专利名称：丹参提取物和红花提取物的提取方法及丹红口服制剂的制备方法
技术领域：
本发明涉及丹参和红花的提取方法及丹红制剂的制备方法。
背景技术：
丹红注射液是以中药丹参、红花为配方提取的复方制剂。中药丹参的主要功效是活血化瘀，而红花具有活血通络、祛瘀止痛之功效，二者均为治疗胸痹的常用药。丹红注射液能够明显缓解心绞痛症状，改善心肌缺血情况，为治疗冠心病、心绞痛、心肌梗塞、缺血性脑病、脑血栓等临床常用药物。但是现有的丹红注射液存在提取工艺不完善，有效成分提取不完全，混合提取成分过于复杂，中间体控制难度大，长期贮存后颜色变深并产生沉淀等技术问题，加之临床注射剂量大，导致临床应用上疗效不稳定或引起不良反应。现有中国专利号为ZL 200610U8647.8，发明名称为“丹红口服制剂及其制备方法”的专利，仍然是以丹参和红花为配方而制成的丹红口服制剂，其中丹参以丹参素为指标控制成分，红花以红花黄色素为指标控制成分。2010版中国药典规定的丹参药材的主要有效成分控制指标为丹酚酸B，规定丹酚酸B的药材最低含量为3. 0 %，并没有把丹参素做为丹参药材的有效成分控制指标，而且丹参药材中丹参素的含量比较低，仅为0. 30% 0. 70%。红花黄色素为红花中多种水溶性查尔酮成分的混合物，混合物做为控制指标成分含量测定准确性比较差。2010版中国药典规定的红花药材的主要有效成分控制指标为羟基红花黄色素A，规定羟基红花黄色素A的药材最低含量为1.0%，并没有把红花黄色素做红花药材的有效成分控制指标。因此现有丹红口服制剂成品的有效成分控制指标是不合理的。
发明内容
本发明的目的是提供一种丹参提取物和红花提取物的提取方法及丹红口服制剂的制备方法。丹参提取物的提取方法按如下步骤进行一、先向丹参药材饮片中加入丹参饮片质量12 16倍、质量浓度为40% 50%的乙醇，然后回流提取1. 5 3小时，滤出丹参药液，再向药渣加入药渣质量8 14倍、质量浓度为40% 50%的乙醇，回流提取1 2 小时，滤出丹参药液，合并两次提取的丹参药液，再减压浓缩成相对密度为1. 12 1. 24的丹参清膏；二、向丹参清膏中加入丹参清膏重量3 5倍的水，边加水边搅拌，室温下静置 12 M小时，再过滤，丹参滤液用盐酸调节pH值为2. 8 3. 2，得到丹参酸化滤液；三、将大孔吸附树脂柱用PH值为2. 8 3. 2的盐酸酸化，将步骤二得到的丹参酸化滤液上样于大孔吸附柱上，用7 8倍树脂体积的纯水冲洗杂质，再用质量浓度为40% 60%的乙醇洗脱，收集2 3倍树脂体积的丹参洗脱液，减压浓缩至相对密度为1. 08 1. 25的丹酚酸清膏，即得到丹酚酸B含量为85. 0% 95. 0%的丹参提取物。红花提取物的提取方法按如下步骤进行一、先向红花中加入质量为红花质量16 20倍、质量浓度为10% 20%的乙醇，加热至沸腾后停止加热，然后热浸30 60分钟，滤出红花药液，再向药渣加入质量为药渣质量14 18倍、质量浓度为10% 20%的乙醇，加热至沸腾后停止加热，然后热浸30 60分钟，滤出红花药液，合并两次滤出的红花药液，冷却至室温；二、红花药液用盐酸调节PH值至1. 9 2. 2，静置12 M小时，再过滤， 得到红花酸化滤液；三、将大孔吸附树脂柱用PH值为1. 9 2. 2的盐酸酸化，将步骤二得到的红花酸化滤液上样于大孔吸附柱上，用8 9倍树脂体积pH值为1. 