专利名称：银杏叶中提取粗品黄酮和黄酮糖苷的方法
技术领域：
本发明涉及一种药材的提取方法，特别是涉及一种中药有效成分 的提取与净化方法。
技术背景目前中药制药企业中药物提取净化的常用方法是水提醇沉法，水 提醇沉法以水为溶剂，对中药材进行煎煮、精提，再以乙醇为澄清剂， 对水提液进行澄清处理，去除中药水提液中的大部分多糖、蛋白质、 树脂等，最后回收乙醇，得到澄清透明的提取物溶液。此种方法适用 于所含有效成分对热稳定、能溶于水，并能溶于一定浓度乙醇的中药 材。虽然使用醇沉法可以得到清澈的有效成分溶液，但也存在成品稳 定性较差、乙醇耗用大、工艺复杂、成本较高且资源浪费严重等缺点。 在澄清药液同时又将中药中的一些醇不溶性的大分子有效成分(如蛋 白质及部分多糖)作为杂质除去，而这些成分特别是多糖通过药理学、 免疫学及临床研究表明具有增强免疫作用和广泛的生理活性，难以保 证成品制剂的有效性且成品的稳定性较差。 发明内容本发明的目的在于提供对银杏叶水提液醇沉法的过程进行改进， 在醇沉之前，使用具有选择性吸附作用的壳聚糖作为银杏叶水提液的 澄清剂，通过絮凝法对银杏叶水提液进行澄清净化以去除杂质，达到 提高粗品黄酮和黄酮苷的有效成分含量的目的。本发明的目的是通过以下技术方案实现的银杏叶中提取粗品黄酮和黄酮糖苷的方法，利用絮凝澄清法处理 银杏叶水提液；在醇沉之前净化；使用具有选择性吸附作用的壳聚糖 作为银杏叶水提液的澄清剂。所述的银杏叶中提取粗品黄酮和黄酮糖苷的方法，在银杏叶水提 液醇沉法提取粗品黄酮和黄酮糖苷之前使用絮凝法除杂。所述的银杏叶中提取粗品黄酮和黄酮糖苷的方法，对银杏叶水提 液使用选择性絮凝的方法净化除杂。本发明的优点与效果是-本发明通过将壳聚糖絮凝剂用于银杏叶水提液的净化除杂，得到 如下结论1. 本发明选用的澄清剂壳聚糖对银杏叶水提液有良好的澄清作 用，絮凝率可达90%以上。2. 壳聚糖对银杏叶水提液的絮凝作用具有选择性，仅絮凝沉降 药液中的杂质，基本不对有效成分起作用，总黄酮损失率低于3%。3. 絮凝法处理的银杏叶水提液总黄酮含量比水提醇沉法高 5.4%,比醇提法高21%。4. 本发明选用的澄清剂壳聚糖处理的粗品黄酮和黄酮糖苷呈亮 黄色，品质明显好于传统方法所得到的粗品黄酮和黄酮糖苷，更适合 制药。
图1为本发明壳聚糖加入量对絮凝效果的影响； 图2为本发明总黄酮损失率随PH值的变化曲线图；图3为本发明温度对总黄酮损失率影响的关系曲线； 图4为本发明絮凝原理中未加入絮凝剂时胶体溶液的示意图； 图5为本发明絮凝原理中絮凝剂吸附在颗粒上的示意图； 图6为本发明絮凝原理加入絮凝剂搅拌后胶体溶液的示意图； 图7为本发明选择性絮凝前两种性质不同颗粒胶体溶液示意图； 图8为本发明胶体溶液选择性絮凝后示意图； 图9a为本发明壳聚糖絮凝作用架桥的机理示意图； 图％为本发明壳聚糖絮凝作用电荷中和作用示意图； 图9c为本发明壳聚糖絮凝作用网捕巻扫示意图。
具体实施方式
下面参照附图对本发明进行详细说明。 银杏叶水提液的特点和银杏叶水提液的醇沉法 在银杏叶水提液中存在两##质不同的胶体颗粒，有效成分胶体 和杂质胶体，其中有效成分胶体的粒度远小于杂质胶体的粒度。醇沉法是中药现代生产的常用方法，它主要利用蛋白质、淀粉、 多糖等杂质不溶于醇，而中药有效成分溶于醇的性质来实现有效成份 和杂质分离的。醇沉法分水提醇沉法和醇提法两种。水提醇沉法一般 将中药水提液浓縮后加入醇，使药液的醇浓度超过80%，这时不溶于 醇的杂质就沉降出来，而有效成分溶于醇液中，实现了有效成份的分 离。由于银杏叶水提液中杂质胶体颗粒不溶于醇，有效成分胶体颗粒 溶于醇，因此采用水提液醇沉法得到纯净的粗品黄酮和黄酮糖苷。 