专利名称：松萝酸和/或其盐的应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种化合物的用途，尤其涉及松萝酸和/或其盐在制备痤疮丙酸杆菌抑制剂中的用途，还涉及松萝酸和/或其盐在制备用于治疗或预防由痤疮丙酸杆菌繁殖引起的粉刺的药物或护肤品中的用途。
背景技术：
松萝酸为松萝科(Usneaceae)植 物松萝Usnea diffracta Vain.和长松萝Usnea longissima Ach.的干燥地衣体提取物。松萝酸也称地衣酸，英文名称为Usninicacid ;分子式C18H16O7 ;化学名为:1，3 (2H, 9bH) -Dibenzofurandione, 2,6-diacetyl_7，9-dihydroxy-8,9b-dimethyl ;分子量为344. I。物理化学性质松萝酸具有旋光性，在地衣中发现有(+)_及(-)_两种形式。松萝酸易溶于氯仿，难溶于甲醇。在地衣显色反应中，松萝酸与KOH反应显黄色；与KOH和NaCl混合液反应显深黄色；松萝酸在丙酮溶液中是黄色斜方棱柱结晶，在氯仿乙醇混合液或者苯溶液中呈针形。松萝酸的衍生物钠盐为淡黄色丝针晶，略溶于水；松萝酸的衍生物通常以松萝酸钠存在，是脂肪酸和氢氧化钠反应的产物。松萝酸及其衍生物具有很好的抗菌生物活性，松萝酸的抗菌谱主要为革兰阳性细菌及结核杆菌。在试管中，松萝酸对肺炎球菌、溶血性链球菌、白喉杆菌、结核杆菌都有很强的抑菌作用，抑菌浓度为1_5μ g/ml，50l·! g/ml可完全抑制细菌的生长。对金黄色葡萄球菌的抑制作用比对上述细菌稍弱，但强于对革兰阴性细菌的作用。左旋与右旋型的抗菌作用无多大差别。但也有文献记载，对革兰阴性的百日咳杆菌、枯草杆菌、肺炎杆菌、大肠杆菌、变形杆菌有效，而对痢疾杆菌、伤寒杆菌无效。此外，松萝酸还具有植物生长抑制剂作用和抗病毒作用。粉刺也称痤疮，是一种复杂的、慢性的和普遍性的皮脂腺功能紊乱疾病，主要发生在青少年的脸部、前胸和后背。它最初表现是由雄性激素过多引起的尖头突起。近年来，已经发现了粉刺的很多发病机理，但是还是有一些机理尚未明确。简单地说，粉刺的发生机理主要有皮脂腺毛囊的堵塞而角质化，厌氧细菌的繁殖，炎症的产生。从临床的表现来看，粉刺分为有炎症伴发型和无炎症伴发型。无炎症的粉刺开始的表现是黑头粉刺，它开始是不可见的微黑头，最后可以转化为任何类型的粉刺。微黑头的形成原因是毛囊的漏斗样真皮组织引起的异常角质化。两种类型的粉刺可以在形态上进行区分，一个是闭合的黑头，而另一个是开放的丘疹。现在普遍认同的粉刺发病机理是多重性的，四个最重要的发病机理已经被鉴定了出来(1)雄性激素刺激皮脂腺的分泌。⑵角化过度和毛囊堵塞引起的漏斗样真皮组织的异常脱屑。(3)痤疮丙酸杆菌的大量繁殖。(4)炎症的产生。粉刺发病的一个重要因素是细菌的大量繁殖，从痤疮患者的粉刺毛囊皮脂腺单位中分离出痤疮丙酸杆菌(P. acnes)、颗粒丙酸杆菌、金黄色葡萄球菌、中间葡萄球菌和表皮葡萄球菌等致病菌。可以认为，痤疮患者致病因素中细菌感染是主要原因之一，而痤疮丙酸杆菌(P. acnes)是主要致病菌。痤疮丙酸杆菌是寄生于人类皮肤毛囊皮脂腺单位里的一种细菌，属于革兰氏阳性无芽孢厌氧菌。通常寄生在皮肤的粘膜上，属于条件致病菌。现代科学认为痤疮丙酸杆菌主要依赖皮质中的脂肪为营养，获取甘油三酯的能量，将甘油三酯分解成脂肪酸。游离在粉刺毛囊中的脂肪酸和痤疮丙酸杆菌的数量正相关，这些游离的脂肪酸可以产生炎症反应。