V158D/E296V/M298Q/L305V-FVII，V158D/E296V/M298Q/K337A-FVII，V158D/E296V/M298Q/L305V/K337A-FVII，K157A-FVII，E296V-FVII，E296V/M298Q-FVII，V158D/E296V-FVII，V158D/M298K-FVII，和S336G-FVII，L305V/K337A-FVII，L305V/V158D-FVII，L305V/E296V-FVII，L305V/M298Q-FVII，L305V/V158T-FVII，L305V/K337A/V158T-FVII，L305V/K337A/M298Q-FVII，L305V/K337A/E296V-FVII，L305V/K337A/V158D-FVII，L305V/V158D/M298Q-FVII，L305V/V158D/E296V-FVII，L305V/V158T/M298Q-FVII，L305V/V158T/E296V-FVII，L305V/E296V/M298Q-FVII，L305V/V158D/E296V/M298Q-FVII，L305V/V158T/E296V/M298Q-FVII，L305V/V158T/K337A/M298Q-FVII，L305V/V158T/E296V/K337A-FVII，L305V/V158D/K337A/M298Q-FVII，L305V/V158D/E296V/K337A-FVII，L305V/V158D/E296V/M298Q/K337A-FVII，L305V/V158T/E296V/M298Q/K337A-FVII，S314E/K316H-FVII，S314E/K316Q-FVII，S314E/L305V-FVII，S314E/K337A-FVII，S314E/V158D-FVII，S314E/E296V-FVII，S314E/M298Q-FVII，S314E/V158T-FVII，K316H/L305V-FVII，K316H/K337A-FVII，K316H/V158D-FVII，K316H/E296V-FVII，K316H/M298Q-FVII，K316H/V158T-FVII，K316Q/L305V-FVII，K316Q/K337A-FVII，K316Q/V158D-FVII，K316Q/E296V-FVII，K316Q/M298Q-FVII，K316Q/V158T-FVII，S314E/L305V/K337A-FVII，S314E/L305V/V158D-FVII，S314E/L305V/E296V-FVII，S314E/L305V/M298Q-FVII，S314E/L305V/V158T-FVII，S314E/L305V/K337A/V158T-FVII，S314E/L305V/K337A/M298Q-FVII，S314E/L305V/K337A/E296V-FVII，S314E/L305V/K337A/V158D-FVII，S314E/L305V/V158D/M298Q-FVII，S314E/L305V/V158D/E296V-FVII，S314E/L305/V158T/M298Q-FVII，S314E/L305V/V158T/E296V-FVII，S314E/L305V/E296V/M298Q-FVII，S314E/L305V/V158D/E296V/M298Q-FVII，S314E/L305V/V158T/E296V/M298Q-FVII，S314E/L305V/V158T/K337A/M298Q-FVII，S314E/L305V/V158T/E296V/K337A-FVII，S314E/L305V/V158D/K337A/M298Q-FVII，S314E/L305V/V158D/E296V/K337A-FVII，S314E/L305V/V158D/E296V/M298Q/K337A-FVII，S314E/L305V/V158T/E296V/M298Q/K337A-FVII，K316H/L305V/K337A-FVII，K316H/L305V/V158D-FVII，K316H/L305V/E296V-FVII，K316H/L305V/M298Q-FVII，K316H/L305V/V158T-FVII，K316H/L305V/K337A/V158T-FVII，K316H/L305V/K337A/M298Q-FVII，K316H/L305V/K337A/E296V-FVII，K316H/L305V/K337A/V158D-FVII，K316H/L305V/V158D/M298Q-FVII，K316H/L305V/V158D/E296V-FVII，K316H/L305V/V158T/M298Q-FVII，K316H/L305V/V158T/E296V-FVII，K316H/L305V/E296V/M298Q-FVII，K316H/L305V/V158D/E296V/M298Q-FVII，K316H/L