皮肤外用剂的制作方法
【专利摘要】以提供共具皮肤中的角化细胞增殖及分化促进作用以及胶原产生增强作用，辅助表皮及真皮的组织结构或生理功能的维持、改善，带来优良的皮肤改善效果的，有持续性的抗皱纹作用的皮肤外用剂作为课题，通过提供含有α-D-吡喃葡萄糖基-（1→3′）-腺苷及/或α-D-吡喃葡萄糖基-（1→5′）-腺苷作为有效成分的皮肤外用剂解决。
【专利说明】皮肤外用剂
【【技术领域】】
[0001]本发明涉及以a -D-吡喃葡萄糖基-(I — 3')-腺苷及/或a -D-吡喃葡萄糖基-(I —5' )_腺苷(以下，各称为“3'-葡萄糖基腺苷”及“5'-葡萄糖基腺苷”，另外，它们有时总称为“葡萄糖基腺苷”)作为有效成分而成的持续性的抗皱纹用皮肤外用剂。
【【背景技术】】
[0002]皮肤形成身体的最外层，由实现从外界保护活体的同时防体内的水分或营养分漏出到外界的作用的外侧的薄的表皮(上皮组织)，和有主要成纤维细胞、胶原(胶原)纤维、弹性纤维、蛋白聚糖等复合性地以三维状扩展的结构，给皮肤带来强度、伸展性及弹力性等的有厚度的真皮(结缔组织)构成。皮肤的状态通过表皮和真皮一同维持各自的健全的组织结构及生理功能而保持。
[0003]皮肤的表皮从真皮侧分为“基底层”、“棘层”、“颗粒层”及“角质层(角层)”，主要由被称为角化细胞(角化细胞)的细胞构成。角化细胞在最下层的基底层作为有分裂能力的未成熟的细胞形成单层，分裂增殖而叠在上层的同时在该过程分化(“角化”)，最终成为作为无核的死细胞的角质细胞而形成角质层，在其表层部分成垢而脱落。在皮肤表皮，通过此角化细胞的增殖、移动、分化、然后脱落的过程以一定的周期圆滑地更新而保持其恒定性。
[0004]但是，皮肤由年龄的增加、干燥、氧化、太阳光(紫外线)等的各种各样的要因劣化而失去水分，以皱纹的发生为始，呈松弛的发生、张力或弹力性的降低等各种各样的现象。那样的皮肤的劣化被认为是，由真皮中的成纤维细胞的胶原合成降低而真皮中的胶原量减少是I个大的原因，为了改善 胶原量的减少而开发了配合胶原或胶原产生增强剂的多种皮肤外用剂或食品等(参照例如，专利第3495217号公报及特开2007-186471号公报)。
[0005]另一方面，在形成身体的最外层的表皮中也发生成为皱纹的发生等的要因的不期望的状态。即，构成表皮的角化细胞的增殖及分化被抑制，从下层的角质细胞的供给及上层中的角质层的形成减少，通过角质层的更新受阻滞，发生角质层的肥厚化及水分量的减少等，还有由角质层的保湿功能及屏障功能降低。另外，由低湿度环境，或过量的皮肤清洗、年龄的增加、体质等而皮肤的干燥进行，则发生易引起角质层的多重剥离，皮肤光泽降低，化妆变差等的弊害，进而，发生皱纹的发生或皮肤粗糙等的问题。为了改善此问题，进行促进角化细胞的增殖或分化的尝试，提案了配合具有角化细胞分化促进活性的物质的用于皮肤的组合物(参照例如，特表2001-510777号公报或特表平8-507289号公报)。
[0006]如上所述，多数提案了改善以皱纹的发生为首的皮肤状态的劣化、即，真皮中的产生胶原的能力的降低及表皮中的角质层的更新的劣化的各种各样的物质及皮肤中使用的组合物。但是由于，它们均仅着眼于改善表皮或真皮的任何一方的症状，无法充分满足其抗皱纹作用，期望改善表皮和真皮的两方的症状，可总地保持皮肤的恒定性的，带来高的抗皱纹作用的皮肤外用剂的开发。作为有这样的功能的物质，在特开2009-149557号公报中公开了促乳素，但由于促乳素是肽，在制剂化之时或作为外用剂用于皮肤时的稳定性、向基底层的渗透性等的方面有问题。为了解决这些的问题，尚强烈期望作用于表皮和真皮的两方而有优良的抗皱纹作用的同时，其效果的持续性也优良的新颖的成分及使用其的皮肤外用剂。
【
【发明内容】
】
[0007]本发明鉴于如上述一样的事情，以提供有辅助表皮和真皮两方的组织结构及生理功能的改善，带来皮肤改善效果，维持皮肤的正常的状态的作用，并且，适用于皮肤也稳定且对活体不带来恶影响而安全的，新颖的持续性的抗皱纹用的皮肤外用剂作为课题。
[0008]本发明人为了解决上述课题着眼于核酸关联的物质，重复锐意研究，重复各种试行错误之过程中，从对活体的安全性的方面考虑，选择作为在活体内原本存在的成分的腺苷进行研究。对于腺苷自体，已知有增强真皮中的胶原产生增强作用或毛乳头细胞的角化细胞增殖的作用(例如，国际公开W005/034902号单行本或国际公开W005/044205号单行本)、但由本发明人的研究判明，腺苷被在活体内原本存在的酶快速代谢，有其效果难持续的情况，再者，腺苷对亲水性溶剂的溶解度低，配合于皮肤外用剂时，伴随处理困难。本发明人为了解决这样的问题，再者重复研究时发现，在腺苷的3'位或5'位(腺苷分子中的核糖的3位或5位)的羟基上α结合I分子D-葡萄糖的3,-葡萄糖基腺苷及/或5,-葡萄糖基腺苷作用于表皮角化细胞，有相比腺苷更显著地优良的角化细胞增殖及分化促进作用。
[0009]再者，本发明人发现，上述葡萄糖基腺苷也作用于真皮的成纤维细胞，有相比腺苷更显著地优良的胶原产生增强作用。
[0010]再者，本发明人发现，上述葡萄糖基腺苷与抗坏血酸2-葡萄糖苷等的糖苷不同，意外地难以受在活体内存在的分解酶等的作用，在活体内环境相比腺苷更稳定，其效果的持续性也优良。
