N⁶-取代腺苷衍生物、其制法以及药物组合物与用途的制作方法

专利名称：N⁶-取代腺苷衍生物、其制法以及药物组合物与用途的制作方法
技术领域：
本发明涉及一类N6-取代腺苷衍生物，这类化合物的制备方法，含有这类 化合物的药物组合物，及其作为制备治疗镇静催眠、抗惊厥、抗癫痫、抗帕金 森氏疾病和痴呆药物、保健品中的应用，属于医药技术领域。
背景技术：
N、取代的嘌啉和腺苷类衍生物是具有重要生物活性的物质，部分结构以 微量形式存在于天然植物中，作为植物细胞分裂素能够促进植物细胞的分裂和 分化，具有促进种子的发芽、芽的分化、枝的形成，以及叶绿素和淀粉的产生 等重要生物学功能，并且在植物生物工程技术研究中有比较广泛应用。最近的 研究发现，组氨酸激酶类包括AHK2、 AHK3和AHK4作为细胞分裂素的受体， 在细胞分裂素信号传导通路中发挥及其重要作用。其中，对N^异戊烯衍生物 取代的嘌啉类衍生物的研究报道相对较多，而对N、异戊烯衍生物取代的核苷 类衍生物的研究报道较少。同时，由于在细胞分裂分化中的重要生理作用，该 类成分在医药生物学及其药理活性的研究，主要集中在抗肿瘤和抗病毒方面， 其他方面的报道很少，尚无镇静催眠作用的报道。Karel Dolezal; Igor P叩a; Eva Hauserova; Lukas Spichal; Kuheli Chakrabarty; Ondrej Novak; Vladimir Krystof; Jiri Voller; Jan Holub and Miroslav Strnad， Preparation, biological activity and endogenous occurrence of N6-benzyladenosines, Bioorganic & Medicinal Chemistry, 2007， 15， 3737-3747.(以及该文引用文献)。
在对中药天麻和手掌参活性成分研究的过程中，本申请的发明人通过活 性跟踪的方法从天麻和手掌参提取物中同时分离得到了具有显著镇静催眠作 用的N6- (4-羟基苄基)腺苷。尽管该成分最近有人也从天麻中分离得到，并 且发现具有防止PC12细胞凋亡和与腺苷A2A受体的结合作用，但是该化合物 和类似成分在镇静催眠等中枢神经系统方面的作用，尚无报道。在此基础上， 本申请的发明人进行了 N6- (4-羟基苄基)腺苷的合成和衍生化修饰，并对它们的镇静催眠活性进行了进一步评价，确证了它们的镇静催眠作用。Nai-Kuei
Huang, Yijuang Chern, Jim-Min Fang, Chia-ILin， Wan-PingChen, and Yun-Lian Lin, NeuroprotectivePrinciplesfromGastrodiaelata ， J.Nat. Prod.， 2007, 70,
<formula>formula see original document page 7</formula>
N6- (4-羟基节基)腺苷[N6-(4-hydroxybenzyl)adenine riboside]。

发明内容
本发明要解决的技术问题是提供一类N、取代腺苷衍生物的制备方法及 其作为治疗镇静催眠、抗惊厥、抗癫痫、抗帕金森氏疾病和痴呆药物、保健品 的活性成分的用途。
具体而言，本发明涉及如通式(I)所示的N、取代腺苷衍生物
<formula>formula see original document page 7</formula>
其中，R选自取代或非取代的苯基、取代或非取代的含有l-2个杂原子的五元 或六元杂环、Cl-6烷基、C3-8环垸基；
571-574。(以及该文引用文献)。苯基、五元杂环、六元杂环上的取代基选自H、 OH、 Cl-4垸基、Cl-4垸氧t 基、NH2、 N02、囟素。
优选的，本发明所述NS-取代腺苷衍生物包括如下结构式的化合物
(1)
其中，R! R5各自独立的选自H、 OH、 Cl-4垸基、Cl-4垸氧基、NH2、 N02、 Cl、 Br或F。
更优选R产R4二R5二H， R2 = R3 = OH;
R产R4二R5二H， R2 = OMe， R3 = OH; R产R4二R产R2二H， R3 = OH;
(2)
其中
R! R4各自独立的选自H、 OH、 Cl-4垸基、Cl-4烷氧基、NH2、 N02、 Cl、 Br或
