专利名称：一种用于关节腔内注射的复方马钱子总碱注射剂的制备方法
技术领域：
本发明属于医药科技领域，涉及一种用于关节腔内注射的复方马钱子总碱注射剂的制备方法。
背景技术：
骨性关节炎(0steoarthritis，0A)是一种以关节疼痛、僵硬、屈伸及行走受限甚至关节畸形、残废为主要表现的骨科常见多发病。目前临床用于防治OA的方法众多非甾体抗炎镇痛类药物可以缓解关节疼痛症状，但不会抑制病情进展，还存在不少不良反应；关节软骨营养与保护剂，如氨基葡糖氨等远期的临床疗效尚不肯定；外科治疗存在创伤大、费用高等，并不普及。关节内注射药物治疗OA是近十多年来推广应用的一种疗法，它直接针对病所施药，作用快速。临床实践表明，目前应用最广泛的注射关节润滑剂SH对疼痛较重而畸形不明显的早期OA患者能较快地改善症状，恢复关节的润滑功能，显示出较好的近期临床疗效。但在长期临床治疗中发现，SH远期疗效不明确，对中晚期OA的患者治疗效果更是不理想。目前证实中药制剂关节腔内注射治疗0A，能起起到延缓关节软骨降解，保护软骨细胞，促进软骨修复，抑制炎症介质的释放，减轻滑膜炎症，改善关节症状等功效，从而达到抑制关节软骨的退化、改善关节的血液循环、减轻滑膜炎症及关节肿痛与功能障碍等症状，但目前尝试用于关节腔的中药注射剂主要以活血化瘀类为主，还缺少从补肝肾、壮筋骨、祛风湿等类药物的研究。已有的研究证明中药制剂联合SH关节腔内注射的效果，优于单独使用SH注射治疗。中药、西药联合制剂关节腔注射具有作用直接、起效迅速的特点。马钱子具有祛风湿、通络、消肿止痛之功效，是中医临床治疗关节炎常用药物之一。张梅等研究发现，马钱子总碱中的马钱子碱能明显降低NO诱导的软骨细胞早期凋亡，提示马钱子碱有保护关节软骨作用；徐丽君等研究证实马钱子总碱能够抑制动物实验性关节炎症进展，证实马钱子总碱是马钱子治疗起到主要药效的原因。目前已有证据证实马钱子总碱可以对OA可以起到标本兼治的效果。但马钱子为毒性药物，口服应用会出现全身的毒副反应。得启发于中药制剂关节腔注射对OA作用的系列研究，我们将马钱子总碱的提取物制成关节腔注射剂进行研发。SH呈弱酸性，而马钱子总碱呈弱碱性，SH不仅可以与马钱子总碱侧链碳氮环上的氢氧根键相结合，而且这种结合不会损坏总碱在直轴上以氢键为连接而起主要治疗作用的性质(《天然药物化学》-生物碱与酸反应)；同时，SH还是关节滑液的组成成份。因此，利用SH作为溶剂来配制马钱子总碱制成关节腔注射剂，二者可起协同效应，在保证润滑关节腔的基础上可以达到控释马钱子总碱的作用，维持其稳定的治疗浓度，延长其在关节腔内的作用时间而发挥局部治疗效应，改善用药的顺应性，降低毒副作用的效果
发明内容
本发明提供一种制备方法简单、稳定性好、毒副作用小、起效迅速、疗效持久的复方马钱子总碱注射剂。由于马钱子为毒性药物，口服应用会出现全身的毒副反应，为了达到复方马钱子总碱注射剂的治疗效果，首先要解决马钱子的毒性问题，避免使用过程中出现毒副反应；其次要解决马钱子总碱的提取问题；再次解决马钱子与SH的配比问题；还要解决注射剂的制备问题；最后解决注射剂对OA的药理效果的问题。基于上述问题，根据我们的研究结果，确定其剂型为注射制剂。因此本发明的目的是提供一种复方马钱子总碱注射剂及其制备方法，通过合理组方，有效成分的提取纯化，干燥提取物的定量投料，制备安全有效、稳定可控的注射剂。本发明解决其技术问题所采用的技术方案是一种用于关节腔内注射的复方马钱子总碱注射剂，它是以马钱子总碱与SH为复方药物原料制成。本发明注射剂所用原料的最佳配比马钱子总碱与SH的最佳配比例范围为31. 25 62. 5 =IOO0本发明注射剂中马钱子总碱的最佳浓度范围为3. 125 6. 25 mg/ml。本发明注射剂中马钱子总碱的助溶条件为加入适量的溶媒，其中IOml溶媒的配制处方为将5ml 1,2-丙二醇和0. 2ml吐温-80加入4. 8ml 5%葡萄糖中充分混勻，得到的IOml溶液中含50% 1,2-丙二醇、2%吐温-80。本发明的一种马钱子总碱玻璃酸钠关节腔内注射剂，其特征在于其制备方法按以下步骤
(1)马钱子总碱的制备