[0011]再者，本发明人发现，上述葡萄糖基腺苷相比腺苷向亲水性溶剂的溶解性更优良。
[0012]再者，本发明人发现，上述葡萄糖基腺苷相比腺苷更难引起细胞障碍，另外，如上述一样，虽然在活体内相比腺苷更稳定，缓慢地分解，生成的腺苷快速代谢，所以是适用于人也安全的物质，确认作为有抗皱纹作用的皮肤外用剂的成分，效果的强度，持续性及安全性之任何方面相比腺苷更有用，从而完成本发明。
[0013]即，本发明通过提供含有3'-葡萄糖基腺苷及/或5'-葡萄糖基腺苷作为有效成分的有持续性的抗皱纹作用的皮肤外用剂解决了上述课题。
[0014]顺便而言，虽然3'-葡萄糖基腺苷及5'-葡萄糖基腺苷本身是，例如，公开于铃木幸雄、内田銅、“科学和工业”、65卷、6号、265~274页(1991年)或，Shuji Takahashi等、“The Journal of Antibiotics”、47 卷、I 号、95 ~100 页(1994 年)而公知的物质,但完全不知促进其表皮角化细胞的增殖及分化的效果，或有增强对真皮的成纤维细胞的胶原产生的效果，有抗皱纹作用，它们的效果相比糖苷化前的腺苷更增强，或相比腺苷更难以受由在活体内原本存在的酶的分解，稳定且上述效果的持续性高。
[0015]本发明的以葡萄糖基腺苷作为有效成分的本发明的皮肤外用剂由于共具表皮角化细胞的增殖及分化促进作用和真皮的成纤维细胞的胶原产生增强作用，所以可促进由各种的要因降低的表皮的角质层的更 新而改善角质层的肥厚化、水分量的减少等，改善保湿功能及屏障功能，同时增加真皮中的胶原量而提高皮肤的张力或弹力性，从而发挥优良的抗皱纹作用，另外，更有效改善皮肤粗糙，皮肤暗沉，张力或弹力性的降低、干皮症等的各种各样的皮肤症状，将皮肤维持在正常的状态。
[0016]再者，本发明的葡萄糖基腺苷相比腺苷向亲水性溶剂的溶解性更优良，配合到皮肤外用剂时相比腺苷更容易处理。
[0017]再者，虽然本发明的葡萄糖基腺苷相比腺苷更稳定，另外，相比抗坏血酸2-葡萄糖苷等的其他糖苷更难被酶分解，但由在活体内存在的分解酶的作用缓慢地分解为D-葡萄糖和腺苷，生成的腺苷快速代谢，所以是即使适用于人也安全的物质，因此相比腺苷在效果的持续性方面也更优良。
[0018]另外，本发明的葡萄糖基腺苷有效果的持续性优良的抗皱纹作用，所以特别是在比较长时间适用于皮肤的皮肤外用剂中使用是适宜的，作为在那样的皮肤外用剂中使用的有防腐或静菌作用的抗菌剂，即使连续使用也对皮肤的刺激少，并且，不损害本发明的葡萄糖基腺苷的效果的是优选的，通过与它们联用可大大发挥本发明的效果。
[0019]另外，本发明的葡萄糖基腺苷对酶等稳定，所以与在皮肤外用剂中使用的其他成分联用也难以受其影响，尤其是与植物的提取物等天然的成分联用时，由它们中含的酶等分解的担忧少，所以可稳定发挥那些其他成分所具有的活性和葡萄糖基腺苷所具有的抗皱纹作用，可制造优良的皮肤外用剂。
[0020]【实施方式】
[0021]如上所述，本发明涉及含有3'-葡萄糖基腺苷及/或5'-葡萄糖基腺苷作为有效成分而成的有持续性的抗皱纹作用的皮肤外用剂。
[0022]本发明中所说的皮肤外用剂含有上述葡萄糖基腺苷，所以有表皮角化细胞的增殖及分化促进作用和胶原产生增强作用的两方的作用，其效果的持续性也优良，所以可在抑制以皱纹的发生为首的皮肤的劣 化，皮肤粗糙，皮肤暗沉，张力或弹力性的降低、干皮症等的各种各样的皮肤症状的改善中使用。
[0023]作为本发明的皮肤外用剂的有效成分使用的葡萄糖基腺苷是含有3,-葡萄糖基腺苷和5'-葡萄糖基腺苷的任何一方或其两方均可。再有,如后述一样,5'-葡萄糖基腺苷对在活体内存在的酶等的活体成分的稳定性优良，对水等的亲水性溶剂的溶解性高，另外，3'-葡萄糖基腺苷易以比较低浓度发挥效果，所以根据皮肤外用剂的剂形或目的将它们适宜组合使用是优选的。另外，本发明的皮肤外用剂含有在上述葡萄糖基腺苷的葡萄糖上再α -1，4、α -1，6及/或α -1, 3结合I分子以上D-葡萄糖的α -糖基腺苷也可。
[0024]本发明的皮肤外用剂中使用的葡萄糖基腺苷可由酶法制备。另外，根据必要，由发酵法或合成法制备也可。如果以经济性作为问题，使用糖转移酶的酶法是有利的。
[0025]本发明中使用的葡萄糖基腺苷无必然高度纯化的必要，在含有如给皮肤带来恶影响的杂质的等的安全性上无问题，只要不妨碍期望的效果，对其纯度无特别限制。根据本发明的皮肤外用剂的施用形态或剂形，是含有作为制造原料使用的腺苷的酶反应后的反应液本身也可，是与其制造方法所特有的其他物质的未分离组合物的形态也可，是部分纯化的，或者，高度纯化的也可。另外，将高度纯化的3,-葡萄糖基腺苷和5,-葡萄糖基腺苷根据目的适宜混合使用也可。
[0026]本发明中所说的表皮角化细胞的增殖及分化促进作用是指，促进表皮的基底层中存在的角化细胞的分裂增殖、及，这样的细胞叠在上层而向形成棘层、颗粒层及角质层的细胞分化，最终至作为无核的死细胞的角质细胞的任一过程，或者，其全过程，维持健康的表皮的作用。另外，本发明中所说的胶原产生增强作用是指亢进真皮中存在的成纤维细胞的胶原产生的作用。