HO OH
HO OH
8更优选R3=R4=H， R!二R2二OH;
R3=R4 = H， R「OMe， R2 = OH;
R尸R2二R产R4二H;
(3)
<formula>formula see original document page 9</formula>
其中
R, r4各自独立的选自H、 OH、 Cl-4垸基、Cl-4烷氧基、NH2、 N02、 Cl、 Bl或F。
更优选R「R4二H， R2 = R3 = OH;
R尸R4二H， R2=OH， R3 = Me;
R尸R2二R产R4二H;
(4)
<formula>formula see original document page 9</formula>
其中，R! R4各自独立的选自H、 OH、 Cl-4垸基、Cl-4烷氧基、NH2、 N02、 Cl、 Br或F。更优选R产R4^H， R2 = R3 = OH;
R!=R4 = H， R2=OH， R3 = Me;
R产R2二R3^R4^H;
X代表O、 N和S，更优选X=0; X = N;
本发明最优选的化合物选自
N、3，4-二羟基苄基)-腺苷
N6-(3-甲氧基-4-羟基苄基)-腺苷
N6-( 4-羟基苄基)-腺苷
N、苄基)-腺苷
N、(吡啶-2-亚甲基)-腺苷 N、吡啶-3-亚甲基)-腺苷 N、(异丁基)-腺苷 N、(环己基)-腺苷 N、(2-硝基苄基)-腺苷。
10本发明还公开了本发明化合物的制备方法。
(1) 用于制备本发明化合物的原料6-氯嘌呤核苷,可以根据文献(Davoll and Blowy， J. Am. Chem. Soc. 1957, 73, 2936)中的方法，通过次黄嘌啉(6-q羟 基嘌啉)与三氯氧磷(POCl3)反应合成得到；或直接从试剂公司购买(Sigma， Aldrich， Fluka等)。
(2) 用于制备本发明化合物的原料之二醛也是可以通过商业购买的或更a 根据现有技术制备。各种醛包括取代或非取代的苯甲醛、取代或非取代的吡啶 醛、烷基醛包括直链烷基醛、支链烷基醛以及环烷基醛。例如苯甲醛的衍生物 包括单取代、双取代、三取代、四取代和五取代，取代基包括OH、 OMe、 NH2、 N02、 CI、 Br和F。
所述化合物的基本合成方法有以下两种 第一种方法包括如下步骤是
第一歩，苯甲醛衍生物与盐酸羟胺反应得到苯甲醛衍生物的肟。反应优选 在醇作为溶剂、在无水乙酸钠存在和室温搅拌的条件下进行。反应完成后将反 应液的溶剂蒸干，用水溶解后，用乙酸乙酯萃取，萃取物蒸去乙酸乙酯，得第
一步反应物。 &
第二步，将上步得到的苯甲醛衍生物的肟氢化得苯甲胺衍生物的盐酸盐。
氢化优选醇作为溶剂，优选的醇是乙醇。氢化条件优选是在Pd/C和浓盐酸存 在的条件下常压氢化。
第三步，苯甲胺衍生物的盐酸盐和6-氯嘌呤核苷反应。反应优选在W, iV-二异丙基乙胺存在下的条件下进行。反应的溶剂优选是醇，优选的醇是正丙醇。 反应优选在加热的条件下进行，反应的温度7(TC。反应的时间是5-ll小时， 优选是7-9小时，最优选是8小时。反应完成后反应液蒸干溶剂，经重结晶或 色谱分离纯化目标产物。重结晶的溶剂优选是无水乙醇。色谱分离纯化的优选 是硅胶柱，优选的洗脱液是氯仿甲醇=15:1-8:1。
第二种方法的基本步骤是第一步，将苯并三氮唑、苯甲醛衍生物和腺苷反应制备第一步产物。反 应的溶剂优选是无水醇。反应优选在催化量酸存在的条件下进行，优选的酸是 冰醋酸。反应优选在加热的条件下进行，最优选的反应温度是溶剂回流的温度。 反应的时间是10-18小时，优选是13-15小时，最优选是14小时。反应完成 后，反应液蒸去溶剂，第一步产物可以经重结晶或色谱分离纯化。色谱分离的 优选条件是使用硅胶柱，氯仿:甲醇体积比30:1-15:1作为流动相。
第二步，将第一步得到的产物和NaBH4反应制备目标产物。反应的溶剂 优选是无水四氢呋喃。反应优选在加热的条件下进行，最优选的反应温度是溶... 剂回流的温度。反应的时间是5-11小时，优选是7-9小时，最优选是8小时。 反应完成后反应液冷却至室温后，倒入冰水混合物中，用酸中和，再用氯仿萃 取。取氯仿层回收溶剂后，经重结晶或色谱分离纯化目标产物。色谱分离的优 选条件是使用硅胶柱，氯仿:甲醇体积比30:1-15:1作为流动相。
