扎那米韦生物利用度增强的制剂的制作方法
【专利摘要】根据本发明，提供包括扎那米韦和至少一种渗透性增强剂的组合物。所述组合物可增加能被运输跨过细胞膜(如Caco-2细胞膜)的扎那米韦量，并且可使该量相对于在不存在渗透性增强剂的情况下能被运输跨过细胞膜的量增加至少150％。还提供包括治疗有效量的扎那米韦和渗透性增强量的渗透性增强剂的组合物的口服剂型。所述口服剂型可进一步包括包围组合物的肠溶-或pH-敏感性包衣或层。根据本发明还提供治疗或预防流感感染的方法。
【专利说明】扎那米韦生物利用度增强的制剂
[0001]相关申请
[0002]本申请要求2012年I月5日提交的美国临时专利申请号61/583，526的优先权，其全部内容被引入本文作为参考。
发明领域
[0003]本发明涉及增强极性活性剂如扎那米韦(zanamivir)的渗透性和生物利用度。
[0004]发明背景
[0005]扎那米韦是抗病毒剂类的一员，其通过抑制病毒神经氨酸苷酶一对于流感病毒复制和感染其宿主而言至关重要的酶一发挥作用。除流感A和B外，禽流感病毒(H5N1)也已显示出对扎那米韦敏感。但是，采用扎那米韦口服形式的动物研究已经证明其口服生物利用度很差。
[0006]因此，需要这样的神经氨酸苷酶抑制剂组合物:在被口服给予以进行治疗或预防多种适用症——例如流感感染——时，呈现提高的生物利用度和效力。
[0007]发明概述
[0008]本发明的特征在于，包括扎那米韦和至少一种渗透性增强剂的组合物。组合物可增加能够被运输跨过细胞膜(如Caco-2细胞膜)的扎那米韦的量，并且可使该量相对于在不存在渗透性增强剂的情况下能够被运输跨过细胞膜的量增加至少150%。
[0009]适用于本发明实践的渗透性增强剂包括脂肪酸、脂肪酸酯、脂肪酸盐、甘油、单辛酸甘油酯、表面活性剂、环糊精、水杨酸钠、乙二胺四乙酸、柠檬酸、壳聚糖、壳聚糖衍生物、氯化N-三甲基壳聚糖、单羧甲基-壳聚糖、氯化棕榈酰肉碱、酰基肉碱、乙二醇四乙酸、3-烷基酰胺基-2-烷氧基丙基-磷酸胆碱衍生物、二甲基棕榈基-铵基丙烷磺酸盐、烷酰基胆碱、N-乙酰化氨基酸、粘膜粘附性聚合物、磷脂、胡椒碱、1-甲基哌嗪、α -氨基酸、矿物油、或类似物。
[0010]根据本发明，还提供组合物的口服剂型，其包括治疗有效量的扎那米韦和渗透性增强量的渗透性增强剂。口服剂型可进一步包括包围组合物的肠溶-或PH-敏感性包衣或层。在口服剂型中，渗透性增强剂可以是甘油、单辛酸甘油酯、二甲基棕榈基-铵基丙烷磺酸盐、及类似物。
[0011]渗透性增强剂可以，基于扎那米韦和渗透性增强剂的组合重量，以约0.lwt%至约99wt%的浓度存在于组合物中。
[0012]根据本发明还提供治疗或预防流感感染的方法。总体上，方法包括将包括扎那米韦和至少一种渗透性增强剂的组合物——包括这种组合物的口服剂型——给予对其有需要的对象。在根据本发明方法使用的组合物中，渗透性增强剂可以是甘油、单辛酸甘油酯、二甲基棕榈基-铵基丙烷磺酸盐、及类似物。
[0013] 附图简述
[0014]图1显示以生理盐水(参见实施例5)以1.5mg/动物在雄性Sprague-Dawley大鼠中静脉内给予后的各个扎那米韦血浆浓度与时间曲线。菱形指代测试大鼠#951，正方形指代测试大鼠#952，和三角形指代测试大鼠#953。
[0015]图2显示由生理盐水(参见实施例5)以1.5mg/动物在雄性Sprague-Dawley大鼠中静脉内给予后的平均扎那米韦血浆浓度与时间曲线。
[0016]图3显示由Capmul MCM L8制剂(参见实施例5)以1.5mg/动物在雄性Sprague-Dawley大鼠中十二指肠内给予后的各个扎那米韦血衆浓度与时间曲线。菱形指代测试大鼠#9545，正方形指代测试大鼠#955，和三角形指代测试大鼠#956。
[0017]图4显示由Capmul MCM L8制剂(参见实施例5)以1.5mg/动物在雄性Sprague-Dawley大鼠中十二指肠内给予后的平均扎那米韦血衆浓度与时间曲线。
[0018]图5显示由甘油制剂(参见实施例5)以1.5mg/动物在雄性Sprague-Dawley大鼠中十二指肠内给予后的各个扎那米韦血浆浓度与时间曲线。菱形指代测试大鼠#957，正方形指代测试大鼠#958，和三角形指代测试大鼠#959。