9 2. 2的盐酸冲洗杂质，再用质量浓度为10% 20%的乙醇洗脱，收集5 7倍树脂体积的红花洗脱液，减压浓缩至相对密度为1. 12 1. 25的羟基红花黄色素清膏，即得羟基红花黄色素A含量为 40. 0% 70. 0%的红花提取物。用上述方法提取的丹参提取物和红花提取物制备丹红口服制剂的方法按如下进行丹参提取物和红花提取物均按照扣除水分后的质量比10 1 9进行混合，然后加入辅料制成口服剂型，即完成丹红口服制剂的制备；其中口服剂型为片剂、胶囊剂、滴丸剂、颗粒剂、丸剂或合剂；所述片剂为普通片、口腔崩解片、口腔分散片、分散片、缓释片、控释片、 泡腾片、口含片、舌下片或咀嚼片；所述胶囊剂为普通硬胶囊、缓释胶囊、控释胶囊或软胶囊；所述滴丸剂为缓释滴丸；所述颗粒剂为普通颗粒剂无糖型、普通颗粒剂有糖型或泡腾颗粒剂。本发明的丹参提取物的提取方法、红花提取物的提取方法及丹红口服制剂的制备方法具有以下优点1、丹酚酸B和羟基红花黄色素A是丹参和红花药材治疗心脑血管疾病的最主要有效成分，而且丹酚酸B和羟基红花黄色素A均为2010版中国药典丹参和红花药材主要有效成分含量测定指标，而且药材含量都比较高。因此本发明将丹酚酸B和羟基红花黄色素A 定为丹参提取物和红花提取物及其口服制剂成品的有效成分控制指标是非常科学合理的。2、丹参和红花均为单独提取，有效成分提取充分完全，有效地提高了产品的内在质量，提升和保证了中间体和成品质量的可控性。3、提高了有效成分纯度、减少了杂质，解决了注射液长期贮存后颜色易变深、产生沉淀等技术问题，并可保证疗效的基础上减小使用剂量，降低了注射液临床使用的风险。4、本发明丹参提取物和红花提取物的提取方法与现有中国专利申请号ZL 200710144744.0、申请日2007年12月04日、发明名称丹酚酸B和羟基红花黄色素A的提取方法及注射用丹红的制备方法的专利相比，提取方法有所简化、改进和提高；其中丹参提取物的提取方法比原有的成本有所降低，丹参提取物的丹酚酸B的含量由原来的80. 0% 以上提高到85. 0% 95. 0% ；红花提取物的提取方法比原有的更合理，红花提取物的羟基红花黄色素A的含量由原来的25. 0%以上提高到40. 0% 70. 0%。5、本发明的制备工艺操作过程比较简单、效率高、成本低，适合于工业化生产。
具体实施例方式具体实施方式
一本实施方式丹参提取物的提取方法按如下步骤进行一、先向丹参药材饮片中加入丹参饮片质量12 16倍、质量浓度为40% 50%的乙醇，然后回流提取1. 5 3小时，滤出丹参药液，再向药渣加入药渣质量8 14倍、质量浓度为40% 50%的乙醇，回流提取1 2小时，滤出丹参药液，合并两次提取的丹参药液，再减压浓缩成相对密度为1. 12 1. 24的丹参清膏；二、向丹参清膏中加入丹参清膏重量3 5倍的水， 边加水边搅拌，室温下静置12 M小时，再过滤，丹参滤液用盐酸调节pH值为2. 8 3. 2， 得到丹参酸化滤液；三、将大孔吸附树脂柱用PH值为2. 8 3. 2的盐酸酸化，将步骤二得到的丹参酸化滤液上样于大孔吸附柱上，用7 8倍树脂体积的纯水冲洗杂质，再用质量浓度为40% 60%的乙醇洗脱，收集2 3倍树脂体积的丹参洗脱液，减压浓缩至相对密度为 1. 08 1. 25的丹酚酸清膏，即得到丹酚酸B含量为85. 0% 95. 0%的丹参提取物。本实施方式步骤一中的丹参清膏的相对密度为40 60°C的条件下丹参清膏相对于水的密度；步骤三中的丹酚酸清膏的相对密度为40 60°C的条件下丹酚酸清膏相对于水的密度。本实施方式步骤二和三中盐酸的质量浓度均为3% 10%。
