用于治疗炎症的组合物和方法
【专利摘要】本发明提供电动产生的流体(例如，富含气体的电动流体或溶液)、用于治疗炎症或至少一种炎症症状的治疗组合物和方法。电动产生的流体或治疗组合物和方法包括任选地与其他治疗剂组合的电动产生的含水流体。具体方面提供通过调节细胞膜、膜电位、膜蛋白(例如膜受体，包括但不限于G蛋白偶联受体(GPCR))和细胞间连接(例如紧密连接、间隙连接、黏着带和桥粒)中的至少一种来调控或调节与炎症反应相关的细胞内信号转导。其他实施方式包括电动产生的流体(例如，电动产生的富含气体的流体和溶液)和治疗组合物的具体施用途径或制剂。
【专利说明】用于治疗炎症的组合物和方法
[0001]本申请是申请日为2008年10月24日的中国专利申请200880122817.9的分案申请。
发明领域
[0002]具体方面一般涉及炎症和调控或调节细胞内信号转导，并且更具体地涉及通过施用包含本发明的至少一种电动产生的流体(例如，电动产生的富含氧的流体)的治疗组合物来治疗或预防受治疗者的炎症或至少一种炎症症状的组合物和方法。具体方面涉及通过施用包含如本文公开的至少一种电动产生的流体(包括富含气体的(例如富含氧的)电动产生的流体)的治疗组合物来调节细胞膜、膜电位、膜蛋白(例如膜受体，包括但不限于G蛋白偶联受体)和细胞间连接(例如紧密连接、间隙连接、黏着带和桥粒(desmasome))中的至少一个来调节与炎症反应相关的细胞内信号转导。其他方面涉及组合治疗。
[0003]相关申请的交叉引用
[0004]本申请要求2007年10月25日提交的美国临时专利申请系列第60 / 982，719号、2007年10月25日提交的第60 / 982，720号、2008年4月28日提交的第61 / 048, 332号、2008年4月28日提交 的第61 / 048, 340号、2008年4月28日提交的第61 / 048, 347号和2008年4月28日提交的第61 / 048，404号的优先权，通过引用将这些临时专利申请整体并入本文。
[0005]发明背景
[0006]炎症可以是对创伤或诸如细菌或病毒的微生物感染的急性或慢性的、局部或系统性的免疫反应和/或血管反应。炎症反应通常破坏、稀释或限制受治疗者中的有害试剂和损伤组织。炎症尤其是急性形式的炎症的特征在于疼痛、发热、发红、肿胀和可能的功能损失的经典体征。在组织学水平，炎症涉及复杂的一系列事件，包括小动脉、毛细管、和小静脉膨胀和渗透性和血流增加、包含血浆蛋白的液体渗出和白细胞向炎症区域的迁移，尤其是对于局部的反应。
[0007]炎症的治疗性治疗依据具体的炎症病症和追求结果而包括静脉内、皮下、局部或口服施用的多种药物。然而，当今大部分可用的抗炎治疗具有相当大的缺点，包括注射部位的重度反应、对感染的敏感性增加、皮疹、或其他副作用。因此，存在对较好的抗炎治疗剂和治疗方法的需要。
[0008]胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)。胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)是触发树突细胞介导的Th2型炎症反应的IL-7样细胞因子并且它被认为是过敏性炎症的主要开关。TSLP是B细胞和T细胞二者的发育和成熟的必需生长因子(integral growth factor)。具体地，鼠TSLP支持B淋巴细胞生成并且是B细胞增殖所需的。鼠TSLP在控制T细胞受体Y (TCR.Y.)基因座的重排中起关键作用并且对胸腺细胞和成熟T细胞具有明显的刺激作用 ο 参见，例如，Friend 等人，Exp.Hematol.，22:321-328,1994 ；Ray 等人，Eur.J.1mmunol.，26: 10-16,1996 ;Candeias 等人，Immunology Letters, 57:9-14,1997。
[0009]TSLP具有类似于IL-7的细胞因子活性。例如，在刺激B细胞增殖反应中TSLP可以代替IL-7 (Friend等人，如上)。尽管TSLP和IL-7介导对靶细胞类似的作用，但是它们似乎具有不同的信号传导途径并且它们的生物学反应可能不同。例如，尽管TSLP调节STAT5的活性，但是它不能激活任何Janus家族酪氨酸激酶成员(Levin等人，J.1mmunol., 162:677-683，1999)。
[0010]TSLP对树突细胞和TNF生成的作用。在2001年克隆了人TSLP和人TSLP受体之后，发现人TSLP有效地激活不成熟的⑶Ilc+髓样树突细胞(mDC)(参见，例如，Reche等人，J.1mmunol.，167:336-343, 2001 和 Soumelis 等人，Nat.1mmunol.，3:673-680, 2002)。Th2细胞在免疫学课本和文献中一般被定义为产生IL-4、IL-5、IL-13和IL-10的⑶4+T细胞。并且诸如⑶4+T细胞的Thl细胞产生IFN- Y并且有时产生TNF。当TSLP-DC用于体外刺激首次实验的同种异型CD4+T细胞时，诱导了独特类型的Th2细胞，该独特类型的Th2细胞产生经典的Th2细胞因子IL-4、IL-5和IL-13以及大量的TNF，但是极少或没有IL-10或干扰素-Y (Reche 等人,如上)(还参见，例如，Soumelis 等人，Nat.1mmunol.，3:673-680,2002)。TNF通常不被认为是Th2细胞因子。然而，TNF在哮喘性气道(asthmatic airway)中是突出的并且与TNF分泌增加相关的基因型伴随有哮喘风险的增加。参见Shah等人，Clin.Exp.Allergy.,25:1038-1044，1995 ；和 Moffatt, M.F.和 Cookson, W.0.，Hum.Mol.Genet.，6:551-554,1997。
[0011]TSLP诱导人mDC在mRNA和蛋白两种水平表达TNF超家族蛋白0X40L(Ito等人，J.Exp.Med.,202:1213-1223)。TSLP-DC的0X40L表达对于炎性Th2细胞的形成很重要。因此，TSLP激活的DC通过上调0X40L而不诱导Thl-极化细胞因子(Thl-polarizingcytokine)产生而产生Th2许可性(Th2_permissive)微环境。出处同上。
[0012]TSLP表达、过敏原特异性反应和哮喘。早期研究已显示人原代皮肤角质形成细胞、支气管上皮细胞、平滑肌细胞和肺成纤维细胞高度表达TSLPmRNA(Soumelis等人，Nat.1mmunol.，3:673_680，2002)。由于TSLP主要在表皮的顶层的角质形成细胞中表达，所以这表明TSLP产生是完全分化的角质形成细胞的特征。在具有特应性皮炎的患者中TSLP的表达与朗格汉斯细胞迁移和原位激活有关，这表明TSLP可以直接促进这些细胞的激活，这些激活的细胞随后可以迁移到引流淋巴结并引发过敏原特异性反应。出处同上。在最近的研究中，通过原位杂交显示TSLP表达在哮喘性气道中增加并且其与Th2吸引性趋化因子表达和疾病严重程度两者都相关，这提供了 TSLP和哮喘之间的联系(Ying等人，J.1mmunol.，174:8183-8190,2005)。