[0027]本发明的皮肤外用剂的施用量，只要得到本发明的期望的效果，就无特别限制，通常、I天I次至分为多次，施用每I天的指定量即可。每I天的施用量，是通常、作为有效成分的葡萄糖基腺苷，每Icm2皮肤涂布0.001~IOOmg即可,优选0.05~IOmg,更优选0.01~Img0经皮的施用量相比每Icm2皮肤0.0Olmg更少，则有得不到期望的效果的时候，施用超
IOOmg，有得不到与施用量匹配的效果的时候。
[0028]本发明的葡萄糖基腺苷单独作为皮肤外用剂的有效成分使用也可，但只要不妨碍本发明的效果，也可随意以适宜配合其他有皮肤改善作用、胶原产生增强作用或角化细胞的增殖及分化促进作用的其他药剂、还有美白剂、抗氧化剂、抗炎症剂、保湿剂等，任意的药效成分的形态使用，与它们的作用一同，也发挥上述的葡萄糖基腺苷的效果的皮肤外用剂也可。另外，只要不妨碍本发明的效果，可根据其形态或剂形，通常添加可在化妆品、药品、准药品等中使用的适宜的载体、赋形剂、稳定剂、缓冲剂、PH调节剂、溶剂等、任意的助剂等，以粉末状、颗粒状、溶液等、任意的形态使用。
[0029]本发明的皮肤外用剂中的葡萄糖基腺苷的配合量，根据其形态或剂形等，只要可达成其效果就无限定，通常、配合至成制剂全量中0.001~30质量％即可，0.01~10质量％是优选的，0.1~5质量％是特别优选的。本发明的葡萄糖基腺苷，在向皮肤外用剂中配合超30质量％时也有得不到与配合量匹配的效果的情况，另外，少于0.001质量％时也有得不到期望的效果的情况。
[0030]本发明的皮肤外用剂可通过促进表皮中存在的角化细胞的增殖及分化，提高角质细胞的供给而促进角质层的更新，改善导至功能降低的皮肤的状态，维持适当的状态。
[0031]再者，本发明的皮肤外用剂可通过增强与由表皮角化细胞的神经酰胺合成或由真皮的成纤维细胞的胶原合成相关的基因的表达，增加表皮的神经酰胺量或真皮的胶原量而提高皮肤的弹力性、张力，屏障功能等，改善导致功能降低的皮肤的状态，维持适当的状态。
[0032]从而，本发明的皮肤外用剂可升高皮肤的保湿功能，预防或改善皮肤粗糙，皱纹、皮肤的张力或弹力性的降低、皮肤的屏障功能的降低、皮肤的干燥、干皮症、干癣等，任意的皮肤症状。另外，葡萄糖基腺苷除了角化细胞增殖及分化促进作用、胶原产生增强作用、神经酰胺合成促进作用之外，有保湿作用，所以本发明的皮肤外用剂，不仅用于角化细胞增殖及分化促进剂、胶原产生增强剂、神经酰胺合成促进剂的制造，在保湿剂的制造中使用也可有利地实施。还有，也可随意在作为与神经酰胺合成相关的酶的β葡萄糖脑苷脂酶(GCase)或鞘磷酯酶(SMase)的基因的表达增强剂的制造中使用。
[0033]这样的本发明的皮肤外用剂有效果的持续优良的抗皱纹作用，从比较长时间适用于皮肤的方面，配合具有防腐或除菌作用的抗菌剂是优选的。作为抗菌剂，可举出安息香酸及其盐类、水杨酸及其盐类、山梨酸及其盐类、脱氢醋酸及其盐、以对羟基安息香酸烷酯为首的对羟基安息香酸酯、依地酸、2，4，4'-三氯-2'-羟基二苯基醚、3，4，4'-三氯二苯脲、六氯酚、氯化苯扎铵、苯氧乙醇、扁柏酚、间苯二酚、乙醇、1，3-丁二醇、感光素201号、乳酸、1，2-链烷二醇、梔子提取物、苦参提取物、鼠尾草提取物、百里香提取物、艾蒿提取物、黄檗提取物、等的有抗菌作用的植物的提取物。[0034]尤其是，本发明的皮肤外用剂，连续使用也对皮肤的刺激少，并且，通过配合不损害本发明的葡萄糖基腺苷的效果的抗菌剂，可大大发挥本发明的效果。上述抗菌剂之中，I, 2-链烷二醇或1，3- 丁二醇等的非对羟基安息香酸酯系的成分在向皮肤的刺激性的低，防腐效果高及保湿性的方面是优选的。作为1，2-链烷二醇，碳原子数4~10的1，2-链烷二醇是优选的，尤其是，选自1，2_戊烷二醇、1,2-己烷二醇、1,2-庚烷二醇或1,2-辛烷二醇的I种或2种以上的1，2-链烷二醇是特别优选的。再有，为了将本发明的葡萄糖基腺苷和这些抗菌剂在皮肤外用剂中均质地配合，只要不损害本发明的效果，也可随意使用适宜的表面活性剂。
[0035]再者，本发明的皮肤外用剂可以与葡萄糖基腺苷一同，通常、将在化妆品、准药品或药品等中使用的其他任意的成分的I种或2种以上根据必要适宜配合的形态利用。在本发明的皮肤外用剂中，作为与葡萄糖基腺苷一同使用的其他任意的成分，可举出例如，以美白剂、抗氧化剂、抗炎症剂、保湿剂、紫外线吸收剂、乳化剂、增粘剂为首的下述成分。
[0036]另外，本发明的葡萄糖基腺苷对酶等的活体成分比较稳定，所以即使与其他成分一同配合也难以受其影响，尤其是，在配合有如上述一样的活性的植物的提取物等天然的成分时，由其成分中含的酶等分解的担忧小，所以可作为可与由该活性成分的效果一同发挥本发明的葡萄糖基腺苷的抗皱纹作用的优良的皮肤外用剂。
[0037]作为美白剂，可举出例如，L-抗坏血酸或其衍生物、熊果苷、曲酸、鞣花酸、胎盘提取物、氢醌糖苷、氨甲环酸或其衍生物、间苯二酚、4-n- 丁基间苯二酚等的烷基间苯二酚、及这些的如盐一样的间苯二酚及其衍生物、谷胱甘肽、蓝草提取物、甘草提取物、黄芩提取物、银杏叶提取物、营实提取物、木兰提取物、芍药提取物、梔子提取物、鼠尾草提取物、当归提取物、鸢尾提取物、儿茶提取物等的植物的提取物。尤其是，L-抗坏血酸2-葡萄糖苷或氨甲环酸由于对于增强葡萄糖基腺苷所具有的生理活性的效果优良而优选。