[0019]图6显示由甘油制剂(参见实施例5)以1.5mg/动物在雄性Sprague-Dawley大鼠中十二指肠内给予后的平均扎那米韦血浆浓度与时间曲线。
[0020]图7显示由PBS制剂(参见实施例5)以1.5mg/动物在雄性Sprague-Dawley大鼠中十二指肠内给予后的各个扎那米韦血浆浓度与时间曲线。菱形指代测试大鼠#960，正方形指代测试大鼠#961，和三角形指代测试大鼠#962。
[0021]图8显示由PBS制剂(参见实施例5)以1.5mg/动物在雄性Sprague-Dawley大鼠中十二指肠内给予后的平均扎那米韦血浆浓度与时间曲线。
[0022]图9显示由PBS制剂(甘油，_2hr预用药(pre-dose)—参见实施例5)以1.5mg/动物在雄性Sprague-Dawley大鼠中十二指肠内给予后的各个扎那米韦血衆浓度与时间曲线。菱形指代测试大鼠#963，正方形指代测试大鼠#964，和三角形指代测试大鼠#965。
[0023]图10显示由PBS制剂(甘油，-2hr预用药一参见实施例5)以1.5mg/动物在雄性Sprague-Dawley大鼠中十二指肠内给予后的平均扎那米韦血衆浓度与时间曲线。
[0024]图11显示由几种不同制剂(菱形指代Capmul MCM L8制剂；正方形指代甘油制剂；三角形指代PBS制剂；和圆形指代PBS制剂，在-2hrs甘油预治疗；参见实施例5)以1.5mg/动物在雄性Sprague-Dawley大鼠中十二指肠内给予后的平均扎那米韦血浆浓度与时间曲线。
[0025]图12提供在以L 5mg/动物在雄性Sprague-Dawley大鼠中十二指肠内给予后来自不同制剂的扎那米韦的生物利用度比较。
[0026]图13显示由甘油(100 μ L)制剂(参见实施例6)以1.5mg/动物在雄性Sprague-Dawley大鼠中十二指肠内给予后的各个扎那米韦血衆浓度与时间曲线。菱形指代测试大鼠#181，正方形指代测试大鼠#182，和三角形指代测试大鼠#183。
[0027]图14显示由甘油(100 μ L)制剂(参见实施例6)以1.5mg/动物在雄性Sprague-Dawley大鼠中十二指肠内给予后的平均扎那米韦血衆浓度与时间曲线。
[0028]图15显示由甘油(150 μ L)制剂(参见实施例6)以1.5mg/动物在雄性Sprague-Dawley大鼠中十二指肠内给予后的各个扎那米韦血衆浓度与时间曲线。菱形指代测试大鼠#184，正方形指代测试大鼠#185，和三角形指代测试大鼠#186。
[0029]图16显示由甘油(150 μ L)制剂(参见实施例6)以1.5mg/动物在雄性Sprague-Dawley大鼠中十二指肠内给予后的平均扎那米韦血衆浓度与时间曲线。
[0030]图17显示由PBS(1yL)制剂(150 μ L甘油，-2hr预用药一参见实施例6)以
1.5mg/动物在雄性Sprague-Dawley大鼠中十二指肠内给予后的各个扎那米韦血衆浓度与时间曲线。菱形指代测试大鼠#187，正方形指代测试大鼠#188，和三角形指代测试大鼠#189。
[0031]图18显示由PBS(50yL)制剂(150yL甘油，-2hr预用药一参见实施例6)以
1.5mg/动物在雄性Sprague-Dawley大鼠中十二指肠内给予后的平均扎那米韦血衆浓度与时间曲线。
[0032]图19 显示由 PBS (50 μ L)制剂(50 μ L Capmul MCM L8，_2hr 预用药(pre-dose) —参见实施例6)以1.5mg/动物在雄性Sprague-Dawley大鼠中十二指肠内给予后的各个扎那米韦血浆浓度与时间曲线。菱形指代测试大鼠#190，正方形指代测试大鼠#191，和三角形指代测试大鼠#192。
[0033]图20显示由PBS (50 μ L)制剂(50 μ L Capmul MCM L8，_2hr预用药一参见实施例6)以1.5mg/动物在雄性Sprague-Dawley大鼠中十二指肠内给予后的平均扎那米韦血衆浓度与时间曲线。
