专利名称：一种预防和治疗动物结核病的天然药物组合物的制作方法
技术领域：
本发明是关于一种预防和治疗动物结核病的天然药物组合物，本发明属于医药领域。
背景技术：
结核病是由结核分枝杆菌复合群引起的各种疾病的总称。结核分枝杆菌复合群(Mycobateria tuberculosis complex, MTC)包括人结核分枝杆菌(Mycobacteriatuberculosis)、牛分枝杆菌(M. bovis)、非洲分枝杆菌(M. africanum)和其它分枝杆菌。牛分枝杆菌对人、牛和家禽等牲畜有致病性，又称牛型结核分枝杆菌。与人型结核分枝杆菌的形态和生长特性基本相似。牛分枝杆菌主要感染不同种属的温血动物，包括有蹄动物、有袋动物、食肉类动物、灵长类、鳍脚类动物和啮齿类动物在内的50多种哺乳动物，还包括类鹦鹉鸟、石鸽、北美洲乌鸦等20多种禽类。其中牛是最敏感的动物(Reillyetal. 1995)。由于牛和人类的关系(牛奶、牛肉及制品等)较其他动物更为密切，因此约10%左右的人结核病 (不同的国家和地区不同有不同的比例)是由牛分枝杆菌引起。牛结核病的传染流行不仅会严重影响到畜牧业的健康持续发展，而且还威胁着人类的身心健康。目前治疗结核病的一线药物主要有异烟肼、利福平、吡嗪酰胺、乙胺丁醇、链霉素等，随着这些药物的应用，耐药结核分枝杆菌也随之产生，而且这些药物应用于兽药领域也存在动物体内药物残留的问题。在这种情况下，从天然药物中选择合理组方治疗动物结核，则具有重要应用价值。本发明所述的天然药物组合物由蛇床子、苦参、侧柏叶三种天然药物组方而成。蛇床子，为伞形科(Umbelliferae)蛇床属植物蛇床(Cnidium monnieri (L.)Cuss.)的干燥成熟果实。蛇床子性温，味辛苦，有小毒。外用燥湿杀虫止痒，内服温肾壮阳，祛风燥湿。有实验证明其中的蛇床子素对于结核杆菌有较好的抑制杀菌作用，其作用机制为干扰细菌蛋白质合成，表面多糖和脂多糖的生物合成及降解，并对结核杆菌的能量代谢产生干扰，从而实现杀菌作用，并证明蛇床子不易产生耐药性(赵全民.抗结核杆菌有效中药筛选及蛇床子素对结核杆菌分子表达影响的研究[D].吉林农业大学，2011.)苦参，(Radix Sophorae Flavescentis),别名为苦骨、牛参等是豆科植物苦参Sophora flavescensAi. t的干燥根。在中药中按功效分类是属于清热药中的清热燥湿药。性寒味苦，归心、肝、胃、大肠和膀胱经。具有清热燥湿，杀虫，利尿的功能。实验证明其中的苦参碱可以降低DNA含量，对结核杆菌标准株H37Rv有抑制作用，最低抑菌浓度值为IOmg/L并具有提高免疫力，抗病毒，抗炎、抗肿瘤、保护肝脏功能等方面的生物活性。(宋文刚，等·中药抗结核分支杆菌研究[J] ·北华大学学报(白然科学版)，2007 (2)，150-151.)侧柏叶为柏科植物侧柏Platycladus orientalis (L. ) Franco的干燥枝梢及叶性寒、味苦涩，具有凉血、止血、生发乌发的功效。实验发现发现侧柏叶醇提取物对肺结核患者有较好的疗效(山东省结核病防治院侧柏叶乙醇浸膏片治疗肺结核的临床总结(内部资料)1979)，并从中分离出抗结核有效成份侧柏异海松酸。(吉德珍等侧柏叶抗结核有效成份的分离及化学研究。华东地区第二次药用植物化学学术会议论文集，1982)。目前异海松酸以被开发成治疗人结核病的药物制剂-抗痨胶囊，具有较好的疗效。本发明是由蛇床子、苦参、侧柏叶这三种天然药物组方而制成兽药制剂，其中这三种天然药物中的主要有效成分结构具有较大差异，通过不同的角度对结核杆菌起到抑制和杀灭的作用，这能够很好地避免了耐药性问题。本发明所述三种天然药物均具有低毒的特点，可以饲料添加剂的形式作为预防制剂使用。本发明所述制备工艺是以三种药效成分的较好提取为基础的，但却没有过分精纯，这在保证了药效的前提下又保留了复合成分治疗的优越性。