`[0038]作为抗酸氧化剂，可举出例如，丁基羟基甲苯、生长酚、植酸钙镁、视黄醇或其衍生物等的维生素A类、维生素B6盐酸盐、维生素B6三棕榈酸盐、维生素B6 二辛酸盐、维生素B2及其衍生物、维生素B12、维生素B15及其衍生物等的维生素B类、抗坏血酸或其衍生物等的维生素C类、α -生长酚、β -生长酚、δ -生长酚、维生素E乙酸盐等的维生素E类、维生素D类、谷胱甘肽、芸香苷、橙皮苷、柚皮苷或其衍生物、贯叶连翘提取物、营实提取物、黄芩提取物、乌龙茶、红茶、绿茶等的茶提取物、松蘑提取物等的有抗氧化作用的植物的提取物。
[0039]作为抗炎症剂，可例示尿囊素或其衍生物、甘草亭或作为其衍生物的甘草亭酸、甘草酸、甘草亭酸尿囊素、甘草亭酸甘油、甘草亭酸硬脂酯、硬脂酸甘草亭酯、3-琥珀酰氧基甘草亭酸二钠、甘草酸二钾、甘草酸单铵等，泛酸及其衍生物、维生素E及其衍生物、L-抗坏血酸、L-抗坏血酸-2-葡萄糖苷、抗坏血酸-生长酚磷酸二酯、L-抗坏血酸硫酸酯、二棕榈酸抗坏血酸酯、棕榈酸抗坏血酸酯、L-抗坏血酸硬脂酯、磷酸L-抗坏血酸基、L-抗坏血酸乙酯等的L-抗坏血酸的衍生物、盐酸吡哆素、薄荷醇、生物素、樟脑、松节油、氧化锌、奥、愈创奥及其衍生物、甲芬那酸及其衍生物、苯基保泰松及其衍生物、吲哚美辛及其衍生物、布洛芬及其衍生物、酮洛芬及其衍生物、ε -氨基己酸、双氯芬酸钠、苯海拉明、氨甲环酸及其衍生物、地塞米松、可的松及其酯、氢化可的松及其酯、泼尼松、泼尼松龙等的肾上腺皮质激素、抗组胺剂、营实、小连翘、黄檗、甘草、水芹、雏菊、鼠尾草、紫草、白桦、茶、金盏花、接骨木、蒲黄、无患子、桉树提取物、绿花椰菜、当归、紫苏、母菊、艾蒿、芦荟、胡萝卜、黄檗末、杨梅皮末、儿茶、土常山、蜀癸、山金车花、狭叶紫锥花、延命草、黄芩、大麦、橙、缬草、母菊、桅子、山白竹、龙胆、老鹳草、牛蒡、花椒、紫苏、菩提树、芍药、西洋木茑、西洋杜松、西洋蓍草、川芎、獐牙菜、鼠尾草、桑白皮、大枣、百里香、冬瓜子、桃仁、蕺草、洋委陵菜、香芹、薄荷、荨麻、白檀、枇杷、假叶树、葡萄、红花、按钮、菩提树、桃、鬼灯檠、艾蒿、薰衣草、迷迭香等的植物或植物来源的成分等。
[0040]作为保湿剂，可举出例如，聚乙二醇、丙二醇、甘油、1，3-丁二醇、己二醇、木糖醇、山梨糖醇、麦芽糖醇、硫酸软骨素、透明质酸、粘液素硫酸、蒈酮酸、端胶原、胆甾醇基-12-羟基硬脂酸酯、乳酸钠、胆汁酸盐、dl-吡咯烷酮羧酸盐、短链可溶性胶原、二甘油(EO) PO附加物、缫丝花提取物、西洋蓍草提取物、黄香草木犀提取物、芦荟提取物、獐牙菜提取物、苦参提取物、丝瓜提取物、七叶树提取物、虎耳草提取物、百里香提取物、当归提取物、百合提取物、桅子提取物、茴香提取物、野芝麻提取物、胡椒薄荷提取物等的植物的提取物、氨甲环酸等。
[0041]作为紫外线吸收剂，可举出例如，对氨基安息香酸(以下，简称为“PABA”)、PABA单甘油酯、N, N- 二丙氧基PABA乙基酯、N, N- 二乙氧基PABA乙基酯、N, N- 二甲基PABA乙基酯、N, N-二甲基PABA 丁基酯、N, N-二甲基PABA甲基酯等的安息香酸系紫外线吸收剂、高薄荷基-N-乙酰邻氨基苯甲酸酯等的邻氨基苯甲酸系统紫外线吸收剂、戊基水杨酸酯、薄荷基水杨酸酯、高薄荷基水杨酸酯、辛基水杨酸酯、苯基水杨酸酯、苄基水杨酸酯、P-异丙醇苯基水杨酸酯等的水杨酸系统紫外线吸收剂、辛基肉桂酸酯、乙基-4-异丙基肉桂酸酯、甲基-2，5- 二异丙基肉桂酸酯、乙基_2，4- 二异丙基肉桂酸酯、甲基_2，4- 二异丙基肉桂酸酯、丙基-P-甲氧基肉桂酸酯、异丙基-P-甲氧基肉桂酸酯、异戊基-P-甲氧基肉桂酸酯、辛基-P-甲氧基肉桂酸酯(2-乙基己基-P-甲氧基肉桂酸酯)、2_乙氧基乙基-P-甲氧基肉桂酸酯、环己基-P-甲氧基肉桂酸酯、乙基-α -氰基-β -苯基肉桂酸酯、2-乙基己基-α -氰基-β -苯基肉桂酸酯、甘油基单-2-乙基已酰基-二对甲氧基肉桂酸酯、三甲氧基桂皮酸甲基双(三甲基硅氧烷)甲硅烷基异戊基等的桂皮酸系统紫外线吸收剂、3- (4 & apos ；-甲基苯亚甲基)-d，1-樟脑、3-苯亚甲基-d, 1-樟脑、尿刊酸、尿刊酸乙酯、2-苯基-5-甲基苯并tl惡唑、2, 2 & apos,-羟基-5 -甲基苯基苯并三唑、2-(2 & apos,-羟基_5 & apos ；-t-辛基苯基)苯并三唑、2- (2 & apos,-羟基_5 & apos ；-甲基苯基苯并三唑、二亚苄基卩丫嗪、二茴香酰甲烷、4-甲氧基-4 & apos ;-t-丁基二苯甲酰甲烷、5- (3，3-二甲基-2-亚降冰片基)-3-戊烷-2-酮、二吗啉代哒嗪酮等，可使用任意的I种或2种以上。
[0042]作为紫外线散射剂，可举出氧化钛、微粒子氧化钛、氧化锌、微粒子氧化锌、氧化铁、微粒子氧化铁、氧化铈等的粉末。这些紫外线散射剂，通常使用、针状、纺锤状、球状、粒状的粉末。另外，粒径是Olym以下的微粒子粉末是优选的。甲基氢聚硅氧烷或硅烷偶联剂等的硅酮处理；金属皂处理；由全氟烷基磷酸二乙醇胺盐或全氟烷基硅烷等的氟处理、糊精脂肪酸酯处理等，疏水化处理的紫外线散射剂也是优选的。
[0043]作为液体油脂，可举出例如，鳄梨油、山茶油、龟油、澳洲坚果油、玉米油、貂油、橄榄油、菜种油、卵黄油、芝麻油、桃仁油、小麦胚芽油、米胚芽油、山茶花油、蓖麻子油、亚麻仁油、红花油、棉籽油、紫苏油、大豆油、落花生油、茶实油、椰子油、米糠油、泡桐油、日本桐油、霍霍巴油、三甘油等。