[0013]TSLP受体(TSLPR)和过敏反应、哮喘。TSLP受体(TSLPR)是大约50kDa的蛋白并且与共同Y-链具有显著的类似性。TSLPR是新的I型细胞因子受体，它与IL-7Ra (⑶127)结合构成TSLP受体复合体，如在例如Pandey等人,Nat.1mmunol., 1:59-64, 2000中所描述的。TSLPR在其羧基末端附近具有可以与磷酸化的STAT5缔合并且在与TSLP结合时介导多种生物学功能的酪氨酸残基(Isaksen等人，J.1mmunol.，168 =3288-3294,2002)。
[0014]人TSLPR是由单核细胞和⑶Ilc+树突细胞表达的，并且TSLP结合诱导TH2细胞吸引性趋化因子CCL17和CCL22的表达。此外，如上文所述的，TSLPR诱导的树突细胞的激活间接导致了 TH2细胞因子IL-4、IL-5和IL-13的分泌增加，TH2细胞因子IL-4、IL-5和IL-13的分泌增加可能是调节⑶4+T细胞内环境稳定所必需的。在小鼠中，TSLPR的缺乏对淋巴细胞数目没有影响。然而，TSLPR和共同Y-链的缺乏导致了与只缺乏共同Y-链的小鼠相比较少的淋巴细胞。参见，Reche等人,J.1mmunol.，167:336-343, 2001和Soumelis等人，Nat.1mmunol.,3:673-680, 2002。
[0015]研究已发现TSLP和TSLPR在小鼠中过敏性疾病的引发中起关键作用。在一个研究中，显示被改造为在皮肤中过表达TSLP的小鼠发展了特应性皮炎，该特应性皮炎的特征为含有炎性渗液的湿疹性皮肤损伤、循环的Th2细胞显著增加和血清IgE增加(Yoo等人，J.Exp.Med.,202:541-549, 2005)。该研究表明在小鼠中TSLP可直接激活DC。在Li等人进行的另一研究中，研究组证实了在皮肤中过表达TSLP的转基因小鼠发展了特应性皮炎，这加固了 TSLP与特应性皮炎发展之间的联系。
[0016]另一组研究显示TSLP是在小鼠中体内引发过敏性气道炎症所需要的。在一个研究中，Zhou等人显示TSLP转基因的午餐特异性(lunch specific)表达诱导过敏性气道炎症(哮喘)，该过敏性气道炎症的特征为白细胞(包括Th2细胞)的大量浸润、杯形细胞超常增生和表皮下纤维化以及血清IgE水平增加(Zhou等人，Nat.1mmunol.，6:1047-1053，2005)。然而，相反的是，缺乏TSLPR的小鼠没有对吸入的抗原反应而发展哮喘(Zhou等人，如上和Al-Shami等人，J.Exp.Med.，202 =829-839, 2005)。因此，这些研究一起表明TSLP是在小鼠中引发过敏性气道炎症所需要的。
[0017]此外，在Yong-Jun等人进行的研究中，显示表皮细胞来源的TSLP在人中触发DC介导的炎性Th2反应，这表明TSLP代表了表皮细胞-DC界面处过敏性炎症的主要开关(Yong-Jun 等人，J.Exp.Med.，203 =269-273, 2006)。
[0018]在最近的研究中， 显示通过抑制TSLPR调节DC功能降低了小鼠中的严重程度(Liyun Shi 等人，Clin.1mmunol.，129:202-210, 2008)。在另一组研究中，显示 TSLPR 不仅在DC中表达，还在巨噬细胞、肥大细胞和⑶4+T细胞中表达(Rochman等人，J.1mmunol.,178:6720-6724,2007 ;和 OmoriM.和 Ziegler S.，J.1mmunol.，178:1396-1404，2007)。为了查明TSLPR中和对CD4+T细胞或过敏性炎症中的其他效应细胞的直接作用，Liyun Shi等人进行了其中在过继地转移到首次实验的小鼠的气道之前用抗TSLPR体外处理加入OVA的DC的实验。先前已发现OVA-DC触发强的嗜酸性气道炎症并伴随着诸如IL-4和IL-5的Th2细胞因子的大量产生(Sung 等人,J.1mmunol.，166:1261-1271 和 Lambrecht 等人,J.Clin.1nvest.，106:551-559，2000)。然而，用抗TSLPR预处理0VA-DC导致嗜酸性粒细胞和淋巴细胞浸润以及IL-4和IL-5水平显著降低，这进一步说明了 TSLPR在DC引发的过敏性疾病中所起的作用。这种结果还支持阻断DC上的TSLPR将有助于控制气道的炎症(Liyun Shi等人，如上)。
[0019]有不断增加的大量实验表明了 TSLP / TSLPR在各种生理过程和病理过程中的作用。TSLP的生理作用包括调节免疫系统，尤其是刺激B细胞和T细胞增殖、发育和成熟。TSLP在过敏性哮喘的病理生物学中起关键作用，并且局部抗体介导的TSLP受体阻断发挥了减轻过敏性疾病的功能。因此据信TSLP和TSLP受体之间的相互作用在如下的许多生理疾病过程中是重要的:过敏性炎症、具有特应性皮炎或特应性湿疹的患者的皮肤损害以及哮喘。
[0020]发明概述
[0021]具体方面提供了用于治疗炎症的方法，所述方法包括给需要其的受治疗者施用治疗有效量的电动改变的含水流体，所述电动改变的含水流体适合于将细胞膜的结构或功能改变至足以提供对受治疗者的细胞中的细胞内信号转导的调节，其中炎症或至少一种炎症症状被治疗或减轻。在某些方面，电动改变的含水流体的改变包括将该流体暴露于流体动力诱导的、局部化的电动效应。在某些实施方式中，暴露于局部化的电动效应包括暴露于电压脉冲和电流脉冲的至少一个。在具体的方面，将流体暴露于流体动力诱导的、局部化的电动效应包括将该流体暴露于用来产生该流体的装置的诱导电动效应的结构部件。
[0022]在该方法的某些方面，所述至少一种炎症症状涉及选自由以下组成的组的至少一种病症:过敏、哮喘、湿疹、类风湿性关节炎、发热、烧伤或其他创伤、微生物感染、接触刺激性皮炎(contact irritant dermatitis)、脂溢性皮炎、昆虫咬伤、昆虫螫伤、晒伤、蕈样肉芽肿病(mycosis fungoides)、坏疽性脓皮症、毒常春藤(poison ivy)、有毒漆树(poisonsumac)、红斑痤疮、眼睛炎症、青光眼、干眼、红眼、眼红斑痤疮、睑缘炎、睑板腺炎、角膜炎、结膜充血(conjunctival hyperemia)、眼睑充血(eyelid hyperemia)等、移植物抗宿主病(graft-versus-host disease)、慢性支气管炎、特应性皮炎、荨麻疫、过敏性鼻炎、过敏性结膜炎、多发性硬化病、腱炎、脑中的慢性炎症、气道炎性疾病、慢性炎性肠病、春季结膜炎(vernal conjunctivitis)、嗜酸性粒细胞肉芽肿(eosinophilic granuloma)、银屑病、胺毒性休克、溃疡性结肠炎、心肌再灌注损伤和脑再灌注损伤、慢性肾小球肾炎、动脉粥样硬化(athlesclerosis)、内毒素性休克和成人型呼吸窘迫综合征。在具体方面，所述至少一种炎症症状选自由以下组成的组:痒(itching)、水肿、疼痛、瘙痒(pruritus)、温度增加、功能损失、发红、鳞屑(scaling)、起疱(blistering)、色素沉着过度和色素沉着不足。
[0023]在该方法的某些方面，电动改变的含水流体包含电动产生的富含氧的水。
[0024]在该方法的某些方面，电动改变的含水流体调节施用部位的一氧化氮的局部水平或细胞水平。在【具体实施方式】中，电动改变的含水流体促进选自由以下组成的组的至少一种细胞因子在施用部位局部降低=IL-1 β、IL-8、TNF-a和TNF-β。
[0025]该方法的某些方面还包括通过用另一种抗炎剂同时或辅助治疗受治疗者来协同或非协同性地抑制或减少炎症。在具体方面，所述其他抗炎剂包括类固醇(例如，包括糖皮质激素类固醇)。在某些方面，类固醇为糖皮质激素类固醇(例如，布地奈德或其活性衍生物)。
