专利名称：治疗咳喘病的中药组合物的检测方法
技术领域：
本发明涉及一种治疗咳喘病的中药组和物及其制备方法和质量控制方法，尤其涉及一种治疗肺肾气虚、痰热郁肺之咳喘，以及急慢性支气管炎、支气管哮喘的中药组和物及其制备方法和质量控制方法，属于中药技术领域。
背景技术：
咳喘病包括哮喘、气管炎等疾病，是一组世界范围内的常见病、疑难病。据世界卫生组织报道“哮喘对人类健康造成的危害和经济负担超过了结核病和艾滋病的总和。”因生态环境污染程度不断加重，哮喘的发病率和死亡率呈逐年增高趋势。目前全世界有哮喘病人1. 5亿 2亿人，而且这个数字还在继续增加，每年死于哮喘病的人达18万之多。其中我国哮喘发病率为 5%，约有3000万哮喘病人。近几年来，随着工业化程度的不断提高、大气污染的加重和化工工业的发展，哮喘的发病率有逐渐增加趋势。顽疾发作时临床表现为咳喘、气喘、痰多、胸闷、喉痒、干咳、呼吸困难、心悸多汗、严重烦燥、喘鸣有声、心跳紊乱、血压下降、甚至窒息死亡。在治疗咳喘病的药物中，化学药品只对症治疗无法根治，而多数中药疗程长，服用量大，疗效不稳定。
发明内容
本发明目的在于提供一种治疗咳喘病的中药组合物；本发明目的还在于提供一种治疗咳喘病的中药组合物的制备方法；本发明目的还在于提供一种治疗咳喘病的中药组合物的质量控制方法。本发明目的是通过如下技术方案实现的本发明所述的治疗咳喘病的中药组合物是由如下重量比的原料药制成的射干20-40重量份桔梗10-20重量份淫羊藿30_60重量份
黄芪30-50重量份麻黄(炙)10-20重量份地龙10_20重量份本发明所述的治疗咳喘病的中药组合物可以是由如下重量比的原料药制成的射干20-40重量份桔梗10-20重量份淫羊藿30_60重量份黄芪30-50重量份麻黄(炙)10-20重量份地龙10_20重量份淮山药20-40重量份葶苈子25-40重量份本发明所述的治疗咳喘病的中药组合物可以是由如下重量比的原料药制成的射干20-40重量份桔梗10-20重量份淫羊藿30_60重量份黄芪30-50重量份麻黄(炙)10-20重量份地龙10_20重量份淮山药20-40重量份知母10-30重量份
本发明所述的治疗咳喘病的中药组合物可以是由如下重量比的原料药制成的射干20-40重量份桔梗10-20重量份淫羊藿30_60重量份黄芪30-50重量份麻黄(炙)10-20重量份地龙10_20重量份淮山药20-40重量份山楂(生)60-80重量份本发明所述的治疗咳喘病的中药组合物可以是由如下重量比的原料药制成的射干20-40重量份桔梗10-20重量份淫羊藿30_60重量份黄芪30-50重量份麻黄(炙)10-20重量份地龙10_20重量份山楂(生)60-80重量份葶苈子25-40重量份本发明所述的治疗咳喘病的中药组合物可以是由如下重量比的原料药制成的射干20-40重量份桔梗10-20重量份淫羊藿30_60重量份黄芪30-50重量份麻黄(炙)10-20重量份地龙10_20重量份山楂(生)60-80重量份蛤蚧5-15重量份本发明所述的治疗咳喘病的中药组合物可以是在上述原料药中加入鱼腥草 80-120重量份。本发明所述的治疗咳喘病的中药组合物可以是由如下重量比的原料药制成的
射干30重量份桔梗15重量份淫羊藿50重量份
山楂(生)75重量份葶苈子30重量份鱼腥草100重量份
黄芪45重量份麻黄(炙)15重量份地龙15重量份
淮山药30重量份知母15重量份蛤蚧10重量份本发明组方科学，黄芪，益气固表，地龙，清热平肝，通络平喘，利尿，二药相合扶正祛邪，标本兼固，为君主之药。淫羊霍、蛤蚧，补肾益肺，助肺纳气；鱼腥草、射干，清热解毒， 祛湿散结，知母清泻肺火，滋阴润肺，助主药清热化痰；炙麻黄质润镇咳平喘；六药均为臣药，共助主药专力主攻主症。佐以葶苈子，泻肺利水，助君臣之药化痰平喘；山楂，消食化积， 活血化淤，淮山药，补脾胃，益肺肾，助脾胃运化，而达到培土生金，宽胸消痞之效；桔梗，宣肺祛痰，行气活血，专入肺经，引诸药直达病所，为方中使药。全方使虚有所补，实有所祛，扶正祛邪，标本兼顾，使肺气得复，痰热得除，咳喘自平。本发明所述的治疗咳喘病的中药组合物制备方法为选取所述原料药药材，加水煎煮1-3次，每次1-3小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度为1. 15 1. 20 (500C )的浸膏，加入辅料，制成本领域各种常规制剂，如颗粒剂、胶囊剂、片剂、软胶囊、丸剂，即得。本发明所述的治疗咳喘病的中药组合物制备方法为选取所述原料药材，加水煎煮二次，第一次加10倍量的水煎煮2小时，第二次加8 倍量的水煎煮2小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度为1. 15 1. 20 (500C )的浸膏， 加淀粉，制粒，干燥，加入0. 5%的硬脂酸镁混合均勻，压片，用95%乙醇做溶剂配制8%的胃溶型包衣溶液，进风温度为40°C，喷液速度为25kg/h，包衣锅转速开始时选用4转/分的速度，随着薄膜衣层在素片表面的不断形成，再逐步增加转速，直到7转/分；喷液结束后， 用热风干燥20分钟，即得。本发明所述的治疗咳喘病的中药组合的质量控制方法包括如下鉴别方法和/或含量测定中的一种或几种鉴别A.取相当于原料药10_50g本发明药物组合物制剂内容物，研细，加甲醇40_80ml， 超声处理10-60分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水20-60ml使溶解，加正丁醇振摇提取三次， 每次20ml，合并正丁醇液，蒸干，残渣加Uml甲醇使溶解，作为供试品溶液。