基于mim蛋白环肽抑制剂的靶向长循环脂质体及其制备方法与应用的制作方法
【专利摘要】本发明提供的基于MIM蛋白环肽抑制剂的靶向长循环脂质体，其结构式如（I）所示；本发明还提供了上述基于MIM蛋白环肽抑制剂的靶向长循环脂质体的制备方法及其在制备抗肿瘤药物中的应用。该脂质体选择性强、安全性高，可以实现肿瘤细胞靶向给药，降低肿瘤药物的毒副作用，且小分子环肽抑制剂S3-a02可以与该脂质体包覆的其它抗肿瘤药物发挥双重药效，极大的提高肿瘤治疗效果。
【专利说明】基于MIM蛋白环肽抑制剂的靶向长循环脂质体及其制备方法与应用
【技术领域】
[0001 ] 本发明属于药用高分子辅料领域，具体涉及一种基于MIM蛋白环肽抑制剂的靶向长循环脂质体，该脂质体为以基于MIM蛋白1-BAR 二聚体的环肽抑制剂S3-a02为靶向配体的聚乙二醇修饰磷脂衍生物，还涉及该脂质体在抗肿瘤药物制备中的应用。
【背景技术】
[0002]脂质体是由磷脂依靠疏水缔合作用在水中自发形成的一种分子有序组合体，为多层囊泡结构，每层均为类脂双分子层，层间和脂质体核内为水相，双分子膜间为油相。其性质与细胞膜相似，因此具有很好的生物相容性。然而当脂质体进入血液循环系统后，很容易被网状内皮系统(Reticulo-endothelial Systems, RES)识别而快速离开血流。因此，“长循环”是脂质体作为给药系统必须具备的基本性质。大量研究表明，在载体表面用亲水性的聚合物如聚乙二醇(PEG)进行化学修饰是达到这一特性的最佳方法，在体外，起立体屏障作用的聚合物可以保护脂质体不与各种溶剂产生作用；在生物学水平，用PEG修饰的脂质体不容易被血浆蛋白吸附，减少与调理素的相互作用，稳定性提高，同时可以有效地避免网状内皮系统的识别，从而大大延长在血液循环系统的停留时间，为其进入组织创造有利条件。
[0003]脂质体对肿瘤组织的靶向一般通过被动靶向和主动靶向的设计来实现，其中被动靶向的设计主要通过调控脂质体粒径的大小。肿瘤组织等病变部位的毛细血管壁内含亚微米孔道，其对亚微米粒子的截流尺寸大约在380nm到780nm之间。因此与正常组织(其毛细血管壁的通道仅为几纳米)相比，尺寸在100-200nm之间的纳米粒子透过肿瘤组织的毛细血管壁要相对容易。另一方面，与正常组织相比，由于肿瘤的淋巴毛细管也要少许多，因此通过淋巴系统排除纳米粒子的可能性也要小得多。这两方面的作用，使粒径在IOOnm左右的纳米粒子更容易进入并保留在肿瘤组织中，这一现象被称为“增强渗透与滞留效应”。因此，粒径在IOOnm左右的脂质体药物粒子对肿瘤有被动靶向的作用。1995年美国FDA批准阿霉素长循环脂质体(Doxil)上市用于治疗AIDS相关的卡波济肉瘤和卵巢癌，其成功上市即得益于脂质体表面的PEG外套和脂质体粒径的控制(IOOnm)0 STEALTH是Doxil的脂质体载体，使其具有长循环特性的成分为甲氧基聚乙二醇一二硬脂酰磷脂酰乙醇胺(MPEG-DSPE)，
结构如下:
[0004]
【权利要求】
1.基于MIM蛋白环肽抑制剂的靶向长循环脂质体，其结构式如(I)所示:
2.根据权利要求1所述的一种基于MIM蛋白环肽抑制剂的靶向长循环脂质体，其特征在于:其中，X为16，y为16，η为45。
3.权利要求 1和2任一项所述的基于MIM蛋白环肽抑制剂的靶向长循环脂质体的制备方法，其特征在于:包括以下步骤:以聚乙二醇为起始原料，用对硝基苯基氯甲酸酯将聚乙二醇两端活化后，在碱性条件下将对硝基苯基氯甲酸酯活化后的PEG分别与带有伯胺基的磷脂和环肽S3-a02成酰胺键，即得。
