专利名称：一种从陆地软体动物提取球蛋白的方法及其应用的制作方法
技术领域：
本发明是从陆地软体动物中提取一种免疫球蛋白的方法。增强白 血病患者免疫抗原体耐受力，维持自身生理平衡，以及消除突变细胞， 维持人体正常细胞功能，尤其是对化疗、放疗的不良反应患者引起消 化道膜炎及功能紊乱，所需补充高蛋白、高热量缓解白血病症状和体 征康复是有独特的作用。
本发明提取的免疫球蛋白涉及生物领域。
背景技术：
白血病是一类严造血干细胞的恶性克隆性疾病。其克隆中的白血 病细胞增殖失控、分化障碍、调亡受阻，而停滞在细胞发育的不同阶 段。在骨髓和其它造血细胞组织中白血病细胞大量增生累积，并浸润 其它器官和组织，而正常造血受抑制。
根据白血病细胞的成熟程度和自然疗程，将白血病分为急性和慢
性两大类。急性白血病(AL)的细胞负难测分化停滞在较早阶段，多 为原始细胞及早期幼稚细胞，病情发展迅速。自然疗程仅几个月。慢 性白血病(CL)的细胞分化停滞在较晚的阶段。多为较成熟的幼稚细 胞和成熟细胞，病情发展缓慢，自然病程为数年。其次，根据受累的 细胞系列可将AL分为急性淋巴细胞白血病(简称急淋白血病或急淋 ALL)和急性非淋巴细胞白血病(简称急非淋白血病或非急淋ANLL)。 CL则分为慢性粒细胞白血病(简称慢粒白血病或慢性ML)慢性淋巴 细胞白血病(简称慢淋白血病或慢淋CLL)，及少见类型的白血病如毛 细胞白血病HCL，幼淋巴细胞白血病PLL等。淋巴样肿瘤是免疫系统肿瘤，破坏正常免疫力调机制。出现免疫 功能缺陷，患者极易遭受感染或出现免疫疾病下列的肿瘤占所有淋巴
样肿瘤的90%以上。
B-和T-细胞淋巴母细胞白血病/淋巴瘤；
慢性淋巴细胞白血病/小淋巴细胞淋巴瘤；
滤泡淋巴瘤；
套细胞淋巴瘤；
弥漫大B细胞淋巴瘤；
伯基特淋巴瘤；
浆细胞瘤；
霍奇金淋巴瘤；
B和T细胞淋巴母细胞白血病/淋巴瘤常见于儿童和青少年，由幼 稚的淋巴母细胞组成。由于B和T淋巴母细胞和肿瘤形态上不能区分， 所引起的体征和症状也相同。B淋巴母细胞肿瘤的特征是广泛累及骨 髓和外周血，而T淋巴母细胞肿瘤主要累及胸腺，在纵隔形成肿块， 尽管如此以纵隔肿瘤为表现的前T细胞肿瘤也迅速进入白血病期，因 此B和T淋巴母细胞瘤临床上通常都有急性淋巴母细胞白血病(ALL) 的表现。两种肿瘤加起来，占儿童白血病的80%，发病高峰期为4岁， 大多数为B细胞性，而前T细胞肿瘤则多见于青少年男性发病高峰期 在15—20岁之间。
ALL的实验室检查和临床表现极象急性髓母细胞白血病(ALL)。 形态学上，瘤细胞分化受阻，母细胞通过克隆扩增变得越来越多，且 成熟障碍，不能分化成有功能的白细胞。当母细胞在骨髓积聚时，压 迫正常造血干细胞，造成红细胞、白细胞和血小板生成减少。
其临床表现急性淋巴白血病起病急骤，大多数病人在症状出现发3个月内诊断，主要的临床症状为骨髓功能受抑制，出现贫血。由于 缺乏成熟的白细胞，病人容易遭受感染。为继发血小板减少时，容易 引起出血，如皮下淤斑、鼻血和牙龈出血。如瘤细胞浸润骨髓可引起 骨痛。白血病细胞播散到骨髓外，导致全身淋巴结、肝、脾明显肿大。 病人还可出现中枢神经系统症状，包括头痛、呕吐和神经麻痹。儿童 出现这些症状比成人常见。