305V/V158T/E296V/M298Q-FVII，K316H/L305V/V158T/K337A/M298Q-FVII，K316H/L305V/V158T/E296V/K337A-FVII，K316H/L305V/V158D/K337A/M298Q-FVII，K316H/L305V/V158D/E296V/K337A-FVII，K316H/L305V/V158D/E296V/M298Q/K337A-FVII，K316H/L305V/V158T/E296V/M298Q/K337A-FVII，K316Q/L305V/K337A-FVII，K316Q/L305V/V158D-FVII，K316Q/L305V/E296V-FVII，K316Q/L305V/M298Q-FVII，K316Q/L305V/V158T-FVII，K316Q/L305V/K337A/V158T-FVII，K316Q/L305V/K337A/M298Q-FVII，K316Q/L305V/K337A/E296V-FVII，K316Q/L305V/K337A/V158D-FVII，K316Q/L305V/V158D/V/298Q-FVII，K316Q/L305V/V158D/E296V-FVII，K316Q/L305V/V158T/M298Q-FVII，K316Q/L305V/V158T/E296V-FVII，K316Q/L305V/E296V/M298Q-FVII，K316Q/L305V/V158D/E296V/M298Q-FVII，K316Q/L305V/V158T/E296V/M298Q-FVII，K316Q/L305V/V158T/K337A/M298Q-FVII，K316Q/L305V/V158T/E296V/K337A-FVII，K316Q/L305V/V158D/K337A/M298Q-FVII，K316Q/L305V/V158D/E296V/K337A-FVII，K316Q/L305V/V158D/E296V/M298Q/K337A-FVII，和K316Q/L305V/V158T/E296V/M298Q/K337A-FVII.制备物和制剂本发明包括治疗性施用VIIa因子或VIIa因子等效物，利用包括VIIa因子制备物的制剂可以实现这一点。如在此所用的“VII因子制备物”指的是多种VIIa因子多肽或VIIa因子等效物多肽，包括已经从合成这些多肽的细胞(无论是原始细胞或者已经编程以合成VIIa因子或VIIa因子等效物的重组细胞)分离的变体和化学修饰形式。用本领域已知的任一方法可以实现多肽与其来源细胞的分离，所述方法包括但不限于从粘附细胞培养物中取出含有所需产物的细胞培养基；离心或过滤以去除非粘附细胞等。任选地，可以进一步地纯化VII因子多肽。利用本领域已知的任一方法可以实现纯化，方法包括但不限于亲和层析法，例如在抗VII因子抗体柱上(见，例如Wakabayashietal.，J.Biol.Chem.26111097，1986；和Thimetal.，Biochem.277785，1988)、疏水相互作用色谱法、离子交换色谱法、大小排阻色谱法、电泳方法(例如制备型等电聚焦(IEF))、差别溶解度(例如硫酸铵沉淀)、或提取等。一般参见Scopes，ProteinPurification，Springer-Verlag，NewYork，1982；和ProteinPurification，J.-C.Janson和LarsRyden编，VCHPublishers，NewYork，1989。在纯化之后，制备物优选地含有少于约10％重量的、更优选地少于约5％以及最优选地少于约1％的源自宿主细胞的非VII因子的蛋白。利用XIIa因子或其他具有胰蛋白酶样特异性的蛋白酶(例如IXa因子、激肽释放酶、Xa因子、和凝血酶)，通过蛋白酶裂解可以激活VII因子和VII因子相关多肽。见，例如Osterudetal.，Biochem.112853(1972)；Thomas的美国专利No.4,456,591和Hedneretal.，J.Clin.Invest.711836(1983)。或者，通过使其通过离子交换色谱柱例如MonoQ(Pharmacia)等可以激活VII因子。然后可以如下所述配制并施用所形成的活化VII因子。本发明使用的药物组合物或制剂包括与可药用载体组合的(优选地溶解于其中的)VIIa因子制备物，可药用载体优选地是水性载体或稀释剂。可以使用多种水性载体，例如水、缓冲水、0.4％盐水、0.3％甘氨酸等。本发明的制备物也可以被配制成用于被递送到或靶向于损伤位点的脂质体制剂。在例如美国专利Nos.4,837,028、4,501,728、和4,975,282中广泛地描述了脂质体制剂。用传统的、熟知的灭菌技术可以对组合物灭菌。所形成的水性溶液可以被包装使用，或者在无菌条件下将其过滤并冻干，在施用之前将冻干制剂与无菌的水溶液合并。本发明组合物可以含有可药用的辅助物质或辅剂，其包括但不限于pH调节剂和缓冲剂、和/或张力调节剂，例如乙酸钠、乳酸钠、氯化钠、氯化钾、氯化钙等。