具体实施方式
二 本实施方式与具体实施方式
一的不同点是步骤一中先向丹参药材饮片中加入丹参饮片质量14倍、质量浓度为45%的乙醇，然后回流提取2. 5小时，滤出丹参药液，再向药渣加入药渣质量12倍、质量浓度为45%的乙醇，回流提取1. 5小时。其它步骤及参数与具体实施方式
一相同。
具体实施方式
三本实施方式与具体实施方式
一的不同点是步骤一中减压浓缩成相对密度为1. 2的丹参清膏。其它步骤及参数与具体实施方式
一相同。
具体实施方式
四本实施方式与具体实施方式
一的不同点是步骤二中向丹参清膏中加入丹参清膏重量4倍的水，边加水边搅拌，室温下静置18小时，再过滤，丹参滤液用盐酸调节PH值为3.0。其它步骤及参数与具体实施方式
一相同。
具体实施方式
五本实施方式与具体实施方式
一的不同点是步骤三中将大孔吸附树脂柱用PH值为3. 0的盐酸酸化。其它步骤及参数与具体实施方式
一相同。
具体实施方式
六本实施方式与具体实施方式
一的不同点是步骤三中用7. 5倍树脂体积的纯水冲洗杂质，再用质量浓度为50%的乙醇洗脱，收集2. 5倍树脂体积的丹参洗脱液，减压浓缩至相对密度为1. 2的丹酚酸清膏。其它步骤及参数与具体实施方式
一相同。
具体实施方式
七本实施方式与具体实施方式
一的不同点是步骤三中大孔吸附树脂的型号为HZ801、AB-8或D101。其它步骤及参数与具体实施方式
一相同。
具体实施方式
八本实施方式与具体实施方式
一的不同点是步骤三中大孔吸附树脂的重量为丹参酸化滤液重量的2倍。其它步骤及参数与具体实施方式
一相同。
具体实施方式
九本实施方式与具体实施方式
一的不同点是步骤三中上样流速为1个树脂体积/小时 1. 5个树脂体积/小时。其它步骤及参数与具体实施方式
一相同。
具体实施方式
十本实施方式与具体实施方式
一的不同点是步骤三中冲洗杂质的流速为1个树脂体积/小时 1. 5个树脂体积/小时。其它步骤及参数与具体实施方式
一相同。
具体实施方式
十一本实施方式与具体实施方式
一的不同点是步骤三中洗脱流速为ι个树脂体积/小时 1. 5个树脂体积/小时。其它步骤及参数与具体实施方式
一相同。
具体实施方式
十二 本实施方式红花提取物的提取方法按如下步骤进行一、先向红花中加入质量为红花质量16 20倍、质量浓度为10% 20%的乙醇，加热至沸腾后
6停止加热，然后热浸30 60分钟，滤出红花药液，再向药渣加入质量为药渣质量14 18 倍、质量浓度为10% 20%的乙醇，加热至沸腾后停止加热，然后热浸30 60分钟，滤出红花药液，合并两次滤出的红花药液，冷却至室温；二、红花药液用盐酸调节PH值至1. 9 2. 2，静置12 M小时，再过滤，得到红花酸化滤液；三、将大孔吸附树脂柱用pH值为1. 9 2. 2的盐酸酸化，将步骤二得到的红花酸化滤液上样于大孔吸附柱上，用8 9倍树脂体积 PH值为1. 9 2. 2的盐酸冲洗杂质，再用质量浓度为10% 20%的乙醇洗脱，收集5 7 倍树脂体积的红花洗脱液，减压浓缩至相对密度为112 1. 25的羟基红花黄色素清膏，即得羟基红花黄色素A含量为40. 0% 70. 0%的红花提取物。本实施方式步骤三中的羟基红花黄色素清膏的相对密度为40 60°C的条件下羟基红花黄色素清膏相对于水的密度。本实施方式步骤二和三中的盐酸质量浓度为3% 10%。
