专利名称：一种眼表生物膜及其制作方法
技术领域：
本发明涉及一种用于眼科护理及治疗用眼表敷料，属三类医疗器械，具体 为一种眼表生物膜及其制作方法。
背景技术：
眼睛的角膜及结膜损伤、炎症的治疗及护理，角膜移植后的护理均需用到 眼表敷料。传统的眼表敷料是一般的消毒纱布，不能与眼睛表面密切接触，只 能起到简单的遮盖作用。近年来，科学家开发了一种以人胎盘羊膜为原料的组 织膜作眼表敷料，可直接贴于眼睛表面，对促进损伤及炎症愈合具有较好作用。 胎盘羊膜所用的固定方法是用传统的戊二醛处理的，戊二醛固定会有残留毒性，
直接会影响愈合效果。且只用10~15KGy的，射线辐照灭活，又无专门设计的 除抗原处理，对可能存在的病毒的杀灭也不够严格，令人担心病毒传播。另外， 人胎盘羊膜来源非常有限，不能广泛的推广应用。
发明内容
本发明的目的是针对以上所述眼表敷料存在的不足，提供一种具有与眼球 相适应的曲面及与人的角膜、结膜组成相近的眼表生物膜及其制作方法。 一种眼表生物膜，为具有与眼球相似曲面的动物膜。 所述的生物膜曲面内设置有药物缓释层。
本发明是这样实现的， 一种眼表生物膜，通过以下步骤制作成
(1) 选材取动物膜材料；
(2) 预处理修剪除去多余的组织、纤维或绒毛等；(3) 脱脂处理用有机溶剂抽取其中的脂肪杂质；
(4) 脱细胞在胶原保护剂的作用下用表面活性剂或者蛋白酶分解细胞；
(5) 多方位除抗原处理用一些活泼亲核试剂与胶原蛋白中处于某种特异 位置的、引起免疫排异反应的活性基团相结合，将其封闭，以及应用强氢键形 成剂破坏引起抗原性的特异构象；
(6) 固定用环氧化物对膜材中的胶原进行交联固定，以提高其稳定性；
(7) 曲面成型用球面模具使膜材成型为与眼球相对应曲面；
(8) 表面修饰；
(9) 包装；
(10) 灭菌灭病毒Y-射线辐照灭菌；
(11) 成品。
所取的动物膜材包括猪、牛、羊等动物的心包膜、肠膜、脂网膜、胎盘羊
膜；
所述的预处理是修剪除去多余的组织、纤维或绒毛等；
所述的脱脂处理是用有机溶剂抽取其中的脂肪杂质，有机溶剂可以是乙酸
酯类、氯仿、四氯化碳、乙醚、丙酮、无水乙醇；
所述的脱细胞是用表面活性剂洗脱法和在胶原保护剂的存在下酶解法，两 者单独应用或两者同时应用来实现；表面活性剂是乙二胺四乙酸、苯甲基氟磺 酸、聚乙二醇辛基苯基醚(Tritonx100)、三羟甲基氨基甲烷(Tris),酶解法
所用的酶是蛋白酶，可以是胰蛋白酶和胃蛋白酶等。
所述的多方位除抗原处理，是用一些活泼亲核试剂与胶原蛋白中处于某种 特异位置的、引起免疫排异反应的活性基团相结合，将其封闭，以及应用强氢
键形成剂破坏引起抗原性的特异构象；这里所述的活性基团主要是-OH*， -NH/，
-Sf等；可应用的活泼亲核试剂有酸酐、酰胺、环氧化物等；可应用的强氢键
形成剂有胍类化合物。
所述的环氧固定处理是指用环氧化物对膜材中的胶原蛋白进行交联固定，
R—CH—CH,
以提高其稳定性。所用的环氧化物可以是碳链环氧化物 /，其中
CH2—CH——(CH2)n—
R=CnH2n+1- ，^ ， n=o， 1 10， 也可以是碳氧链环氧化物
R—O—(CHR'—CH—0)x—Qi—% CH2—CH—
Y ，其中R=CnH2n+1—、 V ， R， 二H、 CH3—(C2H5)n—, n二0、 1、 2、…n， x二0、 1、 2、…x。与传统的戊二醛固定法相比，环氧固定的 交联键稳定，降解时不会释放有毒的醛类，无残留毒性。
所述的成型是用球面模具使膜材成型为与眼球相对应曲面。
此外，本产品还可根据治疗需要，在成型后可增加缓释治疗药物的表面修 饰，方法是用缓释包裹材料将治疗药物包裹到产品上；或增加润滑性的修饰， 方法是将透明质酸引入本生物膜；或可进行增加透气性的表面修饰，方法是用 多向拉伸定型法使膜中微孔适当扩大。
最后将产品用双层塑料袋包装，再用足够剂量(如〉30KGy)的，射线辐照 灭菌，以杀灭可能存在的外源性或动物源性病毒及病菌。