实验室检査病人常有贫血，白细胞计数有不同程度升高，有时高 达100000/ul的50%病人少于10000/ul，更为重要的是在周围血和骨 髓中找到淋巴母细胞。在骨髓、淋巴母细胞比例高达60%—100%。血 小板计数少于100000/ul。偶尔，病人只有全血减少，周围血几无淋 巴母细胞(非白血病性白血病)，但骨髓充斥淋巴母细胞。与再生障碍 性贫血迥然不同。
急骨髓母(髓细胞)白血病分类有M。最少分化型扁L;
Mi来分化型AML， M2分化型AML， M3急性前髓细胞性白血病，主要 为胞质充满颗粒的早幼粒细胞，每个细胞有多个Auer小体，可有贤 形核或两叶核；M4急性髓单核细胞白血病，有髓细胞和单核细胞分化 证据，髓样式分与分化型(M2)相似，周围血单核细胞增多。M5急性 单核细胞白血病，以单核母细胞(过氧化酶阴性，酯酶阳性)和前单 核细胞为主。(常见于儿童和青年人，常有牙龈浸润，染色体11923 异常)。M6急性红白血病，以奇异多核巨型母细胞样红母细胞为主， 也可见髓母细胞(血细胞数少无器官浸润，以老年人多发)M7急性巨 核细胞白血病，以巨核细胞系列母细胞为主，抗血小板体阳性反应， 骨髓纤维化，网状纤维增多。
我国白血病发病率约为2.76/10万元，在恶性肿瘤所致的死亡率中，白血病居第6位(男性)和第8位(女性)，但在儿童及35岁，
以下成人中则居第l位。
我国AL比CL多见(约5.5: 1)其中ANLL最多(1.62/10万)， 其次为ALL (0.69/10万)CML (0.36/10万)，CLL少见(0.05/10万)。 男性发病率略高于女性(1.81:1)。成人AL中以ANLL多见，儿童以 ALL多见，CML随年龄增长而发病率逐渐升高，CLL在50岁以后 发病才明显增多。
我国白血病发病率与亚洲国家相近，低于欧美国家，尤其是CLL 更少，占白血病总数的5%，而在欧美国家占25% 50%。
人类白血病的病因尚未完全清楚
一、 病毒
成人T细胞白血病/淋巴瘤(ATL)可由人类T淋巴细胞病毒I 型(HTLV-I)所致，EB病毒，HIV病毒与淋巴系统恶性肿瘤的关系 也已被认识，病毒感染机体后，作为内源性病毒整体合，并潜伏在宿 主细胞内， 一旦在某些理化因素作用下即被激活表达而诱发白血病； 或作为外源性病毒内外界以横向方式传播感染，直接致病。
二、 电离辐射
包括X射线、Y射线、电离辐射等。早在1911年首次报导了放 射工作者发生白血病的病倒，以后得到大量的动物实验和临床观察证 实，据国外调查的资料证实，1929 1940年放射科医师白血病的发病 率为非放射科医师的10倍。日本广岛及长崎受原子弹袭击后，幸存者 中白血病发病率比未受照射的人群高30倍和17倍。患者多为AL和 CML。此外过去对强直性脊柱炎用放射治疗，真性红细胞增多症用32P 治疗，其白血病发病率也较对照组高。研究表明，大面积由和大剂量照射可使骨骼抑制和机体免疫力下降，NDN突变、断裂和重组，从而 导致白血病的发生。
三、 化学因素
多年接触苯以及含苯的有机溶剂如汽油、橡胶，与白血病的发生 有关。如早年制鞋工作(接触含苯胶水)的发病率高于正常人群的3 20倍。有些药物可损伤造血细胞引导起白血病，如氯霉素、保泰松所 致再障的患者发生白血病的危险性显著增高；乙双吗啉是乙亚胺的衍 生物，具有极强的致染色体畸变和致白血病作用，近年来发现其与白 血病的发生有明显关系。抗肿瘤药物尤以垸化剂被公认为有致白血病 作用，化学物质所致的白血病以ANL为多。