[0044]作为固体油脂，可举出例如，可可脂、椰油、马脂、硬化椰油、棕榈油、牛脂、羊脂、硬化牛脂、棕榈核油、猪脂、牛骨脂、木蜡核油、硬化油、牛脚脂、木蜡、硬化蓖麻子油等。
[0045]作为蜡类，可举出例如，密蜡、小烛树蜡、绵蜡、巴西棕榈蜡、蜡果杨梅蜡、虫白蜡、鲸蜡、褐煤蜡、糠蜡、羊毛脂、木棉花蜡、醋酸羊毛脂、液状羊毛脂、甘蔗蜡、羊毛脂脂肪酸异丙酯、月桂酸己酯、还原羊毛脂、霍霍巴蜡、硬质羊毛脂、虫胶蜡、POE羊毛脂醇醚、POE羊毛脂醇乙酸酯、POE胆留醇醚、羊毛脂脂肪酸聚乙二醇酯、POE氢加成羊毛脂醇醚等。
[0046]作为烃油，可举出例如，流动石蜡、地蜡、角鲨烷、姥鲛烷、石蜡、地蜡、角鲨烯、凡士林、微晶蜡、聚乙烯蜡、费希尔-托罗普希蜡等。
[0047]作为高级脂肪酸，可举出例如，月桂酸、肉豆蘧酸、棕榈酸、硬脂酸、山嵛酸、油酸、十一烯酸、妥尔油酸、亚油酸、亚麻酸、二十碳五烯酸(EPA)、二十二碳六烯酸(DHA)等。
[0048]作为高级醇，可举出例如，直链醇(例如，月桂基醇、鲸蜡基醇、硬脂基醇、山嵛基醇、肉豆蘧基醇、油基醇、鲸蜡硬脂基醇等)；分枝锁醇(例如，单硬脂基甘油醚(鲨肝醇)、
2-癸基十四烯醇、羊毛脂醇、胆留醇、植物留醇、己基十二醇、辛基十二醇等)等。
[0049]作为合成酯油，可举出肉豆蘧酸异丙酯、辛酸鲸蜡酯、肉豆蘧酸辛基十二烷酯、棕榈酸异丙酯、硬脂酸丁酯、月桂酸己酯、肉豆蘧酸肉豆蘧酯、油酸癸酯、二甲基辛酸己基癸酯、乳酸鲸蜡酯、乳酸肉豆蘧酯、醋酸羊毛脂、硬脂酸异鲸蜡酯、异硬脂酸异鲸蜡酯、12-羟基硬脂酸胆留醇酯、二-2-乙基己酸乙二醇酯、二季戊四醇脂肪酸酯、单异硬脂酸N-烷基二醇、二癸酸NEO戊基二醇、苹果酸二异硬脂酯、二 -2-庚基十一烷酸甘油、三-2-乙基己酸三羟甲基丙烷酯、三异硬脂酸三羟甲基丙烷酯、四-2-乙基己酸五赤藓糖醇酯、三-2-乙基己酸甘油、三辛酸甘油、三异棕榈酸甘油、三异硬脂酸三羟甲基丙烷酯、鲸蜡基2-乙基己酸酯、2-乙基己基棕榈酸酯、三肉豆蘧酸甘油、三-2-庚基十一烷酸甘油酯、蓖麻子油脂肪酸甲酯、油酸油酯、乙酰甘油酯、棕榈酸2-庚基十一烷酯、己二酸二异丁酯、N-月桂酰-L-谷氨酸-2-辛基十二烷酯、己二酸二` -2-庚基十一烷基、乙基月桂酸酯、癸二酸二 -2-乙基己基、肉豆蘧酸2-己基癸酯、棕榈酸2-己基癸酯、己二酸2-己基癸酯、琥珀酸2-乙基己酯、柠檬酸三乙酯、聚氧乙烯-聚氧丙烯随机聚合物甲基醚等。
[0050]作为硅酮油，可举出例如，链状聚硅氧烷(例如，二甲基聚硅氧烷、甲基苯基聚硅氧烷、二苯基聚硅氧烷等)；环状聚硅氧烷(例如，八甲基环四硅氧烷、十甲基环五硅氧烷、十二甲基环六硅氧烷等)、形成3维网目结构的硅酮树脂、硅酮橡胶、各种变性聚硅氧烷(氨基变性聚硅氧烷、聚醚变性聚硅氧烷、烷基变性聚硅氧烷、氟变性聚硅氧烷等)等。
[0051]其他，可举出乙醇等的低级醇；酰基肌氨酸酸(例如月桂酰肌氨酸钠)、柠檬酸、苹果酸、酒石酸、乳酸等的有机酸；维生素H、泛酸、泛硫乙胺等的维生素类；烟酸酰胺、烟酸苄酯、Y-谷维素、尿囊素、甘草酸(盐)、甘草亭酸及其衍生物、扁柏酚、没药醇、桉树酮、麝香草酚、肌醇、柴胡皂苷、胡萝卜皂苷、丝瓜皂苷、无患子皂苷等的皂苷类、泛酰乙基醚、乙炔基雌二醇、千金藤碱、胎盘提取物等的各种药剂、羊蹄、锦葵、云杉、问荆、百合、艾蒿、日本花柏、西洋山楂提取物、地椒提取物、睡莲提取物、西河柳提取物、洋委陵菜提取物、胡椒薄荷提取物等的植物来源的提取物或生药、蜂王浆提取物、染料、单月桂酸山梨坦、单棕榈酸山梨坦、倍半油酸山梨坦、三油酸山梨坦、单月桂酸聚氧乙烯山梨坦、单硬脂酸聚氧乙烯山梨坦、聚乙二醇单油酸酯、聚氧乙烯烷基醚、聚二醇二醚、月桂酰二乙醇酰胺、脂肪酸异丙醇酰胺、麦芽糖醇羟基脂肪酸醚、烷基化多糖、烷基葡萄糖苷、糖酯等的非离子性活性剂、硬脂基三甲基铵氯化物、氯化苯扎铵、月桂基胺氧化物等的阳离子性表面活性剂、棕榈酸钠、月桂酸钠、月桂酸钠、月桂基硫酸钾、烷基硫酸三乙醇胺醚、土耳其红油、线性十二烷基苯硫酸、聚氧乙烯硬化蓖麻子油马来酸、酰基甲基牛磺酸等的阴离子性表面活性剂、两性表面活性剂、中和剂、PH调节剂、缓冲剂、δ-生长酚、丁基羟基甲苯等的氧化防止剂、苯氧基乙醇、对羟基苯甲酸酯、链烷二醇类、感光素201号等的防腐剂。另外其他、也可适宜配合依地酸二钠、依地酸三钠、依地酸四钠、柠檬酸钠、聚磷酸钠、偏磷酸钠、葡萄糖酸等的金属封闭剂、咖啡因、单宁、维拉帕米、氨甲环酸及其衍生物、芸香苷、橙皮苷、柚皮苷或其衍生物为首的聚苯酚类、甘草提取物、光甘草定、火棘的果实的热水提取物、肉毒碱、辅酶Q1(l、各种生药、醋酸生长酚、羟基癸烯酸、甘草酸及其衍生物或其盐等、葡萄糖、果糖、甘露糖、蔗糖、α，α-海藻糖、α，α-海藻糖的糖质衍生物、环状四糖、糊精、环糊精、分岐糊精、淀粉、分岐淀粉、出芽短梗孢糖等的糖质、感光素101号、感光素301号、感光素401号等的感光素类、香料、染料
坐寸ο
[0052]本发明的皮肤外用剂包括化妆品、药品、准药品，其剂形也包括水溶液系统、可溶化系、乳化系、油液系统、减I父系、骨系统、软骨系、气溶I父系统、水_油2层系统、水_油_粉末3层等，任意的。另外，也包括在片状基剂或粉末状基剂上荷载的。