另取射干对照药材0. 5-2g，加甲醇10-20ml，超声处理20-60分钟，滤过，滤液浓缩至Iml作为对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验，吸取上述供试品溶液 3-10 μ 1，对照药材溶液1-5 μ 1，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水 (6-10 1-5 0.5-2)的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯OMnm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。B.取相当于原料药40_70g本发明药物组合物制剂内容物，研细，加三氯甲烷 10-40ml，超声处理10-60分钟，滤过，滤液浓缩至0. 5_&ι1，作为供试品溶液。另取地龙对照药材0. 5-2g，加三氯甲烷10-40ml，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2005 年版一部附录VI B)试验，吸取上述对照药材溶液3-10μ 1，供试品溶液5-20μ 1分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以环己烷-乙酸乙酯(8-12 0.5-2) 为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。C.取相当于原料药40_70g本发明药物组合物制剂内容物，研细，加1-3%氢氧化钾甲醇溶液40-60ml，称定重量，加热回流，保持微沸0. 5-2. 0小时，滤过，滤液加三氯甲烷-正丁醇(1-3 0.5-2)混合溶液提取1-3次，每次50ml，合并提取液，用正丁醇饱和的氨试液洗涤1-3次，每次30-50ml，弃去氨试液，三氯甲烷-正丁醇液蒸干，残渣加甲醇 0. 5-2. Oml使溶解，作为供试品溶液。另取黄芪甲苷对照品，加甲醇制成每Iml含0. 1-1. Omg 的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验，吸取供试品溶液10μ 1、对照品溶液1_5μ 1，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G 薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水(10-20 5-10 1-5) 10°C以下放置的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，100°C加热至斑点显色清晰。供试品色谱中， 在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。D.取相当于原料药5_20g本发明药物组合物制剂内容物，研细，加30-70%乙醇 30ml，加热回流10-50分钟，取出，放冷，滤过，滤液蒸至近干，加水l_5ml使溶解，加于聚酰胺柱(5g，柱径10 15mm)上，用水IOOml洗脱，弃去洗脱液，再用乙醇IOOml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加乙醇0. 5-2. Oml使溶解，作为供试品溶液。另取淫羊藿苷对照品，加乙醇制成每Iml含0.5-2. Omg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药黄2005年版一部附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各2 μ 1，分别点于同一聚酰胺薄膜上，以无水乙醇-水 (55 44)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的暗红色斑点。E.取相当于原料药20_40g本发明药物组合物制剂内容物，研细，加浓氨试液 2-8ml使湿润，加氯仿20-60ml，加热回流0. 5-2. 0小时，滤过，滤液蒸干，残渣加氯仿Iml 使溶解，作为供试品溶液。另取盐酸麻黄碱对照品，加氯仿制成每Iml含0. 5-2. Omg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验，吸取
