一种蟾皮凝胶剂及其制备工艺的制作方法
【专利摘要】一种蟾皮凝胶剂，其特征在于每100份蟾皮凝胶剂由以下重量份数的组份组成：蟾皮8-12份、HPMCK4M1-3份、HPMCK100M0.5-0.7份、薄荷脑0.8-1.2份、氮酮2-4份、丙二醇0.8-1.2份、甘油4-6份、尼泊金甲酯0.7-1.2份、水余量。其制备工艺为精密称取处方量蟾皮超微粉加70%乙醇，超声30min，挥干乙醇，至无醇味，加入处方量尼泊金甲酯，将处方量的HPMC溶胀，加入到蟾皮溶液中，加入氮酮、丙二醇、薄荷脑和甘油，混匀静置过夜，即可形成蟾皮凝胶剂。本发明制备工艺简单、设备要求较低、使用安全、病人的顺应性高、毒副作用小、生物利用度高、对皮肤无刺激性和致敏性。
【专利说明】一种蟾皮凝胶剂及其制备工艺
【技术领域】
[0001]本发明属于制药【技术领域】，尤其涉及一种蟾皮凝胶剂及其制备工艺。
【背景技术】
[0002]蟾皮为蟾蜍科动物中华大蟾蜍的干燥皮，有清热解毒、利水消胀之功效，性辛、凉、微毒，主治痈疽、肿毒，据《本草纲目拾遗》记载:蟾皮“贴大毒，能拔毒、收毒”，有明显的镇痛和抗炎、抗肿瘤作用。蟾皮具有确切的抗肿瘤活性，能够直接作用于肿瘤细胞DNA，诱导肿瘤细胞凋亡、抑制多种肿瘤细胞增殖、促进肿瘤细胞分化，还有逆转耐药性、抑制肿瘤血管形成及增强机体免疫力作用。同时，肿瘤形成的主要因素是癌毒之邪，而蟾皮为有毒之品，可以毒攻毒，正合中医治疗肿瘤的原则。我国民间多用来治疗原发性肝癌、肺癌、膀胱癌等，具有较好的临床效果。目前已从蟾皮中分离出来的单体化合物有蟾毒灵、华蟾酥毒基等蟾蜍二烯内酯类化合物，现代中药学研究表明蟾皮及其制剂治疗肝癌、肺癌、肠癌、消化道癌症等恶性肿瘤疗效确切。
[0003]目前在临床上广泛应用的以蟾皮为来源的抗肿瘤制剂主要有华蟾素注射液、华蟾素胶囊，研究较多的有华蟾素纳米剂型、微球、气雾剂等，如沈阳药科大学研制的华蟾素注射乳剂药效学研究表明该制剂具有明显的抗肿瘤，提高机体免疫力等功效。楼月芬等采用微球技术将干蟾皮提取液制成抗肝癌制剂，进一步提高了肝癌介入治疗的效果。
[0004]蟾皮制剂具有抗肿瘤和增强肿瘤患者免疫功能的双重作用在临床已经得到肯定，但由于蟾皮化学成分较为复杂，有效成分与药理作用之间关系研究较少，毒副作用较大，且抗肿瘤机理不明。此外，蟾皮作为药物使用可通过兴奋迷走神经，影响心肌和传导系统，引起窦性心动过缓、房室传导阻滞、室性早搏、心室纤颤，还可导致头晕、恶心、四肢发凉，抽搐，甚至死亡。这些毒副作用大大增加了临床使用风险，所以合理用药，改进工艺，明确药效成分和毒性成分显得尤为重要。
[0005]中药外治为体表给药，经皮肤或粘膜吸收后，药力直达病所，可避免口服所致的首关消除及某些毒副作用。中医外治法是祖国医学的重要组成部分，是治疗癌痛的一支“奇兵”。外治宗师吴师机曰:“外治之理，即内治之理，外治之药，即内治之药，所异者法耳。医理药性无二，而法则神奇变化。”中药外治为体表直接给药，经皮肤或粘膜表面吸收后，药力直达病所，起效迅速，且可避免口服经消化道吸收所遇到的多环节灭活作用及一些药物内服带来的某些副作用，特别是晚期癌症患者正气已虚，不耐攻伐，脾胃吸收功能减弱，单靠内服药效果不佳，中药外治更具优势。
[0006]蟾皮作为传统抗肿瘤外用中药之一，能够缓解癌性疼痛，改善患者症状，且对皮肤癌、宫颈癌、阴茎癌等体表浅部肿瘤疗效确切，在肿瘤治疗中具有举足轻重的作用。蟾皮外敷用药能够显著稳定瘤体，有效延长肝癌患者的生存期，提高生存质量。临床应用发现蟾皮直接粘附于肿瘤部位，具有抗肿瘤、升高白细胞及增强网状内皮系统的吞噬功能，并且能够局部止痛，对于晚期癌症病人的治疗疗效显著。外用蟾皮抗癌多为蟾皮直接打粉或直接蟾皮外敷，存在使用过程中剂量难以控制，使用困难，病人适应性差，对皮肤有过敏性和刺激性等缺点，并存在重大安全隐患。
