专利名称：一种尼莫地平胶束注射剂及其制备方法
技术领域：
本发明提供了一种尼莫地平注射剂，具体为尼莫地平的胶束注射剂，属于医药技术领域。
背景技术：
尼莫地平是第二代1，4- 二氢吡啶类钙离子通道阻断剂，是目前心脑血管常用药， 主要作用是通过阻断钙离子内流引起心肌细胞去极化。尼莫地平选择性抑制Ca2+经细胞膜上的钙通道进入细胞内，具有扩张血管和负性肌力作用，松弛血管平滑肌，减少末梢血管阻力，从而降低血压，但脑、冠状动脉和肾血流量不减少；其可选择性地作用于脑血管平滑肌， 扩张脑血管，增加脑血流量，显著减少血管痉挛引起的缺血性脑损伤。此外尼莫地平有保护和促进记忆，促进智力恢复的作用。尼莫地平为淡黄色结晶粉末，无臭无味，在丙酮、氯仿中易溶，在乙醇中溶解，在乙醚中微溶，在水中几乎不溶(3. 86 μ g/ml，25°C) (Sun Y, Rui Y, Wenliang Ζ, Tang X. Nimodipine semi-solid capsules containing solid dispersion for improving dissolution. Int J Pharm 2008;359:144-9.)。由此可见，尼莫地平的理化性质极大地限制了它在临床上的应用，在将其制备成静脉用的液体制剂时，为了避免产生用药过程中的不良后果，必须需要寻找合适的方法增加其溶解度，且不产生副作用。目前我国市场现有的尼莫地平注射液的商品名有尼膜同、尼立苏等，注射液中含有23.7%(V/V)乙醇(1毫升药液含200毫克乙醇)和17%聚乙二醇400等赋形剂。由于含有大量的有机溶媒，对血管的刺激性大，而尼莫地平又具有高度扩张性，使血管通透性增加， 引起静脉渗漏，使静脉穿刺周围出现红、肿、热、痛等静脉炎症状(罗青，罗晓缓.临床防治尼莫地平引起静脉炎的方法，山西医药杂志，2011. 8 (40):846-847).应用输液泵持续静脉输注治疗蛛网膜下腔出血患者，时间较长，每天需要10 h,治疗时间为1(T14 d，静脉输注过程中，患者经常感觉局部疼痛、红肿等，出现静脉炎刺激症状达90.0%(刘红梅，张萍.地塞米松湿敷预防尼莫地平注射液致静脉炎的研究，护理研究，2006，2( 20):450-451).目前临床上解决此问题的方法有很多种(1)选择粗大静脉输注，可采用PICCj^ 静脉置管输液；(2)输液过程中加强护理，防止局部液体渗出，造成局部组织坏死，尤其是躁动患者，必要时用约束带，密切观察注射部位，发现红肿，立刻停止注射，更换部位重新注入(方红珍，茅彦.尼莫地平注射液的给药护理，护理与康复，2009. 9 (8) =804-805) ； (3) 采用马铃薯、透皮贴、地塞米松外敷；(4)使用输液微泵通过三通阀与静脉输液的药物一起持续输入静脉。虽然上述方法可以减少静脉炎的发生率以及降低静脉炎发生程度，但是并未根本解决有机溶剂带来的严重副作用，不仅大大增加了患者的痛苦和精神负担以及医药工作者的工作量，而且还极大增加了治疗费用，限制了其临床应用。由此可见，目前的研究要解决尼莫地平的应用缺陷，需要探寻一种合适的药物载体和新剂型，在减少有机溶剂使用带来的副作用的同时保持其疗效。
发明内容
为了解决上述提及的问题，研究人员决定从解决溶解度入手，选择合适的赋形剂或剂型在降低有机溶剂使用同时，保持其疗效。现有技术中，用于增加难溶性药物溶解度的方式有多种，例如