[0026 ]本发明的某些方面还包括组合治疗，其中将至少一种另外的治疗剂施用给患者。在具体方面，所述至少一种另外的治疗剂选自由以下组成的组:短效β2_激动剂、长效β2_激动剂、抗胆碱能药、皮质类固醇、系统性的皮质类固醇、肥大细胞稳定剂、白三烯改性剂、甲基黄嘌呤、β2_激动剂、沙丁胺醇、左旋沙丁胺醇(levalbuterol)、吡布特罗、阿福特罗(artformoterol)、福莫特罗、沙美特罗；抗胆碱能药，包括异丙托铵和噻托铵(tiotropium);皮质类固醇，包括倍氯米松、布地奈德、氟尼缩松、氟替卡松、莫米松、曲安西龙、甲基泼尼松龙(methyprednisolone)、泼尼松龙、泼尼松；白三烯改性剂，包括孟鲁司特、扎鲁司特和齐留通(zileuton);肥大细胞稳定剂,包括色甘酸钠(cromolyn)和奈多罗米；甲基黄嘌呤，包括茶碱；组合药物，包括异丙托铵和沙丁胺醇、氟替卡松和沙美特罗、布地奈德和福莫特罗；抗组胺剂，包括羟嗪、苯海拉明、氯雷他定、西替利嗪、和氢化可的松；免疫系统调节药物，包括他克莫司和吡美莫司；环孢菌素；硫唑嘌呤；麦考酚酸酯；以及它们的组合。在某些实施方式中，所述至少一种另外的治疗剂为TSLP和/或TSLPR拮抗剂。在具体方面，TSLP和/或TSLPR拮抗剂选自由以下组成的组:对TSLP和TSLP受体特异性的中和抗体、可溶性TSLP受体分子和TSLP受体融合蛋白，包括TSLPR免疫球蛋白Fe分子或编码多于一种受体链的组分的多肽。
[0027]在该方法的某些方面，改变细胞膜的结构或功能包括改变膜相关蛋白的构象、配体结合活性或催化活性。在具体方面，膜相关蛋白包括选自由以下组成的组的至少一种:受体、跨膜受体、离子通道蛋白、细胞内附着蛋白、细胞黏着蛋白、整联蛋白等。在某些实施方式中，跨膜受体包括G蛋白偶联受体(GPCR)，并且在某些实施方式中，包括与G蛋白的α亚基(例如，选自由以下组成的组的至少一种=GasWapGat^PGa12)相互作用的G蛋白偶联受体(GPCR)。在【具体实施方式】中，所述至少一种G蛋白的a亚基是Ga,。
[0028]在该方法的某些方面，改变细胞膜的结构或功能包括改变膜的电导率或膜电位。在具体的实施方式中，调节细胞膜电导率包括调节全细胞电导(例如，包括调节全细胞电导的至少一种电压依赖性贡献(voltage-depedent contribution))。
[0029]该方法的某些方面包括细胞内信号转导的调节，细胞内信号转导的调节包括钙依赖性细胞通信途径或系统的调节(例如包括磷脂酶C活性的调节或包括腺苷酸环化酶(AC)活性的调节)。
[0030]在该方法的某些方面，细胞内信号转导的调节包括与选自由以下组成的组的至少一种病症或症状有关的细胞内信号转导的调节:过敏、哮喘、湿疹、类风湿性关节炎、发热、烧伤或其他创伤、微生物感染、接触刺激性皮炎、脂溢性皮炎、昆虫咬伤、昆虫螫伤、晒伤、蕈样肉芽肿病、坏疽性脓皮症、毒常春藤、有毒漆树、红斑痤疮、眼睛炎症、青光眼、干眼、红眼、眼红斑痤疮、睑缘炎、睑板腺炎、角膜炎、结膜充血、眼睑充血等、移植物抗宿主病、慢性支气管炎、特应性皮炎、荨 麻疹、过敏性鼻炎、过敏性结膜炎、多发性硬化病、腱炎、脑中的慢性炎症、气道炎性疾病、慢性炎性肠病、春季结膜炎、嗜酸性粒细胞肉芽肿、银屑病、脓毒性休克、溃疡性结肠炎、心肌再灌注损伤和脑再灌注损伤、慢性肾小球肾炎、动脉粥样硬化、内毒素性休克和成人型呼吸窘迫综合征。
[0031]该方法的某些方面包括将电动产生的流体施用给细胞网络或细胞层，并且还包括其中细胞间连接(例如包括选自由以下组成的组中的至少一种:紧密连接、间隙连接、黏着带和桥粒)的调节。在某些方面中，细胞网络或细胞层包括选自由肺上皮细胞、支气管上皮细胞和肠上皮细胞所组成的组中的至少一种。
[0032]在该方法的某些方面，电动改变的含水流体是充氧的，并且其中在该流体中的氧的存在量为大气压下至少8ppm、至少15, ppm、至少25ppm、至少30ppm、至少40ppm、至少50ppm或至少60ppm的氧。
[0033]在某些实施方式中，电动改变的含水流体包含溶剂化电子和电动改性或带电的氧类的至少一种。在具体方面，其中所述溶剂化电子或电动改性或带电的氧类的存在量为至少0.01ppm、至少0.lppm、至少0.5ppm、至少lppm、至少3ppm、至少5ppm、至少7ppm、至少lOppm、至少15ppm或至少20ppm。在某些方面，电动改变的充氧的含水流体包含通过分子氧稳定的溶剂化电子。
[0034]在该方法的某些方面，将细胞膜的结构或功能改变至足以提供对细胞内信号转导的调节的能力在封闭的气密容器中持续了至少两个月、至少三个月、至少四个月、至少五个月、至少6个月、至少12个月或更长的时间。
[0035]另外的方面提供治疗组合物，所述治疗组合物包含电动改变的充氧的含水流体或溶液(并且任选与至少一种其他治疗剂组合)，其中所述流体或溶液中的氧的存在量为至少8ppm、至少15ppm、至少25ppm、至少30ppm、至少40ppm、至少50ppm或至少60ppm的氧。在某些实施方式中，电动改变的充氧的含水流体或溶液包含电动改性的或带电的氧类。在具体方面，电动改性的或带电的氧类的存在量为至少0.5ppm、至少lppm、至少3ppm、至少5ppm、至少7ppm、至少lOppm、至少15ppm或至少20ppm。在某些实施方式中，电动改变的充氧的含水流体或溶液包含通过分子氧稳定的溶剂化电子。在具体方面，溶剂化电子的存在量为至少0.01ppm、至少0.lppm、至少0.5ppm、至少lppm、至少3ppm、至少5ppm、至少7ppm、至少lOppm、至少15ppm或至少20ppm。
[0036]其他实施方式涉及包含电动产生的富含气体的流体的治疗组合物，其中所述流体含有在大气压下水平为大于约百万分之三十的扩散的或溶解的气体，并且其中所述富含气体的流体含有溶剂化电子。在这些实施方式的某些中，所述富含气体的流体包括电动产生的富含氧的水。
[0037]具体方面提供包含电动改变的充氧的含水流体或溶液的组合物，其中所述流体或溶液中的氧的存在量为至少25ppm、至少30ppm、至少40ppm、至少50ppm或至少60ppm的氧。在【具体实施方式】中，电动改变的充氧的含水流体或溶液包含电动改性的或带电的氧类。在某些方面，电动改性的或带电的氧类的存在量为至少0.5ppm、至少lppm、至少3ppm、至少5ppm、至少7ppm、至少lOppm、至少15ppm或至少20ppm。在【具体实施方式】中，电动改变的充氧的含水流体或溶液包含通过分子氧稳定的溶剂化电子。在某些方面，溶剂化电子的存在量为至少0.01ppm、至少0.lppm、至少0.5ppm、至少lppm、至少3ppm、至少5ppm、至少7ppm、至少lOppm、至少15ppm或至少20ppm。 [0038]在某些方面中，充氧的含水流体或溶液包含通过分子氧稳定的溶剂化电子。在【具体实施方式】中，溶剂化电子的存在量为至少0.01ppm、至少0.lppm、至少0.5ppm、至少lppm、至少3ppm、至少5ppm、至少7ppm、至少lOppm、至少15ppm或至少20ppm。
[0039]附图简述
[0040]图1是现有技术混合装置的局部横截面、局部框图。
[0041]图2是混合装置的示例性实施方式的框图。
[0042]图3是将第一材料递送到图2的混合装置的示例性系统的图解。