【发明内容】
[0007]针对现有技术中存在的缺陷，本发明的目的是提供一种蟾皮凝胶剂及其制备工艺。
[0008]所述的一种蟾皮凝胶剂，其特征在于每100份蟾皮凝胶剂由以下重量份数的组份组成:蟾皮 8-12 份、HPMC K4M 1-3 份、HPMC K100M 0.5-0.7 份、薄荷脑 0.8-1.2 份、氮酮 2-4份、丙二醇0.8-1.2份、甘油4-6份、尼泊金甲酯0.7-1.2份、水余量。
[0009]所述的一种蟾皮凝胶剂，其特征在于每100份蟾皮凝胶剂由以下重量份数的组份组成:蟾皮10份、HPMC K4M 2份、HPMC K100M0.6份、薄荷脑1份、氮酮3份、丙二醇1份、甘油5份、尼泊金甲酯1份、水余量。
[0010]所述的一种蟾皮凝胶剂，其特征在于所述蟾皮含水量为3-4%。
[0011]所述的蟾皮凝胶剂制备工艺，其特征在于采用如下步骤:
(1)预处理:选取活蟾蜍取皮，洗净、晾干；
(2)蟾皮干燥:将步骤(1)处理过的蟾皮于冷冻干燥仪中在_45°C至_55°C，压强15-25Pa的条件下连续冷冻干燥16-24h，至含水量达到3-4%，制得鲜蟾皮；
(3)粉碎处理:将步骤(2)中制得的鲜蟾皮于小型粉碎机中粗粉碎直至全部通过10目筛，然后连续超微粉碎5min，制得蟾皮超微粉；
(4)按处方量精密称取步骤(3)制得的蟾皮超微粉，按固液比(g:ml)=1:4加入70%的乙醇超声30min，挥干乙醇，直至无醇味，制得蟾皮溶液；
(5)往步骤(4)制得的蟾皮溶液中分别依次加入处方量的尼泊金甲酯、用蒸馏水溶胀后的HPMC K4M及HPMC K100M、氮酮、丙二醇、薄荷脑及甘油，加水定容，混匀后静置12_24h，SP可形成蟾皮凝胶剂。
[0012]所述的蟾皮凝胶剂制备工艺，其特征在于步骤(2)所述的连续冷冻干燥时间优选为18小时。
[0013]所述的蟾皮凝胶制备工艺，其特征在于步骤(3)所述的蟾皮超微粉为粒径小于蟾皮细胞的粒径。
[0014] 所述的蟾皮凝胶剂制备工艺，其特征在于步骤(5)所述的溶胀后的HPMC K4M是按固液比(g:ml) =1:20进行溶胀的，溶胀后的HPMC K100M是按固液比(g:ml) =1.5:100进行溶胀的。
[0015]所述的蟾皮凝胶制备工艺，其特征在于所述溶胀后的HPMC K4M =HPMCKlOOM=1:0.23-0.5。
[0016]本发明的有益效果是:
本发明将蟾皮制成透皮给药制剂一凝胶剂，制备工艺简单，设备要求较低，使用舒适安全，病人的顺应性高。凝胶剂基质具有缓释作用，在一定程度上能够降低药物毒副作用。冷冻干燥能够最大程度保持药材内部有效成分不被破坏，保持最佳药理活性，超微粉碎能够使药物内部有效成分迅速溶出，使药物提取更完全，弥补了普通饮片提取不完全的不足，显著提高药物生物利用度。该剂型剂量可控，透皮吸收迅速，药物吸收干扰因素小，避免药物的肝脏首过作用，血药浓度稳定，能够有效提高药物生物利用度，并可反复敷贴，可随时使用或停止药物治疗，使用方便，对皮肤无刺激性和致敏性。
【具体实施方式】[0017]本发明下面结合实施例予以进一步详述。
[0018]实施例1
选取活蟾蜍取皮，洗净、晾干，将晾干后的蟾皮于冷冻干燥仪中在温度为_45°C、压强为25 Pa的条件下连续冷冻干燥16h，测定蟾皮含水量为3.97%，得鲜蟾皮；将鲜蟾皮于小型粉碎机中粗粉碎直至全部通过10目筛，然后连续超微粉碎5min，制得蟾皮超微粉，蟾皮超微粉的粒径小于蟾皮细胞的粒径，备用。