同时，粉刺毛囊又为痤疮丙酸杆菌的繁殖提供了很好的厌氧环境，还提供了细菌生长的良好的营养成分，从而痤疮丙酸杆菌大量繁殖。显微镜下观察痤疮丙酸杆菌的超微结构发现痤疮丙酸杆菌长度为3 5um，宽度为O. 4 O. 7um ;大量的核糖体分布在细胞质中；细胞壁以肽聚糖为主。一般认为，痤疮丙酸杆菌是诸多细菌感染的主要原因，同时也是主要的致病菌。痤疮丙酸杆菌中的许多成分可以刺激角化细胞产生大量的细胞因子和炎症因子，这些成分包括，肽聚糖、脂多糖、细菌分泌的酶和一些相关的蛋白因子。而未受痤疮丙酸杆菌感染的角化细胞几乎不产生上述的细胞因子，这些细胞因子和炎症因子可以趋化炎症细胞到痤疮周围，引发炎症损害，这种炎症样的因素也被认为是痤疮的发病机理之一。
痤疮丙酸杆菌在促成大量细胞因子的同时,还产生大量的胞外酶,这些酶包括蛋白酶、透明质酸酶和脂肪酶等酶物质，这些因素都可以引发粉刺的炎症反应。痤疮丙酸杆菌可以产生蛋白酶和一些趋化性因子，可以引发免疫反应，诱导抗体的产生，并通过激活补体途径，引发其免疫介导的炎症反应，从而加重粉刺的生成。同时粉刺本身部位的皮脂腺功能异常，皮脂代谢紊乱，又引起大量的细菌繁殖，这些菌群以痤疮丙酸杆菌为主，同时又伴随着大量的葡萄球菌。脂类成分除了作为痤疮丙酸杆菌的营养成分之外，还有一部分直接参与到炎症路径中。多年来，科学家们对痤疮丙酸杆菌诱导炎症产生做了大量的研究。认为痤疮丙酸杆菌通过产生酯酶、蛋白酶、透明质酸酶分解脂肪成为甘油和脂肪酸，并在此过程中，释放出组胺和一些细胞趋化性物质引发炎症。不过由于T淋巴细胞浸润是痤疮炎症早期的皮损中最早发现的，近年来研究更倾向认为痤疮丙酸杆菌导致炎症生产的过程是一种超敏反应。通过对患者血清抗体的检测,发现患者体内的针对痤疮丙酸杆菌细胞壁成分一些特殊多糖的抗体浓度明显升高，并且炎症的程度跟抗体的浓度呈现正相关，而并未发现其他部位的抗原免疫反应。随后的研究证实参与到严重炎症反应中的免疫球蛋白是IgG，而参与到较轻炎症反应中的主要的免疫球蛋白是IgM，更充分显示出痤疮的严重程度跟免疫有关。痤疮丙酸杆菌细胞壁的肽聚糖可能参与到免疫反应中，这个较短的多糖片段很容易进入表皮，刺激真皮的免疫细胞生成IL-I a、TNF_a、IL-8等炎症因子，这些炎症因子可以调节粘附分子的表达。综上，痤疮丙酸杆菌可能在粉刺炎症中，尤其在痤疮的严重程度上起到重要的作用。当然痤疮丙酸杆菌也不是痤疮产生的唯一因素，这是因为几乎所有人的毛囊中都存在这种细菌，而且并不是每个存在这种细菌的毛囊都会引发感染。有人研究发现痤疮丙酸杆菌的密度跟痤疮的严重程度并没有太大相关性，同时也说明还有更多的因素参与的痤疮炎症形成的过程中来。痤疮丙酸杆菌通过免疫途径和非免疫途径引起局部炎症的机制有(I)痤疮丙酸杆菌细胞壁中的肽聚糖扩散到毛囊周围组织，从而刺激免疫细胞产生肿瘤坏死因子-a和白介素_8，并异常表达粘附分子。(2)淋巴细胞趋化因子，中性粒细胞趋化因子，TNF-a、IL-8等细胞因子趋化淋巴细胞和中性粒细胞到皮脂腺毛囊中。(3)痤疮丙酸杆菌与特异的抗体结合，通过补体途径激活免疫系统，产生补体片段C5a，这种片段可以很大程度的趋化中性粒细胞。(4)在痤疮丙酸杆菌抗体参与时，中性粒细胞可以释放多种水解酶，这些酶具有损伤真皮，破坏毛囊壁的作用。(5)痤疮丙酸杆菌可以分泌大量的酯酶和蛋白酶，从而对毛囊壁结构造成了破坏。(6)细胞壁中的肽聚糖刺激毛囊周围产生肉芽肿胀反应。(7)亚油酸物质的缺乏造成自由基的生成，O2^H2O2和OH ·造成 周围组织的损伤和毛囊完整性的破坏。
