基于胆固醇的三种脂质材料的制备及其应用的制作方法
【专利摘要】本发明涉及三种新型脂质类化合物及其制备方法，该类物质可用于阳离子脂质体的制备和基因类药物的传递。本发明的脂质材料是在胆固醇中有效引入碱性氨基酸多胺基残基，所构建的新型材料具有优良的基因转染活性。本发明化合物的优点是通过己二醇醚键将胆固醇与氨基酸相连，增加脂质材料的稳定性的同时保持胆固醇与氨基酸拼合的优点，从而提高基因转染效果。
【专利说明】基于胆固醇的三种脂质材料的制备及其应用
所属【技术领域】
[0001]本发明涉及三种新型脂质类化合物及其制备方法，该类物质可用于阳离子脂质体的制备和基因类药物的传递。
【背景技术】
[0002]基因治疗在现代医药治疗中发挥越来越重要的作用。有效的基因治疗依赖于外源基因在体内高效、稳定的表达，而这在很大程度上取决基因治疗所采用的载体系统。目前用于基因治疗的载体主要分为病毒载体和非病毒载体两大类。病毒载体转染率高，但其存在免疫原性，具有较大的危险性，限制了它在临床基因治疗上的应用。非病毒载体和病毒载体相比，具有毒性低、免疫原性低，而且所携带的基因不整合至宿主细胞基因组等优点。阳离子脂质体是非病毒载体中最典型的载体，被称为基因治疗领域内最有希望的基因转染载体。因此，开发新型脂质材料是构建基因治疗载体的关键，对进行有效的基因治疗具有重要意义。
[0003]阳离子脂质体通常由阳离子脂质材料和其它天然脂质组成。阳离子脂质由可质子化的极性头部、连接臂和疏水基团3部分组成。极性头部为含胺类基团，疏水基团主要由双链烷基或胆固醇组成。目前，多胺与胆固醇的缀合是设计合成新型高效脂质材料的有效途径。多胺的多阳离子易与核酸形成静电复合物而携带基因，胆固醇的亲脂性使其可顺利通过质膜，能够明显提高载体系统的基因转染效率。连接臂通常有氨甲酰键(DC-chol，Biochem Bioph Res Co, 1991,1235, 296-307 ;Biomacromolecules,2002,3,1197-1207)、醚键(Eur J Pharm Biopharm，1999，47，175-178)、酯键(CN103159819A ；BioconjugateChem.1999，10,791-796 ；Int J Pharm，2011，408，183-190)或酰胺键(W02011 / 84721 ；IntJ Pharm, 2013，443，221-229)，其中基于胆固醇的DC-chol由于在多种细胞上显示良好的转染效果，已成为商品化试剂被广泛应用基因传递载体。因此，基于胆固醇疏水基团，采用不同方式合理构建多氨基极性头部，将有力地扩展阳离子脂质体的脂质分子种类，有望为基因转染提供载体材料，推动基因治疗在医药学中的进一步应用。`
【发明内容】
[0004]本发明的目的是提供三种新型脂质类化合物与其药学上可接受的盐及其制备方法，进一步的目的在于提供该类化合物在制备阳离子脂质体和基因类药物传递中的用途。本发明在系统分析阳离子脂质体结构和转染机制基础上，以廉价易得的天然胆固醇为起始原料，以6-氨基-1-己醇为连接臂，合成中间体胆留-5-烯-3β-6'-氨基己基醚。并在中间体胆留-5-烯-3 β-6'-氨基己基醚的基础上，与赖氨酸、组氨酸和精氨酸三种碱性氨基酸分别反应，在胆固醇结构中通过碱性氨基酸引入不同的氨基基团，设计合成了三种新型多胺脂质材料。本发明的脂质材料是在胆固醇中有效引入碱性氨基酸多氨基残基，所构建的新型材料材料具有优良的基因转染活性。本发明化合物的优点是采用己二醇连接臂醚键将来源丰富的天然产物胆固醇与氨基酸相连，通过碱性氨基酸引入多胺基，增加脂质材料稳定性的同时保持胆固醇与氨基酸拼合的优点，从而提高了其脂质体的稳定性和基因转染效果。
[0005]本发明的化合物结构通式⑴如下
[0006]
【权利要求】
1.通式(I)所示的脂质类化合物或其药学上可接受的盐类， 其中:
2.根据权利要求1所述脂质类化合物(I)药学上可接受的盐中所述阴离子为氯负离子、溴负离子、碘负离子、碳酸根离子、硝酸根离子、磷酸根离子、乙酸根离子、硫酸根离子或三氟乙酸根离子。
3.权利要求1所述化合物的制备方法，其特征在于:以胆留-5-烯-3β-6'-氨基己基醚为原料，经与BOC保护的赖氨酸、组氨酸或精氨酸在四氢呋喃，二氯甲烷，二氧六环，或上述混合溶剂中在室温下经DCC-NHS催化或DCC-DMAP催化反应制得目标化合物(I)。
4.权利要求2所述化合物药学上可接受的盐的制备方法，其特征在于:通式(I)所述的化合物与相应摩尔比盐酸、氢溴酸，氢碘酸、碳酸、硝酸、磷酸、乙酸、硫酸或三氟乙酸在溶剂甲醇、乙醇、乙醚、四氢呋喃、丙酮、水、1，4_ 二氧六环、N, N-二甲基甲酰胺或上述溶剂的混合溶剂中成盐反应得药学上可接受的盐。
5.一种阳离子脂质体，其含有权利要求1或2中所述的通式(I)所示化合物或其药学上可接受的盐类，以及一种或多种其他脂质材料或赋形剂。
6.权利要求1或2中所述的通式(I)所示化合物或其药学上可接受的盐类在制备阳离子脂质体及传递基因方面的用途。
【文档编号】A61K9/127GK103804458SQ201410077516
【公开日】2014年5月21日 申请日期:2014年2月25日 优先权日:2014年2月25日
【发明者】张邦乐, 巨佳, 邱海, 荆自伟, 万宁, 张芳芳, 周四元 申请人:中国人民解放军第四军医大学