絮凝澄清法原理絮凝澄清技术是一种新兴的中药生产技术，它利用无毒的絮凝剂 吸附中药水提液中不能沉降的微小的杂质颗粒，使之结合成较大的能够沉降的絮团来净化中药水提液，如图4、 5、 6所示，絮凝剂加入胶体溶液后吸附在胶体颗粒上，经机械脱水(搅拌)形成絮团并沉降， 絮凝法在一些中药生产中已取得成功，但还没有应用到银杏叶生产的 报道。对于有效成分难溶于水的中药水提液(有效成分在水提液中和杂 质一样呈胶体存在)，应该使用选择性絮凝的方法实现去除杂质的目的，选择性絮凝的原理如图7、 8所示，絮凝剂只吸附絮凝胶体溶液 (具有两种以上性质不同的胶体颗粒)中的一种胶体颗粒，而保留其它种类的颗粒。壳聚糖对银杏叶水提液具有选择性絮凝吸附作用 壳聚糖作为银杏叶水提液的澄清剂具有选择性絮凝吸附作用，它只絮凝吸附杂质胶体颗粒，而对有效成分胶体颗粒不产生吸附作用，从而实现了选择性的絮凝沉降杂质而保留有效成分的目的，为醇沉法提取较纯净的粗品黄酮和黄酮糖苷提供了条件。壳聚糖作为絮凝剂兼有电荷中和絮凝及吸附絮凝的双重作用一方面通过电荷中和而使胶体颗粒脱稳并形成细小的凝聚体；另一方面 通过高分子架桥作用使这些凝聚体形成大体积的絮团。在絮凝银杏叶水提液过程中，由于壳聚糖分子链上分布着大量的 游离羟基和氨基，在稀酸溶液中氨基容易质子化，从而使壳聚糖分子 链上带有大量的正电荷，成为一种可溶性的聚电解质，具有阳离子絮 凝剂的作用。而银杏叶水提液中的杂质颗粒带有负电荷，刚好构成了异种电荷的吸附絮凝。壳聚糖絮凝剂对银杏叶水提液的絮凝作用，首先通过静电作用被 吸引到银杏叶水提液中的粒子上，并在不同的粒子间架桥，然后再通 过电荷中和和双电层的压縮作用形成了较大的絮团，在絮团的下沉过 程中不断的巻扫水提液中的细小颗粒，最后形成絮状沉淀，达到澄清水提液的目的。如图9a 9c所示为壳聚糖絮凝剂对银杏叶水提液的 絮凝作用三种原理图。 银杏叶提取液的制备称取银杏叶药粉C100目过滤)50g放入1000mL烧瓶中，先向烧瓶 中加入500mL温水(35°C 45°C)浸泡约20min，然后加热至沸腾， 煎煮lh，停止加热，冷却后用筛网(200目)三层过滤，将滤渣挤至 半干，再次放入烧瓶中，向烧瓶中加入400mL热水，继续加热至沸 腾，lh后停止加热，冷却，过滤，挤干药渣，合并两次滤液，并采 用稀释或蒸发浓縮的办法，保证生药浓度为0.1g/mL。壳聚糖溶液的制备用1%的乙酸溶液配制成浓度为1%的壳聚糖溶液，充分溶胀后作 为絮凝剂立即使用，以免在稀酸中缓慢水解而影响絮凝效果。水提醇沉法操作方法取银杏叶提取液50mL加热进行浓縮，然 后加入适量的无水乙醇，使得药液浓度为0.1g/raL，边加边搅拌，静 置24h后去除沉淀，即可得到纯净的粗品黄酮和黄酮苷。
权利要求
1.银杏叶中提取粗品黄酮和黄酮糖苷的方法，其特征在于利用絮凝澄清法处理银杏叶水提液；在醇沉之前净化；使用具有选择性吸附作用的壳聚糖作为银杏叶水提液的澄清剂。
2. 根据权利要求1所述的银杏叶中提取粗品黄酮和黄酮糖苷的 方法，其特征在于在银杏叶水提液醇沉法提取粗品黄酮和黄酮糖苷之 前使用絮凝法除杂。
3. 根据权利要求1所述的银杏叶中提取粗品黄酮和黄酮糖苷的 方法，其特征在于对银杏叶水提液使用选择性絮凝的方法净化除杂。
全文摘要
银杏叶中提取粗品黄酮和黄酮糖苷的方法，涉及一种药材的提取方法，特别是涉及一种中药有效成分的提取与净化的方法。利用絮凝澄清法处理银杏叶水提液；在醇沉之前净化；使用具有选择性吸附作用的壳聚糖作为银杏叶水提液的澄清剂。在银杏叶水提液醇沉法提取粗品黄酮和黄酮糖苷之前使用絮凝法除杂。对银杏叶水提液使用选择性絮凝的方法净化除杂。本发明选用的澄清剂壳聚糖处理的组品黄酮和黄酮糖苷呈亮黄色，品质明显好于传统方法所得到的粗品黄酮和黄酮糖苷，更适合制药。
文档编号A61K36/16GK101224224SQ20081001001
公开日2008年7月23日 申请日期2008年1月2日 优先权日2008年1月2日
发明者张建伟, 范红伟, 圆 袁 申请人:沈阳化工学院