[0034]图21显示由不同制剂(菱形指代100 μ L甘油；正方形指代150 μ L甘油；黑三角形指代在_2hr用甘油150 μ L预治疗后的50 μ L PBS ;和白三角形指代在_2hr用CapmulMC L850 μ L预治疗后的50 μ L PBS—参见实施例6)以1.5mg/动物在雄性Sprague-Dawley大鼠中十二指肠内给予后的平均扎那米韦血浆浓度与时间曲线。
[0035]图22显示由生理盐水(300 μ L)制剂(参见实施例7)以1.5mg/动物在雄性Sprague-Dawley大鼠中静脉内给予后的各个扎那米韦血衆浓度与时间曲线。菱形指代测试大鼠#954，正方形指代测试大鼠#955，和三角形指代测试大鼠#956。
[0036]图23显示由生理盐水(300 μ L)制剂(参见实施例7)以1.5mg/动物在雄性Sprague-Dawley大鼠中静脉内给予后的平均扎那米韦血衆浓度与时间曲线。
[0037]图24显示由Capmul MCM L8 (25 μ L)制剂(参见实施例7)以1.5mg/动物在雄性Sprague-Dawley大鼠中十二指肠内(丸剂(bolus))给予后的各个扎那米韦血衆浓度与时间曲线。菱形指代测试大鼠#957，正方形指代测试大鼠#958，和三角形指代测试大鼠#959。
[0038]图25显示由Capmul MCM L8 (25 μ L)制剂(参见实施例7)以1.5mg/动物在雄性Sprague-Dawley大鼠中十二指肠内(丸剂)给予后的平均扎那米韦血衆浓度与时间曲线。
[0039]图26显示由Capmul MCM L8 (50 μ L)制剂(参见实施例7)以1.5mg/动物在雄性Sprague-Dawley大鼠中十二指肠内(丸剂)给予后的各个扎那米韦血衆浓度与时间曲线。菱形指代测试大鼠#960，正方形指代测试大鼠#961，和三角形指代测试大鼠#962。
[0040]图27显示由Capmul MCM L8 (50 μ L)制剂(参见实施例7)以1.5mg/动物在雄性Sprague-Dawley大鼠中十二指肠内(丸剂)给予后的平均扎那米韦血衆浓度与时间曲线。
[0041]图28显示由Capmul MCM L8 (75 μ L)制剂(参见实施例7)以1.5mg/动物在雄性Sprague-Dawley大鼠中十二指肠内(丸剂)给予后的各个扎那米韦血衆浓度与时间曲线。菱形指代测试大鼠#963，正方形指代测试大鼠#964，和三角形指代测试大鼠#965。
[0042]图29显示由Capmul MCM L8 (75 μ L)制剂(参见实施例7)以1.5mg/动物在雄性Sprague-Dawley大鼠中十二指肠内(丸剂)给予后的平均扎那米韦血衆浓度与时间曲线。
[0043]图30显示由Capmul MCM L8 (25,50或75 μ L)制剂(参见实施例7)以1.5mg/动物在雄性Sprague-Dawley大鼠中十二指肠内(丸剂)给予后的平均扎那米韦血衆浓度与时间曲线。菱形指代Capmul MCM L8025 μ L，正方形指代Capmul MCM L8050 μ L，和三角形指代 Capmul MCM L8075 μ L。
[0044]图31Α概括扎那米韦的Caco-2膜渗透性作为其所用介质(vehicle)(即，PBS对照、甘油或Capmul MCM L8)的函数。
[0045]图31B概括其他实验的结果，以确定扎那米韦的Caco-2膜渗透性作为其所用其他介质(即，PBS对照、5%甘油或0.25% Capmul MCM L8)的函数。
[0046]图32A概括通过50 μ I不同介质十二指肠内给予的1.5mg扎那米韦的绝对生物利用度。
[0047]图32B和32C显示来自另外研究的结果,所述研究采用在雄性Sprague-Dawley大鼠中十二指肠内给予扎那米韦/增强剂制剂。在这些实验中，十二指肠内装备插管的大鼠被给予在50 μ L介质中的1.5mg扎那米韦,所述介质由PBS、甘油、或Capmul MCM L8组成。结果证明在不存在增强剂的情况下扎那米韦吸收低，以及在其存在的情况下绝对生物利用度急剧增加。与PBS相比，50 μ L甘油和Capmul MCM L8中的扎那米韦的绝对生物利用度分别增加4.7和23.7倍。在表1中，显示采用所示制剂的扎那米韦的药代动力学参数。最显著地，当Capmul MCM L8用作增强剂时，实现超过7000ng/mL的Cmax。