发明内容
本发明所要解决的技术问题在于提供了松萝酸和/或其盐作为痤疮丙酸杆菌抑制剂的用途，本发明还提供了松萝酸和/或其盐在用于制备预防或治疗由痤疮丙酸杆菌繁殖引起的粉刺的药物或化妆品中的用途。松萝酸和/或其盐可有效治疗因痤疮丙酸杆菌繁殖引起的粉刺生成，对人体毒性低，具有很好的应用前景。本发明提供了松萝酸和/或其盐作为痤疮丙酸杆菌抑制剂的用途。本发明还提供了松萝酸和/或其盐在用于制备预防或治疗由痤疮丙酸杆菌繁殖弓I起的粉刺的药物或化妆品中的用途。本发明所述的松萝酸可以是松萝酸的纯品、粗品或植物提取物。其中，所述的松萝酸纯品或粗品可通过本领域常规方法获得，如从植物(尤其是松萝)中提取、化学合成或者生物合成。其中，所述的松萝酸的植物提取物通常是从植物地衣中采用本领域常规提取方法提取得到的。古丽娜 巴克等研究了分枝石蕊中松萝酸提取方法以及提取条件的优化(中国科学院上海冶金研究所；材料物理与化学(专业)博士论文2000年度，《分枝石蕊有效成分分析》)。其结果表明，分枝石蕊中松萝酸的最件提取条件为料液比为I : 10，提取时间为4h，提取温度为60°C，提取次数为2次；黄绿色针状结晶体测得的熔点范围及吸收峰与松萝酸的相关报道一致。热衣木·马木提(《中国酿造》，2010，11期，P122-124)等以新疆天山后峡地区英雄桥采集的角石蕊为材料，采用有机溶剂提取法，考察了提取次数、料液t匕、提取温度和提取时间对角石蕊中松萝酸提取率的影响。试验结果表明角石蕊中提取松萝酸的最佳提取工艺条件为提取3次，料液比I : 20，温度70°C，提取时间3h。此条件下角石蕊中松萝酸的含量为26.95%。本专利申请中对上述文献的引用视为对该文献的全文引用。其中，所述的松萝酸盐为本领域常规的松萝酸盐，较佳地为松萝酸钠和/或松萝酸钾。本发明所述的松萝酸盐可以是松萝酸盐的纯品、粗品或植物提取物。其中，所述的松萝酸衍生物纯品或粗品可通过本领域常规方法获得，如从植物(尤其是松萝)中提取、化学合成或者生物合成。其中，所述的松萝酸盐的植物提取物通常是从植物松萝中采用本领域常规提取方法提取得到的。
本发明中所述松萝酸和/或其盐的药物载体可为本领域常规的各种载体，较佳地包括微球、脂质体或微乳液。所述药物的剂型可为本领域常规的各种外用剂型，较佳地包括喷雾剂、软膏和乳膏等中的一种或多种。所述药物的给药形式为皮肤给药。本发明中所述的化妆品可以是本领域各种类型的化妆品，如香皂、洗面奶、爽肤水、乳液或膏霜等。所述的松萝酸及其盐在所述药物或化妆品中的含量较佳地为O. 000 Iwt % -99wt %，最佳地为 O. 00 Iwt % -5wt %。本发明所述的痤疮丙酸杆菌抑制剂中除了松萝酸以外，还可根据常识包含其他抗菌和/或抗炎的活性成分，只要该活性成分与松萝酸不产生明显的拮抗作用即可。本发明所述的预防或治疗由痤疮丙酸杆菌繁殖引起的粉刺的药物或化妆品中除了松萝酸以外，还可根据常识包含其他抗菌和/或抗炎的活性成分，只要该活性成分与松萝酸不产生明显的拮抗作用即可。·本发明中，上述优选条件在符合本领域常识的基础上可任意组合，即得本发明各较佳实施例。本发明的原料和试剂皆市售可得。本发明的积极进步效果在于I、本发明提供了松萝酸及其盐的新用途，是一种潜在的高效低毒药物，为治疗痤疮丙酸杆菌大量繁殖弓I起的粉刺提供了应用前景。2、松萝酸及其盐能够制成各种药物剂型和化妆品形式，应用简便，易于使用。