四、 遗传因素
家族性白血病约占白血病的7/1000，单卵孪生子，如果一个人发 生白血病，另一个人的发病率为1/5，比双卵孪生者高12倍。Downs 综合征(唐氏综合征)有21号染色体三体改变，其白血病发病率达 50/10万，比正常人群高20倍。此外先天性再生障碍性贫血(如Fanccmi 贫血)、Bloom综合征(侏儒面部毛细血管扩张)。共济失调一毛细血 管扩张症及先天性丙种球蛋白缺乏症等，白血病的发病率均较高。上 述表明白血病与遗传因素有关。
白血病种类繁多，发病机制复杂，染色体断裂和易位可使原癌基 因被激活和位置发生移动。最明显的例子是慢性粒白血病ph染色体 即t (9;22) (934 ; 911)， 9号染色体上的原癌基因ABL易位至22号染 色体的继裂集中区(BCR)，形成BCR—ABL融合基因，此基因产生一 种新的MRNA，由此再产生一种具有酪氨酸激酶活性的BCR—ABL融合 蛋白。从而促发CML， 一般说来，白血病的发生至少有两个阶段的过 程①各种原因所致的单个细胞原癌基因决定性的突变，导致克隆性的异常造血细胞生成；②进一步的遗传学改变可能涉及一个或多个癌 基因的激活和抑癌基因的失活，从而导致白血病。通常理化因素先引 起单个细胞突变，而后因机体遗传易感性和免疫力低下，病毒感染、 染色体畸变等激活了癌基因(如ras家族)，并使部分抑癌基因失活 (如P53突变或失活)及调亡抑制基因(如bcl-2)过度表达，导致 突变细胞凋亡受阻，恶性增殖。 五、其它血液病
某些血液病最终可能发展为白血病，如骨髓增生异常综合症，淋 巴瘤多发性骨髓瘤等。
白细胞减少是指外周血白细胞绝对计数持续低于4.0X107L。中
性粒细胞是白细胞的主要成分，所以中性粒细胞减少常导致白细胞减 少。外周血中性粒细胞绝对计数在成人低于2.0X107L，在儿童》10 岁低于1.8X107L或〈10岁低于1.5X107L时，称为中性粒细胞减 少；严重者低于0.5X107L时，称为粒细胞缺乏症。
从中性粒细胞发生的过程看，在骨髓中可分为干细胞池(多能造 血干细胞一粒系定向祖细胞，分裂池(原始粒细胞一中幼粒细胞)、贮 存池(晚幼粒细胞一中性粒细胞)，成熟的中性粒细胞多贮存于骨髓， 是血液中的8—10倍，可随时释放人血。综合中性粒细胞的细胞动力 学，根据病因和发病机制，粒细胞缺乏症可大致分为三类中性粒细 胞生成缺陷、破坏或消耗过多、分布异常。中性粒细胞减少的机制复 杂，可以是单一因素，但更多的是多因素综合作用所致。
医院通过对患者的一、血象(血常规)，二、骨髓象(骨髓涂片)； 三、细胞化学，四、免疫学检査，五、造血细胞体外集落培养和特殊 检查确诊出白血病，根据急慢性或属某类型病程病症的实况，目前， 医治方法采用 一、化学治疗；二、并发症治疗；三、免疫治疗；四、造血干细胞移植；五、手术治疗(合并脾功能亢进者如有切脾指证可 行脾切除术以提高血象，为化疗创造有利条件)。
白血病系严重消耗性疾病，特别是化疗、放疗的不良反应可引起 患者消化道粘膜炎及功能紊乱。故注意补充营养，维持水、电解质平 衡，给患者髙蛋白、高热量、易消化食物，必要时经静脉补充营养。