治疗方案在实践本发明中，可以以包括能预防出血进展和/或水肿形成和/或用于治疗并发症的单剂有效量的单次剂量或一起包括能预防或治疗并发症的有效量的分阶段系列剂量给患者施用VIIa因子或VIIa因子等效物。VIIa因子或VIIa因子等效物的有效量(见下)指的是当以单次剂量或以多次剂量累计施用、或者作为任何其他类型的限定治疗方案的一部分施用时，能造成结果的可测量的统计学改善的VIIa因子或VIIa因子等效物的量，如用与ICH和/或其并发症相关的至少一种临床参数(见下)所证实的那样。当施用VIIa因子等效物时，通过比较VIIa因子等效物与VIIa因子的凝血活性并与VIIa因子的预定的有效剂量成比例地调整有待施用的量，可以确定出VIIa因子等效物的有效量。优选地在发生ICH后约4个小时内开始根据本发明施用VIIa因子或VIIa因子等效物，例如在约3个小时内、约2个小时内、或约1个小时内。单次剂量给药指的是在小于约5分钟的时间内缓慢推注全部剂量的VIIa因子或VIIa因子等效物的给药。在一些实施方式中，在小于约2.5分钟的时间内给药，以及在一些实施方式中，小于约1分钟内。单剂有效量通常包括至少约40μg/kg人VIIa因子或相应量的VIIa因子等效物，例如至少约50μg/kg、75μg/kg、或90μg/kg、或者至少160μg/kgVIIa因子。要明白，VIIa因子或VIIa因子等效物的有效量以及总剂量方案根据患者的止血状态可以有所不同，而后者又可反映在一种或多种临床参数上，包括例如循环凝血因子的相对水平、失血量、出血速度、红细胞压积等。还要明白，本领域普通技术人员通过常规试验、通过构建数值矩阵以及测定矩阵中的不同点可以确定出有效量。例如，在一系列实施方式中，本发明包括(i)施用第一个剂量的VIIa因子或VIIa因子等效物；(ii)在预定时间之后，评价患者的凝血状态；以及(iii)根据评价，如果需要，施用另一个剂量的VIIa因子或VIIa因子等效物。可以重复步骤(ii)和(iii)，直到获得满意的止血。根据本发明，可以通过任一有效的途径施用VIIa因子或VIIa因子等效物，途径包括但不限于静脉内、肌肉内、皮下、粘膜、和肺部给药途径。优选地，施用是经静脉内途径。联合治疗本发明包括联合施用VIIa因子或VIIa因子等效物和其他的药物。在一些实施方式中，其他的药物包括凝血剂，包括但不限于凝血因子，例如VIII因子、IX因子、V因子、XI因子、或XIII因子；或纤溶系统的抑制剂，例如PAI-1、抑肽酶、ε-氨基己酸或氨甲环酸。要明白，在包括施用VIIa因子和其他药物组合的实施方式中，VIIa因子或VIIa因子等效物的剂量可以独立地包括有效量，而其他药物可以进一步增强患者的治疗获益。或者，VIIa因子或等效物与第二种药物的组合可以一起包括预防ICH相关并发症的有效量。也要明白，可在特定治疗方案的背景中限定有效量，所述方案包括例如给药的时机和次数、给药方式、制剂等。治疗结果本发明提供了预防或减轻ICH后的出血进展和/或水肿形成，以及预防和/或减轻ICH的一种或多种并发症的方法和组合物。并发症包括但不限于大脑水肿、生活质量的下降包括这些综合征中一种或多种引起的死亡。在实践本发明中，利用传统方法例如CT或MR扫描显像或在此所述的临床评价评分(Scores)可以评价ICH及其并发症的严重度。可以在距本发明治疗开始至少约15天进行评价，例如开始治疗起至少约30天、至少约40天，或至少约90天。器官损伤或器官衰竭包括但不限于器官结构的损伤和/或器官机能的损伤，所述器官是脑，其被定义为但不限于大脑、小脑、桥脑、延髓、脑干、脊髓或周围组织。器官损伤的实例包括但不限于形态学/结构的损伤和/或器官机能的损伤，例如过多的液体或蛋白的蓄积。术语“器官损害”、“器官损伤”和“器官衰竭”可以互换使用。通常，器官损伤可以造成器官衰竭。器官衰竭指的是与正常的、健康的人体中的相应器官的平均的、正常的机能相比较，器官功能有所减低。器官衰竭可以是功能的较小减低(例如80-90％正常功能)或者它可以是功能的较大减低(例如10-20％正常功能)；减低也可以是器官功能的完全衰竭。器官衰竭包括但不限于例如由于组织坏死、纤维蛋白沉积、出血、水肿、或炎症和/或应答这些衰竭所发生的并发症如脑疝所造成的生物学机能的减低。器官损伤包括但不限于组织坏死、纤维蛋白沉积、出血、水肿、或炎症。用于测试器官功能和效率的方法、以及用于这些测试的合适的生化或临床参数对于熟练的临床医生都是熟知的。器官功能的这些标记物或生化参数是例如脑灌注测定脑血流量；脑代谢测定大脑氧提取或直接测定大脑的氧代谢率(例如，经MRS、PET或SPECT扫描)。也包括测定不同于氧的其他底物例如葡萄糖。脑完整性MRI(任何的和所有的标准化方案顺序)、CT、CTA、MRA。EEG所测定的脑细胞电功能；已建立的神经学测试法(例如微量渗析、经颅多普勒)所测定的脑功能。用于测试凝血病和炎症的方法对于熟练临床医生也是熟知的。凝血病状态的这些标记物是例如PTT、纤维蛋白原耗竭、TAT复合物增高、ATIII活性、IL-6、IL-8、或TNFR-1。