专利名称：低银杏酚酸含量的银杏提取物(gbe)的制备工艺的制作方法
技术领域：
本发明涉及天然植物活性成分的提取技术，具体的说是一种低银杏酚酸含量的银杏提取物(GBE)的简易制备工艺。
背景技术：
现有的如专利申请号为03114826.3的专利申请中提到了制备低银杏酚酸含量的方法，但该制备方法中提取浓缩稀释沉降时，需在-1℃～20℃的条件下进行，这样使得生产的一般情况下，需加冷却系统，从而使成本增加；另一方面，为除去银杏酚酸，使成品中银杏酚酸的含量低于5ppm，在该专利中使用了市场上少用且价格较贵的除酸树脂DAD-1，使生产成本增加的同时，带来除酸树脂的额外的开发费用。
发明内容
为克服上述不足之处，本发明提供了一种低银杏酚酸含量的银杏提取物(GBE)的制备工艺，很好的解决了稀释沉降时的温度限制，其温度为环境温度，可以为-1℃～45℃，这样生产时无需冷却系统，同时沉降时无需静置，缩短了生产周期；另外本发明公开的方法无需特殊的除酸树脂，均采用国内市场上最为常见的苯乙烯型大孔吸附树脂，尤其是D101和AB-8，材料价廉易得。
实现本发明目的的技术方案包括以下步骤以银杏叶为原料①银杏叶用25％～95％乙醇或30％～100％甲醇提取，得提取液；②将提取液浓缩回收乙醇或甲醇，得浓缩液；③浓缩液加水或纯化水均匀稀释，稀释液用酸调pH值小于5后，过滤，得滤液；④滤液过大孔吸附树脂柱吸附；⑤吸附柱用含水乙醇或甲醇洗脱，得洗脱液；⑥洗脱液可按以下4种不同的工艺路线，分别制得低银杏酚酸含量的银杏提取物(a)洗脱液直接用低极性有机溶剂萃取，或部分浓缩后用低极性有机溶剂萃取；所得萃取液浓缩、干燥，得低银杏酚酸含量的银杏提取物；(b)洗脱液部分浓缩，加水稀释或不加水，稀释液或部分浓缩液过大孔吸附树脂柱吸附；而后用含水醇类溶剂洗脱，洗脱液浓缩、干燥，得低银杏酚酸含量的银杏提取物；(c)将洗脱液浓缩、干燥所得的银杏提取物为原料，用0％～95％乙醇或0～100％甲醇溶解，用低极性有机溶剂萃取，所得萃取液浓缩、干燥，得低银杏酚酸含量的银杏提取物；(d)将洗脱液浓缩、干燥所得的银杏提取物为原料，用0％～90％乙醇或0％～90％甲醇溶解，过大孔吸附树脂柱吸附；而后用含水醇类溶剂洗脱，洗脱液浓缩、干燥，得低银杏酚酸含量的银杏提取物。
其中步骤③中所述的酸，可用不同浓度的无机酸和有机酸，也可用酸性化合物或上述各种酸的混合物；步骤③中所述的过滤，其过滤方式可采取抽滤、离心过滤或板框压滤的过滤方式；步骤④和步骤⑥中的(b)、(d)所述的大孔吸附树脂均为非极性或弱极性的大孔吸附树脂，尤其是苯乙烯型大孔吸附树脂，更好的是D101和AB-8型大孔吸附树脂；步骤⑤中所述的洗脱，可先后分为两次洗脱，第一次用的溶媒为0％～35％甲醇或0％～35％乙醇洗脱，第二次用溶媒为30％～90％甲醇或30％～90％乙醇洗脱，得洗脱液；步骤⑥中的(b)、(d)所述的含水醇类溶剂是30％～90％甲醇或30％～90％乙醇；步骤⑥中的(b)、(d)中所述的低极性有机溶剂是乙醚、氯仿、二氯甲烷、石油醚、6号溶剂油、汽油、己烷、戊烷或庚烷，或是含有上述溶剂中的一种或多种的混合溶剂。
本发明提供的低银杏酚酸含量的银杏提取物(GBE)的制备工艺的有益效果有1、解决了稀释沉降时的温度限制，在常温下进行即可，无需特殊的除酸树脂，均采用国内市场上常见的价廉且应用已久的苯乙烯型大孔吸附树脂，尤其是D101和AB-8型大孔吸附树脂，降低了生产成本；2、工艺参数无须特别要求，容易实现产品的生产控制状态；3、整个工艺无须静置等耗时操作，缩短了生产周期且生产产品得率一般稳定在2.5～3.3％之间。
具体实施例方式
下面结合实施例对本发明作进一步说明，但本发明不仅限于实施例的内容。