本发明的另一目的是提供了含有所述N^取代的嘌啉和腺苷类衍生物的 药物组合物及其制备方法，该组合物含有治疗有效量的本发明的N、取代的嘌 啉和腺苷类衍生物，以及任选的含有药用载体。其中所述的药用载体的药学领 域常用的药用载体；所述组合物的制备方法是药学领域常规的药物制备方法。
本发明的药物组合物中还可以含有其它的药物化合物，制成复合制剂。 利用本发明方法得到的N、取代的嘌啉和腺苷类衍生物可以与药物上可' 接受的载体和/或其他药物提取物或药用单体化合物一起制成药物制剂，其中 所述的药物制剂是药学领域常用的剂型，例如注射剂或口服制剂，所述的注射 剂例如是溶液、悬浮液、乳液或冻干粉针制剂等，所述的口服制剂例如是片剂、 胶囊、口服液或滴丸等。利用本发明的N、取代的嘌啉和腺苷类衍生物制备所 述各种剂型时，可以按照药学领域的常规生产方法制备。应用本发明的N、取 代的嘌啉和腺苷类衍生物制备各种制剂时，其中的有效成分可以得到有效地控 制，获得质量均一的药品。
本发明进行了大量的药物实验，证明了本发明的N、取代的嘌啉和腺苷类 衍生物具有镇静催眠、抗惊厥、抗癫痫、抗帕金森氏疾病和防治痴呆的作用，对镇静催眠、抗惊厥、抗癫痫、抗帕金森氏疾病和防治痴呆，具有良好的治疗 作用，并可用作或加入保健品，有利于改善身体状况，提高免疫力。
因此，本发明还提供了本发明N、取代的嘌啉和腺苷类衍生物在制药和保 健品领域中的应用，特别是本发明N、取代的嘌啉和腺苷类衍生物在制备用于 镇静催眠、抗惊厥、抗癫痫、抗帕金森氏疾病和防治痴呆的药物中的应用，本 发明的N、取代的嘌啉和腺苷类衍生物可用于制备治疗镇静催眠、抗惊厥、抗 癫痫、抗帕金森氏疾病和防治痴呆疾病，特别是镇静催眠、抗惊厥、抗癫痫抗 帕金森氏疾病和防治痴呆疾病的药物和保健品。
在将本发明的NS-取代的嘌啉和腺苷类衍生物或本发明的组合物用于治 疗上述疾病时，其用药量可参照使用N^取代的嘌啉和腺苷类衍生物进行治疗 时的用量；在将本发明的N、取代的嘌啉和腺苷类衍生物或本发明的组合物用 作保健品，或将其加入保健品时，其用量应少于通常的治疗量。
具体实施例方式
下面的实施例可进一步说明本发明，但不以任何方式限制本发明。
实施例1: N、(3，4-二羟基苄基)-腺苷的制备
第一步，称取2.76g3,4-二羟基苯甲醛，2.52 g盐酸羟胺，3.26 g无水乙 酸钠，溶于80ml乙醇中。室温下，搅拌反应6小时。蒸干溶剂，用40ml水 溶解，乙酸乙酯萃取(40x3 ml)，蒸去乙酸乙酯，得淡黄色固体(3,4-二羟基 苯甲醛肟)2.72 g 。
第二步，2.72 g 3,4-二羟基苯甲醛肟溶于70 ml乙醇中，力n 700 mg 10% Pd/C， 8ml浓盐酸，常压氢化，得白色晶体(3,4-二羟基苯甲胺盐酸盐)2.98g。
第三步，将2.98g3,4-二羟基苯甲胺盐酸盐溶于70 ml正丙醇中，加1 g 6-氯嘌呤核苷和14 ml TV, 7V-二异丙基乙胺，加热至7(TC，反应8小时。蒸干溶 剂，经硅胶柱色谱分离，用氯仿甲醇=15:1-8:1洗脱，得本标题化合物，为无 色结晶0.95 g。
正离子ESIMS附/2 3卯[M + Hl+;负离子ESIMS m/z 388 [M — H]-和
13424[M + Cl]-。 'H NMR (300 MHz, DMSO): 8.71 (2H, brs)， 8.35 (1H, s)， 8.27 (1H, brs), 8.19 (1H, s), 6.72 (1H, brs)， 6.61 (1H, d， 7.8 Hz), 6.57 (1H, brd, 7.8 Hz), 5.87 (1H， d, 5，1 Hz), 5.40 (3H, m)， 4.61 (1H, m), 4.53 (2H， m), 4.13(1H, m)， 3.95 (1H, m), 3.66 (1H, m)， 3.54 (1H, m)。
实施例2: N、(3-甲氧基-4-羟基苄基)-腺苷的制备
第一步，称取3.04g3-甲氧基-4-羟基苯甲醛，2.52 g盐酸羟胺，3.26 g无 水乙酸钠，溶于80ml乙醇中。室温下，搅拌反应6小时。蒸干溶剂，用40ml 水溶解，乙酸乙酯萃取(40x3 ml)，蒸去乙酸乙酯，得淡黄色固体(3-甲氧基 -4-羟基苯甲醛月亏)2.99 g 。