专利文献CN02155645. 8公开了一种尼莫地平冻干注射液的配方，采用磷脂、环糊精及其衍生物或表面活性剂、助溶剂等以增加尼莫地平的溶解度和稳定性，但制备工艺较为复杂，最终产品质量难以控制，并且环糊精有较大的过敏反应和溶血现象，具有潜在的毒性， 限制了其制剂的广泛应用。专利文献CN03153170. 9采用丙二醇和吐温增溶制备注射剂，但是丙二醇和吐温临床不良反应多，且吐温会出现溶血现象。专利文献CN200510081668. 4公开了一种尼莫地平乳注射液及其制备方法，在制备过程中加入了适量的苯甲醇从而提高了尼莫地平在乳剂中的溶解度及制剂的稳定性，使尼莫地平乳剂的浓度相对较高。但是2005年6月10日，国家食品药品监督管理局发出通知，由于监测不良反应，要求加强苯甲醇注射液的使用管理，严禁用于儿童肌肉注射，这严重限制了其在临床上的应用。专利文献CN200610095295. 0公开了一种注射用尼莫地平冻干乳剂的制备方法， 但是其释药难以控制，且使用吐温等表面活性剂作为乳化剂。专利文献CN200810229206. 6公开了一种尼莫地平亚微乳注射剂的制备方法，据文献报道亚微乳具有对肺、肝、脾的靶向性(紫苏醇亚微乳在大鼠体内的组织分布研究，李建勋等，中国医药工业杂志，2010，41 (11)，84广844.)，但是尼莫地平的治疗部位在脑部， 需要减少这些组织器官的摄取。专利文献CN200910021091. 6公开了尼莫地平脂质微球注射液及其制备方法，但是脂质微球制剂，工艺复杂，成本高，长期储存脂质微球的包裹容易破裂产生泄漏，不利于注射。由此可见，上述产品均未有效地解决降低赋形剂的副作用的同时保持/提高尼莫地平的疗效的技术性难题。某些新的剂型在降低了已知的有机溶剂的毒性的之后，却引入了其他表面活性型，给患者造成了更为严重的后果。本发明的目的之一，提供了一种尼莫地平的新剂型，该剂型不仅降低了有机溶剂的使用量，解决了因使用有机溶剂带来的严重副作用；而且还提高了尼莫地平的疗效。本发明的目的之一，提供了一种尼莫地平的胶束制剂，有效地解决了尼莫地平难溶于水的问题，而且可以避免使用乙醇、丙二醇等副作用强的有机溶媒，降低毒性和刺激性，可以制备高浓度的注射剂(高达0. 5mg/ml)。本发明的目的之一，提供一种尼莫地平的胶束注射剂，不仅适用于直接静脉推注， 还适用于不同程度稀释后滴注。本发明所述的尼莫地平胶束注射剂，主要包含，基于重量份计的尼莫地平1-30 份，胆盐20-70份，磷脂30-80份及适量的注射溶剂。作为优选的实施方案之一，本发明的尼莫地平胶束注射剂，主要包含，基于重量份计的尼莫地平1-10份，胆盐40-70份，磷脂40-80份及适量的注射溶剂。进一步优选地，尼莫地平、磷脂、胆盐的重量比为1. 25 40-50 :40-50。