具体实施方式
十三本实施方式与具体实施方式
十二的不同点是步骤一中先先向红花中加入质量为红花质量18倍、质量浓度为15%的乙醇，加热至沸腾后停止加热，然后热浸50分钟，滤出红花药液，再向药渣加入质量为药渣质量16倍、质量浓度为15%的乙醇，加热至沸腾后停止加热，然后热浸50分钟。其它步骤及参数与具体实施方式
十二相同。
具体实施方式
是十四本实施方式与具体实施方式
十二的不同点是步骤二中红花药液用盐酸调节PH值至2. 0，静置18小时。其它步骤及参数与具体实施方式
十二相同。
具体实施方式
十五本实施方式与具体实施方式
十二的不同点是步骤三中将大孔吸附树脂柱用PH值为2. 0的盐酸酸化。其它步骤及参数与具体实施方式
十二相同。
具体实施方式
十六本实施方式与具体实施方式
十二的不同点是步骤三中用 8. 5倍树脂体积pH值为2. 0的盐酸冲洗杂质，再用质量浓度为15%的乙醇洗脱，收集6倍树脂体积的红花洗脱液，减压浓缩至相对密度为1. 2的羟基红花黄色素清膏。其它步骤及参数与具体实施方式
十二相同。
具体实施方式
十七本实施方式与具体实施方式
十二的不同点是步骤三中大孔吸附树脂的型号为X-5或D4020。其它步骤及参数与具体实施方式
十二相同。
具体实施方式
十八本实施方式与具体实施方式
十二的不同点是步骤三中大孔吸附树脂的重量为红花酸化滤液重量的4倍。其它步骤及参数与具体实施方式
十二相同。
具体实施方式
十九本实施方式与具体实施方式
十二的不同点是步骤三中上样流速为1个树脂体积/小时 1. 5个树脂体积/小时。其它步骤及参数与具体实施方式
十二相同。
具体实施方式
二十本实施方式与具体实施方式
十二的不同点是步骤三中冲洗杂质的流速为1个树脂体积/小时 1. 5个树脂体积/小时。其它步骤及参数与具体实施方式
十二相同。
具体实施方式
二十一本实施方式与具体实施方式
十二的不同点是步骤三中洗脱流速为1个树脂体积/小时 1. 5个树脂体积/小时。其它步骤及参数与具体实施方式
十二相同。
具体实施方式
二十二 本实施方式用具体实施方式
一提取的丹参提取物和具体实施方式
十二提取的红花提取物制备丹红口服制剂的方法按如下进行丹参提取物和红花提取物均按照扣除水分后的质量比10 1 9进行混合，然后加入辅料制成口服剂型，即完成丹红口服制剂的制备；其中口服剂型为片剂、胶囊剂、滴丸剂、颗粒剂、丸剂或合剂；所述片剂为普通片、口腔崩解片、口腔分散片、分散片、缓释片、控释片、泡腾片、口含片、舌下片或咀嚼片；所述胶囊剂为普通硬胶囊、缓释胶囊、控释胶囊或软胶囊；所述滴丸剂为缓释滴丸；所述颗粒剂为普通颗粒剂无糖型、普通颗粒剂有糖型或泡腾颗粒剂。
具体实施方式
二十三本实施方式与具体实施方式
二十二的不同点是丹参提取物和红花提取物均按照扣除水分后的质量比10 2进行混合。其它与具体实施方式
二十二相同。
具体实施方式
二十四本实施方式与具体实施方式
二十二的不同点是丹参提取物和红花提取物均按照扣除水分后的质量比10 5进行混合。其它与具体实施方式
二十二相同。
具体实施方式