本发明提供一种以动物膜材为原料，用环氧化物代替戊二醛进行固定，应 用多方位除抗原技术除抗原，用25KGy ，射线辐射的经典灭菌法对可能潜在的 病毒进行有效灭活，再经成型制得的具有一定曲率半径的球面生物膜。本发明 具有与眼球相似的曲面，能紧贴眼球；无抗原性，组织相容性好，可参与眼表 创伤的愈合过程，有利于创伤愈合；同时具有良好的透气性和细菌滤除性，可对眼表起良好保护治疗作用；具有较好强度，可贴可缝，使用方便；另外通过 药物缓释的表面修饰，还可制成可缓释抗感染药物的治疗型眼表生物膜。
图1为本犮明一种眼表生物膜的结构示意图； 图2为本发明一种眼表生物膜带药物缓释层的结构示意图。
具体实施例方式
以下结合具体实施方式
对本发明进行详细的说明。
一种眼表生物膜，如图1所示，是具有与眼球相似曲面的动物膜，可直接 贴于眼睛表面，用于眼睛的角膜及结膜损伤、炎症的治疗及护理，以及角膜移 植后的护理。根据治疗的需要，动物膜曲面内通过表面修饰设置有缓释治疗药 物的药物缓释层2，如图2所示。药物缓释层2为用缓释包裹材料将治疗药物 包裹到动物膜上。另外，动物膜可以引入透明质酸，以增加润滑性；或通过多 向拉伸定型法使微孔适当扩大，以增加透气性。
本发明的一种眼表生物膜其具有与眼球相似的曲面，能紧贴眼球，它无抗 原性，组织相容性好，可参与眼表创伤的愈合过程，有利于创伤愈合；具有良 好的透气性和细菌滤除性，可对眼表起良好保护治疗作用；具有较好强度，可 贴可缝，使用方便。另外通过药物缓释的表面修饰，还可制成可缓释抗感染药 物的治疗型眼表生物膜。
本发明的一种眼表生物膜，通过以下步骤制作成
(1)取动物膜材料可以选取的动物膜材包括猪、牛、羊等动物的 心包膜、肠膜、脂网膜、胎盘羊膜等；
(2)预处理修剪除去多余的组织、纤维或绒毛等杂质，以方便后续的处
理；
(3) 脱脂处理用有机溶剂抽取其中的脂肪杂质，抽取脂肪的有机溶剂可 以是无水乙醇、乙酸乙酯、丙酮、氯仿等；
(4) 脱细胞是用表面活性剂洗脱法和在胶原保护剂的存在下酶解法， 两者单独应用或两者同时应用来实现；表面活性剂是乙二胺四乙酸、苯甲基氟 磺酸、聚乙二醇辛基苯基醚(Tritonx100)、三羟甲基氨基甲垸(Tris)，酶解 法所用的酶是蛋白酶，可以是胰蛋白酶和胃蛋白酶等。
(5) 多方位除抗原处理用一些活泼亲核试剂与胶原蛋白中处于某种特异 位置的、引起免疫排异反应的活性基团相结合，将其封闭，以及应用强氢键形 成剂破坏引起抗原性的特异构象，这里所述的活性基团主要是-OH*, -NH2*，
等；亲核试剂可以是酸酐、酰胺、环氧化物等；强氢键形成剂可以是胍类化合 物。
(6) 固定用碳链环氧化物对膜材中的胶原蛋白进行交联固定，以提高其
<formula>formula see original document page 8</formula>稳定性；所用的环氧化物可以是碳链环氧化物 ，其中R《nH2^-，
<formula>formula see original document page 8</formula>
其中R<image>image see original document page 8</image>与传统的戊二醛固定法相比，环氧固定的交联键稳定，降解时不会释 放有毒的醛类，无残留毒性。
(7) 曲面成型用球面模具使膜材成型为与眼球相对应曲面；
(8) 表面修饰可以根据治疗需要，在成型后的动物膜增加缓释治疗药物 的表面修饰，可以是用缓释包裹材料将治疗药物包裹到动物膜上；也可以进行
增加润滑性的修饰，如将透明质酸引入膜体内；或可进行增加透气性的表面修 饰，通过多向拉伸定型法使膜中微孔适当扩大。
(9) 包装将产品用双层塑料袋包装；
(10) 灭菌灭病毒用足够剂量的Y-射线辐照灭菌，以杀灭可能存在的外 源性或动物源性病毒及病菌，所用Y-射线的剂量不少于30KGy;
(11) 成品。 实施例1
取新鲜猪心包或猪小肠膜，放入专用保鲜剂中浸泡灭菌保鲜，小心除去膜 上的杂质，沥干水分，放入无水乙醇、乙酸乙酯、丙酮、氯仿等有机溶剂中，