本发明上下文中预防包括但不限于减轻、消除、最小化、缓解或改善与ICH和/或其并发症相关的一种或多种症状或病况，包括但不限于，预防已经遭受一定程度的器官衰竭和/或损伤的受累器官遭受进一步的损伤和/或衰竭，以及预防尚未遭受器官衰竭和/或损伤的其它器官遭受损伤和/或衰竭。这些症状或病况的实例包括但不限于形态学/结构损伤和/或器官机能的损伤，器官例如但不限于脑和周围器官。这些症状或病况的实例包括但不限于形态学/结构损伤和/或器官机能的损伤，例如由于血肿的肿块效应或者所产生的周围组织的炎症反应、组织坏死、纤维蛋白沉积、出血、水肿、或炎症所造成的蛋白或液体的蓄积。器官衰竭或损伤的减轻包括如通过将所述器官功能的至少一种熟知标记物(见下)与在没有根据本发明治疗的ICH患者中所见的相应数值相比所测定出的器官功能的任何改善。在各种实施方式中，与没有经本发明的VIIa因子或VIIa因子等效物治疗过的患者中的血肿进展相比较，血肿进展减少了至少5％、例如10％、20％、30％、40％、50％、60％、或至少70％。在各种实施方式中，与没有经本发明的VIIa因子或VIIa因子等效物治疗过的患者中的水肿形成相比较，水肿形成减少了至少5％、例如10％、20％、30％、40％、50％、60％、或至少70％。在其他实施方式中，与没有经本发明的VIIa因子或VIIa因子等效物治疗过的患者中的总出血体积相比较，总出血体积(ICH+IVH)减少了至少5％、例如10％、20％、30％、40％、50％、60％、或至少70％。ICH严重度和/或并发症的衡量下面是用于评价ICH并发症的发生率和严重度的方法的非限定性实例。通过使用附录的工具或其等同物(附录1，见下)确定出Glasgow昏迷评分(GCS；Teasdale和Jennett，TheLancet13；2(7872)81-84，1974)。通过使用附录的工具或其等同物(附录2，见下)确定出修正Rankin量表(mRS；Bonita和Beaglehole，Stroke1988Dec；19(12)1497-1500)。通过使用附录的工具或其等同物(附录3，见下)确定出Barthel指数(BI；Mahoney和Barthel，MarylandStateMedicalJournal1965；1456-61)。通过使用附录的工具或其等同物(附录4，见下)确定出NIH卒中量表(NIHSS；Brottetal.，1989)。通过使用附录的工具或其等同物(附录5，见下)确定出Glasgow结果量表扩充版(GOSe，Lindsayetal.，JournalofNeurotrauma；15(8)573-580，1998)。在TheInternetStrokeCenterWashington，UniversitySchoolofMedicine，DepartmentofNeurology(www.strokecenter.org)可以找到关于包括上面所提及的五种熟知工具的量表和评价工具的信息。其他的治疗指数利用其他的临床参数也可以评价本发明的方法的疗效，包括但不限于与没有被施用本发明的VIIa因子或VIIa因子等效物的相似患者相比较，下面参数中任何一种或多种的降低如上所述的NIHSS、mRS、E-GOS、GCS或BI量表所测定的神经学结果的改善；患ICH后的住院天数的减少，包括患者在重症监护病房(ICU)的住院天数的减少以及需要特定干预(例如呼吸机)的天数的减少。非限定性的结果实例包括(i)NIHSS评分提高至少1、2、4、8、10、或20分；(ii)mRS量表提高至少1、2、3、或4分；(iii)BI量表提高至少5、10、15、20或30分；(iv)8项GOS提高至少1、2、3、5、或7分；(v)ICU天数减少1天、2天、或4天；(vi)使用呼吸机天数减少1天、2天、或4天；(vii)总住院天数减少2天、4天、或8天。本发明的多种实施方式本发明包括VIIa因子或VIIa因子等效物用于生产预防或减轻ICH后的出血进展和/或水肿形成以及预防或减轻ICH的一种或多种并发症的药物的用途。并发症的非限定性实例包括ICH后的大脑水肿和差的神经学结果、以及死亡。在一些实施方式中，患者患有自发性ICH，以及在一些实施方式中，患者患有外伤性ICH。在一些实施方式中，药物包括至少约160μg/kgVIIa因子或相应量的VIIa因子等效物。在一些实施方式中，药物以含有至少约160μg/kg的首次剂量施用。在另一个方面，本发明包括VIIa因子或VIIa因子等效物用于生产减少ICH患者在症状发作或损伤发作后的住院天数的药物的用途。在一些实施方式中，药物被用于减少ICH患者在损伤或症状发作后在重症监护病房(ICU)的住院天数。在另一个方面，本发明包括VIIa因子或VIIa因子等效物用于生产改善ICH患者的脑功能的药物的用途。在一些实施方式中，药物被用于减轻ICH患者的脑水肿的量以及与这些水肿相关的进一步神经学恶化的相关危险。在一些实施方式中，药物被用于降低脑损伤的进展危险。