专利名称：具有延长的半衰期的因子ix缀合物的制作方法
具有班长的半衰期的因子IX缀合物1.发明领域本发明涉及因子IX的生物相容性聚合物缀合物、含有因子IX缀合物的组合物以 及使用因子IX缀合物治疗血友病的方法。2.发明概述本申请者已确定重组因子IX(在本文中称为FIX)的制备可通过将FIX缀合至一 个或多个生物相容性聚合物以使可将FIX与因子IXa(在本文中称为FIXa)有效分离来增 强。增强的制备性质还包括产生高纯度FIX缀合物的能力。FIX缀合物可以提供治疗益处，例如，当与未缀合的FIX相比时。此类治疗益处包 括但不限于增加的循环半衰期、减少的免疫原性、更高的活性、更低的剂量需要以及允许可 选择的施用途径(例如，皮下施用)。如本文中所使用的，术语“因子IX缀合物”或“FIX缀合物”是指经修饰包含 生物相容性聚合物的部分(该部分导致与未修饰因子IX相比改善的药物动力学特性 (pharmacokinetic profile))的因子IX。药物动力学特性的改善可被观察为一个或多个 下列参数的改善效力(potency)、稳定性、曲线下面积和循环半衰期。在特定的实施方案中，本文中所描述的高纯度FIX缀合物基本上不含FIXa。考虑 到FIX组合物的污染物，根据Gray等人Thromb. Haemost. 1995 Apr ；73(4) :675-9)(通过引 用合并入本文)，甚至痕量的FMa可导致危险的血栓形成。如本文中所使用的，术语“基本上不含FMa的”在纯化FIX和FIX缀合物的上下 文中，是指低于 Iu FIXa/1000 IU FIX 的 FIXa 的量。按照 Gray 等人 Thromb. Haemost. 1995 Apr ；73 (4) :675-9中描述的技术可测量小浓度的FDCa。在一些实施方案中，FDCa污染物的 量可低于0.5 u FIXa/1000IU FIX。在一些实施方案中，FMa污染物的量可低物于0. 25u FIXa/1000IU FIX。在一些实施方案中，FIXa 的量可低于 0. Iu FIXa/1000IU FIX。具有生物相容性聚合物的缀合FIX增强FIX缀合物与FMa的可分离性，从而增强 药物组合物中FIX的利用。此外，生物相容性部分可保护FIX免受降解和抗体应答。FIX缀 合物可具有延长的循环半衰期，这可导致剂量节约效应(dose-sparing effect)和更少的 施用频率。在特定的实施方案中，将FIX缀合至一个或多个聚乙二醇(PEG)部分。在另一 个特定的实施方案，将FIX缀合至一个或多个多聚唾液酸部分。在另一个特定的实施方案 中，将FIX缀合至白蛋白。因此在第一方面，本发明表征了通过一个或多个半胱氨酸残基缀合至FIX的一个 或多个生物相容性聚合物。在实施方案中，通过一个或多个半胱氨酸残基将一个或多个PEG 部分缀合至FIX。在一个实施方案中，可将FIX缀合物的生物相容性聚合物部分结合至在FIX上形 成二硫键的两个半胱氨酸残基。因此，含有PEG的连接体桥接二硫键。在特定的实施方案 中，按照通式I将生物相容性聚合物缀合至FIX
权利要求
1.因子IX-聚乙二醇(FIX-PEG)缀合物，其中一个或多个聚乙二醇基团通过半胱氨酸 残基被连接至因子IX。
2.因子IX-聚乙二醇(FIX-PEG)缀合物，其中一个或多个聚乙二醇基团通过一个或多 个还原的半胱氨酸二硫键结合至因子IX。
3.权利要求2的FIX-PEG缀合物，其中一个或多个含有PEG的部分按照下式桥接一个 或多个半胱氨酸二硫键
4.权利要求3的FIX-PEG缀合物，其中所述一个或多个含有PEG的部分按照下式桥接 一个或多个半胱氨酸二硫键