二十五本实施方式与具体实施方式
二十二的不同点是丹参提取物和红花提取物均按照扣除水分后的质量比10 8进行混合。其它步骤及参数与具体实施方式
二十二相同。实验丹参提取物的提取方法按如下步骤进行一、先向丹参药材饮片中加入丹参饮片质量14倍、质量浓度为45%的乙醇，然后回流提取2小时，滤出丹参药液，再向药渣加入药渣质量12倍、质量浓度为45%的乙醇，回流提取1. 5小时，滤出丹参药液，合并两次提取的丹参药液，再减压浓缩成相对密度为1. 2的丹参清膏；二、向丹参清膏中加入丹参清膏重量 4倍的水，边加水边搅拌，室温下静置18小时，再过滤，丹参滤液用盐酸调节pH值为3. 0，得到丹参酸化滤液；三、将大孔吸附树脂柱用PH值为3. 0的盐酸酸化，将步骤二得到的丹参酸化滤液上样于大孔吸附柱上，用8倍树脂体积的纯水冲洗杂质，再用质量浓度为50%的乙醇洗脱，收集3倍树脂体积的丹参洗脱液，减压浓缩至相对密度为1. 2的丹酚酸清膏，即得到丹酚酸B含量为95. 0 %的丹参提取物。红花提取物的提取方法按如下步骤进行一、先向红花中加入质量为红花质量18 倍、质量浓度为15%的乙醇，加热至沸腾后停止加热，然后热浸50分钟，滤出红花药液，再向药渣加入质量为药渣质量16倍、质量浓度为15%的乙醇，加热至沸腾后停止加热，然后热浸50分钟，滤出红花药液，合并两次滤出的红花药液，冷却至室温；二、红花药液用盐酸调节PH值至2. 0，静置18小时，再过滤，得到红花酸化滤液；三、将大孔吸附树脂柱用pH值为2. 0的盐酸酸化，将步骤二得到的红花酸化滤液上样于大孔吸附柱上，用9倍树脂体积 pH值为2. 0的盐酸冲洗杂质，再用质量浓度为15%的乙醇洗脱，收集6倍树脂体积的红花洗脱液，减压浓缩至相对密度为1. 2的羟基红花黄色素清膏，即得羟基红花黄色素A含量为 70.0%的红花提取物。用上述方法提取的丹参提取物和红花提取物制备丹红口服制剂的方法按如下进行丹参提取物和红花提取物均按照扣除水分后的质量比10 1 9进行混合，然后加入辅料制成口服剂型，即完成丹红口服制剂的制备；其中口服剂型为片剂、胶囊剂、滴丸剂、颗粒剂、丸剂或合剂；所述片剂为普通片、口腔崩解片、口腔分散片、分散片、缓释片、控释片、 泡腾片、口含片、舌下片或咀嚼片；所述胶囊剂为普通硬胶囊、缓释胶囊、控释胶囊或软胶囊；所述滴丸剂为缓释滴丸；所述颗粒剂为普通颗粒剂无糖型、普通颗粒剂有糖型或泡腾颗粒剂。
所述口腔崩解片的制备如下一、取丹参提取物15g、红花提取物5g、微晶纤维素 50g、交联聚维酮25g、二氧化硅15g、甘露醇15g、阿斯巴甜9g和硬脂酸镁Ig ；二、将丹参提取物和红花提取物混合干燥后与微晶纤维素、交联聚维酮、二氧化硅充分混合，依次过40 目筛和20目筛各一次，然后加入甘露醇、阿斯巴甜、硬脂酸镁混合，依次过40目筛和20目筛各一次，再用Φ7. 5mm平膜压片即得。所述分散片的制备如下一、取丹参提取物30g、红花提取物10g、微晶纤维素 150g、二氧化硅15g、预交化淀粉40g、甘露醇20g、阿斯巴甜9g、聚维酮K3(12. 5% (乙醇水 =2:8) lmg、吐温_8010mg、桔子香精2g、羧甲基淀粉钠IOg和硬脂酸镁2g ；二、将丹参提取物、红花提取物、微晶纤维素、二氧化硅、预交化淀粉、甘露醇充分混合，加入吐温-80和聚维酮_，以观目筛制粒，在60°C以内的温度下通风干燥，干燥后用观目筛整粒后，加阿斯巴甜、桔子香精、羧甲基淀粉钠、硬脂酸镁混合均勻，再用ΦΙΙπιπι平膜压片即得。