在另一个方面，本发明包括VIIa因子或VIIa因子等效物用于生产降低ICH患者的死亡危险的药物的用途。在一些实施方式中，药物还包括能增强VIIa因子或VIIa因子等效物的所述预防或减轻作用的量的第二种凝血剂。在一些实施方式中，第二种凝血剂选自由凝血因子和抗纤溶剂组成的组。凝血因子的非限定性实例包括VIII因子、IX因子、V因子、XI因子、XIII因子、和前述因子的任何组合；而抗纤溶剂的非限定性实例包括PAI-1、抑肽酶、ε-氨基己酸、和氨甲环酸。在另一个方面，本发明提供了预防或减轻ICH后的出血进展和/或水肿形成以及预防或减轻ICH的一种或多种并发症的组件的试剂盒，其包括(i)包括VIIa因子或VIIa因子等效物的药物；和(ii)使用说明书，其描述了a.在开始治疗时，应当施用含有至少约50、优选地至少约160μg/kgVIIa因子或相应量的VIIa因子等效物的首次剂量；b.可能需要第二剂量，应当在开始治疗后1个小时施用40、80、或160μg/kg量的VIIa因子或相应量的VIIa因子等效物。在另一个方面，本发明提供了用于预防或减轻ICH后出血进展和/或水肿形成以及预防或减轻ICH的一种或多种并发症的方法，该方法包括给需要所述预防或减轻作用的患者施用能实现预防或减轻作用的有效量的VIIa因子或VIIa因子等效物。并发症的非限定性实例包括脑死亡、脑疝、继发于脑疝的呼吸异常以及任何其它继发于脑功能不全的相关并发症。在一些实施方式中，患者患有自发性ICH，以及在其他实施方式中，患者患有外伤性ICH。在一些实施方式中，有效量包括至少约40μg/kgVIIa因子或相应量的VIIa因子等效物。在一些实施方式中，在开始治疗时，施用至少约160μg/kgVIIa因子或相应量的VIIa因子等效物的首次量，以及在开始治疗后1个小时，给患者施用约40、80、或160μg/kgVIIa因子或相应量的VIIa因子等效物的第二个量。在一些实施方式中，该方法还包括给患者施用能增强VIIa因子或VIIa因子等效物的预防或减轻作用的量的第二种凝血剂。在一些实施方式中，第二种凝血剂是凝血因子或抗纤溶剂。凝血因子的非限定性实例包括VIII因子、IX因子、V因子、XI因子、XIII因子、和前述因子的任何组合；以及抗纤溶剂的非限定性实例包括PAI-1、抑肽酶、ε-氨基己酸、和氨甲环酸。在另一个方面，本发明提供了用于减少ICH患者在自发性ICH或外伤性ICH后的住院天数的方法，通过给患者施用能减少天数的有效量的VIIa因子或VIIa因子等效物实现该方法。在另一个方面，本发明提供了用于减少ICH患者在损伤或症状发作后在重症监护病房(ICU)的住院天数的方法，通过给患者施用能减少天数的有效量的VIIa因子或VIIa因子等效物实现该方法。在另一个方面，本发明提供了用于改善ICH患者的脑功能的方法，通过给患者施用能改善功能的有效量的VIIa因子或VIIa因子等效物实现该方法。在另一个方面，本发明提供了用于降低发生脑功能不全的并发症的危险的方法，所述并发症包括但不限于ICH患者的脑疝、脑梗死，通过给患者施用能降低危险的有效量的VIIa因子或VIIa因子等效物实现该方法。在一些实施方式中，本发明提供了用于降低脑损伤向脑死亡进展的危险的方法。在另一个方面，本发明提供了用于降低ICH患者的死亡危险的方法，通过给患者施用能降低危险的有效量的VIIa因子或VIIa因子等效物实现该方法。在另一个方面，本发明提供了用于预防或减轻ICH后的出血进展和/或水肿形成的方法，为了预防或减轻出血进展和/或水肿形成的目的，通过给需要预防或减轻作用的患者有意识地施用预防或减轻有效量的VIIa因子或VIIa因子等效物实现该方法。在另一个方面，本发明提供了用于预防或减轻大多数自发性ICH或外伤性ICH患者在ICH后的出血进展和/或水肿形成的方法，通过(i)给一组ICH患者施用预防或减轻有效量的VIIa因子或VIIa因子等效物；和(ii)观察到患者组中的一种或多种ICH并发症的发生频率比在未接受VIIa因子或VIIa因子等效物的相同患者组中预期的并发症的发生频率有所减低来实现该方法。下面的实施例用作本发明的不受限的举例说明。实施例一般方法测量方法利用带有ROI(兴趣区)模块的AnalyzeTM软件(BiomedicalImagingResourceattheMayoFoundation)，通过计算机断层扫描(CT扫描)测量血肿、脑室内出血(IVH)和水肿的体积(mm3)。利用计算机显像系统，研究中心的不了解治疗分组的神经放射学家通过描绘每个受累横断面的图像(“切片”)中的适当的高或低衰减区的周长计算出血肿、脑室内出血(IVH)和水肿的体积(mm3)。利用AnalyzeTM软件中的兴趣区(ROI)模块进行所有的测定。评审者用半自动分层工具和/或手绘工具确定出每个靶区域。每个确定区都是可编辑的，这将有助于评审者仅仅包括相关的区域，其被表示为图像中的ROI(见图1a和1b)。该方法对于评审者确定为必需的每个切片以及每个分开的靶区域进行复制。一旦评审者已经确定出所有区域，可以用AnalyzeTM软件计算出每个ROI的统计数据。