5.权利要求1、2、3或4的FIX-PEG缀合物，其中所述一个或多个含有PEG的部分具有 大约IOkDa的分子量。
6.权利要求1、2、3、4或5的FIX-PEG缀合物，其具有1个含PEG的部分。
7.权利要求1、2、3、4或5的FIX-PEG缀合物，具有2个含PEG的部分。
8.包含权利要求1至7的任一项的缀合物的组合物，其中所述组合物还包含药学上可 接受的稀释剂、佐剂或载体。
9.权利要求8的组合物，其中组合物已被配制用于胃肠外施用。
10.权利要求9的组合物，其适合用于皮内、皮下和肌内注射以及静脉内或骨内输注。
11.包含权利要求1至7的任一项的缀合物的组合物，其采用溶液、悬浮液或乳剂的形式。
12.权利要求1至7的任一项的缀合物，其中与未修饰的FIX相比，所述FIX-PEG缀合 物具有更长的半衰期。
13.权利要求1至7的任一项的缀合物，其中与未修饰的FIX相比，所述FIX-PEG缀合 物具有更高的AUC。
14.权利要求1至7的任一项的缀合物，其中与未修饰的FIX相比，所述FIX-PEG缀合 物具有更高的生物利用度。
15.用于治疗血友病B的方法，其包括给有此需要的患者施用药物组合物，所述药物组合物包含权利要求1至7的任一项的FIX-PEG缀合物和药学上可接受的稀释剂、佐剂或载 体。
16.减少具有血友病B的哺乳动物中关节积血、大出血、消化道出血和月经过多的风险 的方法，其包括给有此需要的患者施用药物组合物，所述药物组合物包含权利要求1至7的 任一项的FIX-PEG缀合物和药学上可接受的稀释剂、佐剂或载体，其中组合物基本上不含 因子IXa。
17.权利要求16的方法，其中组合物的平均血栓评分在3个独立的实验后小于1。
18.权利要求16的方法，其中组合物的平均血栓评分在3个独立的实验后小于0.5。
19.权利要求16的方法，其中组合物的平均血栓评分在3个独立的实验后为0。
20.权利要求15的方法，其中皮下施用所述组合物。
21.权利要求15的方法，其中静脉内施用所述组合物。
22.权利要求15的方法，其中与包含可测的量的因子IXa的重组因子IX的组合物相 比，所述组合物导致减少的血栓形成发生率。
23.权利要求15的方法，其中每天1次施用所述组合物。
24.权利要求15的方法，其中每2天1次施用所述组合物。
25.权利要求15的方法，其中以IIU至10，000IU的剂量施用所述组合物。
26.权利要求15的方法，其中以200IU至2500IU的剂量施用所述组合物。
27.权利要求15的方法，其中以大约250IU、大约500IU、大约1000IU或大约2000IU的 剂量施用所述组合物。
28.权利要求15的方法，其中以使循环性因子IX活性的浓度为lIU/dL至150IU/dL的 剂量施用所述组合物。
29.权利要求15的方法，其中以使循环性因子IX活性的浓度为10IU/dL至120IU/dL 的剂量施用所述组合物。
30.权利要求15的方法，其中以使循环性因子IX活性的浓度为20IU/dL至100IU/dL 的剂量施用所述组合物。
全文摘要
本发明涉及经修饰的包含生物相容性聚合物部分的因子IX的缀合物。所述因子IX缀合物基本上无因子IXa污染。因子IX缀合物具有改善的药物动力学性质，例如增加的半衰期，这导致剂量节约和更低频率的施用。
文档编号A61K47/48GK102046205SQ200980119877
公开日2011年5月4日 申请日期2009年4月24日 优先权日2008年4月24日
发明者W·亨利 申请人:凯尔特药物Peg有限公司