第二步，2.99 g 3 -甲氧基-4-羟基苯甲醛肟溶于70 ml乙醇中，加700 mg 10% Pd/C， 8ml浓盐酸，常压氢化，得白色晶体(3-甲氧基-4-羟基苯甲胺盐酸盐) 3.31 g。
第三步，将3.31g3-甲氧基-4-羟基苯甲胺盐酸盐溶于70ml正丙醇中，加 1 g6-氯嘌昤核苷和14mliV,iV-二异丙基乙胺，加热至70。C,反应8小时。蒸 千溶剂，经硅胶柱色谱分离，用氯仿甲醇=15:1洗脱，得本标题化合物，为无 色结晶1.02 g。
正离子ESIMS w/z 404[M + H]+;负离子ESIMS附/z 402 [M — H]-和 438[M + Cir。 4丽R (300 MHz, DMSO): 8.78 (1H， s), 8.35 (1H, s)， 8.29 (1H, brs), 8.20 (1H, brs), 6.96 (1H, brs)， 6.72 (1H， brd, 7.8 Hz), 6.66 (1H, d, 7.8 Hz), 5.87 (1H, d， 6.3 Hz), 5.37-5.44 (2H, m)， 5.18 (IH， 4.5 Hz), 4.60 (2H, m)， 4.11 (2H, m), 3.95 (1H, m), 3.71 (3H, s), 3.66 (1H， m), 3.54 (1H, m)。
实施例3: N6-( 4-羟基苄基)-腺苷的制备
第一步，称取2.55g4-羟基苯甲醛，2.60g盐酸羟胺，3.40g无水乙酸钠， 溶于80ml乙醇中。室温下，搅拌反应6小时。蒸干溶剂，用40ml水溶解， 乙酸乙酯萃取(40x3ml)，蒸去乙酸乙酯，得淡黄色固体(4-羟基苯甲醛肟) 2.6"。
第二歩，2.66 g4-羟基苯甲醛月亏溶于70ml乙醇中，力[]300 mg 10% Pd/C， 8ml浓盐酸，常压氢化，得白色晶体(4-羟基苯甲胺盐酸盐)3.02 g。
14第三步，将3.02g4-羟基苯甲胺盐酸盐溶于70ml正丙醇中，加1 g 6-氯 嘌呤核苷和14mlMiV-二异丙基乙胺，加热至7(TC，反应8小时。蒸干溶剂， 无水乙醇重结晶，得本标题化合物，为无色结晶1.07g。
正离子ESIMS m/z 374[M + H]+、 396[M + Na]+和412[M + K]+;负离子 ESIMS m/z 372 [M - H].和408[M + Cl]—。 'HNMR (400 MHz, CD3OD): 8.19 (2H, s)， 7.16 (2H, d， 8.4 Hz)， 6.68 (2H， d, 8.4 Hz), 5.89 (IH, d, 6.4 Hz), 4.69 (IH, dd， 6.4, 5.2 Hz), 4.64 (2H, brs), 4.26 (IH, dd, 5.2, 2.4Hz)， 4.11 (IH, q, 2.4 Hz), 3.83 (IH, dd， 12.8, 2.4 Hz), 3.68 (IH， dd， 12.8, 2.4 Hz)。 13C NMR (100 MHz, CD3OD): 156.1, 156.0, 154.4， 152.3， 148.4, 139.8， 130.1, 128.5， 119.7, 114.8, 87.9, 85.8， 73.3, 70.6， 61.6, 42.3。
实施例4: N、苄基)-腺苷的制备
第一步，称取1.08g苯甲醛，1.29g盐酸羟胺，1.67g无水乙酸钠，溶 于40ml乙醇中。室温下，搅拌反应6小时。蒸干溶剂，用20ml水溶解，乙 酸乙酯萃取(20x3 ml)，蒸去乙酸乙酯，得淡黄色固体(苯甲醒肟)1.13 g 。
第二歩，1.13 g苯甲醛肟溶于40 ml乙醇中，力n 85 mg 10% Pd/C， 1 ml 浓盐酸，常压氢化，得白色晶体(苯甲胺盐酸盐)1.29 g。
第三步，将355 mg苯甲胺盐酸盐溶于40ml正丙醇中，加143 mg 6-氯嘌 呤核苷和2mlW，iV-二异丙基乙胺，加热至7(TC，反应8小时。蒸干溶剂，经 硅胶柱色谱分离，用氯仿甲醇=30:1洗脱，得本标题化合物，为无色固体151 mg。