这包括ROI的面积(单位为mm2)以及ROI的体积(单位为mm3)。通过用面积乘以所采集切片的厚度可以计算出ROI的体积。因为一个目标可以包括一个以上的切片，在“StatLogRegionofInterest”窗中显示了每个切片的ROI体积。将该窗口中的这个信息储存为ASCII文件，并直接输入到BlindRead数据库内。一旦已经往BlindRead数据库内输入了所有的体积，评审者所确定出的区域被储存为目标图并保存。目标图仅仅是体积和确定区域/结构的拷贝。评审者用AnalyzeTM软件的兴趣区(ROI)模块测定出下面的参数-ICH的体积-脑室内出血(IVH)的体积-血肿旁水肿的总体积根据上面的测定值，可以计算出下面的内容-从筛选到24小时CT扫描时ICH体积的变化，用mm3和百分比表示计算为变化百分比＝[(24小时时的ICH体积-筛选时的ICH体积)/筛选时的ICH体积]100。计算为mm3变化＝24小时时的ICH体积-筛选时的ICH体积。●每次CT扫描时的水肿/ICH体积的比值比值＝水肿体积/ICH体积●每次CT扫描时的总出血计算为总出血＝ICH+IVH下面的计算被用于利用多切片厚度技术所显示的CT扫描中。(经后颅窝所用的较小切片厚度，过渡到经头顶的较大切片厚度。)1＝较小切片厚度的采集值2＝较大切片厚度的采集值计算为切片厚度(mm)/切片间距(mm)＝X/[表位置1(mm)+1/2切片间距1(mm)]-[表位置2(mm)-1/2切片间距2(mm)]缺口/重叠的体积(mm3)＝X(1中的最终切片的面积(mm2))操作实施例实施例1施用给ICH患者的VIIa因子的疗效目的为了评价NovoSeven在预防急性大脑内出血(ICH)的早期血肿进展方面的疗效和安全性。打算在损伤或症状发作后尽可能早地施用治疗，但是因为转运和/或缓和医疗情况的原因，治疗可以被推迟。时机应当是在损伤或症状出现后的小时级，而不是天级。试验设计该试验是随机、双盲、多中心、多国家、安慰剂对照的疗效和安全性试验，分成了四个治疗组40、80和160μg/kg剂量对安慰剂。试验人群研究对象的数目400例ICH患者。入选标准1.在发作3个小时内，经CT扫描诊断的自发性ICH(包括脑干和小脑)；2.男性或女性对象，年龄≥18岁；3.签署知情同意书，或者在IRB/IEC允许放弃知情同意书的国家，签署完整的放弃书。排除标准1.发生ICH症状的时间不清或＞3小时2.与梗死、肿瘤、出血性梗死、大脑静脉血栓形成、动脉瘤、动静脉畸形(AVM)、溶栓或严重外伤相关的继发性ICH的患者；3.在发作后24个小时内计划或进行外科血肿清除；4.入院时为深昏迷(GCS3-5)；5.已知应用口服抗凝剂(除非证实INR小于1.4)。应用阿司匹林不是排除标准。6.已知的血小板减少症(除非证实血小板大于50,000/μL)；7.已有残疾(即在卒中前必须具有mRS评分0-2)；8.任何血友病或其他凝血病的病史；9.急性心肌缺血、急性败血症、急性挤压伤、急性出血性弥漫性血管内凝血、或急性血栓性卒中；10.妊娠；11.在最近30天内的心绞痛、心肌梗塞、缺血性卒中、先前的血管疾病造成的肢体截肢、或坏疽的病史；12.已知的或可疑的对试验产品或相关产品的过敏；13.先前参与过本试验；14.在进入到本试验30天内参与了任何的研究药物或设备试验；评价疗效终点●主要疗效终点是如CT头部扫描测定出的从给药前到基线扫描后24小时ICH体积的变化。●次要疗效终点是组间在试验持续时间内在修正Rankin量表(mRS)、Barthel指数(BI)、Glasgow昏迷量表(GCS)、8项Glasgow结果量表(GOS)、EuroQOL量表、和美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)上的差异。安全性终点●到出院为止的不良事件以及到完成试验结束表为止的严重不良事件的发生率；●从给药前到给药后1小时的安全性实验室凝血参数(纤维蛋白原和1+2片段)；●在给药后72小时，用头部CT扫描所评价的脑水肿(水肿/ICH体积比值)的恶化。试验产品丹麦的NovoNordiskA/S提供活化重组人VII因子(rFVIIa/NovoSeven)和安慰剂，其为冻干粉末，注射前用水重配。实施例2给ICH患者施用VIIa因子在除去1例撤回知情同意书的患者之后，ITT人群包括399例患者。ICH血肿进展(ITT)基线到24小时的变化％CT体积的变化基线到24小时的变化％(也图解于图1中)ICH大脑内出血IVH脑室内出血总出血＝ICH+IVH实施例3给ICH患者施用VIIa因子对ITT人群在基线后72小时的水肿体积的次要疗效、出血终点分析用广义线性混合模型分析体积的变化，其中患者和阅读者作为随机效应协变量，而基线体积、从卒中到基线CT的时间、以及基线CT到给药的时间作为固定效应协变量。对ITT人群在基线后72小时的总水肿体积(ICH+IVH+水肿)的次要疗效、出血终点分析。用广义线性混合模型分析体积的变化，其中患者和阅读者作为随机效应协变量，而基线体积、从卒中到基线CT的时间、以及基线CT到给药的时间作为固定效应协变量。