8上述两种溶液各3-10 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以异丙醇-正丁醇-浓氨试液 (10-20 1-3 1-5)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以茚三酮试液，在105°C加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的红色斑点。F.取相当于原料药20_50g本发明药物组合物制剂内容物，加7%硫酸乙醇-水 (0.5-2.0 1-5)混合溶液40ml，加热回流1-5小时，放冷，加氯仿振摇提取1-3次，每次 10-30ml，合并氯仿液，加水20-40ml洗涤，弃去水液，氯仿液用无水硫酸钠脱水，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇l_3ml使溶解，加活性碳适量处理，滤过，滤液作为供试品溶液。另取桔梗对照药材0. 5-2. Og,同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各2-10 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-乙醚 (0.5-2.0 0.5-2.0)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105°C加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的主斑点。含量测定淫羊藿的含量测定色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水 (40-60 60-40)为流动相；检测波长为200-300nm。理论板数按淫羊藿苷峰计算应不低于 2000。对照品溶液的制备取淫羊藿苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每Iml含 0. 05-0. 5mg的溶液，即得。供试品溶液的制备取相当于原料药30_50g本发明药物组合物制剂内容物，研细，取约0. 5-2. Og,精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入稀乙醇10-20ml，称定重量，超声处理(功率250W，频率50kHz) 0. 5-2. 0小时，放冷，再称定重量，用稀乙醇补足减失的重量， 摇勻，滤过，取续滤液，即得。测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各2-10μ 1，注入液相色谱仪，测定，即得。本品每日服用剂量含淫羊藿以淫羊藿苷(C33H4tlO15)计，不得少于1. 0-5. Omgo本发明所述的治疗咳喘病的中药组合的质量控制方法包括如下鉴别方法和/或含量测定中的一种或几种鉴别Α.取相当于原料药37. 5g本发明药物组合物制剂内容物，研细，加甲醇50ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水40ml使溶解，加正丁醇振摇提取三次，每次20ml，合并正丁醇液，蒸干，残渣加2ml甲醇使溶解，作为供试品溶液。另取射干对照药材lg，加甲醇 15ml，超声处理30分钟，滤过，滤液浓缩至Iml作为对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验，吸取上述供试品溶液5μ 1，对照药材溶液2μ 1，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水(8 2.5 1)的下层溶液为展开剂， 展开，取出，晾干，置紫外光灯OMnm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。B.取相当于原料药56g本发明药物组合物制剂内容物，研细，加三氯甲烷30ml，超声处理30分钟，滤过，滤液浓缩至1ml，作为供试品溶液。另取地龙对照药材lg，加三氯甲烷 30ml，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验，吸取上述对照药材溶液5μ 1，供试品溶液10μ 1分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以环己烷-乙酸乙酯(9 1)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯 (365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。C.取相当于原料药56g本发明药物组合物制剂内容物，研细，加2%氢氧化钾甲醇溶液50ml，称定重量，加热回流，保持微沸1小时，滤过，滤液加三氯甲烷-正丁醇O 1) 混合溶液提取2次，每次50ml，合并提取液，用正丁醇饱和的氨试液洗涤2次，每次40ml，弃去氨试液，三氯甲烷-正丁醇液蒸干，残渣加甲醇Iml使溶解，作为供试品溶液。另取黄芪甲苷对照品，加甲醇制成每Iml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验，吸取供试品溶液10μ 1、对照品溶液2μ 1，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水(15 7 2) IO0C 以下放置的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，100°C加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。D.取相当于原料药Ilg本发明药物组合物制剂内容物，研细，加50%乙醇30ml， 加热回流30分钟，取出，放冷，滤过，滤液蒸至近干，加水3ml使溶解，加于聚酰胺柱(5g，柱径10 15mm)上，用水IOOml洗脱，弃去洗脱液，再用乙醇IOOml洗脱，收集洗脱液，蒸干， 残渣加乙醇Iml使溶解，作为供试品溶液。