[0053]本发明中所说的皮肤外用剂是指，以皮肤粗糙、色斑或皱纹、炎症、老化等的预防、保湿、美容等作为目的，在脸或身体的皮肤等的表皮上直接使用，或者，在其使用时与皮肤接触，有给这些带来影响的可能性的，化妆皂、洗染料、一般霜-乳液、化妆水、花露水、洗齐?、化妆油、白粉-粉末、粉底、颊红-眉墨、眼霜-眼影-睫毛膏、香水、晒-防晒霜、晒-防晒洗剂、晒-防晒油、眼线、口红、唇膏、牙膏，浴用化妆品、各种疾病治疗剂等的护肤化妆品、化妆化妆品、身体护理化妆品、口腔护理化妆品、香味化妆品等的化妆品、准药品或药品。另外，也包括如软膏、泥敷剂、膜剂等一样，涂布或贴附到皮肤或粘膜而使用的准药品或，如口中清凉剂一样在口腔内其使用时直接接触皮肤而使用的药品或准药品。
[0054]顺便而言，作为本发明的皮肤外用剂的有效成分的葡萄糖基腺苷是，如已所述，虽然无需限定于由特定的方法、手段 制造的，但如果以经济性作为问题，则使用糖转移酶的酶法是有利的。例如，在含淀粉质和腺苷的溶液中，将环麦芽糖糊精-葡聚糖转移酶(CGT酶)、α-葡萄糖苷酶、淀粉酶、α-异麦芽糖基葡萄糖糖质生成酶(参照例如W002/10361号单行本)、异麦芽糖基转移酶(参照例如国际公开WOO1/90338号单行本)、α -葡萄糖基转移酶(国际公开W02008/136331号单行本)、及，淀粉水解的同时催化糖基的转移，生成环糊精，可由使用作用于出芽短梗孢糖而生成潘糖的α -淀粉酶(国际公开W02008/136331号单行本)等的有糖转移活性的酶的酶法，大量、廉价制造。尤其是，在使用在国际公开W02008/136331号单行本中公开的α-葡萄糖基转移酶时，可高收率得到水溶性高的5,-葡萄糖基腺苷。另外，在使用CGT酶时，可高收率制造相比使用α-葡萄糖基转移酶时，3'-葡萄糖基腺苷的构成比率更高的葡萄糖基腺苷。
[0055]通过使有糖转移活性的α -葡萄糖基转移酶或CGT酶作用于含淀粉质和腺苷的溶液，I分子或2分子以上的D-葡萄糖转移到腺苷的3'位或5'位的羟基，在生成上述在3'位或5,的羟基结合I分子的D-葡萄糖的3,-葡萄糖基腺苷及5,-葡萄糖基腺苷的同时，生成上述在3,位或5,位的羟基结合2个以上的D-葡萄糖的，例如，3'-麦芽糖基腺苷或3,-麦芽三糖基腺苷等的3,-糖基腺苷、或者，例如，5'-麦芽糖基腺苷或5,-麦芽三糖基腺苷等的5,-糖基腺苷。[0056]相对于溶解淀粉质和腺苷的水溶液以每Ig淀粉质I~2，000单位、优选为I~1，000单位的比例添加α -葡萄糖基转移酶或CGT酶至，通常、淀粉质浓度成I~40w/v%，所述溶液保持在pH约3~10、温度30~70°C，反应6小时以上、优选为约12~96小时。
[0057]溶液中的淀粉质和腺苷的质量比通常设定为以无水物换算1:2~20:1、优选为1:1~10:1的范围。淀粉质的比例相比此范围更大，则虽然向腺苷的糖转移有效进行，但腺苷的生成率受由腺苷的始发浓度的制约，止于低水平。相反，腺苷的比例相比上述的范围更大，则未反应的腺苷显著量残留，对于工业生产不优选。从而，上述的比率的范围最好。
[0058]再有，除了 α -葡萄糖基转移酶或CGT酶之外，作为淀粉脱支酶联用异淀粉酶时，异淀粉酶，在含有腺苷和淀粉质的溶液中与α -葡萄糖基转移酶或CGT酶共存的状态下作用于淀粉质是优选的。其添加量，虽然也依赖于异淀粉酶的至适温度、至适PH等，但通常、以每Ig淀粉质200~2，500单位，在55°C以下反应是优选的。另外，作为淀粉脱支酶使用支链淀粉酶时，也基准于异淀粉酶使用即可。
[0059]由α -葡萄糖基转移酶及/或CGT酶和淀粉脱支酶的酶反应大致结束,则加热酶反应液而使这些酶失活而停止酶反应，接下来，使葡萄糖淀粉酶作用于此酶反应液。向其作用葡萄糖淀粉酶，则在腺苷的3'位及/或5'位的羟基结合的2分子以上的D-葡萄糖链的大部分被切断，转变为3,-葡萄糖基腺苷及/或5,-葡萄糖基腺苷，这些的化合物的生成率升高。将这样的提高3,-葡萄糖基腺苷及/或5,-葡萄糖基腺苷的含有率的反应液，由常规方法，使用活性炭等脱色过滤，再者，通过适用使用离子交换树脂、合成吸附剂树脂、多孔性树脂等的柱层析，纯化溶液中的葡萄糖基腺苷即可。再者根据需要，使用逆相层析等，使3,-葡萄糖基腺苷及/或5,-葡萄糖基腺苷的纯度变高也可，将各自的化合物单离、纯化而使用也随意。将这些含有葡萄糖基腺苷的溶液直接作为本发明的皮肤外用剂的原料使用也可，根据需要，浓缩使用也可，再者，由减压干燥或喷雾干燥等的适宜的方法干燥，根据需要粉碎而使用也可。
[0060]鉴于从葡萄糖基腺 苷的制造成本看到的向淀粉质的成本分配等，原料使用淀粉是优选的，在此时，为了调节液化淀粉中的葡萄糖聚合度，切断分支部分，例如，异淀粉酶(EC3.2.1.68)、联用支链淀粉酶(EC3.2.1.41)等的淀粉脱支酶也可有利地实施。这些的淀粉脱支酶之中，异淀粉酶在酶活性、底物特异性等的方面易处理，所以是特别优选的。作为淀粉，可举出马铃薯淀粉、甘藷淀粉、木薯淀粉、玉米淀粉、小麦淀粉等。另外，使用如糊精一样的这些淀粉的部分分解物也可，也可随意使用分子内无实质的分支结构，并且，具备葡萄糖聚合度的，例如，环麦芽糖糊精、环直链淀粉、合成直链淀粉等的淀粉质。