本发明一种非药物(化疗)、放疗治疗白血病办法，采用从陆地软 体动物提取的一种含高纯免疫球蛋白、高热量的食疗方法，不存在对 患者产生不良反应和损害体质的副作用，造成患者再度免疫下降的弊
上山顺。
发明内容
本发明是一种从陆地软体动物中体内提取高纯球蛋白、活动性酶 等物质的方法。
"无壳蜗牛"(又名鼻涕虫或油盐虫)，"蜗牛"(又名天螺丝)。鼻 涕虫动物生长在潮湿阴暗处，如废水沟、垃圾堆放处、下水道口处或 厨房洗锅刷碗洗菜排水沟旁，有时农田山边腐烂污泥的地方也能出现。 此动物白天不见，晚上出来觅食。该动物生命力极强，不论酷署严寒、 环境肮脏都能存活、繁殖。它体内含有高纯蛋白质和活性自由基本酶， 其体内排出的粘液遍布周身、粘液具有抗菌杀灭病毒作用是陆地其它 动物不具备的。
鼻涕虫大的一般长3 5cm，小的l 2cm左右。全身软体无骨无 脚，葡伏爬行。身体上部灰歇色，触地面带白色，全身有粘液物质， 爬行过的地方，可留下粘液，干后发亮(白色透明)。
天螺丝(有壳蜗牛)生长在农田、菜地、水沟、小溪边或废水沟 旁。有壳蜗牛一年四季生存繁殖，白天不见，夜晚活动觅食。不活动 时身体巻縮壳内。蜗牛壳园型，大的1 L5厘米，小的0.3 0.8 11左右。爬行所经过的地方会存留粘液，干后发亮(白色透明)。鼻涕虫与 天螺丝体内含有高纯免疫球蛋白和自由基活性酶物质。同时体内的粘 液具有抗病毒和特殊的粘附作用。其球蛋白有提高人体免疫功能，抑 制白血病母细胞，取代正常骨髓成分的作用。自由基活性酶物质能限 止真性细胞增多症和骨髓化生并骨髓纤维化。能维持正常白细胞，抑 制白细胞缺乏或增多症，尤其它的粘液多糖，能粘着在肿瘤细胞的表 面，阻止了肿瘤细胞穿透血管转移到正常组织上，从而限制了肿瘤细 胞的扩散和发展。另外体内的辅酶能增强巨噬细胞的吞噬能力，切断
变异细胞(癌细胞)的DNA复制，阻止骨髓和周围血出现大量粒细 胞与血小板增多症。同时对减轻肿瘤在化疗、放疗后的副作用均有效 果。
白血病正是免疫反应异常，无论是反应过高或过低均能引起组织 损害，导致疾病。不管是自身免疫性疾病，免疫性缺陷病以及器官和 骨髓移植排斥反应的发生。
本发明的目的是提供一种从鼻涕虫和天螺丝体内获取的球蛋白和 活性自由基酶、粘液多糖物质，达到免疫反应机体在疗食过程中所获 得的"识别自己，排除异已"的一种重要生理功能，增强患者免疫系 统细胞和体液免疫机制以抵抗外界入侵的病原生物，维持自身生理平 衡，以及消除突变细胞，起到保护机体的作用。
本发明的要点它是从陆地软体动物无壳蜗牛(鼻涕虫)和蜗牛 (天螺丝)体内通过蒸流方法获取球蛋白、活性自由基酶和粘液多糖 以及辅酶的方法。
本发明的优点在于( 一 )提高机体对自身抗原的耐受力使之不丢 失，增强自身耐受状态；①克隆消除未成熟或成熟的T、 B细胞中在 中枢或外周免疫器官中接触自身抗原，诱导自身反应性细胞克隆死亡并被除去；②克隆无变应性，在某些情况下，T.B细胞虽然仍有与抗 原反应的T细胞受体或膜免疫球蛋白表达，但对该抗原递呈无应答或 低应答状态；③T细胞外周抑制，抑制性T细胞T细胞抑制其它自身 反应性T细胞的功能；④抑制某些隐蔽抗原的释放。(二)清除自身 免疫性疾病的易感性与遗传因素的抗原；(三)抑制微生物细菌支原体 和病毒导致自身免疫病发生。①不让微生物作用下，自身抗原决定簇 发生改变，或微生物抗原与组织的抗原结合形成复合抗原，从而回避 了T细胞的耐受；②限止某些病毒(如EB病毒)和细菌产物可激活 非物异性多克隆B细胞，从而产生自身抗体；③维持稳定Ts细胞功 能(不使它丧失)减少存在自身抗原；④消除因某些激素对某些自身 免疫性疾病的促发作用。(四)非药物疗法对人体无副作用或过敏反应；