正离子ESIMS w/z 358[M + H]+;负离子ESIMS m/z 356 [M - H]—和 392[M + C1]-。 iH廳R (300 MHz, CD3OD): 8.20 (1H, s), 8.18 (1H, brs), 7.14-7.34 (5H， m)， 5.90 (1H， d， 6.6 Hz)， 4.77 (2H, brs), 4.69 (1H， dd, 6.3, 5.4 Hz), 4.26 (1H， dd, 5.4, 2.4 Hz), 4.11 (1H， q， 2.4 Hz), 3.83 (IH, dd, 12.6, 2.4 Hz), 3.68 (IH, dd， 12.6, 2.4 Hz)。
实施例5: N、(吡啶-2-亚甲基)-腺苷的制备
第一步，称取1.09g2-吡啶甲醛，1.29g盐酸羟胺，1.67g无水乙酸钠， 溶于40ml乙醇中。室温下，搅拌反应6小时。蒸干溶剂，用20ml水溶解，乙酸乙酯萃取(20x3 ml)，蒸去乙酸乙酯，得淡黄色固体(2-吡啶甲醛躬)1.08 ' g c
第二步，1.08g2-吡啶甲醛肟溶于40ml乙醇中，加85mglO%Pd/C， 1 ml 浓盐酸，常压氢化，得白色晶体(2-吡啶甲胺盐酸盐)1.19 g。
第三步，将357 mg2-吡啶甲胺盐酸盐溶于40ml正丙醇中，加143 mg 6-氯嘌呤核苷和2ml7V，iV-二异丙基乙胺，加热至70。C，反应8小时。蒸干溶剂， 经硅胶柱色谱分离，用氯仿甲醇=30:1-15:1洗脱，得本标题化合物，为无色固 体119mg。
正离子ESIMS w/z 358[M + H]+。 'H NMR (300 MHz, CD3OD): 8.56 (1H, m), 8.39 (1H, m)， 8.22 (1H, s), 8.19 (1H， s), 7.89 (1H, brd, 7.8 Hz)， 7.39 (1H, dd, 7.8, 5.1 Hz)， 5.90 (1H， d， 6.3 Hz), 4.80 (2H, brs)， 4.69 (1H, dd, 6.3， 5.4 Hz), 4.27 (1H， dd， 5.4, 2.4 Hz), 4.11 (1H, q, 2.4 Hz)， 3.83 (1H, dd， 12.6, 2.4 Hz), 3.68 (1H, dd, 12.6, 2.4 Hz)。
实施例6: N、(吡啶-3-亚甲基)-腺苷的制备
第一步，称取1.09g3-吡啶甲醛，1.29g盐酸羟胺，1.67g无水乙酸钠， 溶于40ml乙醇中。室温下，搅拌反应6小时。蒸干溶剂，用20ml水溶解， 乙酸乙酯萃取(20x3 ml)，蒸去乙酸乙酯，得淡黄色固体(3-吡啶甲醛肟)1.03 g 。
第二步，1.03 g 3-吡啶甲醛肟溶于40 ml乙醇中，加85 mg 10% Pd/C， 1 ml 浓盐酸，常压氢化，得白色晶体(3-吡啶甲胺盐酸盐)1.16 g。
第三步，将357 mg3-吡啶甲胺盐酸盐溶于40ml正丙醇中，力[]143 mg 6-氯嘌呤核苷和2mliV，iV-二异丙基乙胺，加热至7(TC，反应8小时。蒸干溶剂， 经硅胶柱色谱分离，用氯仿甲醇=30:1-15:1洗脱，得本标题化合物，为无色固' 体114 mg。
正离子ESIMS w/z 358[M + H]+。 NMR (300 MHz, CD3OD): 8.45 (1H, m), 8.24 (1H, brs)， 8.17 (1H, s), 7.74 (1H， td, 7.8， 1.8 Hz), 7.38 (1H， brd， 7.8 Hz), 7.26 (!H, m), 5.92 (1H， d, 6.6 Hz), 4.88 (2H， brs), 4.69 (1H, dd, 6.3, 5.4 Hz), 4.27 (IH， dd， 5.4, 2.4 Hz), 4.11 (1H, q, 2.4 Hz), 3.83 (1H, dd, 12.3, 2.4 Hz), 3.68 (1H, dd, 12.3, 2.4 Hz)。实施例7: N、(异丁基)-腺苷的制备
HO OH
第一步，称取苯并三氮唑148 mg，异丁醛108 mg，腺苷251 mg置于100 ml三颈瓶中，加40ml无水乙醇和催化量冰醋酸，接加液漏斗(内装4A分子 筛)，接冷凝管，加热至90。C回流，反应14h。期间，每30min补加异丁醛 lml。蒸去溶剂得粘稠液体，经硅胶柱色谱分离，用氯仿:甲醇=30:1-15:1洗脱， 得白色固体368 mg，产率85%。