4.一种根据权利要求3所述的基于MIM蛋白环肽抑制剂的靶向长循环脂质体的制备方法，其特征在于:包括以下步骤: 1)双对硝基苯基碳酸酯聚乙二醇的合成:在三乙胺的催化下，聚乙二醇与过量的对硝基苯基氯甲酸酯室温下反应10-15h，过滤，滤液蒸干，依次用乙醚、乙酸乙酯重结晶，得双对硝基苯基碳酸酯聚乙二醇； 2)二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-对硝基苯基碳酸酯的合成:在三乙胺的催化下，二硬脂酰磷脂酰乙醇胺和过量的双对硝基苯基碳酸酯聚乙二醇40-50°C下反应5-10h，加入乙酸和乙腈，过滤，滤液蒸干，加入碳酸氢钠水溶液溶解，超滤，冻干，得二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-对硝基苯基碳酸酯； 3)二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-环肽的合成:将二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-对硝基苯基碳酸酯溶于氯仿中，减压蒸馏除去溶剂形成脂膜；将环肽S3-a02溶于稀盐酸中，加入脂膜并轻摇使脂膜充分分散；再加入pH为9.0的Tris缓冲液混匀，0-10°C反应10-16h ;产物在以水为介质、分子量为3.5KD的透析袋透析2-3天，冻干，即得。
5.一种根据权利要求4所述的基于MIM蛋白环肽抑制剂的靶向长循环脂质体的制备方法，其特征在于:步骤I)中，溶剂为二氯甲烷，所述聚乙二醇为PEG.、PEG4000或者PEG_ ；步骤2)中，溶剂为氯仿，溶剂、乙酸和乙腈的体积比为20:(2-4): (4-6)，碳酸氢钠水溶液的质量百分比浓度为15-25% ;步骤3)中，稀盐酸的浓度为l-3mol/L。
6.权利要求1至2任一项所述的基于MIM蛋白环肽抑制剂的靶向长循环脂质体在抗肿瘤药物制备中的应用。
7.如权利要求6所述的应用，其特征在于:所述抗肿瘤药物中包括权利要求1至2任一项所述的基于MIM蛋白环妝抑制剂的革El向长循环脂质体、脂质体基质和抗肿瘤药物。
8.如权利要求7所述的应用，其特征在于:所述抗肿瘤药物选自紫杉醇、表阿霉素、藤黄酸、多西紫杉醇、环孢素A、长春酰胺或柔红霉素中的任意一种或几种的组合；所述脂质体基质选自蛋黄卵磷脂、二棕榈酰磷脂酰胆碱、二硬脂酰磷脂酰胆碱或胆固醇中的一种或几种的组合，其中二棕榈酰磷脂酰胆碱和二硬脂酰磷脂酰胆碱均为饱和卵磷脂脂质体基质。
9.如权利要求7所述的应用，其特征在于:所述脂质体基质为蛋黄卵磷脂和胆固醇，所述抗肿瘤药物为阿霉素；其中，蛋黄卵磷脂、胆固醇Cho1、阿霉素、基于MIM蛋白环肽抑制剂的靶向长循环脂质体的摩尔比为20:2:2:1。
10.如权利要求7所述的应用，其特征在于:所述基于MIM蛋白环肽抑制剂的靶向长循环脂质体的平均粒径为75-170纳米。`
【文档编号】A61K31/352GK103845737SQ201410077563
【公开日】2014年6月11日 申请日期:2014年3月5日 优先权日:2014年3月5日
【发明者】蔡进, 吉民, 曹萌, 陈峻青 申请人:东南大学