作为优选的实施方案之一，本发明所述的磷脂包括但不限于注射用的大豆卵磷脂或蛋黄卵磷脂及其组合，尤其是平均分子量为600-900的磷脂。作为优选的实施方案之一，本发明所述的胆盐包括但不限于脱氧胆酸钠、甘氨胆酸钠、牛磺胆酸钠、猪胆酸钠或牛磺脱氧胆酸钠中的一种或多种的组合，优选的是包括但不限于脱氧胆酸钠、甘氨胆酸钠或牛磺胆酸钠中的一种或多种的组合。本发明的胶束注射剂，还可以包括任何常规的赋形剂，例如等渗调节剂、稳定剂、 金属离子络合剂、PH调节剂。作为优选的实施方案之一，等渗调节剂包括葡萄糖或氯化钠等；稳定剂包括抗氧剂包括亚硫酸钠，亚硫酸氢钠、维生素C或叔丁基茴香醚等；金属离子络合剂包括EDTA钠盐等；PH调节剂包括盐酸或氢氧化钠等酸性或碱性物质。本发明的尼莫地平胶束注射剂，虽然具有增加了尼莫地平的溶解度和稳定性的效果；然而，本发明的重点在于，通过长期的研究发现尼莫地平主要是作用于肌细胞膜上的钙通道阻滞剂，而本发明胶束制剂中采用的磷脂成分属于细胞膜的重要构成成分之一，制剂中两者的相互融合；进入体内之后，出人意料地改善尼莫地平在脑血管作用部位的积聚， 稳定其扩张血管的作用，而且进一步降低了其与血浆蛋白的结合，缓解了其体内代谢，产生了预料不到的疗效。本发明的另一个目的，是提供一种尼莫地平胶束注射剂的制备方法，包括如下步骤
(1)称取处方量的各组分，溶于适量有机溶剂中，超声混合均勻。(2)旋蒸除去有机溶剂，旋蒸温度为25_80°C，得到尼莫地平胶束共沉淀物薄膜。(3)用适量的注射溶剂水化，搅拌，即得到尼莫地平的胶束溶液，活性炭吸附，微孔滤膜过滤，分装，热压灭菌后，得到本发明的尼莫地平胶束注射剂。其中，步骤(1)中所用有机溶剂包括但不限于乙酸乙酯、丙酮、氯仿、乙醇、乙醚的一种或多种的组合，优选的有机溶剂为乙醇。上述有机溶剂仅作为制备过程中的溶解溶剂， 在最后的产品中基本无残留。步骤(3)中所述的注射溶剂包括但不限于注射用水、氯化钠水溶液、葡萄糖注射液、含葡萄糖和氯化钠的注射用水溶液或ρΗ7. Γ8. 2的磷酸盐溶液的任一种。优选地，0. 9%的氯化钠水溶液、5%葡萄糖注射液、含5%的葡萄糖和0. 9%氯化钠的注射用水溶液或PH7. 4^8. 2的磷酸盐溶液的任一种。步骤(3)优选加入活性炭搅拌后，离心分离，然后用微孔滤膜过滤，取滤液，分装， 热压灭菌，得到尼莫地平混合胶束注射液。其中的活性炭为注射级活性炭，用量为0. 05%-0. 2%，搅拌时间为15min-30min。离心分离时间为3-5min，转速12000-13500rpm/min，微孔滤膜的孔径范围 0. 22-0. 8um0具体的实施方案之一，本发明优选的制备尼莫地平胶束注射剂的方法，包括以下步骤
(1)基于重量计，称取基于重量份计的尼莫地平1-10份，胆盐40-70份和磷脂40-80 份，溶于乙醇中，超声混合均勻。(2)旋蒸除去有机溶剂，旋蒸温度为25_80°C，得到尼莫地平胶束共沉淀物薄膜。
(3)用2-2.5:1 (ml :mg)注射溶剂水化，低速搅拌，即得到尼莫地平的胶束溶液， 加入注射级活性炭搅拌15min后，12000rpm/min离心分离5min，然后用0. 22um微孔滤膜过滤，取滤液，分装，热压灭菌121°C下灭菌15min，得到尼莫地平混合胶束注射剂。本发明的另一个目的是提供了所述的尼莫地平胶束制剂在制备预防和治疗缺血性脑血管病如各种原因的蛛网膜下隙出血后的脑血管痉挛和急性脑血管病恢复期的血液循环改善，脑动脉硬化，老年性脑功能障碍，老年性痴呆，顽固性呃逆，脑梗塞及梗塞后癫痫，偏头痛，突发性耳聋，消化性溃疡，肺心病，病毒性脑炎，高血压，新生儿缺氧缺血性脑病，颈椎病及治疗糖尿病周围神经病变等药物中的应用。发明的有益效果是:
(1)本发明的尼莫地平胶束注射剂，大大提高尼莫地平的水溶性和稳定性，经过热循环实验和稀释实验都没有晶体析出。(2)本发明尼莫地平胶束注射剂，浓度高达0. 5mg/ml，相对于市售注射剂(0. 2mg/ ml)，具有更高的临床价值。(3)本发明的胶束注射剂的组分不产生副作用，安全可靠、来源广泛，成本低廉。(4)本发明所述的制备方法工艺简单，重复性好，有机溶剂回收利用，适合于工业
化生产。( 5 )本发明的胶束注射剂，不仅适用于直接静脉推注，还适用于不同程度稀释后滴注，极大地方便了临床给药。
以下，结合附图来详细说明本发明的实施方案，其中 图1尼莫地平高效液相色谱标准曲线。图2磷脂/胆盐比值不同的条件下胶束制剂对尼莫地平的增溶效率。图3磷脂与胆盐的总浓度不同的条件下胶束制剂对尼莫地平的增溶效率。图4尼莫地平胶束注射剂的粒径测量结果。图5尼莫地平体内样品高效液相色谱标准曲线
具体实施例方式实施例1
称取50mg的蛋黄卵磷脂、50mg的甘氨胆酸钠、1. 25mg的尼莫地平置于50ml圆底烧瓶中，加入IOml乙醇，溶解，超声分散均勻。在水浴温度40°C下旋蒸除去乙醇，直至无醇味， 形成一层透明薄膜，再用2.5ml的注射用水分散，得到含药混合胶束的分散体溶液。加入
0.05%注射级活性炭搅拌15min后，12000rpm/min离心分离5min，然后用0. 22 μ m微孔滤膜过滤，取滤液，分装，热压灭菌121°C下灭菌15min，得到尼莫地平混合胶束注射剂。根据下文实施例5测得增溶效率为96%，尼莫地平的浓度为0. 48mg/ml，载药量为
1.2% ο实施例2
称取50mg的蛋黄卵磷脂、50mg的甘氨胆酸钠、Img的尼莫地平置于50ml圆底烧瓶中，加入IOml乙醇，溶解，超声分散均勻。再旋蒸除去乙醇，水浴温度为35°C，旋至无醇味，形成一层透明薄膜，再用2. 5ml的注射用水分散，得到含药混合胶束的分散体溶液。加入0. 05% 注射级活性炭搅拌15min后，12000rpm/min离心分离5min，然后用0. 22 μ m微孔滤膜过滤， 取滤液，分装，热压灭菌121°C下灭菌15min，得到尼莫地平混合胶束注射剂。根据下文实施例5测得增溶效率为93%，尼莫地平的浓度为0. 37mg/ml，载药量为
0.9%ο实施例3
称取45mg的多烯磷脂酰胆碱、40mg的脱氧胆酸钠、Img的尼莫地平置于50ml圆底烧瓶中，加入IOml乙醚，溶解，超声分散均勻。在水浴温度为35°C下，旋蒸除去乙醚，形成一层透明薄膜，再用2. 5ml的注射用水分散，得到含药混合胶束的分散体溶液。加入0.05%注射级活性炭搅拌15min后，12000rpm/min离心分离5min，然后用0. 22 μ m微孔滤膜过滤，取滤液，分装，热压灭菌121°C下灭菌15min，得到尼莫地平混合胶束注射剂。根据下文实施例5测得增溶效率为9096，尼莫地平的浓度为0. 36mg/ml，载药量为
1.0%。实施例4
称取47mg的大豆卵磷脂、50mg的牛磺胆酸钠、Img的尼莫地平置于50ml圆底烧瓶中， 加入IOml甲醇氯仿=1:1，溶解，超声分散均勻。再旋蒸除去有机溶剂，水浴温度为35°C， 旋蒸除去有机溶剂，形成一层透明薄膜，再用2. 5ml的注射用水分散，得到含药混合胶束的分散体溶液。加入0. 05%注射级活性炭搅拌15min后，12000rpm/min离心分离5min，然后用0. 22 μ m微孔滤膜过滤，取滤液，分装，热压灭菌121°C下灭菌15min，得到尼莫地平混合胶束注射剂。根据下文实施例5测得增溶效率为96%，尼莫地平的浓度为0. 38mg/ml，载药量为 1. 0%。实施例5尼莫地平增溶效率和载药量的测定方法