(五)不存在细胞或器官移植血型匹配和排斥反应；(六)非放、化疗 不损害人体健康(正常)细胞，可使患者获得完全缓解即白血病的症 状和体征消失，外周血中性粒细胞绝对值》1.5X107L，白小板)IOO X107L，白细胞分类中无白血病细胞，骨髓中原粒细胞，+早幼粒细 胞(原单+幼单核细胞或原+幼淋细胞)《5%，无Auer小体，红细胞 及巨核细胞系列正常，无髓外白血病。白血病的免疫学、细胞遗传学 和分子物学异常标志均消失。(七)缓解后食疗使患者长期无病生存
(DFS)和痊愈，使初疗时的Al体内的白血病的数量101^ 1012，经 诱导缓解阶段治疗达到CR时，体内白血病细胞仅降到108-109。无髓 外某些隐蔽白血病细胞浸润。(八)成本低；(九)原料来源广泛；(十) 哮喘病、爱滋病、免疫力下降或因放疗、化疗免疫力低的患者可食疗； 另外健康人也可食用，增强免疫力，抵抗疾病。本发明具有一定的广 谱性。
具体实施例本发明的目的由下列实施予以实现。
捕捉或收集鲜活的无壳蜗牛(鼻涕虫)、蜗牛(天螺丝)，经清洗 干净后(天螺丝需除壳取肉)消毒，放入专门的容具中密闭，用蒸流 方法摄取该动物的球蛋白、酶、粘液多糖物质溶液后兑入一定成份的
无病健康新鲜瘦肉或健康鲜牛肉；(需切碎)再进一步密封蒸流，其温 度控制在110左右，适时取出密封罐装，食用成份配比软体动物(1: 2鲜痩肉)；初期患者一天二次(500ml) 二个疗程，三个月；中期患 者一天三次(500ml 1000ml) 二个疗程，六个月；晚期患者一天四 次(500ml 1500ml)四个疗程九个月；注病重患者不能进食进水 者除外。
其它如哮喘、爱滋病患者和免疫力低下的人也可用此蛋白食疗， 正常健康人可食用，更加增强免疫力，抗抵疾病。
权利要求
一种从陆地软体动物体内提取的免疫球蛋白，它由无壳蜗牛(鼻涕虫)、蜗牛(天螺丝)健康新鲜猪瘦(精)肉、牛肉组成。其特征在于无壳蜗牛。以及辅酶物质。按等份配伍后，经蒸流和沸煮工艺方法提取上述物质(做成一种保健食品)。
全文摘要
一种从陆地软体动物提取球蛋白的方法及其应用，是属生物领域。本发明是从陆地软体动物中，提取一种免疫球蛋白、自由基活性酶、粘液多糖、辅酶与无病鲜猪精肉、牛肉等物质配伍，制成一种含有高纯度球蛋白、高热量的保健食品，采用非药物(化疗)放疗的方法治疗白血病患者，患者经过饮用食疗后，增强患者自身免疫抗原体耐受力，维护自身生理平衡，以及消除突变细胞，维持人体正常细胞功能。尤其是对化疗、放疗的不良反应者引起消化道膜炎及功能紊乱，所需补充高蛋白、高热量，缓解白血病症状和体症是具有独特的作用。本发明的免疫球蛋白对哮喘、爱滋病患者和免疫低下的人以及肿瘤患者放化疗免疫力下降有一定的疗效。同时，本发明对正常健康人也可作为补充体内所需蛋白、热量而可饮用，增强体质，防预疾病。
文档编号A61K35/56GK101468043SQ200710305390
公开日2009年7月1日 申请日期2007年12月25日 优先权日2007年12月25日
发明者林增余 申请人:林增余