另取淫羊藿苷对照品，加乙醇制成每Iml含Img 的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药黄2000年版一部附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各2 μ 1，分别点于同一聚酰胺薄膜上，以无水乙醇-水(55 44)为展开剂， 展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的暗红色斑点。E.取相当于原料药37. 5g本发明药物组合物制剂内容物，研细，加浓氨试液細1使湿润，加氯仿40ml，加热回流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加氯仿Iml使溶解，作为供试品溶液。另取盐酸麻黄碱对照品，加氯仿制成每Iml含Img的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各5 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以异丙醇-正丁醇-浓氨试液(15 2 2.5)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以茚三酮试液，在105°C加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的红色斑点。F.取相当于原料药37. 5g本发明药物组合物制剂内容物，加7%硫酸乙醇-水 (1 幻混合溶液40ml，加热回流3小时，放冷，加氯仿振摇提取2次，每次20ml，合并氯仿液，加水30ml洗涤，弃去水液，氯仿液用无水硫酸钠脱水，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇2ml 使溶解，加活性碳适量处理，滤过，滤液作为供试品溶液。另取桔梗对照药材lg，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各6μ1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-乙醚(1 1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105°C加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的主斑点。含量测定淫羊藿的含量测定色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水 (53 47)为流动相；检测波长为270nm。理论板数按淫羊藿苷峰计算应不低于2000。
对照品溶液的制备取淫羊藿苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每Iml含0. Img 的溶液，即得。供试品溶液的制备取相当于原料药37. 5g本发明药物组合物制剂内容物，研细，取约lg，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入稀乙醇20ml，称定重量，超声处理(功率 250W,频率50kHz) 1小时，放冷，再称定重量，用稀乙醇补足减失的重量，摇勻，滤过，取续滤液，即得。测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5 μ 1，注入液相色谱仪，测定，即得。本品每日服用剂量含淫羊藿以淫羊藿苷(C33H4tlO15)计，不得少于2. 25mg。本发明组方科学，黄芪，益气固表，地龙，清热平肝，通络平喘，利尿，二药相合扶正祛邪，标本兼固，为君主之药。淫羊霍，补肾益精，助肺纳气，鱼腥草、射干，清热解毒，祛湿散结，助主药清热化痰，炙麻黄质润镇咳平喘。四药均为臣药，共助主药专力主攻主症，佐以葶苈子，泻肺利水，助君臣之药化痰平喘。山楂，消食化积，活血化淤，助脾胃运化，而达到培土生金，宽胸消痞之效，桔梗，宣肺祛痰，行气活血。专入肺经，引诸药直达病所，为方中使药全方使虚有所补实有所祛，扶正祛邪，标本兼顾，使肺气得复，痰热得除，咳喘自平。本发明组合物疗效确切，具有益气补肾，清肺化痰，止咳平喘的作用，对肺肾气虚、 痰热郁肺之咳喘，以及急慢性支气管炎、支气管哮喘见上述证候者有很好的疗效。通过与现有制剂的对比实验发现，本发明药物组合物具有突出的药效。本发明所提供的中药组合物的质量控制方法，是通过大量具体创造性试验筛选后得到，鉴别方法中通过对样品处理方法的筛选，展开剂的选择，使得鉴别专属性很好，而且方法经济适用、结果快速，并且对不同的薄层板都能应用。含量测定方法中通过对样品、供试品处理方法的筛选，展开剂的选择，使得含量测定方法可以很有效的对产品进行质量控制，并且用该方法测定的产品要相比其他方法测定的产品在药理效果上表现的更为稳定。
具体实施例方式下述实验例和实施例进一步说明但不下限于本发明实验例1.本发明中药组和物制备工艺的优选实验1、提取工艺研究1. 1水提加水量研究在原提取工艺中，没有规定加入的溶剂体积，但在实际生产过程中，加入的提取溶剂体积是重要参数，对提取的浸膏的质量有很大影响，故在研究过程中，对原提取工艺进行完善，以保证提取工艺的科学性和可控性。按施例3处方比例配置3份药材，每份187. 5g，分四组进行试验，第一组加水量6 倍量、4倍量，第二组加水量8倍量、6倍量，第三组加水量10倍量、8倍量，第四组加水量12 倍量、10倍量，合并煎液，滤过，分别浓缩成相对密度为1. 25 1. 30的清膏(75°C )，真空干燥，以干膏得率为指标，确定加水量。结果见表1:表1 水提加水量
