具有抑菌活性的聚戊烯醇微乳液的制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及具有抑菌活性的聚戊烯醇微乳液的制备方法，属于生物医药领域。
【背景技术】
[0002] 聚戊稀醇（polyprenols，GBP)是以C5异戊烯基为结构单元的类脂化合物，从结构 上可分：桦木醇型 w_(trans)2_(cis) n-〇H、菲卡醇型c^-(trans)3-(cis) n-〇H和前尼醇型 ?-(trans)n-〇H，见图1。聚戊烯醇是生物体细胞膜中糖蛋白合成过程中的重要活性成分， 参与生物体内多种代谢，生物活性十分广泛。
[0003] 拉脱维亚医科院和"BI0LAT"公司按照苏联卫生部药物委员会"新药用物质临床前 毒理试验要求"，结果表明，聚戊烯醇对人体安全无毒，无致突变，致畸及致癌作用。拉脱维 亚利用针叶聚戊烯醇开发了"R0PREN"制剂，在免疫功能、护肝、多发性硬化症、抗肝炎病毒 和爱滋病毒以及辅助化疗白血病等方面具有明显的药效。
[0004] 聚戊烯醇是生物体细胞膜糖蛋白生物合成的关键产物，以游离态醇或磷酸酯形式 分布于细胞膜中，并能够参与生物体内多种生理代谢活动，因此聚戊烯醇可作为良好的药 物运输载体。利用聚戊烯醇作为良好的生物细胞膜载体将药物送入细胞内部参与代谢，可 以较好的提高药物的生物利用度以及靶向性，从而达到减少药物使用量的目的。
[0005] 聚戊烯醇分子量大，具有强疏水性，导致聚戊烯醇在人体和动物体内的生物利用 度较低，更影响其生物活性研宄以及相关制剂开发。因此，将聚戊烯醇通过化学或物理方 法进行亲水改性，是解决聚戊烯醇制剂及其生物利用度问题的关键。对于聚戊烯醇化学 改性通常是通过对聚戊烯醇末端羟基进行取代，通过引入亲水基团达到改性目标；对于聚 戊烯醇物理改性可以采用制备聚戊烯醇微乳液来达到目的。本发明以桦木醇型聚戊烯醇 〇-(trans) 2-(cis)n-OH，其中η的范围为10~24为原料，来制备具有抑菌活性的聚戊稀醇 微乳液。
【发明内容】
[0006] 为实现上述目的，发明了具有抑菌活性的聚戊烯醇微乳液的制备方法，本发明解 决技术问题所采用的技术方案如下。
[0007] 制作上述聚戊烯醇微乳液的方法，其工艺步骤是： 第一步：将乳化剂以及助乳化剂混合并搅拌均匀，并在加热条件下，边搅拌边缓慢加入 聚戊烯醇若干，直至搅拌均匀，得到油相； 第二步：向第一步制得的油相中边搅拌边缓慢加入少量去离子水，体系会出现短暂浑 浊后变澄清； 第三步：待体系稳定后，在加热条件下，边搅拌边继续加入大量去离子水转相，体系将 由澄清变为浑浊，随后提高温度至Α，搅拌速度X，搅拌时间Τ，体系变为澄清即可得到聚戊 烯醇微乳液。
[0008] 所述的乳化剂包括聚氧乙烯失水山梨醇单油酸酯、聚氧乙烯失水山梨醇单棕榈酸 酯、聚氧乙烯失水山梨醇单硬脂酸酯、失水山梨醇单油酸酯、失水山梨醇单硬脂酸酯、失水 山梨醇单棕榈酸酯等中的一种或其中两种的复配混合物。
[0009] 所述的助乳化剂包括正丁醇、甘油或聚甘油酯中的至少一种。
[0010] 所述的乳化剂和助乳化剂的混合物与聚戊烯醇的质量比为1~5 :1。
[0011] 所述的乳化剂与助乳化剂的质量比为3~8 :1。
[0012] 所述的第三步中温度A为40~75 °C。
[0013] 所述的第三步中搅拌速度X为5000~20000 r / min。
[0014] 所述的第三步中搅拌时间T为5~30 min。
[0015] 所述的聚戊烯醇来源于银杏叶、松针叶、桑叶中的一种，聚戊烯醇的结构为桦木醇 型 co-(trans)2-(cis) n-〇H，其中 η 的范围为 10 ~24〇
[0016] 本发明还提供了所述的制备方法制得的具有抑菌活性的聚戊烯醇微乳液。
[0017] 对上述方法制成的聚戊烯醇微乳液进行粒径分布以及显微分析，结果显示该方法 制成的乳液平均粒径可达到100 Iim以下，粒径分布变异系数达到0. 4以下，如图2 ;显微显 示粒径分布较为平均且排列有序，如图3。
[0018] 对上述方法制成的聚戊烯醇微乳液按标准GB11543-89测定，离心稳定性、贮藏稳 定性及分散性结果均为1级，即乳液展现出良好的均匀性。冻融稳定性测试显示，聚戊烯醇 微乳液在经过多次循环冷冻后分散性仍能保持良好均匀性，达到1级。
[0019] 对上述方法制成的聚戊烯醇微乳液进行与抗生素配伍的抑菌协同作用考察，结果 显示，该乳液具有良好的协同抗生素抑菌作用，具体表现为：上述方法制成的聚戊烯醇微 乳液分别与氨苄西林、氧氟沙星、庆大霉素硫酸盐、红霉素以及多粘菌素 B硫酸盐联合使 用时，除了与氨苄西林和多粘菌素 B硫酸盐配伍对大肠杆菌无协同作用外，该乳液与氧氟 沙星、庆大霉素硫酸盐和红霉素配伍对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌均有不同程度的协同 抑制作用，即单一抗生素抑菌圈由8. 9~26. 8 mm上升至与该乳液配伍后抑菌圈11. 6~ 29. 5_，分级抑菌浓度指数最低达0. 5。同时，与其它平均粒径较大的聚戊烯醇微乳液相比， 本发明方法制得的聚戊烯醇微乳液具有更强的抑菌作用，因此本发明可以有效的提高聚戊 烯醇自身的抑菌能力。
[0020] 本发明的有益效果表现为： 1.本发明是利用微乳分散技术将脂溶性的聚戊烯醇油状物与一定比例的乳化剂、助乳 化剂和水形成外观呈微黄澄清、热力学稳定的水分散体系，该乳液体系平均粒径可达到100 nm以下，粒径分布变异系数达到0. 4以下，显微显示粒径分布较为平均且排列有序。该体系 可无限加水稀释，既能满足科研相关生物活性实验要求，又能在流体、半流体以及水含量较 高的相关食品、保健品、化妆品和药品中得到广泛应用。
[0021] 2.本发明制成的聚戊烯醇微乳液展现出良好的离心稳定性、贮藏稳定性、分散性 以及冻融稳定性，客服了聚戊烯醇因为疏水性强且分子量较大，难以在水相中平衡等问题， 从而提高了聚戊烯醇在科研、食品和药品中的实际应用。
[0022] 3.本发明避免了长时间搅拌、高温或高压均质等耗能高的方法，既能保持聚戊烯 醇的生物活性，又能节约能源，