图I为松萝酸对痤疮丙酸杆菌的抑制作用图。
具体实施例方式以下结合实施例对本发明作进一步的详细描述，但本发明并不限于此。实施例I松萝酸对痤疮丙酸杆菌的抑制实验实验菌株痤疮丙酸杆菌(ATCC6919)培养基(I)液体培养基胰蛋白胨10g/L，牛肉膏10g/L，葡萄糖5g/L，NaCl 5g/L，酵母膏3g/L，醋酸钠3g/L，可溶性淀粉lg/L，半胱氨酸盐酸盐O. 5g/L，蒸馏水溶解，调节pH为
6.8±0. 2，115°C高压灭菌20min。(2)固体培养基在液体培养基的基础上加入琼脂15g/L0实验方法抑菌圈测定将痤疮丙酸杆菌接种于固体培养基中，于37°C厌氧条件培养2d进行活化，活化后的直接将菌斑用生理盐水稀释，制备成菌悬液。取活化后菌悬液O. 5ml于液体培养基中，于37°C厌氧条件培养2d，为实验菌悬液。实验方法采用杯碟法，在培养皿中倒入5ml固体培养基，待凝固；另取固体培养基于微波炉中溶化，待温度降到50°C左右时，加入实验菌悬液，调整痤疮丙酸杆菌浓度为105CFU/ml，将含有痤疮丙酸杆菌的固体培养基约7ml倒入5ml凝固的固体培养基上层，凝固后，在培养基上等距离放2个无菌牛沣杯[内径出.0±0. Dmm,外径(8. 0±0· l)mm，高(10. 0±0· l)mm，在杯内分别注入100 μ I待测样品(用含10% DMSO的生理盐水稀释)，用含10% DMSO的生理盐水作为对照。37°C厌氧培养2d后，用直尺测量松萝酸的抑菌圈直径，取其平均值。实验结果见表I和图I :表I松萝酸对痤疮丙酸杆菌的抑制作用
权利要求
1.松萝酸和/或其盐作为痤疮丙酸杆菌抑制剂的用途。
2.如权利要求I所述的用途，其特征在于所述的盐为钠盐和/或钾盐。
3.松萝酸和/或其盐在用于制备预防或治疗由痤疮丙酸杆菌繁殖引起的粉刺的药物或化妆品中的用途。
4.如权利要求3所述的用途，其特征在于所述的盐为钠盐和/或钾盐。
5.如权利要求3或4所述的用途，其特征在于所述的松萝酸和/或其盐在所述药物或化妆品中的含量为O. OOO Iwt % -99wt%。
6.如权利要求5所述的用途，其特征在于所述的松萝酸和/或其盐在所述药物或化妆品中的含量为O. 00 Iwt % -5wt%。
7.如权利要求3或4所述的用途，其特征在于所述的松萝酸和/或其盐的药物载体包括微球、脂质体或微乳液。
8.如权利要求3或4所述的用途，其特征在于所述药物的剂型为外用剂型，较佳地为喷雾剂、软膏或乳膏。
9.如权利要求8所述的用途，其特征在于所述药物的给药方式为皮肤给药。
10.如权利要求3或4所述的用途，其特征在于所述的化妆品包括香皂、爽肤水、乳液或膏霜。
全文摘要
本发明公开了松萝酸和/或其盐作为痤疮丙酸杆菌抑制剂的用途本发明还公开了松萝酸和/或其盐在用于制备预防或治疗由痤疮丙酸杆菌繁殖引起的粉刺的药物或化妆品中的用途。本发明可有效的治疗因痤疮丙酸杆菌繁殖引起的粉刺生成。松萝酸和/或其盐即可来源于松萝植物中又可来源于人工合成，其对人体毒性低，对痤疮丙酸杆菌的抑菌作用高，能够制成各种外用药物剂型和化妆品，具有很好的应用前景。
文档编号A61P17/10GK102949298SQ20111043093
公开日2013年3月6日 申请日期2011年12月20日 优先权日2011年12月20日
发明者孙常磊, 段朝辉, 朱丽平, 翟春涛 申请人:上海莱博生物科技有限公司