实施例4给ICH患者施用VIIa因子没有发生水肿的患者(水肿体积＝0)-基线到72小时的变化通过引用将在此所述的所有专利、专利申请、和参考文献的全部内容并入本申请。了解了上面详尽描述的本领域熟练人员知道本发明的多种变异。这些明显的变异是在附属权利要求书的全部的预期范围之内。附录附录1Glasgow昏迷评分(GOS)附录2修正Rankin量表(mRS)附录3Barthel指数(BI)附录4NIH卒中量表(NIHSS)附录5Glasgow结果量表扩展版(GOSe或E-GOS)参考文献TeasdaleG，JennettB.“Assessmentofcomaandimpairedconsciousness.Apracticalscale.”TheLancet13；2(7872)81-4，1974由InternetStrokeCenter提供-www.strokecenter.org.总分(0-6)参考文献RankinJ.“Cerebralvascularaccidentsinpatientsovertheageof60.”ScottMedJ1957；2200-15BonitaR，BeagleholeR.“ModificationofRankinScaleRecoveryofmotorfunctionafterstroke.”Stroke1988Dec；19(12)1497-1500VanSwietenJC，KoudstaalPJ，VisserMC，SchoutenHJ，vanGijnJ.“Interobserveragreementfortheassessmentofhandicapinstrokepatients.”Stroke1988；19(5)604-7由InternetStrokeCenter提供-www.strokecenter.org.由InternetStrokeCenter提供-www.strokecenter.org.BarthelADL指数使用指南1.该指数是记录病人做了什么，而不是记录他们能做什么。2.主要目标是评估病人对外界帮助(体力或言语)的依赖程度，不管程度如何，也不管为什么需要帮助。3.如果病人需要人监督则表明他并不独立。4.病人的表现要用能获得的最好的证据来评估。询问病人、亲戚朋友和护士是常用的信息来源，但是观察病人及一般状况的评估也很重要。但不需要直接测试病人。5.通常在评价前24-48小时内病人的表现最重要，但有时需要更长的时间。6.评分中中间那档意味着病人自已完成了50％以上该项活动。7.使用辅助器具可以被评价为“独立完成”。参考文献MahoneyFI，BarthelD.“FunctionalevaluationtheBarthelIndex.”MarylandStateMedicalJournal1965；1456-61.Usedwithpermission.LoewenSC，AndersonBA.“Predictorsofstrokeoutcomeusingobjectivemeasurementscales.”Stroke.1990；2178-81.GreshamGE，PhillipsTF，LabiML.“ADLstatusinstrokerelativemeritsofthreestandardindexs.”ArchPhysMedRehabil.1980；61355-358CollinC，WadeDT，DaviesS，HorneV.“TheBarthelADLIndexareliabilitystudy.”IntDisablilityStudy.1988；1061-63.版权信息马里兰州医学会拥有Barthel指数的版权。下述文献可以免费用于非商业目的MahoneyFI，BarthelD.“FunctionalevaluationtheBarthelIndex.”MarylandStateMedicalJournal1965；1456-61.Usedwithpermission.若需修改Barthel指数或者用于商业目的需要征得同意。由InternetStrokeCenter提供-www.strokecenter.org.时间间隔1[]基线2[]治疗后2小时3[]症状出现后24小时±20分钟4[]7-10天5[]3个月6[]其它()时间:1[]am2[]pm按下表的顺序完成卒中量表项目。对病人进行每项测试，并记录病人的得分，不要返回并修改评分。遵循所提供的每个检查技术的指导。评分应当反映病人做了什么，而不是医生认为病人能够做什么。医生在进行测试时要迅速记录答案。除非有要求，否则不能训练病人(例如反复要求病人完成一项特殊的活动)。如果有任何测试没有完成，医生需要在表上写明详细的解释。所有未完成的项目都将由监督员查阅，并通过电话与检测者讨论。