一种用于鼻腔给药的尼莫地平脂质体及其制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种用于鼻腔给药的尼莫地平脂质体及其制备方法，属于药物制剂领 域。
【背景技术】
[0002] 尼莫地平（Nimodipine，NM)是一种选择性扩张脑血管作用较强的二氢吡啶类钙 离子拮抗剂，临床药理学和治疗研究证明，尼莫地平对蛛网膜下腔出血、偏头痛、脑卒中、突 发性耳聋、由慢性脑血管疾患所致的脑功能紊乱等疾病有良好的治疗效果。但因匪水溶性 差且存在严重的首过效应，其片剂、胶囊剂等口服制剂生物利用度低，平均生物利用度仅为 5~20%，为了维持疗效，患者需大剂量、频繁用药，这不仅增加了药物的毒副作用，且口服 后尼莫地平转运入脑的浓度易受生理因素变化的影响，临床效果波动较大，难以保证药效 的有效发挥。其注射剂又存在药物易解离的稳定性问题、以及因水溶性差需添加增溶剂产 生的刺激性问题，患者顺应性较差，而更为主要的是注射剂需要一定的医疗操作条件，在患 者脑卒中发作时，往往在到达医院前无法及时施用药物，或用药时已经错过了最佳时机，造 成机体无法恢复的损伤。
[0003] 因此开发鼻腔给药制剂具有现实意义。但鼻腔给药系统存在的两大问题是药物对 鼻粘膜的毒性和药物的有效吸收。除了选择低毒性的制剂材料以减少刺激，还要选择合适 的剂型以提高药物在鼻腔内的吸收。近年来，随着鼻腔给药系统的发展，剂型的种类也多种 多样，常规剂型有气雾剂、喷雾剂、滴鼻剂、粉剂，还有新发展的制剂如凝胶剂、乳剂、微粒、 微球、纳米粒、脂质体等。
[0004] 已报导的匪鼻腔给药剂型有纳米乳、冷冻干燥脂质体、纳米粒、微乳、凝胶等。中 国专利申请CN 200510023273(公开号CN1679561A)公开了一种鼻腔用尼莫地平凝胶剂， 含尼莫地平和亲水凝胶，以及其它药剂学上有效的辅料，其中尼莫地平的浓度为0. 1-15% (w/w)，即每g凝胶中含尼莫地平l-150mg，以过200目筛微粉或分子形式分散在亲水凝胶 基质中；所述的亲水凝胶选自卡波普、纤维素类衍生物、壳聚糖、聚乙烯醇、聚氧乙烯、海藻 酸钠或黄原胶中的一种或数种，其中，卡波普其浓度为〇. 02-2. 0% (w/w)，纤维素衍生物其 浓度为0.1-10% (w/w)，壳聚糖浓度为0.2-10 % (w/w);聚乙烯醇的浓度为0.2-15% (w/ w);聚氧乙烯的浓度为0.5-10% (w/w);海藻酸钠的浓度为0.2-7% (w/w);黄原胶的浓度 为0.2-6% (w/w);所述的纤维素类衍生物选自甲基纤维素、羧甲基纤维素钠或羟丙基甲基 纤维素。可加入其它药剂学上有效的辅料，如PH调节剂、保湿剂和防腐剂等，所述的鼻用凝 胶剂将尼莫地平均匀分散在亲水凝胶基质中制备而成。但是，已有文献报道以及我们的试 验研究均显示尼莫地平对鼻粘膜具有较强的刺激性，由于尼莫地平在凝胶剂中仍主要以其 原型药物状态存在，当与敏感的鼻粘膜接触时，药物仍会直接暴露于黏膜组织和细胞，故凝 胶剂的制备并不能有效地降低或避免药物的鼻刺激性。如何使尼莫地平既具有良好的鼻粘 膜吸收性能、又能克服其刺激性，是尼莫地平能否开发鼻腔给药制剂的关键。另外，凝胶剂 制剂本身对药物吸收的改善作用也比较有限。
【发明内容】
[0005] 本发明要解决的技术问题是提供一种用药方便、毒副作用小且生物利用度高的尼 莫地平脂质体，这种脂质体主要用于制备各种尼莫地平鼻腔给药制剂。