第二步，将368 mg第一步产物置于100 ml三颈瓶中，加191 mg NaBH4, 加60ml无水四氢呋喃，加热至80'C回流，反应8h。待反应液冷却至室温， 倒入冰水混合物中，用乙酸中和，用氯仿萃取。取氯仿层，经硅胶柱色谱分离， 用氯仿:甲醇30:l-15:l洗脱，得本标题化合物，为白色固体36mg,产率13.3%。
正离子ESIMS w/z 324[M + H]+;负离子ESIMS w/z 322 [M — H]-禾口 358[M + Cl]-。 & NMR (300 MHz, DMSO): 8.33 (1H, s), 8.18 (1H, brs), 7.92 (1H, brs), 5.86 (1H, d, 6.3 Hz), 5.42 (2H, d, 5.1 Hz)， 5.17 (1H, m)， 4.61 (1H, m), 4.13 (1H, m), 3.95 (1H， m), 3.68 (1H, m), 3.55 (1H， m), 3.29 (2H, m), 1.95 (1H, m), 0.87 (6H, d, 6.6 Hz)。
实施例8: N、(环己基-亚甲基+腺苷的制备
HO OH
第一步，称取苯并三氮唑148mg， 环己基甲醛168mg，腺苷251mg置
17于100 ml三颈瓶中，加40 ml无水乙醇和催化量冰醋酸，接加液漏斗(内装 4A分子筛)，接冷凝管，加热至9(TC回流，反应14h。蒸去溶剂得粘稠液体， 经硅胶柱色谱分离，用氯仿:甲醇=30'.1-15:1洗脱，得白色固体219 mg，产率 48.5%
第二步，将152mg第一步产物置于100ml三颈瓶中，加73mgNaBH4,加 60ml无水四氢呋喃，加热至90'C回流，反应8h。待反应液冷却至室温，倒 入冰水混合物中，用乙酸中和，用氯仿萃取。取氯仿层，经硅胶柱色谱分离， 用氯仿:甲醇=30:1-15:1洗脱，得白色固体65mg，产率58.3%。
正离子ESIMS w/z 364[M + H]+;负离子ESIMS w/z 362 [M - H]-和 398[M + Cl]-。 'H丽R (300 MHz, DMSO): 8.32 (1H, s), 8.18 (1H, brs), 7.88 (1H, brs), 5.86 (1H, d， 6.3 Hz), 5.42 (2H, d, 6.0 Hz), 5.17 (1H, d， 5.1 Hz)， 4.61 (1H, m)， 4.13 (1H， m), 3.95 (1H， m)， 3.66 (1H， m)， 3.51 (1H, m), 3.32 (2H, m), 0.89-1.71 (11H, m)。
实施例9: N、2-硝基苄基)-腺苷的制备
第一步，称取苯并三氮唑148 mg， 2-硝基苯甲醛226 mg，腺苷251 mg 置于100ml三颈瓶中，加40ml无水乙醇和催化量冰醋酸，接加液漏斗(内装 4A分子筛)，接冷凝管，加热至卯'C回流，反应14h。蒸去溶剂得粘稠液体， 经硅胶柱色谱分离，用氯仿:甲醇=30:1-15:1洗脱，得白色固体133 mg，产率 27.3%。
第二步，将105mg第一步产物置于100ml三颈瓶中，加46mgNaBH4，加 60ml无水四氢呋喃，加热至9(TC回流，反应8h。待反应液冷却至室温，倒 入冰水混合物中，用乙酸中和，用氯仿萃取。取氯仿层，经硅胶柱色谱分离， 用氯仿:甲醇=30:1-15:1洗脱，得白色固体22mg，产率27.1%。
正离子ESIMS w/z 403[M + H]+。 NMR (300 MHz， DMSO): 8.52 (2H, brs), 8.43 (1H， brs), 8.16 (1H, s)， 8.04 (1H, dd, 8.1, 1.2 Hz), 7.66 (1H, td, 8.1, 1.2 Hz), 7.46-7.54 (2H， m)， 6.57 (1H, brd， 7.8 Hz), 5.89 (1H, d, 5,7 Hz)， 5.44 (1H， d, 6.0 Hz), 5.32 (1H, t, 6.0 Hz)， 5.19 (1H, d, 5.1 Hz), 4.98 (1H, m), 4.62 (1H, m), 4.06-4.15 (2H, m), 3.96 (1H， m), 3.68 (1H, m), 3.55 (1H, m)。药理实验
实施例1: N^取代的嘌啉和腺苷类衍生腹腔给药对小鼠自主活动的影响