技术领域：
本发明中的尼莫地平的浓度的测定方法，采用甲醇破坏混合胶束结构后，使胶束释放药物，用HPLC测定尼莫地平的含量。尼莫地平在此混合胶束处方中的增溶效率高，表明混合胶束处方的增溶效果好。增溶效率的计算方法为
增溶效率=(处方中溶解的尼莫地平的量)/ (投入的总尼莫地平的量) 载药量的计算方法为
载药量=(处方中溶解的尼莫地平的量)/ {加入的总辅料的量(磷脂+胆盐+尼莫地
平)}
方法精密吸取混合胶束注射剂，用甲醇定容，摇勻，作为供试品溶液，用HPLC测定。色谱条件
a.流动相甲醇乙腈水=35:38:27
b.检测波长237nm
c.柱温:40°C
d.色谱柱C18柱(250mmX4. 6mm，5 μ m，Kromasi 1)
e.流速1.0mL/min结果尼莫地平混合胶束注射剂中所含药物在0. 1 6 μ g/mL，浓度与吸光度呈良好的线性关系，A=70. 096C+0. 495，r2=l。如附图1所示。实施例6胶束对尼莫地平增溶效率的考察
固定尼莫地平的投药量为1. 25mg、胆盐的浓度为20mg/ml，25°C生理盐水水化，考察胆盐/磷脂比值分别1 0. 8、1 1、1 2、1 3、1 0情况下尼莫地平的溶解度差异，所述的磷脂为蛋黄卵磷脂，所述胆盐为甘氨胆酸钠，根据实施例1的工艺制备而成。如附图2所示，结果选择比例为1:1。固定尼莫地平投药量为1.25mg、磷脂胆盐为1 1，25°C生理盐水水化，考察辅料总浓度为8mg/ml、24mg/ml,40mg/ml、56mg/ml、72mg/ml情况下，尼莫地平的溶解度的差异， 所述磷脂为蛋黄卵磷脂，所述胆盐为甘氨胆酸钠，根据实施例1的工艺制备而成。如附图3所示，结果选择辅料总浓度为40mg/ml。进一步优选的处方I为，根据实施例1的工艺制备而成 尼莫地平:1. 25mg ；
蛋黄卵磷脂50mg ； 甘氨胆酸钠50mg ； 生理盐水2. 5ml。实施例7胶束粒径及尼莫地平含量
按照实施例6的优选处方I制备的尼莫地平胶束制剂，测定粒径和增溶效率，最终我们得到了尼莫地平含量为0. 468士0. 011mg/mL，粒径大小为6. 099士0. 048 nm, PDI为 0. 107士0. 016的尼莫地平混合胶束溶液。粒径测量结果如附图4所示。实施例8稀释实验
按照实施例6的优选处方I制备的尼莫地平胶束制剂，用注射用水、生理盐水、葡萄糖注射液稀释10倍、100倍、500倍经过IOh均没有晶体析出。实施例9活性炭吸附实验
为保证注射液澄明，无内毒素，选用注射用活性炭对注射液进行吸附是必要的。但活性炭的用量需要进行筛选。按照实施例6的优选处方I制备的尼莫地平胶束制剂，搅拌至澄明后，分别加入活化了的活性炭，使其浓度分别为0. 05 %、0. 1 %、0. 2 %，分别吸附15min、 30min,60min,过滤，定容，测定吸附前后主药含量，结果见下表
权利要求