[0006] 本发明的要解决的另一个技术问题是提供这种尼莫地平脂质体的制备方法。
[0007] 为实现上述目的，本发明采用以下技术方案：
[0008] -种用于鼻腔给药的尼莫地平脂质体，由以下用量的尼莫地平环糊精包合物和药 用辅料组成：尼莫地平环糊精包合物〇. 〇25g、磷脂0. 1~I. 5g、胆固醇0. 015~0. 8g、PBS 缓冲液10~25mL、膜软化剂0. 013~0. 8g ;其中尼莫地平环糊精包合物由尼莫地平与环糊 精组成，尼莫地平与环糊精的质量比为1 :1~1 :1〇。
[0009] 优选的所述用于鼻腔给药的尼莫地平脂质体，由以下用量的尼莫地平环糊精包合 物和药用辅料组成：尼莫地平环糊精包合物0. 〇25g、磷脂0. 15g、胆固醇0. 03g、PBS缓冲液 15mL、膜软化剂0.075g;其中尼莫地平环糊精包合物由尼莫地平与环糊精组成，尼莫地平 与环糊精的质量比为1 :1~1 :3。
[0010] 所述膜软化剂为聚氧乙烯氢化菌麻油40 (Cremophor RH40)、聚山梨酯-80、山梨糖 醇甘油酸酯、油酸聚乙二醇甘油酯中的一种或几种。
[0011] 优选的所述膜软化剂为聚氧乙烯氢化菌麻油40 (Cremophor RH40)。
[0012] 所述的环糊选自α-环糊精及其衍生物、β-环糊精及其衍生物（如羟丙 基-β-环糊精（ΗΡ-β-⑶)）、Y-环糊精及其衍生物中的一种或几种，优选β-环糊精。
[0013] 所述用于鼻腔给药的尼莫地平脂质体，尼莫地平的浓度为2-9% w/v(每mL脂质体 中含尼莫地平20-90 μ g)。
[0014] 一种用于鼻腔给药的尼莫地平脂质体的制备方法，包括以下步骤：
[0015] (1)饱和水溶液法制备尼莫地平环糊精包合物（NM-CD);
[0016] (2)薄膜分散法制备尼莫地平包合物柔性纳米脂质体。
[0017] 所述步骤（1)饱和水溶液法制备尼莫地平-环糊精包合物是指：按尼莫地平：环 糊精为1:1~1:10的重量比分别称取尼莫地平和环糊精，在40~65°C将尼莫地平溶解于 适量无水乙醇、将环糊精加入蒸馏水制成饱和水溶液；将尼莫地平乙醇溶液分别逐滴缓慢 加入环糊精饱和水溶液中，40-65°C水浴搅拌1~5小时；4°C保存过夜，抽滤，水洗，再用适 量无水乙醇洗去残留尼莫地平，40°C干燥1小时，即得尼莫地平-环糊精包合物（NM-⑶）。
[0018] 所述步骤（2)薄膜分散法制备尼莫地平包合物柔性纳米脂质体是指：将磷脂 0. 1~I. 5g、胆固醇0. 015~0. Sg加至梨形瓶，超声溶于适量的无水乙醇中，形成脂质溶 液，45°C减压旋转蒸发除去乙醇，至瓶壁形成一层薄膜，继续旋转lOmin，使乙醇蒸发完全； 步骤（1)得到的尼莫地平-环糊精包合物0. 〇25g及膜软化剂0. 013~0. 8g加入10~25mL PBS缓冲液，于50°C搅拌lh，将药物的PBS溶液趁热倒入梨形瓶中，反复振荡洗脱膜材，水化 完全后，均质匀化即得得尼莫地平-环糊精包合物柔性纳米脂质体（NM-⑶-FNL)。
[0019] 优选的所述步骤（1)中尼莫地平与环糊精的重量比为1:3,水浴温度为50°C，水浴 搅拌3小时。