实施例一取银杏叶25kg，用10、10、8倍量(溶剂体积比药材重量，以下情况同此)60％乙醇，70℃搅拌提取三次，时间分别为2h、2h、1h，放出提取液，合并浓缩至药材重量的1.5倍体积，加2倍体积的纯化水，用稀盐酸调pH值4.5～5.0，搅拌均匀，静置30min后经三足离心机离心，得离心液，离心液过AB-8型大孔吸附树脂吸附，依次用20％乙醇、80％乙醇洗脱，收集80％乙醇洗脱液，减压浓缩，温度50～60℃，浓缩至约0.4倍洗脱液体积，再过AB-8型大孔吸附树脂吸附，用70％乙醇洗脱，洗脱液减压浓缩、喷雾干燥，得低银杏酚酸含量的银杏提取物0.75kg。银杏总黄酮为32.6％、银杏内酯11.2％，银杏酚酸2.1ppm。树脂再生后可重复使用(以下情况同此)。
实施例二取银杏叶50kg，用12、10倍量70％乙醇，80℃搅拌提取二次，时间分别为2h、2h，放出提取液，合并浓缩至药材重量的2.0倍体积，加2倍体积的纯化水，用20％硫酸调pH1.0～2.0，搅拌均匀后，经高速离心机离心，得离心液，离心液过D101型大孔吸附树脂吸附，依次用15％乙醇、60％乙醇洗脱，收集60％乙醇洗脱液，减压浓缩，温度50～60℃，浓缩至约0.5倍洗脱液体积，再过D101型大孔吸附树脂，用70％乙醇洗脱，洗脱液减压浓缩、喷雾干燥，得低银杏酚酸含量的银杏提取物1.36kg。银杏总黄酮为30.8％、银杏内酯12.1％，银杏酚酸3.4ppm。
实施例三取银杏叶200kg，用12、10倍量80％乙醇，80℃搅拌提取二次，时间分别为2h、2h，放出提取液，合并浓缩至药材重量的1.6倍体积，加3倍体积的纯化水，用10％枸橼酸调pH3.0～3.5，搅拌均匀后，经板框压滤，得滤液，滤液过D101型大孔吸附树脂吸附，依次用10％乙醇、80％乙醇洗脱，收集80％乙醇洗脱液，减压浓缩，温度45～55℃，浓缩至约0.8倍洗脱液体积，加入等体积的石油醚(60～90℃)萃取，下层再加入0.5倍体积的石油醚(60～90℃)萃取，取下层减压浓缩、喷雾干燥，得低银杏酚酸含量的银杏提取物6.0kg。银杏总黄酮为29.68％、银杏内酯10.8％，银杏酚酸1.1ppm。
实施例四取银杏叶200kg，用12、10倍量80％甲醇，60℃搅拌提取二次，时间分别为2h、2h，放出提取液，合并浓缩至药材重量的2.1倍体积，加2.5倍体积的纯化水，用维生素C调pH2.0～2.5，搅拌均匀后，静置2h后，经三足离心机离心，得离心液，离心液过AB-8型大孔吸附树脂吸附，依次用25％乙醇、80％甲醇洗脱，收集80％甲醇洗脱液，减压浓缩，温度40～45℃，浓缩至约1.2倍洗脱液体积，加入等体积的6号溶剂油萃取，下层再加入0.8倍体积的6号溶剂油萃取，取下层减压浓缩、喷雾干燥，得低银杏酚酸含量的银杏提取物6.1kg。银杏总黄酮为32.2％、银杏内酯12.5％，银杏酚酸1.4ppm。
实施例五取银杏叶150kg，用10、8、8倍量60％甲醇，70℃搅拌提取三次，时间分别为2h、2h、1h，放出提取液，合并浓缩至药材重量的2.0倍体积，加2倍体积的纯化水，用硫酸铵调pH4.0～5.0，搅拌均匀，静置8h后，经高速机离心，得离心液，离心液过AB-8型大孔吸附树脂吸附，依次用30％甲醇、75％甲醇洗脱，收集75％甲醇洗脱液，加入0.8倍体积的己烷萃取，下层再加入0.8倍体积的己烷萃取，取下层减压浓缩、喷雾干燥，得低银杏酚酸含量的银杏提取物4.1kg。银杏总黄酮为32.7％、银杏内酯11.6％，银杏酚酸0.5ppm。
实施例六取银杏叶180kg，用12、10倍量80％甲醇，60℃搅拌提取二次，时间分别为2h、2h，放出提取液，合并浓缩至药材重量的2.0倍体积，加2倍体积的纯化水，用20％磷酸调pH3.0～4.0，搅拌均匀后，经三足离心机离心，得离心液，离心液过D101型大孔吸附树脂吸附，依次用水、20％乙醇、75％乙醇洗脱，收集75％乙醇洗脱液，减压浓缩，温度50～60℃，浓缩至约0.6倍洗脱液体积，再过AB-8型大孔吸附树脂，用70％乙醇洗脱，洗脱液减压浓缩、喷雾干燥，得低银杏酚酸含量的银杏提取物5.0kg。银杏总黄酮为34.8％、银杏内酯12.9％，银杏酚酸0.8ppm。
实施例七取银杏叶150kg，用10、10倍量75％甲醇，60℃搅拌提取二次，时间分别为2h、2h，放出提取液，合并浓缩至药材重量的2.0倍体积，加2倍体积的纯化水，用10％硫酸调pH2.0～3.0，搅拌均匀后，经高速离心机离心，得离心液，离心液过AB-8型大孔吸附树脂吸附，依次用水、15％乙醇、75％甲醇洗脱，收集75％甲醇洗脱液，减压浓缩，温度50～60℃，喷雾干燥，得银杏提取物4.7kg，其中银杏总黄酮为31.8％、银杏内酯13.2％，银杏酚酸7.9ppm。