[0043]图4是图2的混合装置顶端部分的不完全局部横截面视图。
[0044]图5是图2的混合装置第一侧面部分的不完全横截面视图。
[0045]图6是图2的混合装置第二侧面部分的不完全局部横截面视图。
[0046]图7是位于图5的第一侧面部分与图6的第二侧面部分之间的图2的混合装置的侧面部分的不完全横截面视图。
[0047]图8是图2的混合装置的转子和定子的透视图。
[0048]图9是图2的混合装置的第一室内部的透视图。
[0049]图10是包括泵410的替代实施方式的图2的混合装置的第一室内部的不完全横截面视图。
[0050]图11是图2的混合装置的第二室内部的透视图。
[0051]图12是混合装置的替代实施方式的侧面部分的不完全横截面视图。
[0052]图13是供混合装置的替代实施方式使用的壳体的中部替代实施方式的透视图。[0053]图14是供混合装置的替代实施方式使用的轴承壳体的替代实施方式的不完全横截面视图。
[0054]图15是通过垂直于旋转轴的平面而取得的图2的混合装置的混合室的横截面视图，描绘了当转子的穿孔接近(但不对齐)定子的孔隙时由穴泡引起的旋转流类型。
[0055]图16是通过垂直于旋转轴的平面而取得的图2的混合装置的混合室的横截面视图，描绘了当转子的穿孔对齐定子的孔隙时由穴泡引起的旋转流类型。
[0056]图17是通过垂直于旋转轴的平面而取得的图2的混合装置的混合室的横截面视图，描绘了当之前对齐定子的孔隙的转子的穿孔不再与其对齐时由穴泡引起的旋转流类型。
[0057]图18是转子的替代实施方式的侧视图。
[0058]图19是通过垂直于转子的旋转轴的平面而取得的放大的不完全横截面视图，描绘了在转子中形成的穿孔和在定 子中形成的穿孔的交替构型。
[0059]图20是通过经过并沿转子的旋转轴延伸的平面而取得的放大的不完全横截面视图，描绘了在转子中形成的穿孔和在定子中形成的穿孔的构型。
[0060]图21是通过经过并沿转子的旋转轴延伸的平面而取得的放大的不完全横截面视图，描绘了在转子中形成的穿孔和在定子中形成的穿孔的替代偏移构型。
[0061]图22是可用来构建转子的穿孔和/或定子的孔隙的形状的图解。
[0062]图23是可用来构建转子的穿孔和/或定子的孔隙的形状的图解。
[0063]图24是可用来构建转子的穿孔和/或定子的孔隙的形状的图解。
[0064]图25是可用来构建转子的穿孔和/或定子的孔隙的形状的图解。
[0065]图26是在表面附近形成的双电层(“EDL”)的图解。
[0066]图27是混合室的内部的模型的透视图。
[0067]图28是图27的模型的横截面视图。
[0068]图29是实验装置的图解。
[0069]图30图解了用图2的混合装置中的氧处理并储存于各自在65度华氏温度封盖的500ml薄壁塑料瓶和1000ml玻璃瓶中的水中的溶解氧水平。
[0070]图31图解了用图2的混合装置中的氧处理并储存于均在39度华氏温度制冷的500ml薄壁塑料瓶和1000ml玻璃瓶中的水中的溶解氧水平。
[0071]图32图解了用图2的混合装置中的氧处理的500ml饮料流体的溶解氧保留。
[0072]图33图解了用图2的混合装置中的氧处理的500ml布劳恩(braun)平衡盐溶液的溶解氧保留。
[0073]图34图解了另外一个实验，其中通过用图2的混合装置中的氮气处理水，图2的混合装置被用来排除水中氧。
[0074]图35图解了在标准的温度和压力下通过图2的混合装置排除水中氧。
[0075]图36是示例性纳米笼(nanocage)的图解。
[0076]图37A和37B图解了富含氧的流体的瑞利散射效应；
[0077]图38图解了在富含气体的流体和去离子对照流体的存在下促有丝分裂测定的细胞因子概况。
[0078]图39图解了在各种溶解氧饱和率的假单胞菌属(Pseudomonas)细菌的生长速率的差异。
[0079]图40A和40B图解了使用富含氧的细胞培养基和非富含气体的培养基的创伤体外愈合。
[0080]图41A到41F示出真皮和表皮体内创伤愈合的组织学横切片。
[0081]图42图解了用来检测酸性粘多糖例如透明质酸的处理和对照的愈合创伤中Hale染色的表达；
[0082]图43图解了用来检测处理和对照的愈合创伤中血管发生的血管假性血友病因子(Willebrand's Factor)染色的表达；
[0083]图44图解了用来检测处理和对照的愈合创伤中弹性蛋白的Luna染色的检测；
[0084]图45图解了对于处理和对照的愈合创伤的每个视野的肥大细胞的数目。
[0085]图46图解了在使用本发明的富含气体的培养基和对照培养基的角膜成纤维细胞测定中在分开的时间点的死细胞的百分比。
[0086]图47图解了在聚合物袋中本发明的富含气体的流体的储存期限。
[0087]图48图解了在加压罐充氧的流体⑴、本发明的富含气体的流体⑵或对照去离子的流体(3)的存在下使脾细胞与MOG接触的结果。
[0088]图49-58示出细胞因子的全血样品评估结果。
[0089]图59-68示出支气管肺泡灌洗流体(BAL)样品评估的对应的细胞因子结果。
[0090]图69-75示出缓激肽B2膜受体被固定到氨丙基硅烷(aminopropylsilane) (APS)生物传感器上的研究。在图69中指明了样品板设置，并且根据如图71中所指明的样品设置对缓激肽与固定化受体的结合进行了评定。缓激肽结合的结果示于图72中。根据在图73中所指明的设置进一步滴定与受体结合的缓激肽。如图74所表明的，与B2受体结合的缓激肽是浓度依赖性的，并且在本发明公开的专利的富含气体的盐水流体中与生理盐水相比提高了结合亲和力。与B2受体结合的缓激肽的稳定示于图75中。
[0091]图76-83示出显示本文公开的【具体实施方式】影响调节性T细胞的能力的数据。该研究涉及辐射抗原呈递细胞并引入抗原和T细胞。
[0092]图84示出本发明的电动产生的流体减少了鲑鱼降钙素和动物模型的血清摄入。结果与紧密连接的增强是一致的。
[0093]图85-89示出在肺组织中的紧密连接相关蛋白的表达水平，所述肺组织是来自用于产生图84的数据的动物模型。
[0094]图90-94示出从暴露于RDC1676-01 (通过具有添加的额外的氧的本专利装置处理的无菌盐水；本发明公开的富含气体的电动产生的流体(Rev))的人包皮角质形成细胞获得的数据，显示出NOSl和N0S3、以及Nostrin、N0S3的上调。
[0095]图95和96示出支持局部化电动效应(电压/电流)的数据，所述电动效应发生在包括绝缘的转子和定子部件的混合装置中以允许在电动流体产生的过程中检测电压/电流效应。
[0096]图97A-C示出为进一步表征本发明的电动产生的流体的基本性质而进行的核磁共振(NMR)研究的结果。电动产生的流体增加了报道分子海藻糖溶质的13C-NMR线宽。
[0097]图98和99示出为进一步表征本发明的电动产生的流体的基本性质而进行的伏安研究(即方波伏安(图98)和溶出极谱(图99))的结果。在-0.14V、-0.47V、-1.02V和-1.36V观察到对电动产生的流体唯一的方波伏安峰差异(相比于对照)。对于电动产生的Revera和Solas流体在-0.9伏特看到明显的极谱峰(polaragraphic peak),并且非电动产生的空白和盐水对照流体的波谱在-0.19和-0.3伏特示出特征峰，所述特征峰在电动产生的流体的波谱中是不存在的。