[0019]精密称取处方量蟾皮超微粉8g加32ml70%乙醇，超声提取30min，挥干乙醇，直至无醇味，制得蟾皮溶液，往蟾皮溶液中依次加入尼泊金甲酯0.7g、溶胀后的HPMC K4Mlg、溶胀后的HPMC K100M0.5g、氮酮2g、丙二醇0.8g、甘油4g，余量为水，混匀后静置12-24h，即可形成均匀、细腻、深灰色、黏度适中的100g蟾皮凝胶剂。
[0020]实施例2
选取活蟾蜍取皮，洗净、晾干，将晾干后的蟾皮于冷冻干燥仪中在温度为_50°C、压强为20 Pa的条件下连续冷冻干燥18h，测定蟾皮含水量为3.185%，得鲜蟾皮；将鲜蟾皮于小型粉碎机中粗粉碎直至全部通过10目筛，然后连续超微粉碎5min，制得蟾皮超微粉，蟾皮超微粉的粒径小于蟾皮细胞的粒径，备用。
[0021 ] 精密称取处方量蟾皮超微粉IOg加40ml70%乙醇，超声提取30min，挥干乙醇，直至无醇味，制得蟾皮溶液，往蟾皮溶液中依次加入尼泊金甲酯lg、溶胀后的HPMC K4M2g、溶胀后的HPMC K100M0.6g、氮酮3g、丙二醇lg、甘油5g，余量为水，混匀后静置12_24h，即可形成均匀、细腻、深灰色、黏度适中的100g蟾皮凝胶剂。
[0022]实施例3
选取活蟾蜍取皮，洗净、晾干，将晾干后的蟾皮于冷冻干燥仪中在温度为_55°C、压强为
15Pa的条件下连续冷冻干燥24h，测定蟾皮含水量为2.864%，得鲜蟾皮；将鲜蟾皮于小型粉碎机中粗粉碎直至全部通过10目筛，然后连续超微粉碎5min，制得蟾皮超微粉，蟾皮超微粉的粒径小于蟾皮细胞的粒径，备用。
[0023]精密称取处方量蟾皮超微粉12g加48ml70%乙醇，超声提取30min，挥干乙醇，直至无醇味，制得蟾皮溶液，往蟾皮溶液中依次加入尼泊金甲酯1.2g、溶胀后的HPMC K4M3g、溶胀后的HPMC K100M0.7g、氮酮4g、丙二醇1.2g、甘油6g，余量为水，混匀后静置12_24h，即可形成均匀、细腻、深灰色、黏度适中的100g蟾皮凝胶剂。
[0024]试验例
蟾皮凝胶剂处方前研究
实验药品和试剂:蟾皮(浙江百草中药饮片公司，产地为江苏，经本校中药资源与鉴定教研室张水利教授鉴定为蟾蜍科动物中华大蟾蜍及z/b bufo gargrizans Caflior和黑框蟾蜍及//b melanostictus混合药材,批号20120521),华蟾酥毒基对照品(中
国食品药品检定研究院提供，110803-200605),脂膽毒配基对照品(中国食品药品检定研究院提供，110718-200507 )，甲醇(天津市四友精细化学品有限公司，120215，色谱纯)，乙腈(天津市四友精细化学品有限公司，091010，色谱纯)，甘油(浙江杭州大方化学试剂厂，20050812)，乙醇(杭州长征化学试剂有限公司，20101201 )，环磷酰胺(江苏恒瑞医药股份有限公司，11072821)，生理盐水(中国广州百特医疗用品有限公司生产，GS1105064)，水为高纯水，其它试剂均为分析纯。
[0025]实验器材:天美公司LC2000梯度系统；LC2130输液泵(日本原装进口)，配梯度洗脱和在线脱气装置；LC2030紫外检测器；手动进样器7725i ;色谱工作站T2000P ；400克摇摆式高速万能粉碎机(型号0FY-400，温岭市林大机械有限公司);振动式超微粉碎研磨混炼机(XDW-6B1，济南达微机械有限公司)；WQL粒度仪(LKY-2，上海精密科学仪器有限公司);真空冷冻干燥机(FD-1-50，北京博医康实验仪器有限公司)；电热鼓风干燥箱(HN101-2，南通沪南科学仪器有限公司);烘干法水分测定仪(DHS 20-A，上海精密科学仪器有限公司);电子天平(FA2004，常州市幸运电子设备有限公司)；数控超声波清洗器(KQ5200DE，昆山市超声仪器有限公司)；数显恒温水浴锅(HH-4，常州澳华仪器有限公司)。