[0061]结合到腺苷的3'位及/或5'位的羟基的2分子以上的D-葡萄糖链的切断中使用的葡萄糖淀粉酶，不问其给源、纯度，是市售品也可。例如，可使用作为市售的葡萄糖淀粉酶剂的，Nagase ChemteX株式会社以商品名“Glucozyme # 20000”销售的属于根霉(Rhizopus)属的微生物来源的酶剂或,天野酶株式会社以商品名“Gluczyme”销售的曲霉(Aspergillus)或根霉(Rhizopus)属的微生物来源的酶剂。
[0062]以下，通过实验更详细地说明本申请发明。
[0063]〈实验1:由α -葡萄糖基转移酶的葡萄糖基腺苷的制备>
[0064]〈实验1-1: α -葡萄糖基转移酶的制备>
[0065]由国际公开W02008/136331号单行本的实验5的方法，向含淀粉部分分解物(商品名“Pinedex # 4”、松谷化学工业株式会社制造)1.5w/v (质量/容积)％、酵母提取物(商品名“聚胨”、日本制药株式会社制造)0.5w/v%、酵母提取物(商品名“酵母提取物S”、日本制药株式会社制造)0.1w/v%、磷酸二钾0.lw/v%、磷酸一钠.2水和物0.06w/v%、硫酸镁.7水和物0.05w/v%、硫酸锰.5水和物0.001w/v%jt酸亚铁.7水和物0.001w/v%及水的液体培养基接种环状芽孢杆菌(Bacillus circulans)PP710株(以保藏号FERM BP-10771，在2007年2月I日，在位于茨城县筑波市东1-1-1中央第6的独立行政法人产业技术综合研究所、专利生物保藏中心保藏)，在发酵罐中培养约24小时。培养后，离心分离而回收培养液上清，添加硫酸铵至成80%饱和，通过于4°C、放置24小时而盐析。将盐析物离心分离而回收，加20mM醋酸缓冲液(pH6.0)而溶解之后，对于同缓冲液透析，通过膜浓缩制备浓缩粗酶液。本浓缩粗酶液的α-葡萄糖基转移酶活性是约1300单位/ml。另外，在本浓缩酶液也确认约140单位/ml的淀粉酶活性。
[0066]再有，上述α-葡萄糖基转移酶的活性如以下一样测定。将麦芽糖溶解于20mM醋酸缓冲液(PH6.0)至最终浓度lw/v%而作为底物。向此底物液5ml加酶液0.5ml，于40°C反应30分钟之后，通过将其反应液0.5ml和5ml的20mM醋酸缓冲液(pH7.0)混合，在沸腾水中加热10分钟而停止反应之后，将反应液中的葡萄糖量根据常规方法由葡萄糖-氧化酶法测定，算出由反应生成的葡萄糖量。α -葡萄糖基转移酶的活性I单位定义为，在上述的条件下在I分钟生成I微摩尔的葡萄糖的酶量。另外，混在的淀粉酶的活性如以下一样测定。即，将短链直链淀粉(商品名“直链淀粉ΕΧ-Ι”、株式会社林原生物化学研究所销售、平均聚合度17)溶解于含ImM的氯化钙的50mM醋酸缓冲液(pH6.0)至最终浓度lw/v%而作为底物液，向其底物液2ml加酶液0.2ml，于35°C酶反应30分钟，将其反应液0.2ml混合于8ml的0.02N硫酸溶液，停止反应之后，添加0.2ml的0.1N碘溶液，于25°C保持15分钟之后，测定660nm的吸光度。对于另行反应O小时的反应液同样地测定，测定每反应时间的碘呈色的减少。淀粉酶的活性I单位定义为，在上述的条件下使20mg的短链直链淀粉的660nm处的吸光度(碘呈色)降低10%的酶量的10倍量。
[0067]<实验1-2:葡萄糖基`腺苷的制备>
[0068]用0.3N的盐酸溶解至腺苷(和光纯药株式会社销售、试剂特级)的浓度成10质量％。将此腺苷的10质量％溶液40ml和糊精(松谷化学株式会社销售、商品名“Pinedex
#I”、固体分约92.3质量%)12g加入含2mM的CaCl2的50mM醋酸缓冲液(pH6.0)336ml而搅拌混合，加将实验1-1中制备的浓缩粗酶液用50mM醋酸缓冲液(pH6.0)稀释至α-葡萄糖基转移酶的活性成20单位/ml的酶液9ml，搅拌混合，于50°C进行24小时反应。向反应结束后的反应液加IN盐酸而调节到pH3.5后，每Ig糊精的固体分加1，000单位葡萄糖淀粉酶(长濑生物化学工业公司销售、商品名“XL-4”、3，800单位/ml)，于50°C反应24小时，于100°C处理10分钟，停止酶反应。通过使此停止酶反应的反应液以流速SV=3 (5ml/分)通过活性炭柱(100ιτπηχφ41?η_>而使葡萄糖基腺苷吸附于柱之后，用脱离子水(湿润树脂容积的5倍量)及20容积％乙醇溶液(湿润树脂容积的3倍量)清洗柱，用40容积％乙醇溶液溶出。将溶出液分为各50ml，回收紫外吸收(260nm)是0.15以上的级分。将回收的级分用旋转蒸发器浓缩，供于使用ODS柱的分离用高速液体柱层析(HPLC)，回收葡萄糖基腺苷的溶出级分的主峰。分2次实施由使用ODS柱的HPLC的分离，制备合计约0.8g以固体物换算含有99质量％以上的葡萄糖基腺苷的标品。再有，分离用HPLC在以下的条件下进行。
[0069]<分离HPLC条件>
[0070]装置:SHIMADZUShodexR1-102(检测器)，LC-10AD (泵)，SIL-lOADvp (自动采样机)、C-R7Aplus (记录计)
[0071]柱:0DS柱(YMC 公司销售、商品名『YMC-PackR & DODS-Aj, (ρ20π?η?Χ250η--?1)