权利要求
1. 一种治疗咳喘病的中药组合物制剂的检测方法，其特征在于该方法包括如下步骤 选取如下原料药射干20-40重量份桔梗10-20重量份淫羊藿30-60重量份黄芪30-50重量份麻黄(炙)10-20重量份地龙10-20重量份淮山药20-40重量份山楂(生)60-80重量份； 该检测方法包括如下鉴别方法和/或含量测定中的一种或几种 鉴别A.取相当于原料药10-50g该组合物制剂，研细，加甲醇40-80ml，超声处理10-60分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水20-60ml使溶解，加正丁醇振摇提取三次，每次20ml，合并正丁醇液，蒸干，残渣加l_3ml甲醇使溶解，作为供试品溶液；另取射干对照药材0. 5-2g，加甲醇10-20ml，超声处理20-60分钟，滤过，滤液浓缩至Iml作为对照药材溶液；照薄层色谱法 (中国药典2005年版一部附录VI B)试验，吸取上述供试品溶液3-10 μ 1，对照药材溶液 1-5 μ 1，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水(6-10 1-5 0.5-2) 的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯OMnm)下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；B.取相当于原料药40-70g该组合物制剂，研细，加三氯甲烷10-40ml，超声处理10-60 分钟，滤过，滤液浓缩至0. 5-aiil，作为供试品溶液；另取地龙对照药材0. 5-2g，加三氯甲烷 10-40ml,同法制成对照药材溶液；照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验，吸取上述对照药材溶液3-10 μ 1，供试品溶液5-20 μ 1分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以环己烷-乙酸乙酯(8-12 0.5-2)为展开剂，展开，取出， 晾干，置紫外光灯(365nm)下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；C.取相当于原料药40-70g该组合物制剂内容物，研细，加1-3%氢氧化钾甲醇溶液 40-60ml，称定重量，加热回流，保持微沸0. 5-2. 0小时，滤过，滤液加三氯甲烷-正丁醇 (1-3 0.5- 混合溶液提取1-3次，每次50ml，合并提取液，用正丁醇饱和的氨试液洗涤 1-3次，每次30-50ml，弃去氨试液，三氯甲烷-正丁醇液蒸干，残渣加甲醇0. 5-2. Oml使溶解，作为供试品溶液；另取黄芪甲苷对照品，加甲醇制成每Iml含0. 1-1. Omg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验，吸取供试品溶液 10μ 1、对照品溶液1_5μ 1，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上， 以三氯甲烷-甲醇-水(10-20 5-10 1-5) 10°C以下放置的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，100°C加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；D.取相当于原料药5-20g该组合物制剂内容物，研细，加30-70%乙醇30ml，加热回流 10-50分钟，取出，放冷，滤过，滤液蒸至近干，加水l_5ml使溶解，加于聚酰胺柱(5g，柱径 10 15mm)上，用水IOOml洗脱，弃去洗脱液，再用乙醇IOOml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加乙醇0. 5-2. Oml使溶解，作为供试品溶液；另取淫羊藿苷对照品，加乙醇制成每Iml含 0. 5-2. Omg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法(中国药黄2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各2 μ 1，分别点于同一聚酰胺薄膜上，以无水乙醇-水(55 44)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的暗红色斑点；E.取相当于原料药20-40g该组合物制剂内容物，研细，加浓氨试液2-8ml使湿润，加氯仿20-60ml，加热回流0. 5-2. 0小时，滤过，滤液蒸干，残渣加氯仿Iml使溶解，作为供试品溶液；另取盐酸麻黄碱对照品，加氯仿制成每Iml含0. 