从发酵液中提取并纯化尼莫克汀的方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及生物农药技术领域，特别涉及从尼莫克汀的发酵液中提取尼莫克汀， 继而对产物进行纯化，获得高纯度的尼莫克汀的方法。
【背景技术】
[0002] 尼莫克汀（Nemadectin)、莫西克汀（Moxidectin)属于莫西菌素，是微生物产生的 次级代谢物，是广谱、高效、新型的生物农药，莫西克汀是尼莫克汀的结构衍生物。尼莫克汀 是一种十六元大环内酯类抗生素，由蓝灰链霉菌经发酵过程生产，用于制备抗寄生虫制剂， 但更广泛用于合成活性更强的驱虫药莫西克汀。尼莫克汀的结构如下式所示：
【主权项】
1. 一种从发酵液中提取并纯化尼莫克汀的方法，包括以下步骤： 1) 将生产尼莫克汀的发酵液进行絮凝过滤，得到湿菌丝渣； 2) 用非水溶性的有机溶剂萃取湿菌丝渣，得到提取液； 3) 对提取液进行酸性洗涤纯化； 4) 对酸洗后的提取液进行浓缩，用烃类有机溶剂溶解后进行碱性洗涤纯化； 5) 对对碱洗后的溶液进行尼莫克汀衍生处理，再通过结晶分离出尼莫克汀衍生物； 6) 对尼莫克汀衍生物进行水解，还原为尼莫克汀； 7) 萃取水解液中的尼莫克汀，经结晶、干燥得尼莫克汀产品。
2. 如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤1)首先要将发酵液的pH调节为7. 5~ 9. 0,然后加入絮凝剂进行絮凝，所用絮凝剂为无机高分子絮凝剂。
3. 如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤2)所用非水溶性有机溶剂为为醋酸丁 酯和/或乙酸乙酯；萃取温度20-30°C。
4. 如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤3)中酸性洗涤用酸为盐酸或硫酸；洗 涤温度15-30°C。
5. 如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤4)所述烃类有机溶剂选自下列溶剂中 的一种或多种：甲苯、二甲苯、庚烷和己烷。
6. 如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤4)碱性洗涤所使用的碱性洗涤液为 Na2C03或K 2C03溶液，洗涤温度为30-35°C。
7. 如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤5)衍生处理使用的衍生试剂为含苯环 的酰氯或酸酐，缚酸剂为吡啶、二乙胺和/或三乙胺。
8. 如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤5)衍生反应终止后，反应液用NaHC03 溶液洗涤，然后真空浓缩，降温结晶，控制结晶终点温度5-10°C，分离收集潮晶，真空干燥得 尼莫克汀衍生物。
9. 如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤6)将尼莫克汀衍生物用水溶性有机溶 剂溶解，然后加碱进行水解反应，水解温度5-8°C。
10. 如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤7)向步骤3)的水解液中加入烃类有 机溶剂萃取尼莫克汀，收集有机萃取相，真空浓缩，降温结晶，控制结晶终点温度为5-KTC， 分离收集潮晶，干燥得尼莫克汀产品。
【专利摘要】本发明公开了一种从发酵液中提取并纯化尼莫克汀的方法。首先将发酵液进行絮凝过滤，得到湿菌丝渣，然后用非水溶性的有机溶剂萃取，将得到的提取液进行酸洗涤纯化，随后进行真空浓缩，改用极性较小的有机溶剂溶解并进行碱性洗涤纯化，接着对尼莫克汀进行衍生处理，通过结晶分离出尼莫克汀衍生物，再对衍生物进行水解还原为尼莫克汀，萃取水解液中的尼莫克汀，经结晶、干燥得含量高于80%的尼莫克汀产品。本发明方法对生产设备的要求低，条件温和，操作简单，避免了使用昂贵的大孔树脂、层析硅胶及繁琐的层析操作过程，获得的尼莫克汀纯度高，更适宜进行规模化生产。
【IPC分类】C07H19-01, C07H1-06
【公开号】CN104628802
【申请号】CN201310547873
【发明人】李华德, 张洪兰, 欧建民
【申请人】北大方正集团有限公司, 北大国际医院集团重庆大新药业股份有限公司, 北大医疗产业集团有限公司
【公开日】2015年5月20日
【申请日】2013年11月7日