雄性昆明种小鼠，18 20g，随机分组，对照组腹腔注射生理盐水0.1mg/kg， 其余各组腹腔注射给受试物；观察并记录5 min内各组小鼠自主活动的次数。
结果见表1。
表l腹腔给药对小鼠自主活动的影响U=7-10， S±SE)
- - 剂虽(mg/kg) fi Jk活动次数~"~减少率(％)
对照组 一 145 ±7 —
N6-(4羟基苄基)-腺苷 1 82 ±9* 43
N6-(节基)-腺苷 1 148 ±20 —2
N6-(3-甲氧基-4-羟基苄基)-腺苷 1 21 ±8*** 86
#-(吡啶-3-亚甲基)-腺苷 1 67 ±19* 54
N6-(3,4—二羟基苄基)-腺苷 1 31 ±4*** 79
N6-(异丁基-亚甲基)-腺苷 1 55±7* 62
N6-(环己基)-腺苷 1 91土13 37
唑吡坦(Zolpidem) 2 45±11*** 59
与对照组比较，*p<0.05， **p<0.01, ***p<0.005， ？-"W。
实施例2: N、取代的嘌啉和腺苷类衍生灌胃给药灌胃对小鼠自主活动的影响
雄性昆明种小鼠，18 20g，随机分组，对照组灌胃生理盐水0.1mg/kg， 其余各组灌胃给受试物；观察并记录15min内各组小鼠自主活动的次数。
结果见表2.
表2 灌胃对小鼠自主活动的影响(n=7-12， ；±SE)
剂量(mg/kg)自主活动次数减少率(％)
对照组一165±29一
N6-(4羟基苄基)-腺苷5153±507
N、(苄基)-腺苷4132土18一14
N、3-甲氧基-4-羟基苄基)-腺苷464±14*45
N、吡啶-3-亚甲基)-腺苷4112±123
N、(3,4-二羟基苄基)-腺苷459 ±18*49
与对照组比较，*p<0.05，WM.
19实施例3: N、取代的嘌啉和腺苷类衍生物腹腔给药协同戊巴比妥钠诱导小鼠入睡试 验
雄性昆明种小鼠，18 20g，随机分组，对照组腹腔注射生理盐水0.1mg/kg， 其余各组腹腔注射给受试物；给药后30min，各组腹腔注射戊巴比妥钠睡眠最 大阈下剂量23mg/kg,观察并记录15 min内各组小鼠入睡只数。
结果见表3。
表3腹腔给药协同戊巴比妥钠诱导小鼠入睡试验(n=7-12， S±SE)
1 5/8** 63
1 0/7 0
1 7/7*** 100
1 2/7 28
1 7/8*** 87
1 2/12 17 '
1 0/10 0
2 6/8*** 75 与对照组比较，**p<0.01，***p<0.005。
~ "~
对照组 N6-(4羟基苄基)-腺苷 N"苄基)-腺苷 N6-(3-甲氧基-4-羟基苄基)-腺苷 N"吡啶-3-亚甲基)-腺苷 N、(3,4-二羟基苄基)-腺苷 N、异丁基-亚甲基)-腺苷 N、(环己基)-腺苷 唑吡坦(Zolpidem)
实施例4: N、取代的嘌啉和腺苷类衍生物口服给药协同戊巴比妥钠诱导小鼠入睡试
验
雄性昆明种小鼠，18 20g，随机分组，对照组灌胃给生理盐水0.1mg/kg, 其余各组灌胃给受试物；给药后30min，各组腹腔注射戊巴比妥钠睡眠最大阈 下剂量23mg/kg，观察并记录15 min内各组小鼠入睡只数。结果见表4。
表4 口服给药协同戊巴比妥钠诱导小鼠入睡试验(n=7-10， ；c土SE)
齐U量(mg/kg)入睡只数/总只数入睡率(％)
对照组一0/100
N6-(4羟基苄基)-腺苷53/1030
N、苄基)-腺苷40/70
N、(3-甲氧基-4-羟基苄基)-腺苷471
N"吡啶-3-亚甲基)-腺苷40/70
N、(3,4-二羟基苄基)-腺苷45/7**71
与对照组比较，**p<0.01。
实施例5: N、取代的嘌啉和腺苷类衍生物口服或腹腔给药对戊巴比妥钠诱导的小鼠
睡眠时间的影响
雄性昆明种小鼠，18 20g，随机分组。对照组灌胃给生理盐水0.1mg/kg， 其余各组灌胃或腹腔注射给受试物；给药后30min，各组腹腔注射戊巴比妥钠 阈上睡眠剂量39mg/kg，观察并记录各组小鼠入睡潜伏期和睡眠持续时间。
结果见表5。
表5药物对戊巴比妥钠诱导的小鼠睡眠时间的影响(S士SE)
剂量 (mg/kg)
潜伏期 (min)
缩短率 (%)
睡眠时间 (min)
延长率 (%)
对照组 N6-(3，4-二羟基苄基)-腺
苷
N6-(3-甲氧基-4-羟基苄
基)-腺苷 NS-(4轻基苄基)-腺苷
4 (p.o.)
