一种制备高纯度尼莫克汀的方法
【专利摘要】一种制备高纯度尼莫克汀的方法，属于药物化学领域。尼莫克汀是一种十六元大环内脂类驱虫抗生素，主要用于合成驱虫药效更好的莫西克汀。这种制备高纯度尼莫克汀的方法，通过乙醇水溶液萃取尼莫克汀得到萃取液，该萃取液经过离子交换树脂脱色、大孔吸附树脂脱蛋白和脱糖，最后由适当的大孔吸附树脂吸附和分离，可以制得纯度大于90%的尼莫克汀产品。该方法通过各树脂搭配使用，针对性强，制得的高纯度尼莫克汀对于合成高纯度莫西克汀具有重要意义。
【专利说明】一种制备高纯度尼莫克汀的方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种制备高纯度尼莫克汀的方法，属于药物化学领域。
【背景技术】
[0002]尼莫克汀是一种十六元大环内酯类驱虫抗生素，可以用于治疗牛羊等动物体内及体外的寄生虫。尼莫克汀由蓝灰链霉菌发酵生产，主要用于合成药效更好的莫西克汀。因而，高纯度的尼莫克汀对于制备高纯度的莫西克汀具有特别重要的意义。
[0003]目前已知的文献中报道提纯尼莫克汀的方法较少，主要有以下两种:
1.中国专利CN101372492A公开了一种大孔吸附树脂柱层析提纯的方法。这种方法得到的尼莫克汀纯度为40%~50%，其后合成莫西克汀的过程中需进一步的柱层析提纯。
[0004]2.中国专利CN102336796A中公开了另外一种方法:尼莫克汀发酵液经喷雾干燥，得到固体粉末。萃取该固体粉末，萃取液经大孔吸附树脂柱层析分离，可得到纯度约90%的尼莫克汀。该方法中使用的大孔吸附树脂价格昂贵，难以在工业化生产中应用；并且该方法对使用的大孔吸附树脂缺乏保护，其使用寿命堪忧。
[0005]大孔吸附树脂对于分离提纯尼莫克汀具有积极的作用，我们发现，通过大孔吸附树脂与其他树脂的配合使用，可以制备高纯度的尼莫克汀产品。
【发明内容】
[0006]本发明的目的在于提供了一种制备高纯度尼莫克汀的方法。
[0007]本发明采用的技术方案是:一种制`备高纯度尼莫克汀的方法采用的步骤为:
(1)乙醇水溶液萃取尼莫克汀，所述乙醇水溶液中乙醇与纯化水的重量比为50:50~60:40，乙醇水溶液与发酵得到的含有尼莫克汀的干燥固体粉末重量比为5:1~6:1，搅拌4~6小时，过滤得到尼莫克汀的萃取液；
(2)萃取液经离子交换树脂脱色，流速不大于每小时I床层体积；
(3)脱色液经大孔吸附树脂I和大孔吸附树脂2吸附，大孔吸附树脂I与大孔吸附树脂2的床层体积比为1:10~1:5，大孔吸附树脂I和大孔吸附树脂2为不同牌号非离子非极性大孔吸附树脂，其中大孔吸附树脂I用于吸附萃取液中的蛋白质、多糖和色素等杂质，大孔吸附树脂2用于吸附、分离尼莫克汀；
(4)梯度洗脱大孔吸附树脂2，分段收集洗脱液，洗脱用乙醇水溶液的梯度为55%~70%重量比，收集尼莫克汀纯度大于90%的洗脱液，负压脱溶，过滤得到白色固体粉末，45°C真空干燥至恒重，得到尼莫克汀产品。
[0008]本发明的有益效果是:这种制备高纯度尼莫克汀的方法，通过乙醇水溶液萃取尼莫克汀得到萃取液，该萃取液经过离子交换树脂脱色、大孔吸附树脂脱蛋白和脱糖，最后由适当的大孔吸附树脂吸附和分离，可以制得纯度大于90%的尼莫克汀产品。该方案通过各树脂搭配使用，针对性强，制得的高纯度尼莫克汀对于合成高纯度莫西克汀具有重要意义。【具体实施方式】
[0009]通过下述实施例有助于进一步理解本发明。
[0010]实施例1
IOL釜内投入尼莫克汀干燥菌丝体1.0kg (其中尼莫克汀外标含量为5.5%)、55%乙醇水溶液6.0kg, 23°C搅拌4小时。过滤，得到棕色滤液4.84kg ;滤饼返釜，投入55%乙醇水溶液6.0kg继续搅拌4小时。过滤，得到浅棕色滤液6.15kg。合并2次滤液，其中尼莫克汀外标含量为0.50%,纯度为58.4%。
[0011]萃取液上脱色柱，树脂为FPA53 (罗门哈斯，吸附量30 g~40g/L)，流速为2.0L/ho流出液为淡黄色透明溶液。