抽提6小时以上，以除去其中的脂肪杂质。再用蛋白酶酶解法脱除其中细胞， 蛋白酶可用胰蛋白酶、胃蛋白酶或两者混合。酶解温度为18-25°C，酶解时间2 小时以上。再用环氧化物交联固定，所用的环氧化物为R—eH\7eH2 。这里
CH2—CH——(CH2)n——
R=CnH2n+1-或V ， n=0， 1， 2， "n，洗净，沥干，再用丁酸酐或丁酰
氯封闭活性抗原基团，这里活性抗原基团主要是含有-0H， -NH2， -SH的特异活
性基团，以去除其抗原性。洗净，再用球状膜具压制成曲面并拉伸定型。包装，
Y-射线辐射灭菌即得产品。
权利要求
1、一种眼表生物膜的制作方法，其特征在于，以动物膜材料为原料，通过如下的制作步骤制成(1)取动物膜材料；(2)预处理修剪除去多余的组织、纤维或绒毛；(3)脱脂处理用有机溶剂抽取动物膜材料中的脂肪杂质；(4)脱细胞用表面活性剂或者蛋白酶分解细胞；(5)多方位除抗原处理应用多种试剂破坏或封闭抗原表位；(6)固定处理用对膜材中的胶原进行交联固定；(7)曲面成型用球面模具使动物膜材料成型具有与眼球相对应曲面；(8)表面修饰；(9)包装；(10)灭菌灭病毒；(11)成品。
2、 如权利要求1所述的一种眼表生物膜的制作方法，其特征在于所述的 动物膜材料是动物的心包膜、肠膜、脂网膜、胎羊膜。
3、 如权利要求1所述的一种眼表生物膜的制作方法，其特征在于所述脱 脂处理的有机溶剂是乙酸乙酯、乙酸丁酯、氯仿、四氯化碳、乙醚、丙酮、无 水乙醇。
4、 如权利要求1所述的一种眼表生物膜的制作方法，其特征在于所述的 脱细胞是用表面活性剂洗脱法和在胶原保护剂的存在下的酶解法，两者单独应 用或两者同时应用来实现；所述的表面活性剂是乙二胺四乙酸、苯甲基氟磺酸、聚乙二醇辛基苯基醚、三羟甲基氨基甲烷，所述的酶解法所用的酶是蛋白酶， 包括胰蛋白酶和胃蛋白酶。
5、 如权利要求1所述的一种眼表生物膜的制作方法，其特征在于所述的 除抗原的试剂是亲核试剂和强氢键形成剂，亲核试剂有酸酐，酰氯，酰胺，环 氧化物；强氢键形成剂有胍类化合物。
6、 如权利要求1所述的一种眼表生物膜的制作方法，其特征在于所述的固定处理是用的环氧化物对膜中的胶原进行交联固定，所述的环氧化物是碳链环氧化物 / ，其中R=CnH2n+1-、Y ， R， =H、 CH3—(C2H5)n-， n=0、 1、 2、…n， x二0、 1、 2、…x。
7、 如权利要求1所述的一种眼表生物膜的制作方法，其特征在于所述的 表面修饰是通过多向拉伸定型法使膜的微孔扩大，及在膜上引入增加润滑性的润滑剂。
8、 如权利要求1所述的一种眼表生物膜的制作方法，其特征在于所述的表面修饰是先将眼科常用而有效的抗感染药物吸附于膜上，再在膜上覆盖上一 层缓释膜，在膜表面建立抗感染缓释系统。
9、 如权利要求1所述的一种眼表生物膜的制作方法制成的一种眼表生物膜，其特征在于是具有与眼球相似曲面的动物膜。
10、 如权利要求9所述的一种眼表生物膜，其特征在于所述的生物膜曲 面内设置有药物缓释层。或者是碳氧链环氧化物其中R=CnH2n+1-全文摘要
本发明提供了一种眼表生物膜的制备方法，它是以动物的心包膜、肠膜、脂网膜为原料经脱脂、脱细胞、多方位除抗原、环氧固定、曲面成型、表面修饰、钴-60γ-射线辐照灭菌等工艺步骤制成。本发明方法所得到一种眼表生物膜的具有与眼球相似的曲面，能紧贴眼球，它无抗原性，组织相容性好，可参与眼表创伤的愈合过程，有利于创伤愈合；具有良好的透气性和细菌滤除性，可对眼表起良好保护治疗作用；具有较好强度，可贴可缝，使用方便。另外通过药物缓释的表面修饰，还可制成可缓释抗感染药物的治疗型眼表生物膜。
文档编号A61L27/36GK101172166SQ200710031439
公开日2008年5月7日 申请日期2007年11月16日 优先权日2007年11月16日
发明者斌 徐, 徐国风, 陈建苏 申请人:广东冠昊生物科技有限公司