[0098]图100-106示出评定电动产生的流体的测试对上皮细胞膜极性和离子通道活性的影响的膜片钳技术的结果。结果表明本发明的电动产生的流体影响全细胞电导的电压依赖性贡献。
[0099]图107A-D和108A-D示出数据，所述数据表明本发明的电动产生的流体(例如RDC1676-00、RDC1676-01、RDC1676-02和RDC1676-03)当单独或作为硫酸沙丁胺醇的稀释剂在雄性豚鼠中施用时保护免受醋甲胆碱诱导的支气管收缩。
[0100]图109-114示出为评定本发明的电动产生的流体在Brown Norway大鼠卵白蛋白敏化模型中的气道抗炎特性而进行的布地奈德实验的结果。本发明的电动产生的流体降低了嗜酸性粒细胞计数，示出在降低嗜酸性粒细胞计数上与布地奈德的强协同效应，降低Penh值，提高潮气量，降低Eotaxin (嗜酸性粒细胞趋化因子)的血液水平，在用本发明的电动产生的流体(例如Rev60)单独或连同布地奈德一起处理所产生的激发后6小时显著增强两种主要的关键抗炎细胞因子ILlO和干扰素Y的血液水平，并且降低了 Rantes的系统水平。数据示出存在布地奈德750ug / kg与本发明的电动产生的流体(例如Rev60)的实质的协同效应。
[0101]图115示出本发明的电动产生的流体(例如Revera60和Solas)分别减少支气管上皮细胞(BEC)中的DEP诱导 的TSLP受体表达大约90%和50%，而生理盐水(NS)仅有边际效应。
[0102]图116示出本发明的电动产生的流体(例如Revera60和Solas)分别抑制支气管上皮细胞中的DEP诱导的细胞表面结合的MMP9水平大约80%和70%，而生理盐水(NS)仅有边际效应。
[0103]发明详述
[0104]本文所公开的某些实施方式涉及提供通过以下来治疗至少一种炎症症状的组合物和方法:使部位与包含新的电动产生的流体的治疗组合物接触或向受治疗者施用包含新的电动产生的流体的治疗组合物。在某些【具体实施方式】中，电动产生的流体包括富含气体的电动产生的流体，该流体包括富含氧的水。
[0105]电动产牛的流体:
[0106]如本文所用的“电动产生的流体”是指出于本文工作实施例的目的通过本文详细描述的示例性混合装置(还参见US200802190088和W02008 / 052143，通过引用将二者整体并入本文)而产生的 申请人:发明的电动产生的流体。如本文公开和呈现的资料所证明，电动流体表示相对于现有技术非电动流体，包括相对于现有技术充氧的非电动流体(例如压力罐充氧的流体及类似物)的新颖的且从根本上不同的流体。如在本文各方面中所公开的那样，电动产生的流体具有独特且新颖的物理和生物特性，包括但不限于以下:
[0107]在具体的方面，电动产生的流体是指在流体动力诱导的、局部化(例如就全部流体体积而言是非均一的)的电动效应(例如电压/电流的脉冲)例如本文所述的装置部件-局部化效应的存在下产生的流体。在具体的方面，所述流体动力诱导的、局部化的电动效应与本文公开并讨论的表面相关的双层和/或流动电流效应联合。
[0108]在具体的方面，电动改变的含水流体适合于调节其中溶解的报告溶质(例如海藻糖(Trehelose))的13C-NMR线宽。NMR线宽效应是在测量例如在具体工作实施例中如本文所述的测试流体中的溶质“翻滚”的间接方法中。
[0109]在具体的方面，电动改变的含水流体的特征为以下至少一种:在-0.14V、-0.47￥、-1.02￥和-1.36￥的任何一个的与众不同的方波伏安峰差异；在_0.9伏特的极谱峰；以及在-0.19和-0.3伏特不存在极谱峰，在-0.19和-0.3伏特的极谱峰是具体工作实施例中本文所公开的电动产生的流体所独有的。
[0110]在具体的方面，电动改变的含水流体适合于改变细胞膜电导率(例如在本文公开的膜片钳研究中测量的全细胞电导的电压依赖性贡献)。
[0111]在具体的方面，电动改变的含水流体是充氧的，其中在该流体中的氧的存在量为大气压下至少15, ppm、至少25ppm、至少30ppm、至少40ppm、至少50ppm或至少60ppm的溶解氧。在具体的方面，电动改变的含水流体具有小于15ppm、小于IOppm的大气压下的溶解氧或大致环境氧水平。
[0112]在具体的方面，电动改变的含水流体是充氧的，其中在该流体中的氧的存在量在大约8ppm与大约15ppm之间，并且在这种情况中有时在本文称作“Solas”。
[0113]在具体的方面，电动改变的含水流体包括溶剂化电子(例如，通过分子氧稳定)和电动改性和/或带电的氧类的至少一种，并且其中在某些实施方式中所述溶剂化电子和/或电动改性或带电的氧类的存在量为至少0.01ppm、至少0.lppm、至少0.5ppm、至少lppm、至少3ppm、至少5ppm、至少7ppm、至少lOppm、至少15ppm或至少20ppm。
[0114]在具体的方面，电动改变的含水流体适合于改变细胞膜的结构或功能(例如改变膜相关蛋白的构象、配体结合活性或催化活性)至足以提供对细胞内信号转导的调节，其中在具体的方面，所述膜相关蛋白包括选自由以下组成的组的至少一种:受体、跨膜受体(例如G蛋白偶联受体(GPCR) ,TSLP受体、β 2肾上腺素能受体、缓激肽受体等)、离子通道蛋白、细胞内附着蛋白、细胞黏着蛋白和整联蛋白。在某些方面，发挥效应的G蛋白偶联受体(GPCR)与G蛋白的α亚基(例如G a s、G a 1、G a (j和G α 12)相互作用。
[0115]在具体的方面，电动改变的含水流体适合于调节细胞内信号转导，包括钙依赖性细胞通信途径或系统的调节(例如磷脂酶C活性的调节或腺苷酸环化酶(AC)活性的调节)O
[0116]在具体的方面，电动改变的含水流体的特征为在本文工作实施例和其他地方中描述的各种生物活性(例如细胞因子、受体、酶和其他蛋白质和细胞内信号传导途径的调控)。
[0117]在具体的方面，电动改变的含水流体显示出与沙丁胺醇和布地奈德的协同效应，如在本文工作实施例中所示。
[0118]在具体的方面，电动改变的含水流体减少在支气管上皮细胞(BEC)中DEP诱导的TSLP受体的表达,如本文工作实施例中所示。 [0119]在具体的方面，电动改变的含水流体抑制在支气管上皮细胞(BEC)中DEP诱导的细胞表面结合的ΜΜΡ9水平，如本文工作实施例中所示。
[0120]在具体的方面，电动改变的含水流体的生物效应被白喉毒素抑制，表明β阻断、GPCR阻断和钙离子阻断影响电动改变的含水流体的活性(例如关于调节性T细胞的功能)，如在本文工作实施例中所示。
[0121]在具体的方面，电动改变的含水流体的物理和生物效应(例如改变细胞膜的结构或功能至足以提供对细胞内信号转导的调节的能力)在一个封闭的容器(例如，封闭的气密容器)中持续了至少两个月、至少三个月、至少四个月、至少五个月、至少六个月或更长时间。
[0122]因此，其他方面提供所述电动产生的溶液和制备电动改变的充氧的含水流体或溶液的方法，所述方法包括:在相对运动的两个间隔的表面间提供流体材料流，并且在所述两个间隔的表面间界定混合体积，其中流动的流体材料在混合体积内和穿过混合体积的单次通过的滞留时间为大于0.06秒或大于0.1秒；和在适于将至少20ppm、至少25ppm、至少30、至少40、至少50或至少60ppm的氧(O2)溶解在材料中并电动改变流体或溶液的条件下将氧引入混合体积内的流动的流体材料。在某些方面，在小于100毫秒、小于200毫秒、小于300毫秒或小于400毫秒内将氧注入材料中。在【具体实施方式】中，表面积与体积比为至少