4 (p.o.) 1 (i.P.)
5. 0±0. 6 3. 7±0. 3
3. 7±0. 1 3. 4±0. 3
25
26 33
31. 9±3. 8 55. 5±6. 5
74
59. 7±9. 4 87 60.5±6,6 90
N=8.与对照组比较，*p<0.05 "p<0.01。
2权利要求
1、如通式(I)所示的N6-取代腺苷衍生物其中，R选自取代或非取代的苯基、取代或非取代的含有1-2个杂原子的五元或六元杂环、C1-6烷基、C3-8环烷基；苯基、五元杂环、六元杂环上的取代基选自H、OH、C1-4烷基、C1-4烷氧基、NH2、NO2、卤素。
2、根据权利要求l的化合物，其特征在于，所述的化合物选自(Ia) 个3<formula>formula see original document page 2</formula>(Ia)其中，R^ Rs各自独立的选自H、 OH、 Cl-4烷基、Cl-4烷氧基、NH2、 N02、 Cl、 Br或F。
3、根据权利要求l的化合物，其特征在于，所述的化合物选自(Ib)<formula>formula see original document page 3</formula>其中,R! R4各自独立的选自H、 OH、 Cl-4垸基、Cl-4烷氧基、NH2、 N02、 Cl、 Br或F。
4、根据权利要求l的化合物，其特征在于，所述的化合物选自(Ic)<formula>formula see original document page 3</formula>其中,R! R4各自独立的选自H、 OH、 Cl-4烷基、Cl-4烷氧基、NH2、 N02、 Cl、 Br或F。
5、根据权利要求l的化合物，其特征在于，所述的化合物选自(Id)<formula>formula see original document page 4</formula>其中,R! R4各自独立的选自H、 OH、 Cl-4垸基、Cl-4烷氧基、NH2、 N02、 Cl、 Br或F。
6、根据权利要求l的化合物，其特征在于，所述的化合物选自(Ie)HO OH (Ie)其中，X选自O、 N和S。
7、根据权利要求l的化合物，其特征在于，所述的化合物选自N、(3，4-二羟基苄基)-腺苷 N、(3-甲氧基-4-羟基苄基)-腺苷 N6-( 4-羟基苄基)-腺苷N、苄基)-腺苷N、吡啶-2-亚甲基)-腺苷N、(吡啶-3-亚甲基)-腺苷N、异丁基)-腺苷 N、(环己基)-腺苷 N6-(2-硝基苄基)-腺苷。
8、 制备权利要求l-7中任一所述的化合物，其特征在于，包括如下步骤如下:第一步，苯甲醛衍生物与盐酸羟胺反应得到苯甲醛衍生物的肟； 第二步，将上步得到的苯甲醛衍生物的肟氢化得苯甲胺衍生物的盐酸盐； 第三步，苯甲胺衍生物的盐酸盐和6-氯嘌呤核苷反应制备最终产物。
9、 制备权利要求l-7中任一所述的化合物，其特征在于，包括如下步骤如下:第一步，将苯并三氮唑、苯甲醛衍生物和腺苷反应制备第一步产物； 第二步，将第一步得到的产物和NaBH4反应制备最终产物。
10、 一种药物组合物，其中含有治疗有效量的权利要求1-7中任一所述的化 合物，以及药学上可接受的载体。
11、 权利要求l-7任一所述的化合物在制备治疗镇静催眠、抗惊厥、抗癫痫、 抗帕金森氏疾病和痴呆疾病的产品中的应用。
全文摘要
本发明公开了N6-取代腺苷衍生物、其制法以及药物组合物与用途，具体涉及如通式(I)所示的一类N6-取代腺苷衍生物，这类化合物的两种制备方法，这类化合物的作为有效成分的药物组合物，及这类化合物在作为制备治疗镇静催眠、抗惊厥、抗癫痫、抗帕金森氏疾病和痴呆药物、保健品中的应用。
文档编号A61P25/00GK101602786SQ20081011459
公开日2009年12月16日 申请日期2008年6月10日 优先权日2008年6月10日
发明者张建军, 徐瑞明, 朱承根, 敏 李, 杨永春, 樊晓娜, 王亚芳, 石建功, 訾佳辰 申请人:中国医学科学院药物研究所