[0026]实验动物和材料
细胞株:小鼠S180腹水型肿瘤细胞，由浙江省医科院提供。动物:健康ICR小鼠，SPF级，雌雄各半，年龄:4-6周，体重18-22g。购自中科院上海实验动物中，合格证SCXK (沪)2007 -0005。
[0027]方法和结果
蟾皮冷冻干燥工艺:蟾皮冷冻干燥工艺主要影响因素为冷冻干燥时间，冷冻干燥后物料含水量约为3-5%，本实验以冷冻后药物水分含量不超过4%为指标，采用单因素考察冷冻干燥时间。精密称取蟾皮100g置于冷冻干燥仪中(温度:-50±5°C，压强:20±5Pa)，分别干燥6h、12h、18h、24h测定药物水分含量。结果见表1。
[0028]表1冷冻干燥时间考察
【权利要求】
1.一种蟾皮凝胶剂，其特征在于每100份蟾皮凝胶剂由以下重量份数的组份组成:蟾皮 8-12 份、HPMC K4M 1-3 份、HPMC K100M 0.5-0.7 份、薄荷脑 0.8-1.2 份、氮酮 2-4 份、丙二醇0.8-1.2份、甘油4-6份、尼泊金甲酯0.7-1.2份、水余量。
2.根据权利要求1所述的一种蟾皮凝胶剂，其特征在于每100份蟾皮凝胶剂由以下重量份数的组份组成:蟾皮10份、HPMC K4M 2份、HPMC K100M0.6份、薄荷脑1份、氮酮3份、丙二醇1份、甘油5份、尼泊金甲酯1份、水余量。
3.根据权利要求1或2所述的一种蟾皮凝胶剂，其特征在于所述蟾皮含水量为3-4%。
4.蟾皮凝胶剂制备工艺，其特征在于采用如下步骤: (1)预处理:选取活蟾蜍取皮，洗净、晾干； (2)蟾皮干燥:将步骤(1)处理过的蟾皮于冷冻干燥仪中在-45°C至-55°C，压强15-25Pa的条件下连续冷冻干燥16-24h，至含水量达到3-4%，制得鲜蟾皮； (3)粉碎处理:将步骤(2)中制得的鲜蟾皮于小型粉碎机中粗粉碎直至全部通过10目筛，然后连续超微粉碎5min，制得蟾皮超微粉； (4)按处方量精密称取步骤(3)制得的蟾皮超微粉，按固液比(g:ml)=1:4加入70%的乙醇超声30min，挥干乙醇，直至无醇味，制得蟾皮溶液； (5)往步骤(4)制得的蟾皮溶液中分别依次加入处方量的尼泊金甲酯、用蒸馏水溶胀后的HPMC K4M及HPMC K100M、氮酮、丙二醇、薄荷脑及甘油，加水定容，混匀后静置12_24h，SP可形成蟾皮凝胶剂。
5.根据权利要求4所述的蟾皮凝胶剂制备工艺，其特征在于步骤(2)所述的连续冷冻干燥时间优选为18小时。`
6.根据权利要求4所述的蟾皮凝胶制备工艺，其特征在于步骤(3)所述的蟾皮超微粉为粒径小于蟾皮细胞的粒径。
7.根据权利要求4所述的蟾皮凝胶剂制备工艺，其特征在于步骤(5)所述的溶胀后的HPMC K4M是按固液比(g:ml) =1:20进行溶胀的，溶胀后的HPMC K100M是按固液比(g:ml)=1.5:100进行溶胀的。
8.根据权利要求7所述的蟾皮凝胶制备工艺，其特征在于所述溶胀后的HPMCK4M:HPMC KlOOM=1:0.23-0.5。
【文档编号】A61P35/00GK103655620SQ201310554129
【公开日】2014年3月26日 申请日期:2013年11月11日 优先权日:2013年11月11日
【发明者】黄绳武, 李雅雅, 赵丹丹, 王俊俊, 蒋杉杉, 闾红燕 申请人:浙江中医药大学