12、至少20、至少30、至少40或至少50。
[0123]其他方面提供制备电动改变的充氧的含水流体或溶液的方法，所述方法包括:在两个间隔的表面间提供流体材料流，所述两个间隔的表面在其间界定了混合体积；在适于在小于100毫秒、小于200毫秒、小于300毫秒或小于400毫秒内将至少20ppm、至少25ppm、至少30、至少40、至少50或至少60ppm的氧扩散到材料中的条件下将氧引入在混合体积中的流动的材料中。在某些方面，在混合体积内的所述流动的材料的滞留时间为大于0.06秒或大于0.1秒。在【具体实施方式】中，表面积与体积比为至少12、至少20、至少30、至少40或至少50。
[0124]另外的实施方式提供制备电动改变的充氧的含水流体或溶液的方法，所述方法包括使用用于通过混合第一材料和第二材料来产生输出混合物的混合装置，所述装置包括:第一室，其被构造为接纳来自第一材料来源的第一材料；定子；具有旋转轴的转子，所述转子被设置在定子内并且被构造为环绕其中的旋转轴旋转，所述转子和定子的至少一个具有多个穿孔；在转子和定子之间界定的混合室，所述混合室与第一室流体联通并且被构造为接纳来自第一室的第一材料，并且所述第二材料经由转子和定子中的一个中所形成的多个穿孔供给混合室；第二室，其与混合室流体联通并且被构造为接纳来自混合室的输出材料；以及安装在第一室内的第一内部泵，所述第一内部泵被构造为将第一材料从第一室抽吸到混合室中。在某些方面，第一内部泵被构造为在第一材料进入混合室之前赋予第一材料圆周速度。
[0125]其他实施方式提供制备电动改变的充氧的含水流体或溶液的方法，所述方法包括使用用于通过混合第一材料和第二材料来产生输出混合物的混合装置，所述装置包括:定子；具有旋转轴的转子，所述转子被设置在定子内并且被构造为环绕其中的旋转轴旋转；在转子和定子之间界定的混合室，所述混合室具有:开放的第一末端，第一材料通过该开放的第一末端进入混合室；和开放的第二末端，输出材料通过该开放的第二末端离开混合室，第二材料通过转子和定子的至少一个进入混合室；第一室，其与所述混合室的开放的第一末端的至少大部分联通；以及第二室，其与所述混合室的开放的第二末端联通。
[0126] 其他方面提供根据上述方法的任何一种制备的电动改变的充氧的含水流体或溶液。
[0127]
[0128]炎症可以作为对外来材料尤其是微生物来源入侵受治疗者的防御性反应产生。此外，机械创伤、毒素和瘤形成可以诱导炎性反应。白细胞的积聚和随后的激活是大部分形式的炎症发病的中心事件。炎症的缺乏可能危害宿主，使其对恶化的感染或创伤敏感。诸如延长的炎性反应的过量炎症可能导致炎性疾病，所述炎性疾病包括但不限于:糖尿病、动脉硬化、白内障、慢性皮肤病、再灌注损伤和癌症；感染后综合征，例如感染性脑膜炎、风湿热；以及风湿性疾病，如系统性红斑狼疮和类风湿性关节炎。这些疾病每年影响着世界范围内数百万的人们，并且引起死亡率和发病率增加。这些不同疾病过程中炎性反应的共性使得其能调节预防或治疗人类疾病的主要元件。
[0129]促炎性细胞因子的过量产生参与了大量炎性疾病和自身免疫疾病的发病。TNFa分泌是炎性级联引发的主要事件(Brennan F.Μ.,等人.Lancet, 1989, 2:244-7 ；HaworthC，等人Eur.J.1mmunol.1991,21:2575-2579)并且其直接促进这些疾病的引发和维持。其他细胞因子也发挥作用，包括白细胞介素I β (IL-Ιβ)、IL-6、IL-8、IL-12、一氧化氮(NO)、IFN-Y、粒细胞集落刺激因子(G-CSF)、粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)以及IL-10。这些细胞因子的某些(例如，IL-8)可以增加或加重炎性反应，而其他(例如，IL-10)可以降低或减轻炎性反应。[0130]免疫系统的细胞尤其是巨噬细胞会对激活性刺激物反应而分泌这些细胞因子中的一些。细胞因子的靶细胞可以在任何身体隔室局部化并且可经由长距离机制作用或可以作用于邻近的细胞。因此，细胞因子可以以局部的或全身的方式调控炎症。
[0131]炎症相关的病症或疾病
[0132]本文的某些实施方式涉及通过预防或减轻与某些病症或疾病相关的至少一种炎症症状治疗受治疗者的治疗组合物和方法。例如，本文公开的治疗组合物和/或方法可能对于治疗或预防选自由以下组成的组的一种或多种病症或疾病是有用的:过敏、哮喘、湿疹、类风湿性关节炎、发热、烧伤或其他创伤、感染(病毒、细菌、其他微生物)、接触刺激性皮炎、脂溢性皮炎、昆虫咬伤、昆虫螫伤、晒伤、蕈样肉芽肿病、坏疽性脓皮症、毒常春藤、有毒漆树、红斑痤疮、眼睛炎症、青光眼、干眼、红眼、眼红斑痤疮、睑缘炎、睑板腺炎、角膜炎、结膜充血、眼睑充血等、移植物抗宿主病、慢性支气管炎、特应性皮炎、荨麻疹、过敏性鼻炎、过敏性结膜炎、多发性硬化病、腱炎、脑中的慢性炎症、气道炎性疾病、慢性炎性肠病(克罗恩病(Crohn’s disease))、春季结膜炎、嗜酸粒细胞肉芽肿、银屑病、脓毒性休克、溃疡性结肠炎、心肌再灌注损伤和脑再灌注损伤、冠状动脉粥样硬化(coronary arteryathesclerosis)、心脏病、慢性肾小球肾炎、内毒素性休克和成人型呼吸窘迫综合征。
[0133]炎性皮肤病症是其中炎性细胞(例如，多形核中性粒细胞和淋巴细胞)在没有明显的或已知的感染病因的条件下浸润皮肤的那些皮肤病症。炎性皮肤病症的症状一般包括:红斑(发红)、水肿(肿胀)、疼痛、瘙痒、表面温度增加和功能损失。如本文所用的炎性皮肤病症包括但不限于:湿疹和相关病症、昆虫咬伤、红皮病、蕈样肉芽肿病和相关病症、坏疽性脓皮症、银屑病、多形性红斑、红斑痤疮、甲癣、毒常春藤、有毒漆树以及痤疮和相关病症。这些症状或疾病的某些可能导致痒、肿胀、疼痛、瘙痒、表面温度增加、功能损失、发红、鳞屑、起疱、色素沉着过度或色素沉着不足以及其他炎症症状。[0134]已经用类固醇；氨甲喋呤；免疫抑制药物，包括环磷酰胺、环孢菌素，硫唑嘌呤和来氟米特；非类固醇类抗炎剂，如阿司匹林、对乙酰氨基酚；和C0X-2抑制剂；金剂和抗疟疾治疗来治疗与炎症相关的一些病症或疾病。这些药物具有多种缺点和不利反应，包括注射部位反应、皮疹、上呼吸道感染、自身免疫病患和对感染的敏感性增加。此外，许多抗炎性药物需要静脉内(IV)或皮下(SC)施用，这与较方便和依从性较好的口服或局部皮肤途径相反。因此，仍然需要开发用于炎症相关病症和疾病的新药物和治疗方法。
[0135]组合治疗:
[0136]其他方面提供的本文所公开的本发明方法还包括组合治疗，其中将至少一种另外的治疗剂施用给患者。在某些方面，所述至少一种另外的治疗剂选自由下列组成的组:短效β2_激动剂、长效β2_激动剂、抗胆碱能药、皮质类固醇、系统性的皮质类固醇、肥大细胞稳定剂、白三烯改性剂、甲基黄嘌呤以及它们的组合。在【具体实施方式】中，所述至少一种另外的治疗剂选自由下列组成的组:由β 2_激动剂组成的支气管扩张剂，β 2-激动剂包括沙丁胺醇、左旋沙丁胺醇、吡布特罗、阿福特罗、福莫特罗、沙美特罗；和抗胆碱能药，例如异丙托铵和噻托铵；皮质类固醇，包括倍氯米松、布地奈德、氟尼缩松、氟替卡松、莫米松、曲安西龙、甲基泼尼松龙、泼尼松龙、泼尼松；白三烯改性剂，包括孟鲁司特、扎鲁司特和齐留通；肥大细胞稳定剂，包括色甘酸钠和奈多罗米；甲基黄嘌呤，包括茶碱；组合药物，包括异丙托铵和沙丁胺醇、氟替卡松和沙美特罗、布地奈德和福莫特罗；抗组胺剂，包括羟嗪、苯海拉明、氯雷他定、西替利嗪、和氢化可的松；免疫系统调节药物，包括他克莫司和吡美莫司；环孢菌素；硫唑嘌呤；麦考酚酸酯；以及它们的组合。