所述缓释片的制备如下一、将丹参提取物45g、红花提取物15g和乙基纤维素50g 混勻，加入体积浓度为50%的乙醇18ml，制粒，干燥，加硬脂酸镁Ig混勻，压制成丹红缓释制剂；二、取50g丙烯酸树脂I，以IOOOml体积浓度为75%的乙醇浸泡8小时，溶解，加入 15g柠檬酸三乙酯、15g吐温-80、20g钛白粉，搅勻，胶体磨研磨后过80号筛，获得胃肠溶衣液；三、用胃肠溶衣液对丹红缓释制剂进行喷雾包衣，干燥后即得。所述胶囊剂的制备如下一、取丹参提取物150g、红花提取物50g、微晶纤维素 20g、预交化淀粉50g、交联羧甲基纤维素钠20g、二氧化硅15g和1号硬胶囊1000粒；二、将丹参提取物，红花提取物混合在60°C以内的温度下通风干燥，然后加入微晶纤维素、预交化淀粉、交联羧甲基纤维素钠、二氧化硅混合均勻，依次过40目筛和20目筛各一次，灌1号硬胶囊即得。所述缓释胶囊的制备如下一、将丹参提取物45g、红花提取物15g和乙基纤维素 15g混勻，加入体积浓度为50%的乙醇15ml，制粒，干燥，整粒，然后加入硬脂酸镁lg，灌胶
囊即得。所述滴丸剂的制备如下将丹参提取物的干粉45g、红花提取物的干粉15g、水 60g、聚乙二醇4000 30g和聚乙二醇6000 160g溶化，然后通过北京长征天民高科技有限公司生产的TZDW-I型滴丸机的滴头滴入，以液体石蜡、甲基硅油或植物油为冷却剂的冷却剂中，吸除滴丸表面的冷却剂，干燥即得；其中滴头的滴管内径为3mm ；滴制温度为50_90°C ；滴制速度为40d/min ；冷却剂为液体石蜡，冷却剂温度为0°C ；滴头的滴管与冷却剂液面的距离为3cm ；采用上述的实验方法进行试验，结果如下采用中华人民共和国药典O010版)附录IK滴丸剂目录下进行重量差异限度测定，平均丸重29. 55mg，重量差异为4. 9% -5. 3%。所述普通颗粒剂无糖型的制备如下一、取丹参提取物的干粉75g、红花提取物的干粉25g、木糖醇600g、糊精180g、微晶纤维素100g、阿斯巴甜15g、桔子香精2g、二氧化硅 2g和2. 5%羧甲基纤维素钠水溶液；二、将丹参提取物的干粉、红花提取物的干粉、木糖醇、
9糊精混合均勻后，加2. 5%羧甲基纤维素钠水溶液制粒，颗粒控制在60-20目，在50-60°C下通风干燥，以20目筛整粒之后，加微晶纤维素、阿斯巴甜、桔子香精、二氧化硅混合均勻，分装为1000包即得。所述普通颗粒剂有糖型的制备如下一、取丹参提取物75g、红花提取物25g、糊精200g和蔗糖粉700g ；二、将丹参提取物、红花提取物、糊精、蔗糖混合制粒，颗粒控制在 60-20目，在50-60°C下通风干燥，以20目筛整粒后，分装1000包即得。所述合剂的制备如下一、取丹参提取物30g、红花提取物10g、蔗糖300g和苯甲酸钠4g ；二、将丹参提取物和红花提取物加入蒸馏水稀释至1000ml，再加入蔗糖和苯甲酸钠， 调勻分装100支即得。制得的丹红口服制剂进行如下药效学试验1、丹红口服制剂(丹红合剂)对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型的影响目的观察丹红合剂给药对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用。