5-2. Omg的溶液，作为对照品溶液； 照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各3-10 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以异丙醇-正丁醇-浓氨试液(10-20 1-3 1-5)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以茚三酮试液，在105°C加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的红色斑点；F.取相当于原料药20-50g该组合物制剂内容物，加7%硫酸乙醇-水(0.5-2.0 1-5) 混合溶液40ml，加热回流1-5小时，放冷，加氯仿振摇提取1-3次，每次10_30ml，合并氯仿液，加水20-40ml洗涤，弃去水液，氯仿液用无水硫酸钠脱水，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇l_3ml使溶解，加活性碳适量处理，滤过，滤液作为供试品溶液；另取桔梗对照药材0. 5-2. Og,同法制成对照药材溶液；照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各2-10 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-乙醚 (0.5-2.0 0.5-2.0)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105°C加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的主斑点；含量测定淫羊藿的含量测定，色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水00-60 60-40)为流动相；检测波长为200-300nm;理论板数按淫羊藿苷峰计算应不低于2000 ；对照品溶液的制备取淫羊藿苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每Iml含0. 05-0. 5mg的溶液，即得；供试品溶液的制备取相当于原料药30_50g本发明药物组合物制剂内容物，研细，取约0. 5-2. 0g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入稀乙醇 10-20ml，称定重量，超声处理(功率250W，频率50kHz) 0. 5-2. 0小时，放冷，再称定重量，用稀乙醇补足减失的重量，摇勻，滤过，取续滤液，即得；测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各2-10 μ 1，注入液相色谱仪，测定，即得；本品每日服用剂量含淫羊藿以淫羊藿苷计，不得少于1. 0-5. Omg。
2.如权利要求1所述的组合物制剂的检测方法，其特征在于该方法包括如下鉴别方法和/或含量测定中的一种或几种鉴别方法Α.取相当于原料药37. 5g该组合物制剂，研细，加甲醇50ml，超声处理30分钟，滤过， 滤液蒸干，残渣加水40ml使溶解，加正丁醇振摇提取三次，每次20ml，合并正丁醇液，蒸干， 残渣加2ml甲醇使溶解，作为供试品溶液；另取射干对照药材lg，加甲醇15ml，超声处理30 分钟，滤过，滤液浓缩至Iml作为对照药材溶液；照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验，吸取上述供试品溶液5μ 1，对照药材溶液2μ 1，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水(8 2.5 1)的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯OMnm)下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；B.取相当于原料药56g该组合物制剂，研细，加三氯甲烷30ml，超声处理30分钟，滤过，滤液浓缩至1ml，作为供试品溶液；另取地龙对照药材lg，加三氯甲烷30ml，同法制成对照药材溶液；照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验，吸取上述对照药材溶液5μ 1，供试品溶液10μ 1分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上， 以环己烷-乙酸乙酯(9 1)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；C.取相当于原料药56g该组合物制剂，研细，加2%氢氧化钾甲醇溶液50ml，称定重量， 加热回流，保持微沸1小时，滤过，滤液加三氯甲烷-正丁醇O 1)混合溶液提取2次， 每次50ml，合并提取液，用正丁醇饱和的氨试液洗涤2次，每次40ml，弃去氨试液，三氯甲烷-正丁醇液蒸干，残渣加甲醇Iml使溶解，作为供试品溶液；另取黄芪甲苷对照品，加甲醇制成每Iml含0. 5mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取供试品溶液10μ 1、对照品溶液2μ 1，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水(15 7 2)10°C以下放置的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，100°C加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；D.