[0137]其他方面提供的本文所公开的本发明方法还包括与下列的组合治疗:TSLP和/或TSLPR拮抗剂(例如，对TSLP和TSLP受体特异性的中和抗体、可溶性TSLP受体分子和TSLP受体融合蛋白，如TSLPR免疫球蛋白Fe分子或编码多于一种受体链的组分从而模拟生理受体异源二聚体 或更高级的寡聚物的多肽。如果受体包含多于一种的多肽链，则可以采用单链融合体)。
[0138]电动产生的富含气体的流体和溶液的抗炎活性
[0139]根据本发明的某些方面，本文所公开的富含气体的流体和/或溶液具有抗炎特性和作用，并且可用作治疗受炎症相关疾病或病患折磨的受治疗者的抗炎剂。图38显示来自健康血液供体的经过刺激的淋巴细胞的细胞因子特征的实验结果。如图38中可以看到的，本发明的富含氧的流体(水)引起特定细胞因子的下调，尤其是IL-6、IL-8和IL-1 β。
[0140]促炎性细胞因子的产生增加参与了大量炎性疾病和自身免疫疾病的发病。TNFa分泌是炎性级联引发的主要事件(Brennan F.Μ.,等人.Lancet, 1989, 2:244-7 ；HaworthC，等人Eur.J.1mmunol.1991,21:2575-2579)并且其直接促进炎性疾病和自身免疫疾病的引发和维持。其他促炎性细胞因子也发挥有作用，包括白细胞介素I β (IL-Ιβ)、IL-6、IL-8、IL-12、一氧化氮、IFN-y和GM-CSF，而诸如IL-10的抗炎性细胞因子则可以降低疾病。免疫系统的细胞尤其是巨噬细胞会对激活性刺激物反应而分泌这些细胞因子中的许多。
[0141]炎性过程中涉及了多种细胞类型。单核细胞、巨噬细胞和其他免疫细胞的TNFa过量产生是大量疾病发病的关键因素。巨噬细胞和T细胞在免疫反应的引发和维持中尤其发挥重要的作用。一旦被病理的或免疫原性刺激物激活，巨噬细胞便通过释放包括下列的大量细胞因子而反应:TNF- a、IL-1 β、IL-8, IL-12、一氧化氮(NO)、IL-6, GM-CSF, G-CSF,M-CSF以及其他。T细胞释放IL-2、IL-4、INF- Y和其他炎性细胞因子。这些细胞因子激活其他的免疫细胞，并且一些也可以作为独立的细胞毒性剂起作用。巨噬细胞和T细胞来源的炎性介质的过量释放可特定地导致正常细胞和周围组织损伤。
[0142]促炎性细胞因子参与了 HIV-AIDS和其他病毒感染，包括巨细胞病毒感染、流感病毒感染和孢疹病毒家族感染。TNFa增强人巨细胞病毒的主要即时早期增强子/启动子的基本活性，并且在前期单核细胞(premonocytic cell)中的潜伏性HCMV感染再激活中起作用(Prosch S.，等人 Virologyl995，208:197-206)。
[0143]此外，大量炎性细胞因子促进患脓毒症或内毒素性休克的患者的发病率。例如，TNFa和IL-Ιβ在脓毒症、脓毒性休克和内毒素性休克中具有已经充分确定的重要作用。这些细胞因子的水平增加伴随有发热、低血压和休克(Smith J.W.等人J.Clin.0ncol.1992,10:1141-1152 ；Chapman P.B.，等人 J.Clin.0ncol.1987,5:1942-1951)以及磷脂酶 A2(Gronich J.，等人 J.Clin.1nvest.1994,93:1224-1233)和 NO 合酶的基因表达的诱导。
[0144]NO从平滑肌细胞的诱导在脓毒性休克期间介导了平均动脉压和全身血管阻力的降低，这表明了 NO的基本作用。因此，对IL-8、IL-li3和NO的靶下调作用可以有益于治疗炎性疾病或病患，包括脓毒症、脓毒性休克和内毒素性休克。
[0145]TNFa的过度产生促进诸如糖尿病和类风湿性关节炎的大量自身免疫疾病的临床特征。系统性红斑 狼疮(SLE)也会被IL-1 β和TNF a水平增加促进。在狼疮患者中，血清C反应性蛋白、IL-1 β和TNFa水平高于对照，这表明炎性反应的增加在该疾病中起作用(Liou L.B.Clin.Exp.Rheumatol.2001，19:515-523)。具有一种形式的 SLE 即神经精神性红斑狼疮(NPLE)的患者的研究表明表达TNFa的mRNA的外周血单核细胞的数目以及NO代谢物的脑脊液水平与NPLE疾病的严重程度相关(Svenungsson E.,等人.Ann.Rheum.Dis.2001,60:372-9)。
[0146]在动物模型中，IL-1和TNF a在多种急性和慢性反应中起重要作用。此外，IL-11、IFNa和IFNP还可以上调炎性反应。相反地，几种细胞因子可以参与下调炎性反应(即，IL-4、IL-10、IL-13以及其他)。如在实施例1中所示，与具有T3抗原的本发明的富含气体的流体接触的细胞显示出比在具有T3抗原的对照培养基中增加的IFN- Y水平，而具有T3抗原的本发明的富含气体的培养基中IL-8低于具有T3抗原的对照培养基。此外，在具有PHA的本发明的富含气体的培养基中IL-6、IL-8和TNF-a水平低于具有PHA的对照培养基，而具有PHA的本发明的富含气体的流体中的IL-1 β水平与具有PHA的对照培养基相比则较低。在单独的本发明的富含气体的培养基中，IFN-Y水平高于对照培养基。这些结果与抗炎性微环境一致。
[0147]NO被认为是炎性反应的介质和调节剂。它对病原具有细胞毒性特性，但是也可能对受治疗者自身的组织具有有害作用。(Korhonen等人，Curr Drug Targets InflammAllergy4 (4):471_9，2005)。NO与可溶性的鸟苷酸环化酶反应形成环尿苷一磷酸(cGMP)，该环尿苷一磷酸介导许多NO的作用。NO也可以与分子氧和过氧化物阴离子相互作用产生可以改变各种细胞功能的活性氧类。NO的这些间接作用对炎症具有显著的作用，其中大量NO由诱导型NO合酶(iNOS)产生并且活性氧类由激活的炎性细胞合成。[0148]NO可以由角质形成细胞、成纤维细胞、内皮细胞和可能的其他细胞产生。NO的一些血管作用包括血管舒张、抑制血小板对血管内皮的黏着、抑制白细胞对血管内皮的黏着以及清除超氧化物酶。(Shah 等人，Env.Health Persp.V.106 (5):1139-1143)。
[0149]此外，已经显示NO合成的抑制延缓创伤收缩、改变胶原组织并改变新生表皮(neoepidermis)厚度。(Amadeu 和 Costa, J.Cutan.Pathol.33:465-473, 2006)。创伤中肥大细胞迁移和血管发生也受NO抑制的影响。(出处同上)不受任何具体的机制理论束缚，在某些实施方式中，本发明的富含气体的流体可以调节局部的NO和/或细胞NO的产生或降解，这与本文所公开的实施例部分所说明的创伤愈合作用谱一致。由于调控途径不同，在某些实施方式中，本发明的富含气体的流体可以增加NO产生和/或延迟NO降解，而在其他的某些实施方式中，本发明的富含气体的流体可以降低NO产生和/或促进NO降解。
[0150]特定地，用富含氧的盐水溶液处理创伤显示在第4天至第11天和第3天与第11天之间创伤愈合增加，用富含氧的盐水溶液处理的创伤中新表皮迁移速度为用生理盐水溶液处理的创伤的表皮迁移的2至4倍，如本文的实施例9所示。该研究还显示在第15天和第22天之间，如通过较早地形成了较多成熟的表皮层所证明的，用富含氧的盐水溶液处理的创伤以较快的速率分化。在所有阶段，在用富含氧的盐水溶液处理的创伤内没有出现与正常愈合相伴随的表皮中所出现的增厚。