取上述银杏提取物1kg，加15倍量60％甲醇溶解后，加入0.8、0.6倍体积量的石油醚(60～90℃)萃取两次，取下层液，浓缩、喷雾干燥得低银杏酚酸含量的银杏提取物0.94kg。银杏总黄酮为31.6％、银杏内酯13.7％，银杏酚酸0.7ppm。
取上述银杏提取物1kg，加入10倍量40％甲醇溶解，再加入等体积的纯水稀释后，过D101大孔吸附树脂吸附，依次用水、70％甲醇洗脱，70％甲醇洗脱液，减压浓缩、喷雾干燥，得低银杏酚酸含量的银杏提取物0.92kg。银杏总黄酮为33.8％、银杏内酯12.1％，银杏酚酸0.4ppm。
权利要求
1.低银杏酚酸含量的银杏提取物(GBE)的制备工艺，其特征在于它由以下步骤组成以银杏叶为原料①银杏叶用25％～95％乙醇或30％～100％甲醇提取，得提取液；②将提取液浓缩回收乙醇或甲醇，得浓缩液；③浓缩液加水或纯化水均匀稀释，稀释液用酸调pH值小于5后，过滤，得滤液；④滤液过大孔吸附树脂柱吸附；⑤吸附柱用含水乙醇或甲醇洗脱，得洗脱液；⑥洗脱液可按以下4种不同的工艺路线，分别制得低银杏酚酸含量的银杏提取物(a)洗脱液直接用低极性有机溶剂萃取，或部分浓缩后用低极性有机溶剂萃取；所得萃取液浓缩、干燥，得低银杏酚酸含量的银杏提取物；(b)洗脱液部分浓缩，加水稀释或不加水，稀释液或部分浓缩液过大孔吸附树脂柱吸附；而后用含水醇类溶剂洗脱，洗脱液浓缩、干燥，得低银杏酚酸含量的银杏提取物；(c)将洗脱液浓缩、干燥所得的银杏提取物为原料，用0％～95％乙醇或0～100％甲醇溶解，用低极性有机溶剂萃取，所得萃取液浓缩、干燥，得低银杏酚酸含量的银杏提取物；(d)将洗脱液浓缩、干燥所得的银杏提取物为原料，用0％～90％乙醇或0％～90％甲醇溶解，过大孔吸附树脂柱吸附；而后用含水醇类溶剂洗脱，洗脱液浓缩、干燥，得低银杏酚酸含量的银杏提取物。
2.根据权利要求1所述的低银杏酚酸含量的银杏提取物(GBE)的制备工艺，其特征在于步骤③中所述的酸，可用不同浓度的无机酸和有机酸，也可用酸性化合物或上述各种酸的混合物；步骤③中所述的过滤，其过滤方式可采取抽滤、离心过滤或板框压滤的过滤方式。
3.根据权利要求1所述的低银杏酚酸含量的银杏提取物(GBE)的制备工艺，其特征在于步骤④和步骤⑥中的(b)、(d)所述的大孔吸附树脂均为非极性或弱极性的大孔吸附树脂，尤其是苯乙烯型大孔吸附树脂，更好的是D101和AB-8型大孔吸附树脂。
4.根据权利要求1所述的低银杏酚酸含量的银杏提取物(GBE)的制备工艺，其特征在于步骤⑤中所述的洗脱，可先后分为两次洗脱，第一次用的溶媒为0％～35％甲醇或0％～35％乙醇洗脱，第二次用溶媒为30％～90％甲醇或30％～90％乙醇洗脱，得洗脱液。
5.根据权利要求1所述的低银杏酚酸含量的银杏提取物(GBE)的制备工艺，其特征在于步骤⑥中的(b)、(d)所述的含水醇类溶剂是30％～90％甲醇或30％～90％乙醇；步骤⑥中的(b)、(d)所述的低极性有机溶剂是乙醚、氯仿、二氯甲烷、石油醚、6号溶剂油、汽油、己烷、戊烷或庚烷，或是含有上述溶剂中的一种或多种的混合溶剂。
全文摘要
本发明涉及天然植物活性成分的提取技术，具体的说是一种低银杏酚酸含量的银杏提取物(GBE)的简易制备工艺。该方法制备所得的银杏提取物中，银杏总黄酮28～40％，银杏内酯6～14％，银杏酚酸＜5ppm。其制备方法包括提取、分离纯化、浓缩、干燥等步骤，与现有技术相比，本发明具有工艺简单，周期短，易于操作控制，无需特殊设备和材料，成本低等特点，适合于大规模生产。
文档编号C07H1/08GK101091730SQ200610093940
公开日2007年12月26日 申请日期2006年6月23日 优先权日2006年6月23日
发明者袁干军, 刘军保, 陈志斌, 涂蓉, 黄红谦, 苏秋玲 申请人:海南医学院