取相当于原料药Ilg该组合物制剂，研细，加50%乙醇30ml，加热回流30分钟，取出，放冷，滤过，滤液蒸至近干，加水3ml使溶解，加于聚酰胺柱(5g，柱径10 15mm)上，用水IOOml洗脱，弃去洗脱液，再用乙醇IOOml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加乙醇Iml使溶解，作为供试品溶液；另取淫羊藿苷对照品，加乙醇制成每Iml含Img的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法(中国药黄2000年版一部附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各2 μ 1， 分别点于同一聚酰胺薄膜上，以无水乙醇-水(55 44)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的暗红色斑占.E.取相当于原料药37.5g该组合物制剂，研细，加浓氨试液使湿润，加氯仿40ml， 加热回流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加氯仿Iml使溶解，作为供试品溶液；另取盐酸麻黄碱对照品，加氯仿制成每Iml含Img的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法(中国药典 2000年版一部附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各5μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上， 以异丙醇-正丁醇-浓氨试液(15 2 2.5)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以茚三酮试液，在105°C加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的红色斑点；F.取相当于原料药37.5g该组合物制剂，加7%硫酸乙醇-水(1幻混合溶液40ml， 加热回流3小时，放冷，加氯仿振摇提取2次，每次20ml，合并氯仿液，加水30ml洗涤，弃去水液，氯仿液用无水硫酸钠脱水，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，加活性碳适量处理，滤过，滤液作为供试品溶液；另取桔梗对照药材lg，同法制成对照药材溶液；照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各6 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-乙醚(1 1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105°C加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的主斑点；含量测定方法为淫羊藿的含量测定，色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水(53 47)为流动相；检测波长为270nm;理论板数按淫羊藿苷峰计算应不低于2000 ；对照品溶液的制备取淫羊藿苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每Iml含0. Img的溶液，即得；供试品溶液的制备取相当于原料药37. 5g本发明药物组合物制剂内容物，研细，取约lg，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入稀乙醇20ml， 称定重量，超声处理(功率250W，频率50kHz) 1小时，放冷，再称定重量，用稀乙醇补足减失的重量，摇勻，滤过，取续滤液，即得；测定法，分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各 5μ1，注入液相色谱仪，测定，即得；本品每日服用剂量含淫羊藿以淫羊藿苷计，不得少于 2. 25mg。
3.如权利要求1所述的中药组合物的检测方法，其特征在于该药物组合物制剂的制备方法为淮山药、黄芪、地龙、山楂粉碎成100目细粉，其余药味加水煎煮二次，每次2小时， 合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度为1.05 1. 10(50°C)的浓缩液，用上述药粉泛丸，即得。
全文摘要
本发明公开了一种治疗咳喘病的中药组合物的检测方法。本发明中药组合物由射干、桔梗、淫羊藿、山楂(生)、等原料药组成，本发明组合物质量控制方法中采用高效液相色谱法对淫羊藿苷进行含量测定，对射干、桔梗、淫羊藿、黄芪、麻黄(炙)、地龙进行定性薄层鉴别。
文档编号A61P11/14GK102258665SQ201110149988
公开日2011年11月30日 申请日期2007年9月26日 优先权日2007年9月26日
发明者付建家, 付立家 申请人:北京亚东生物制药有限公司