说明等级定义分值时间间隔1[]基线2[]治疗后2小时3[]症状出现后24小时±20分钟4[]7-10天5[]3个月6[]其它()时间间隔1[]基线2[]治疗后2小时3[]症状出现后24小时±20分钟4[]7-10天5[]3个月6[]其它()时间间隔1[]基线2[]治疗后2小时3[]症状出现后24小时±20分钟4[]7-10天5[]3个月6[]其它()附加项目，不是NIH卒中量表的一部分12.()实施量表者编码Youknowhow.Downtoearth.Igothomefromwork.Nearthetableinthediningroom.Theyheardhimspeakontheradiolastnight.MAMATIP-TOPFIFTY-FIFTYTHANKSHUCKLEBERRYBASEBALLPLAYER如下确定出8项GOS(扩展型Glasgow结果量表；e-GOS)评分患者的总体评分基于以下等级所示的最低的结果分类1.死亡2.植物状态3.较低严重残疾(较低SD)4.较高严重残疾(较高SD)5.较低中度残疾(较低MD)6.较高中度残疾(较高MD)7.良好复健(较低GR)8.较高良好复健(较高GR)权利要求1.一种用于预防或减轻大脑内出血(ICH)的一种或多种并发症的方法，所述方法包括给有此需要的患者施用有效量的包括VIIa因子或VIIa因子等效物的第一种凝血剂。2.权利要求1的方法，其中所述患者经历自发性或外伤性ICH。3.权利要求1的方法，其中所述有效量包括至少约40μg/kg所述VIIa因子或VIIa因子等效物。4.权利要求3的方法，其中所述有效量包括至少约80μg/kg所述VIIa因子或VIIa因子等效物。5.权利要求4的方法，其中所述有效量包括至少约120μg/kg所述VIIa因子或VIIa因子等效物。6.权利要求1的方法，其中在发生ICH约24小时内实施所述施用。7.权利要求6的方法，其中在发生ICH约4小时内实施所述施用。8.权利要求1的方法，还包括给患者施用第二种凝血剂，其中所述第一种和第二种凝血剂的量一起能有效地实现所述预防或减轻作用。9.权利要求8的方法，其中第二种凝血剂是凝血因子。10.权利要求9的方法，其中所述第二种凝血剂选自由VIII因子、IX因子、V因子、XI因子、XIII因子、VII因子或不同于第一种凝血剂的VIIa因子、以及任何前述试剂的组合组成的组。11.权利要求8的方法，其中所述第二种凝血剂是抗纤溶剂。12.权利要求11的方法，其中所述抗纤溶剂选自由PAI-1、抑肽酶、ε-氨基己酸、氨甲环酸、和任何前述试剂的组合组成的组。13.权利要求1的方法，其中所述施用造成一种或多种下面的情况ICH患者在ICH后的住院天数的减少以及ICH患者的死亡危险的降低。14.一种用于预防或减轻大多数ICH患者的一种或多种ICH并发症的方法，通过(i)给一组ICH患者施用能有效实现预防或减轻作用的量的VIIa因子或VIIa因子等效物；和(ii)观察到接受了VIIa因子或VIIa因子等效物的患者组中ICH的一种或多种并发症的发生频率相对于没有接受所述VIIa因子或VIIa因子等效物的相同患者组中所预期的所述并发症的发生频率有所降低来实施所述方法。15.包括VIIa因子或VIIa因子等效物的第一种凝血剂用于生产预防或减轻患者的大脑内出血(ICH)的一种或多种并发症的药物的用途。16.权利要求15的用途，其中所述患者经历自发性或外伤性ICH。17.权利要求15到16中任一项的用途，其中所施用的VIIa因子或VIIa因子等效物的量包括至少约40μg/kg。18.权利要求17的用途，其中所施用的VIIa因子或VIIa因子等效物的量包括至少约80μg/kg。19.权利要求18的用途，其中所施用的VIIa因子或VIIa因子等效物的量包括至少约120μg/kg。20.权利要求15到19中任一项的用途，其中在发生ICH约24小时内实施VIIa因子或VIIa因子等效物的施用。21.权利要求20的用途，其中在发生ICH约4小时内实施所述施用。22.权利要求15到21中任一项的用途，其中所述药物还包括第二种凝血剂，其中所述第一种和第二种凝血剂的量一起能有效地实现所述预防或减轻作用。23.权利要求22的用途，其中第二种凝血剂是凝血因子。24.权利要求23的用途，其中所述第二种凝血剂选自由VIII因子、IX因子、V因子、XI因子、XIII因子、VII因子或不同于第一种凝血剂的VIIa因子、以及任何前述试剂的组合组成的组。25.权利要求22的用途，其中所述第二种凝血剂是抗纤溶剂。26.权利要求25的用途，其中所述抗纤溶剂选自由PAI-1、抑肽酶、ε-氨基己酸、氨甲环酸、和任何前述试剂的组合组成的组。27.权利要求15到26中任一项的用途，其中所述预防或减轻作用造成一种或多种下面的情况ICH患者在ICH后的住院天数的减少以及ICH患者的死亡危险的降低。全文摘要本发明涉及VIIa因子或VIIa因子等效物用于生产预防ICH患者的并发症的药物的用途。文档编号A61K38/48GK1988916SQ200580025056公开日2007年6月27日申请日期2005年6月21日优先权日2004年6月21日发明者N·C·布龙,E·埃哈特森,B·E·斯科尼克申请人:诺和诺德医疗保健公司