1.一种尼莫地平的胶束注射剂，其特征在于，主要包含，基于重量份计的尼莫地平 1-30份，胆盐20-70份，磷脂30-80份及适量的注射溶剂。
2.根据权利要求1尼莫地平的胶束注射剂，其特征在于，主要包含，基于重量份计的尼莫地平1-10份，胆盐40-70份，磷脂40-80份及适量的注射溶剂。
3.根据权利1或2所述的尼莫地平混合胶束注射剂，其特征在于所述胆盐包括但不限于脱氧胆酸钠、甘氨胆酸钠、猪胆酸钠、牛磺胆酸钠或及其组合。
4.根据权利要求1-3任一项所述的尼莫地平混合胶束注射剂，其特征在于所述磷脂包括但不限于注射用的大豆卵磷脂、蛋黄卵磷脂、多烯磷脂酰胆碱或及其组合。
5.如权利要求1-4任一项所述的尼莫地平胶束注射剂的制备方法，其特征在于包括以下步骤(1)称取处方量的各组分，溶于适量有机溶剂中，超声混合均勻；(2)旋蒸除去有机溶剂，旋蒸温度为25-80°C，得到尼莫地平胶束共沉淀物薄膜；(3)用适量的注射溶剂水化，搅拌，即得到尼莫地平的胶束溶液，活性炭吸附，微孔滤膜过滤，分装，热压灭菌后，得到本发明的尼莫地平胶束注射剂。
6.根据权利要求5所述的尼莫地平胶束注射剂的制备方法，其特征在于，步骤(1)中所用有机溶剂包括但不限于乙酸乙酯、丙酮、氯仿、乙醇、乙醚的一种或多种的组合，优选的有机溶剂为乙醇。
7.根据权利要求5所述的尼莫地平胶束注射剂的制备方法，其特征在于，步骤(3)中所述的注射溶剂包括但不限于注射用水、氯化钠水溶液、葡萄糖注射液、含葡萄糖和氯化钠的注射用水溶液或PH7. 4 8. 2的磷酸盐溶液的任一种；优选地，0. 9%的氯化钠水溶液、5%葡萄糖注射液、含5%的葡萄糖和0. 9%氯化钠的注射用水溶液或ρΗ7. Γ8. 2的磷酸盐溶液的任一种。
8.根据权利要求5所述的尼莫地平胶束注射剂的制备方法，其特征在于，步骤(3)优选加入活性炭搅拌后，离心分离，然后用微孔滤膜过滤，取滤液，分装，热压灭菌，得到尼莫地平混合胶束注射液；其中的活性炭为注射级活性炭，用量为0. 05%-0. 2%，搅拌时间为15min-30min ；离心分离时间为3-5min，转速12000-13500rpm/min，微孔滤膜的孔径范围 0. 22-0. 8um0
9.根据权利1-8所述的尼莫地平胶束注射剂在制备预防和治疗缺血性脑血管病如各种原因的蛛网膜下隙出血后的脑血管痉挛和急性脑血管病恢复期的血液循环改善，脑动脉硬化，老年性脑功能障碍，老年性痴呆，顽固性呃逆，脑梗塞及梗塞后癫痫，偏头痛，突发性耳聋，消化性溃疡，肺心病，病毒性脑炎，高血压，新生儿缺氧缺血性脑病，颈椎病及治疗糖尿病周围神经病变等药物中的应用。
全文摘要
本发明公开一种尼莫地平胶束注射剂及其制备方法，本发明使用活性成分尼莫地平与磷脂/胆盐制备而成。本发明尼莫地平胶束注射剂不仅极大提高了尼莫地平的溶解度，稀释不析出结晶；而且磷脂、胆盐生物相容性好，不需要使用乙醇、丙二醇等毒副作用大的有机溶剂增溶，降低了药物的毒性，对血管刺激小，减少了药物的不良反应，尼莫地平胶束注射剂即可以直接静脉推注，又可以不同程度稀释后滴注，极大地方便了临床给药。
文档编号A61P21/00GK102525917SQ20121000030
公开日2012年7月4日 申请日期2012年1月4日 优先权日2012年1月4日
发明者孙逊, 龚涛 申请人:成都师创生物医药科技有限公司