[0020] 所述步骤（2)薄膜分散法制备尼莫地平包合物柔性纳米脂质体是指：将磷脂 0. 15g、胆固醇0.03g加至梨形瓶，超声溶于适量的无水乙醇中，形成脂质溶液，45°C减压旋 转蒸发除去乙醇，至瓶壁形成一层薄膜，继续旋转lOmin，使乙醇蒸发完全；步骤（1)得到 的尼莫地平-β环糊精包合物0. 〇25g及膜软化剂0. 075g加入15mL PBS缓冲液，于50°C 搅拌lh，将药物的PBS溶液趁热倒入梨形瓶中，反复振荡洗脱膜材，水化完全后，探头超 声或高压均质匀化，过〇. 22 μ微孔滤膜，即得尼莫地平-环糊精包合物柔性纳米脂质体 (NM-CD-FNL)〇
[0021] 所述步骤（2)的膜软化剂为聚氧乙烯氢化菌麻油40 (Cremophor RH40)、聚山梨 酯-80、山梨糖醇甘油酸酯、油酸聚乙二醇甘油酯中的一种或几种，优选的膜软化剂为聚氧 乙烯氢化菌麻油40 (Cremophor RH40)。
[0022] 本发明尼莫地平柔性纳米脂质体（Flexible nano-lipsomes, FNL)是在脂质体基 础上加入了膜软化剂，具有高度的柔韧性和渗透性，可有效的提高药物的生物利用度和治 疗效果，尤其在鼻腔给药上有生物粘附性强、吸收迅速、刺激性低等诸多优势。但其包裹脂 溶性药物存在药物易泄露、稳定性差等问题，如因 FNL中膜软化剂的作用和一些脂溶性药 物本身对脂质膜的干扰，致使FNL不稳定，易发生药物泄露；再者某些刺激性的脂溶性药物 往往分布于FNL结构中的亲脂外层，给药后较易于与鼻粘膜接触，长期使用可能会产生造 成一定的粘膜毒性。环糊精作为药物的载体，由于其特殊的空间结构，能与许多药物特别是 脂溶性药物形成包合物，改善药物的水溶性，可直接或间接提高药物的鼻吸收。作为优质的 鼻腔给药助溶剂或附加剂，低浓度的环糊精及其衍生物没有严重的纤毛毒性，如果将脂溶 性药物用环糊精包合，提高其水溶性，再将其制成环糊精包合物柔性纳米脂质体，使脂溶性 药物由外部亲脂层向FNL结构内部的水相分布，这对降低药物从FNL中的泄漏、避免或减少 药物直接暴露于黏膜产生刺激毒性非常有益，同时柔性纳米脂质体本身具有良好的吸收特 性，使得药物能够获得较好的生物利用度，成为既稳定又安全、生物利用度又高的用于制备 各种鼻腔给药剂型的尼莫地平脂质体。
[0023] 本发明采用饱和水溶液法制备NM-环糊精包合物，对工艺进行筛选和优化，得到 载药量高且操作相对简单的制备方法。包合物中NM载药量可达18%。
[0024] 本发明采用薄膜分散法将进一步制备尼莫地平-环糊精包合物柔性脂质体 (NM-CD-FNL)。通过单因素考察和正交设计实验优选处方：包合物和磷脂质量比为1:6,磷 脂和胆固醇质量比为5:1，磷脂和RH40质量比为2:1。稳定性考察结果显示，经室温及4°C 条件下放置后NM-CD-FNL的粒径、电位、包封率变化较小，与NM-FNL相比药物渗漏率明显降 低，说明NM-CD-FNL可有效降低尼莫地平从柔性纳米脂质体中的泄漏。
[0025] 本发明测定匪以及NM-CD-FNL大鼠鼻腔给药后体内的血药浓度，并以匪灌胃给 药（给药剂量为鼻腔给药的10倍）作为对比，分析比较其药时曲线特性及药动参数。采用 HPLC法进行匪体内分析，结果显示，即使给药剂量相较鼻给药提高了 10倍，匪口服给药后 血药浓度仍很低，且吸收较慢，相对NM-⑶-FNL鼻腔给药的生物利用度仅为13. 40%。与NM 鼻腔给药相比，NM-⑶-FNL鼻给药后吸收更迅速，较匪鼻腔给药达峰时间提前10min，Cmax 和AUC均有显著性提高，匪鼻腔给药相对于NM-⑶-FNL鼻腔给药的生物利用度为77. 33 %。 表明NM-CD-FNL用于