方法取健康雄性Wistar大鼠，适应性喂养一周后，按体重随机分为6组假手术组、模型组、丹红合剂低、中、高剂量组和阳性对照组。采用改进的ka Longa's大脑中动脉内栓线阻断法(MCAO)制备大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型，并于缺血1. 后进行再灌注。试验过程中，MCAO手术失败，造模不成功及Mh内死亡的动物均弃之不用，不足预定数额者按照随机抽样原则补齐动物并重新造模，并保证每组造模成功的动物数为8只。假手术组给予相应体积生理盐水，丹红合剂低、中、高组给药剂量分别为6ml -kg^.^ml - kg"1和 24ml · kg—1，阳性对照组给予丹红注射液，给药剂量为12ml · kg—1。各组于脑缺血前一周ig 给相应药物，连续5天，末次给药后即刻脑缺血。脑缺血1. 5h再灌注24h后，各组动物进行神经病学检查，继而断头取脑经TTC染色后测定缺血侧脑组织梗死体积。结果与假手术组相比，模型组大鼠局灶性脑缺血1. 5h再灌注损伤24h后神经功能缺损体征明显，缺血侧脑组织肉眼可见明显的乳白色梗死灶，并伴有水肿，同时缺血侧血管肿胀较明显，TTC染色可见明显的梗死灶，说明模型制备成功，满足本试验要求。与模型组相比，阳性对照组及各给药组缺血再灌注损伤大鼠的神经功能障碍均有改善，脑梗死体积明显缩小，缺血侧脑水肿程度减轻。阳性对照组脑梗死面积减小7. 88%，有明显统计学意义(P < 0. 05)。低剂量组脑梗死体积减小3. 75%，但无明显的统计学意义；中剂量组脑梗死体积降低12%，高剂量组降低15. 88%，两组均有明显统计学意义(P < 0. 05)。与阳性对照组比较，低、中剂量组无明显差异，高剂量组有统计学差异(P < 0.01)，比丹红注射液治疗效果好，具体实验数据见表1和表2。表1丹红合剂对大鼠神经行为学改变的影响
权利要求
1.丹参提取物的提取方法，其特征在于丹参提取物的提取方法按如下步骤进行一、 先向丹参药材饮片中加入丹参饮片质量12 16倍、质量浓度为40% 50%的乙醇，然后回流提取1. 5 3小时，滤出丹参药液，再向药渣加入药渣质量8 14倍、质量浓度为 40% 50%的乙醇，回流提取1 2小时，滤出丹参药液，合并两次提取的丹参药液，再减压浓缩成相对密度为1. 12 1. 24的丹参清膏；二、向丹参清膏中加入丹参清膏重量3 5倍的水，边加水边搅拌，室温下静置12 24小时，再过滤，丹参滤液用盐酸调节pH值为2. 8 3. 2，得到丹参酸化滤液；三、将大孔吸附树脂柱用pH值为2. 8 3. 2的盐酸酸化，将步骤二得到的丹参酸化滤液上样于大孔吸附柱上，用7 8倍树脂体积的纯水冲洗杂质，再用质量浓度为40% 60%的乙醇洗脱，收集2 3倍树脂体积的丹参洗脱液，减压浓缩至相对密度为1.08 1.25的丹酚酸清膏，即得到丹酚酸B含量为85.0% 95.0%的丹参提取物。
2.根据权利要求1所述的丹参提取物的提取方法，其特征在于步骤三中大孔吸附树脂的型号为HZ801、AB-8或D101。
3.根据权利要求1所述的丹参提取物的提取方法，其特征在于步骤三中大孔吸附树脂的重量为丹参酸化滤液重量的2倍。