提取采用酸性乙醇加热回流提取法将烫砂马钱子粉碎，过筛，称取300g的马钱子细粉，在细粉中加入6倍量pH=5的50%乙醇提取3次，每次Ih ；合并3次提取液，抽滤，滤液经旋转蒸发器挥干乙醇，IOml (3 — 100)硫酸溶解，加氨水调pH值至9 10，静置6小时；最后用氯仿萃取3次，每次静置萃取时间为2小时，合并氯仿层萃取液。纯化抽滤上述萃取液，将滤液与碱性氧化铝充分混合，蒸发干燥拌勻，干法装入含有碱性氧化铝填充的柱色谱(ΡΗ=9 10)；先用极性较小的石油醚冲柱，然后分别用氯仿、氯仿和无水乙醇(8:1、7 :2、5 :4、1 :8)、无水乙醇冲洗柱，分别用容量瓶接取，再依次取少量溶液用磷钼酸、碘化铋钾、苦味酸试剂鉴定，静置观察反应，综合沉淀多、反应体系颜色深的相应溶液；最后，0. 22 μ m的双层滤膜精滤，真空干燥，得到较纯的马钱子总碱。(2)注射剂的制备
取适量按一定比例配好的溶媒，加入适量的马钱子总碱粉末，超声震荡20分钟，至澄清，再加入适量的透明质酸钠粉末，充分搅拌混勻，超声震荡20分钟。将上述制剂加入pH调节剂，将PH值调至6 7。按每支2ml量熔封，115°C 30min终端灭菌制成。本发明提供的复方马钱子总碱注射剂的规格为anl，其中马钱子总碱的含量为6. 25 12. 5 mgo本发明的优点在于
1、处方精炼，配伍合理。2、提取物中有效成分的纯度高。3、质量稳定可控。本发明采用提取纯化的有效成分定量投料制成注射剂，克服了药材质量波动对制剂的影响，并通过制定和执行严格的提取物内控标准及指纹图谱技术，保证了注射液批与批之间质量的稳定性与均一性。下面结合实施例对本发明专利做进一步说明。实施例(马钱子总碱的浓度为3. 125 mg/ml)
处方
权利要求
1.一种用于关节腔内注射的复方马钱子总碱注射剂的制备方法，其特征在于先采用酸性乙醇加热回流提取法从马钱子原药材中粗提出马钱子总碱，再通过碱性氧化铝色谱柱法分离纯化，最后经0. 22 μ m的双层滤膜精滤，真空干燥，得到较纯的马钱子总碱；然后以马钱子总碱与玻璃酸钠(Sodium Hyaluronate, SH)为复方药物原料，与合适溶媒按一定的配比溶解后，加入PH调节剂，过滤，灭菌，配制成专门用于关节腔内注射的复方马钱子总碱注射剂；其中SH可延长马钱子总碱在关节腔内的作用时间，充分发挥该注射剂的抗炎、镇痛和消肿作用。
2.根据权利要求1所述的一种用于关节腔内注射的复方马钱子总碱注射剂的制备方法，其特征在于药物用于关节腔内注射，能充分发挥抗炎、镇痛和消肿作用。
3.根据权利要求1所述的一种用于关节腔内注射的复方马钱子总碱注射剂的制备方法，其特征在于注射剂主要由马钱子总碱与SH配制而成，利用了 SH可以作为一种溶剂让总碱溶入其中的特性，同时利用了弱酸同弱碱相结合，而且在不损坏总碱在直轴上以氢键为连接而起主要治疗作用的基础上，从而达到控释马钱子总碱的作用，延长马钱子总碱在关节腔内的作用时间，SH还是关节滑液的组成成份，可充分发挥抗炎、镇痛、消肿作用。
4.根据权利要求1所述的一种用于关节腔内注射的复方马钱子总碱注射剂的制备方法，其特征在于马钱子总碱的提取纯化按以下步骤进行主要用酸性乙醇加热回流进行粗提，再通过碱性氧化铝色谱柱法分离，最后0. 22 μ m的双层滤膜精滤，真空干燥，得到较纯的马钱子总碱。
5.根据权利要求1所述的一种用于关节腔内注射的复方马钱子总碱注射剂的制备方法，其特征在于(1)马钱子总碱与SH的最佳配比例范围为31. 25 62. 5 :100 ；(2)注射剂中马钱子总碱的浓度范围为3. 125^6. 25 mg/ml ； (3)注射剂中马钱子总碱的助溶条件为加入适量的溶媒，其中IOml溶媒的配制处方为将5ml 1，2-丙二醇和0. 2ml吐温-80加入4. 8ml 5%葡萄糖中充分混勻，得到的IOml溶液中含50% 1,2-丙二醇、2%吐温-80。
6.经药理或临床验证有效的溶剂配比、附加剂组成与比例以及药物浓度等，本专利也同样适用。
全文摘要
本发明公开了一种用于关节腔内注射的复方马钱子总碱注射剂的制备方法，具体制备方法包括采用酸性乙醇加热回流提取法从马钱子原药材中粗提出马钱子总碱，再通过碱性氧化铝色谱柱法分离纯化，最后经0.22μm的双层滤膜精滤，真空干燥，得到较纯的马钱子总碱。然后以马钱子总碱与玻璃酸钠(SodiumHyaluronate,SH)为复方药物原料，与合适溶媒按一定的配比溶解后，加入pH调节剂，过滤，灭菌，配制成专门用于关节腔内注射的复方马钱子总碱注射剂。其中SH可延长马钱子总碱在关节腔内的作用时间，充分发挥该注射剂的抗炎、镇痛和消肿作用。
文档编号A61P29/00GK102552406SQ20121001329
公开日2012年7月11日 申请日期2012年1月17日 优先权日2012年1月17日
发明者李孝栋, 章芬, 苏友新, 郑良朴, 陈秀明, 陈立典 申请人:福建中医药大学