[0012]脱色液上大孔吸附树脂I和大孔吸附树脂2。其中大孔吸附树脂I为XAD1180N(罗门哈斯)，用量0.5L ;大孔吸附树脂2为XAD1600N (罗门哈斯)，用量4L。上样流速为2.0L/ho待脱色液上样完毕，依次使用55%乙醇水溶液、60%乙醇水溶液，65%乙醇水溶液对大孔吸附树脂2洗脱。收集尼莫克汀纯度大于90%的洗脱液，45°C负压脱溶至断流，水相中析出大量白色固体粉末。过滤，滤饼45°C真空干燥，得到白色固体粉末38.8 g，纯度93.6%，含量85.1%。
[0013]实施例2
IOL釜内投入尼莫克汀干燥菌丝体1.0kg (其中尼莫克汀外标含量为5.5%)、50%乙醇水溶液8.0kg, 20°C搅拌6小时。过滤，得到棕色滤液7.78kg ;滤饼返釜，投入50%乙醇水溶液8.0kg继续搅拌6小时。过滤，得到浅棕色滤液8.31kg。合并2次滤液，其中尼莫克汀外标含量为0.34%，纯度为58.6%。
[0014]萃取液上脱色柱，树脂为D0C2001 (苏青树脂，吸附量30 g~40g/L)，流速为3.0L/ho流出液为淡黄色透明溶液。
[0015]脱色液上大孔吸附树脂I和大孔吸附树脂2。其中大孔吸附树脂I为XAD1180N(罗门哈斯)，用量0.8L;大孔吸附树脂2为HP20 (三菱)，用量4L。上样流速为3.0L/h。待脱色液上样完毕，依次使用55%乙醇水溶液、63%乙醇水溶液，68%乙醇水溶液对大孔吸附树脂2洗脱。收集尼莫克汀纯度大于90%的洗脱液，45°C负压脱溶至断流，水相中析出大量白色固体粉末。过滤，滤饼45°C真空干燥，得到白色固体粉末37.4 g，纯度92.4%，含量84.8%。
[0016]实施例3
IOL釜内投入尼莫克汀干燥菌丝体1.0kg (其中尼莫克汀外标含量为5.5%)、60%乙醇水溶液5.0kg, 21°C搅拌4小时。过滤，得到棕色滤液3.88kg ;滤饼返釜，投入60%乙醇水溶液5.0kg继续搅拌4小时。过滤，得到浅棕色滤液5.20kg。合并2次滤液，其中尼莫克汀外标含量为0.61%，纯度为57.9%。
[0017]萃取液上脱色柱，树脂为FPA40 (罗门哈斯，吸附量30 g~40g/L)，流速为1.2L/ho流出液为淡黄色透明溶液。
[0018]脱色液上大孔吸附树脂I和大孔吸附树脂2。其中大孔吸附树脂I为H60(西安电力)，用量0.4L ;大孔吸附树脂2为YP108 (扬州三环)，用量4L。上样流速为1.2L/h。待脱色液上样完毕，依次使用55%乙醇水溶液、60%乙醇水溶液，63%乙醇水溶液对大孔吸附树脂2洗脱。收集尼莫克汀纯度大于90%的洗脱液，45°C负压脱溶至断流，水相中析出大量白色固体粉末。过滤，滤饼45°C真空干燥，得到白色固体粉末36.2 g，纯度90.2%，含量83.6%。
【权利要求】
1.一种制备高纯度尼莫克汀的方法，其特征是:该方法采用的步骤为: (1)乙醇水溶液萃取尼莫克汀，所述乙醇水溶液中乙醇与纯化水的重量比为50:50~60:40，乙醇水溶液与发酵得到的含有尼莫克汀的干燥固体粉末重量比为5:1~6:1，搅拌4~6小时，过滤得到尼莫克汀的萃取液； (2)萃取液经离子交换树脂脱色，流速不大于每小时I床层体积； (3)脱色液经大孔吸附树脂I和大孔吸附树脂2吸附，大孔吸附树脂I与大孔吸附树脂2的床层体积比为1:10~1:5，大孔吸附树脂I和大孔吸附树脂2为不同牌号非离子非极性大孔吸附树脂，其中大孔吸附树脂I用于吸附萃取液中的蛋白质、多糖和色素等杂质，大孔吸附树脂2用于吸附、分离尼莫克汀； (4)梯度洗脱大孔吸附树脂2，分段收集洗脱液，洗脱用乙醇水溶液的梯度为55%~70%重量比，收集尼莫克汀纯度大于90%的洗脱液，负压脱溶，过滤得到白色固体粉末，45°C真空干燥至恒重，得到尼莫 克汀产品。
【文档编号】C07D493/22GK103588784SQ201310563411
【公开日】2014年2月19日 申请日期:2013年11月14日 优先权日:2013年11月14日
【发明者】杜志博, 王维新, 梁全德, 赵丹阳, 赵欢, 王荣良, 戚元强 申请人:大连九信生物化工科技有限公司