4.红花提取物的提取方法，其特征在于红花提取物的提取方法按如下步骤进行一、 先向红花中加入质量为红花质量16 20倍、质量浓度为10% 20%的乙醇，加热至沸腾后停止加热，然后热浸30 60分钟，滤出红花药液，再向药渣加入质量为药渣质量14 18 倍、质量浓度为10% 20%的乙醇，加热至沸腾后停止加热，然后热浸30 60分钟，滤出红花药液，合并两次滤出的红花药液，冷却至室温；二、红花药液用盐酸调节PH值至1. 9 2. 2，静置12 24小时，再过滤，得到红花酸化滤液；三、将大孔吸附树脂柱用pH值为1. 9 2. 2的盐酸酸化，将步骤二得到的红花酸化滤液上样于大孔吸附柱上，用8 9倍树脂体积 PH值为1. 9 2. 2的盐酸冲洗杂质，再用质量浓度为10% 20%的乙醇洗脱，收集5 7 倍树脂体积的红花洗脱液，减压浓缩至相对密度为112 1. 25的羟基红花黄色素清膏，即得羟基红花黄色素A含量为40. 0% 70. 0%的红花提取物。
5.根据权利要求4所述的红花提取物的提取方法，其特征在于步骤三中大孔吸附树脂的型号为X-5或D4020。
6.根据权利要求4所述的红花提取物的提取方法，其特征在于步骤三中大孔吸附树脂的重量为红花酸化滤液重量的4倍。
7.用权利要求1提取的丹参提取物和权利要求4提取的红花提取物制备丹红口服制剂的方法，其特征在于制备丹红口服制剂的方法按如下进行丹参提取物和红花提取物均按照扣除水分后的质量比10 1 9进行混合，然后加入辅料制成口服剂型，即完成丹红口服制剂的制备；其中口服剂型为片剂、胶囊剂、滴丸剂、颗粒剂、丸剂或合剂；所述片剂为普通片、口腔崩解片、口腔分散片、分散片、缓释片、控释片、泡腾片、口含片、舌下片或咀嚼片； 所述胶囊剂为普通硬胶囊、缓释胶囊、控释胶囊或软胶囊；所述滴丸剂为缓释滴丸；所述颗粒剂为普通颗粒剂无糖型、普通颗粒剂有糖型或泡腾颗粒剂。
8.根据权利要求7所述的制备丹红口服制剂的方法，其特征在于丹参提取物和红花提取物均按照扣除水分后的质量比10 2进行混合。
9.根据权利要求7所述的制备丹红口服制剂的方法，其特征在于丹参提取物和红花提取物均按照扣除水分后的质量比10 5进行混合。
10.根据权利要求7所述的制备丹红口服制剂的方法，其特征在于丹参提取物和红花提取物均按照扣除水分后的质量比10 8进行混合。
全文摘要
丹参提取物和红花提取物的提取方法及丹红口服制剂的制备方法，它涉及丹参和红花的提取方法及丹红制剂的制备方法。丹参提取物的提取一、回流；二、酸化；三、吸附即得。红花提取物的提取一、煎煮；二、酸化；三、吸附即得。丹红口服制剂的制备丹参提取物和红花提取物混合后加辅料制成口服剂型，即完成。本发明丹参和红花均为单独提取，有效成分提取充分完全，有效地提高了产品的内在质量，提升和保证了中间体和成品质量的可控性；本发明丹红口服制剂中有效成分控制指标是非常科学合理的；本发明提高了有效成分纯度、减少了杂质，降低了注射液临床使用的风险；本发明制备工艺操作过程比较简单、效率高、成本低，适合于工业化生产。
文档编号A61K36/537GK102357118SQ20111034376
公开日2012年2月22日 申请日期2011年11月3日 优先权日2011年11月3日
发明者付饶, 任瑞涛, 冯文军, 吴志军, 李云涛, 李殿明, 王英新, 解黎雯 申请人:哈药集团中药二厂