[0048]作为甘油和Capmul MCM L8的渗透性增强效果持续时间的初始测试，进行在扎那米韦施药前2hr给予渗透性增强剂的实验。在这些实验中，增强剂和药物暂时分离2hr不导致吸收增强；两种增强剂的绝对生物利用度等同于阴性对照的绝对生物利用度。显然，增强效果是暂时的，并且在2hr中持续良好。
[0049] 图33示例在固定1.5mg扎那米韦药物负载下增加十二指肠内给予的Capmul MCML8对绝对生物利用度的影响。
[0050]图34概括了在十二指肠内给予后在固定50 μ L量的Capmul MCM L8下来自不同扎那米韦水平的交互结果。
[0051]图35显示Capmul MCM L8对雪貂中十二指肠内扎那米韦吸收的影响。动物(每组3个)通过外科布置的插管被十二指肠内给予所示介质中的1mg扎那米韦。使动物恢复数天，然后给予测试制剂。在所示时间获得血液样本，将其用肝素钠作为抗凝剂来处理，并冷冻储存，直到利用已建立的LC-MS分析程序定量扎那米韦水平。
[0052]发明详述
[0053]根据本发明，提供组合物，其包括:
[0054]扎那米韦，和
[0055]渗透性增强剂，
[0056]其中组合物使运输跨过Caco-2细胞膜的扎那米韦量相对于在渗透性增强剂不存在的情况下运输跨过Caco-2细胞膜的扎那米韦量增加至少150%。
[0057]扎那米韦指化合物5-乙酰胺基-4-胍基-6-(l，2，3-三羟丙基)-5，6_ 二氢-4H-吡喃-2-羧酸(扎那米韦)，并具有以下所示化学结构:
[0058]
【权利要求】
1.组合物，包括: 扎那米韦，和 渗透性增强剂， 其中所述组合物使被运输跨过CaC0-2细胞膜的扎那米韦量，相对于在不存在所述渗透性增强剂的情况下被运输跨过Caco-2细胞膜的扎那米韦量，增加至少150%。
2.治疗或预防流感感染的组合物,所述组合物包括: 扎那米韦，和 渗透性增强剂， 其中所述组合物使被运输跨过Caco-2细胞膜的扎那米韦量，相对于在不存在所述渗透性增强剂的情况下被运输跨过Caco-2细胞膜的扎那米韦量，增加至少150%。
3.组合物，包括: 扎那米韦，和 渗透性增强量的渗透性增强剂。
4.治疗或预防流感感染的组合物,所述组合物包括: 扎那米韦，和 渗透性增强剂， 其中所述组合物使扎那米韦在被给予所述组合物的对象中的生物利用度，相对于在不存在所述渗透性增强剂的情况下扎那米韦在被给予所述组合物的对象中的生物利用度，增加至少1Voo
5.前述权利要求中任一项所述的组合物，其中所述渗透性增强剂是脂肪酸、或其盐或酯。
6.权利要求5所述的组合物，其中所述脂肪酸是CS至ClO酸、以及其盐或酯。
7.前述权利要求中任一项所述的组合物，其中所述渗透性增强剂以增强剂和扎那米韦的组合重量的至少0.1wt %的量存在。
8.权利要求7所述的组合物，其中所述渗透性增强剂以不大于增强剂和扎那米韦的组合重量的99wt%的量存在。
9.前述权利要求中任一项所述的组合物，其中所述组合物使被运输跨过Caco-2细胞膜的扎那米韦量，相对于在不存在所述渗透性增强剂的情况下被运输跨过Caco-2细胞膜的扎那米韦量，增加至少250%。
10.前述权利要求中任一项所述的组合物，其上进一步包括肠溶包衣。
11.口服剂型，包括前述权利要求中任一项所述的组合物，其中所述组合物包括治疗有效量的扎那米韦和渗透性增强量的所述渗透性增强剂。
12.单位剂型，包括单次使用剂量的前述权利要求中任一项所述的组合物，其中所述组合物包括治疗有效量的扎那米韦和渗透性增强量的所述渗透性增强剂。
13.治疗或预防流感感染的方法，所述方法包括向对其有需要的对象给予根据前述权利要求中任一项所述的组合物。
14.根据前述权利要求中任一项所述的组合物在制备治疗或预防流感感染的药物中的应用。
15.试剂盒，包括根据权利要求1-10中任一项所述的组合物，和将其给予对其有需要的对 象的指南。
【文档编号】A61K31/351GK104080450SQ201380004849
【公开日】2014年10月1日 申请日期:2013年1月3日 优先权日:2012年1月5日
【发明者】E·霍尔姆斯, M·海勒, G·K·奥斯特兰德 申请人:阿拉维制药公司