发明内容
本发明的目的是提供一种预防和治疗动物结核病的天然药物组合物，其特征在于由蛇床子、苦参、侧柏叶组方而成。本发明所述的天然药物组合物中的主要有效成分结构具有较大差异，通过不同的角度对结核杆菌起到抑制和杀灭的作用，这能够很好地避免了耐药性问题。·本发明中所述组成药物组合物的三种天然药物均具有低毒的特点，可以饲料添加剂的形式作为预防制剂使用。本发明相对于现有技术具有纯天然疗效确切、无毒副作用、价格低廉等优点。本发明所述的天然药物组合物由下述重量份的原料制成蛇床子2-5份、苦参1-3份、侧柏叶2-5份。本发明所述的天然药物组合物的制备方法如下蛇床子用70% -95%乙醇回流提取2-3次，过滤，滤液回收乙醇，得浓缩液，干燥，粉碎；苦参用50% -70%乙醇回流提取2-3次，过滤，滤液回收乙醇，得浓缩液，干燥，粉碎；侧柏叶直接粉碎或用60% -95%乙醇提取2-3次，每次1-3小时，过滤，滤液回收乙醇，浓缩，干燥，粉碎；三种粉碎物混匀，即得。本发明所述的天然产物组合物具有防治动物结核病的功能，是通过以下药效学实验得到证实的(实验所用药用组合物为在实施例I中制备的药用组合物)。取组合物用O. 5%吐温80水溶液溶解或混悬，制成含药浓度分别为5，2，O. 5，O. 1，
O.02mg/ml共五个浓度的含药培养基；5mg/ml的利福平培养基,每个浓度平行装2支试管，以O. 5%吐温80水溶液作为空白对照培养基。取适量无药改良罗氏培养基上20-30d后生长良好的AFZ12结核杆菌菌株。取上述菌种适量，置盛0.5% (v/v)吐温80生理盐水的玛瑙研钵中，研磨成混悬液，将浓度调整至lmg/ml再用生理盐水稀释,使之浓度为O. 5X 1021mg/ml供接种用。取该菌液O. Iml在无菌条件下分别接种于不同浓度的各培养基中，使接种菌量约为O. 5X 1023mg/ml。放入37°C恒温箱中培养，I周后开始观察培养基表面菌落生长情况。菌落生长情况如表所示
权利要求
1.一种预防和治疗动物结核病的天然药物组合物，其特征在于由蛇床子、苦参、侧柏叶组方而成。
2.根据权利要求I所述的天然药物组合物，其特征在于由下述重量份的原料制成蛇床子2-5份、苦参1-3份、侧柏叶2-5份。
3.根据权利要求I和2所述的天然药物组合物，其制备方法如下(1)蛇床子用70%-95%乙醇回流提取2-3次，过滤，滤液回收乙醇，得浓缩液，干燥，粉碎；(2)苦参用50%-70%乙醇回流提取2-3次，过滤，滤液回收乙醇，得浓缩液，干燥，粉碎； (3)侧柏叶直接粉碎或用60%-95%乙醇提取2-3次，每次1-3小时，过滤，滤液回收乙醇，浓缩，干燥，粉碎； (4)三种粉碎物混匀，即得。
4.根据权利要求I和2所述的天然产物组合物，与兽药可接受载体混合，制成兽药制剂。
全文摘要
一种预防和治疗动物结核病的天然药物组合物，其特征在于由蛇床子、苦参、侧柏叶组方而成，可与辅料混合制成兽药制剂。
文档编号A61P31/06GK102755377SQ20121028314
公开日2012年10月31日 申请日期2012年8月10日 优先权日2012年8月10日
发明者李庆杰, 王春雨, 王海军, 王莲萍, 赵全民 申请人:吉林农业大学