[0072]移动相:20mM醋酸-醋酸铵缓冲液(ρΗ3.5) /甲醇84/16 (容积/容积)
[0073]检测:RI
[0074]流速:3.0ml/ 分
[0075]柱温度35 °C
[0076]〈实验2:由CGT酶的葡萄糖基腺苷的制备>
[0077]向IOmM醋酸钠溶液(pH5.5)以无水物换算添加，腺苷(东京化成工业株式会社销售、试剂特级)至其浓度成lw/v%、添加糊精(松谷化学株式会社销售、商品名“Pinedex
#I”)至其浓度成10w/v%，加温至50°C，搅拌着使完全地溶解。每Ig糊精添加1，000单位特开昭50-63189号公报(特公昭53-27791号公报)中公开的嗜热脂肪土芽孢杆菌(作为Geobacillus stearothermophiIus)(曾分类为嗜热脂肪芽抱杆菌(Bacillusstearothermophi Ius ) ) Tc_91株(国际保藏号FERMBP-11273,在位于茨城县筑波市东1-1-1中央第6的独立行政法人产业技术综合研究所、专利生物保藏中心保藏；国内保藏号FERMP-2225，于2010年8月6日 将其转国际保藏)来源的CGT酶(株式会社林原生物化学研究所制造)，于50°C反应24小时后，于100°C加热15分钟而使CGT酶失活之后，每Ig糊精加2，600单位葡萄糖淀粉酶(Nagase ChemteX株式会社销售、商品名“Glucozyme
#20000，，、20，000单位/g)，于50°C反应24小时。将此反应液于100。。加热10分钟之后，离心(ll,500rpm),回收上清。通过使此上清以流速SV=3 (5ml/分)通过活性炭柱150ml(120mmX Φ41πιπι)而使葡萄糖基腺苷吸附于柱之后，用脱离子水(湿润树脂容积的7倍量)及20容积％乙醇溶液(湿润树脂容积的6倍量)清洗柱，用40容积％乙醇溶液溶出(湿润树脂容积的16倍量)。将溶出液分为各50ml，回收紫外吸收(260nm)是0.15以上的级分。将回收的级分浓缩后，供于使用ODS柱的分离用HPLC，回收含有葡萄糖基腺苷的级分的主峰。使此回收的级分吸附于活性炭柱而脱盐，由40容积％乙醇溶出，用旋转蒸发器浓缩，回收葡萄糖基腺苷的溶出级分。分离用HPLC是除了在移动相中使用20mM醋酸-醋酸铵缓冲液(PH3.5)/甲醇82/18 (容积/容积)，柱温度设为40°C以外，与上述实验1_2同样地在与葡萄糖基腺苷的分离相同的条件下进行，制备约1.6g以无水物换算含有99质量％以上葡萄糖基腺苷的标品。顺便而言，从使用ODS柱的分离用HPLC溶出的葡萄糖基腺苷的主峰与实验1-2中溶出的葡萄糖基腺苷的主峰以不同保留时间溶出。另外，这样的主峰中含葡萄糖基腺苷根据由常规方法的质谱(MS)分析的分子量的测定也预先确认。
[0078]在实验1-2及实验2中，将由使用ODS柱的分离用HPLC制备的2种葡萄糖基腺苷的结构，通过由常规方法的NMR分析确定。将基于NMR的分析的结果的，2种葡萄糖基腺苷的碳化学移位值与腺苷的碳化学移位值一并不于表1。再有，NMR分析由下述条件进行。另外，腺苷的碳化学移位值是将获自独立行政法人产业总合技术研究所公开的有机化合物的光谱数据库(SDBS ；http://riodb01.1base.aist.g0.jp/sdbs/cg1-bin/direct_frame_top.cgi)的一并示于表1。[0079]<NMR分析条件>
[0080]装置:日本电子株式会社销售、商品名Ujnm-ALSOOVh:300.4MHz、13C:75.45MHz
[0081]溶剂:重水(0.6ml)
[0082]内部标准:3-三甲基甲硅烷基-1-丙烷磺酸钠盐(TPS)
[0083]累加次数:屮-匪1?128次、13C-NMR4, 000 次、DEPT400 次、H-HC0SY32 次、H-CC0SY36次
[0084]样品量:20mg
[0085]【表1】
[0086]
【权利要求】
1.有持续性的抗皱纹作用的皮肤外用剂，其含有a-D-吡喃葡萄糖基_(1 — 5' )_腺苷及/或a -D-吡喃葡萄糖基-(I — 3')-腺苷作为有效成分。
2.权利要求1所述的皮肤外用剂，其特征在于，含有a-D-吡喃葡萄糖基-(I —5')-腺苷及/或α-D-吡喃葡萄糖基-(I — 3')-腺苷，同时作为抗菌剂含有选自1，3-丁二醇或1，2-链烷二醇的成分。
3.权利要求1或2所述的皮肤外用剂，其特征在于，再含有选自美白剂、抗氧化剂、抗炎症剂及保湿剂的成分。
4.权利要求3所述的皮肤外用剂，其中选自美白剂、抗氧化剂、抗炎症剂及保湿剂的成分是植物的提取物。
5.a -D-吡喃葡萄糖基_(I — 5')-腺苷及/或a -D-吡喃葡萄糖基_(I — 3')-腺苷的制造方法，其包括: 使a-葡萄糖基转移酶或环麦芽糖糊精-葡聚糖转移酶作用于含淀粉质和腺苷的溶液的步骤，以及 收集生成的a -D-吡喃葡萄糖基-(I — 5 ')-腺苷或a -D-吡喃葡萄糖基_(1 — 3') -腺昔的步骤。
【文档编号】A61K31/7076GK103501757SQ201280011459
【公开日】2014年1月8日 申请日期:2012年1月31日 优先权日:2011年2月1日
【发明者】石原达也, 牛尾慎平, 山本朗子, 大仓隆则, 福田惠温 申请人:株式会社林原