[0151]因此，根据创伤愈合作用谱，但不受任何具体理论限制，据信富含氧的盐水溶液可以在创伤内调节NO的局部水平和/或细胞水平。NO在创伤愈合中调节生长因子、胶原沉积、炎症、肥大细胞迁移、表皮增厚和新血管形成。此外，一氧化氮是由受氧调节的诱导型酶产生的。
[0152]在肥大细胞迁 移的情况下，对于富含氧的溶液还出现了迁移早晚的差异。这与关于NO合成抑制领域中已知的情况一致(Amadeu和Costa, J.Cutan Pathol33:465-473,2006)。
[0153]现在参考图41A至41F，各图解比较了存在或不存在富含氧的盐水溶液的猪表皮组织的创伤愈合结果。如可以看到的，在第1、4和16天进行了对照创伤和使用富含氧的盐水溶液的创伤的愈合观察。
[0154]图41A图解第I天对照创伤的创伤愈合。如可以看到的，创伤显示出表皮/真皮增厚和轮廓损失。图41B图解第I天使用富含氧的盐水溶液处理的创伤的创伤愈合。创伤显示出通常在新创伤上正常的表皮/真皮厚度和正常的轮廓。
[0155]现在参考图41C和41D，图解了第4天对照创伤的创伤愈合和第4天用富含氧的盐水溶液处理的创伤的创伤愈合。对于图41C中所图解的对照创伤，创伤显示出600微米的表皮突出物。在图41D中的用富含氧的盐水溶液处理的创伤中，图示了 1200微米的表皮突出物。因此，在实验的前4天，使用富含氧的盐水溶液处理的创伤中产生的表皮突出物显示出为未用富含氧的盐水溶液处理的创伤两倍的表皮生长速率。
[0156]现在参考图41E，图解了第16天的对照创伤。该创伤与图41F中所图解的用富含氧的盐水溶液处理的创伤所示出的相比，显示出具有表皮/真皮轮廓损失的较低分化的表皮。图41F在创伤中显示出更加分化的表皮和更正常的表皮/真皮轮廓。
[0157]在炎症过程的前两个阶段，外来体被破坏，例如，如果外来体为生物体；或外来体周围的组织被松散，例如，如果外来体为碎片。在愈合阶段，炎症开始消退；各血管和血管模式变得再次正常；并且创伤修复开始。修复过程的三个主要事件为(I)通过成纤维细胞增殖形成新的结缔组织；(2)上皮再生；和(3)长出新的毛细血管。
[0158]甚至在炎症消退之前，成纤维细胞就开始由周围的正常组织向损伤区域移动，在所述正常组织中，成纤维细胞通常以休眠状态存在。它们通过沿纤维蛋白链的变形运动迁移并将它们本身分布在整个愈合区域。一旦固定在损伤组织的位置内，它们便开始合成胶原并分泌这种蛋白，这种蛋白将其自身安排在纤维中。纤维以其纵轴在最大应力方向将其自身定向。随着胶原束硬度增加，成纤维细胞逐渐退化并紧密地连接至该束，并且损伤区域转化为疤痕组织。
[0159]疤痕组织形成的同时，在创伤边缘的完整的表皮细胞开始以一个片层增殖并向损伤区域中心移动。随着炎症消退，增加了对直接血液来源的需要，并且在创伤部位出现了血管发生。
[0160]炎症是涉及多种细胞类型的复杂过程。例如，肥大细胞释放触发早期血管舒张的介质，伴随着内皮细胞的分离和在内皮下层的胶原纤维的暴露。血管内形成的细胞间隙内的纤维捕获血小板并触发介质从这些细胞释放。
[0161]除血小板之外，暴露的胶原纤维还与滤过加宽的血管壁的孔的血浆蛋白相互作用，包括血液凝固级联、增加血管舒张、增加血管透性和趋化性的触发因子。
[0162]此外，补体级联可以被以下几种刺激物激活:损伤的血管、损害的细胞释放的蛋白水解酶、任何参与的细菌的膜组分和抗原-抗体复合体。激活的补体组分的一些充当趋化因子，负责白细胞向发炎区 域的流动，而其他则促进吞噬作用并参与细胞裂解。
[0163]此外，据信本发明的富含气体的流体或溶液还可以调控炎症的至少一方面所涉及的至少一种细胞因子，所述细胞因子包括但不限于MAF(巨噬细胞活化因子)、MMIF(巨噬细胞迁移抑制因子)、MCF(巨噬细胞趋化因子)、LMIF(白细胞迁移抑制因子)、HRF(组胺释放因子)、TF (转移因子)、白细胞介素(IL-1、IL-2、IL-3、IL-4、IL-5、IL-6、IL-7、IL-8、IL-9、IL-10、IL-11、IL-12、IL-13、IL-14、IL-15 等)、TNF-a、TNF-β、干扰素(IFN- α、IFN- β、IFN- y、IFN- ζ、IFN- δ等)、G-CSF (粒细胞集落刺激因子)、GM-CSF (粒细胞巨噬细胞CSF) ,M-CSF (巨噬细胞CSF)、多潜能-CSF (IL-3)、成纤维细胞生长因子(aFGF、bFGF)、EGF(表皮生长因子)、NGF(神经生长因子)、H)GF(血小板源生长因子)、VEGF(血管内皮生长因子)、转化生长因子(TGF-a、TGF-13等)、NAP_2 (嗜中性白细胞活化蛋白2)、PF_4 (血小板因子4)、血小板球蛋白、MCP-1 (单核细胞趋化蛋白l)、MCP-3、MIP-la、ΜΙΡ_1β_+(巨噬细胞炎性蛋白)、RANTES(激活后调节的正常T细胞表达和分泌的细胞因子(regulatedupon activation normal T expressed and presumably secreted chemokine))、HSP (热休克蛋白)、GRP (葡萄糖调节蛋白)、泛素以及其他细胞因子。
[0164]因此，在某些实施方式中，富含气体的流体和/或治疗组合物可以增加抗炎性分子或细胞因子的产生和/或分泌或降低抗炎性分子或细胞因子的降解，从而减轻或预防至少一种炎症症状。在其他实施方式中，本发明的富含气体的流体和/或治疗组合物可以降低促炎性分子或细胞因子的产生和/或分泌或增加促炎性分子或细胞因子的降解，从而减轻或预防至少一种炎症症状。
[0165]先前的研究已显示了抗MOG抗体在脱髓鞘作用的增大和EAE (实验性自身免疫脑脊髓炎)恶化中的关键作用，EAE是用于类风湿性关节炎的人自身免疫疾患的动物模型系统。(Linington,等人 1992.J.Neuroimmunol.40:219-224)。此外，抗MOG 的抗体参与了多发性硬化病的发病。(Berger 等人 N.Engl.J.Med.2003Jull0 ；349(2):139-45)。
[0166]如在图48和实施例12中所示的，本发明所发明的富含气体的流体放大了淋巴细胞对之前引发动物的抗原的反应。如图48中所示，当在用本发明的包含溶剂化电子的富含气体的流体重构的流体中培养时，与加压的、充氧的流体(压力罐)或对照去离子化流体相t匕，淋巴细胞增殖对MOG激发的反应更高。
_7] 本发明的电动产生的富含气体的流体和溶液
[0168]一种流体用另一种流体扩散或富集可产生这两种流体的溶液或悬浮液。具体而言，用气体(例如氧)富集液体可能对包括治疗性处理的某些应用是有益的。如本文所用“流体” 一般地可指对于任何具体公开的实施方式的液体、气体、蒸汽、液体和/或气体的混合物或者它们的任何组合。此外，在某些实施方式中“液体” 一般地可指纯的液体或者可指凝胶、溶胶、乳液、流体、胶体、分散体或混合物以及它们的任何组合；以上任何一种粘度可不同。
[0169]在本文所公开的【具体实施方式】中，溶解的气体包括环境空气。在一个优选的实施方式中，溶解的气体包括氧。在另一个实施方式中，溶解的气体包括氮氧化物。
[0170]存在几种领域认可的气体富集液体(例如氧富集水)的方法。例如，涡轮机充气系统可在叶轮的一组旋转叶片附近释放空气，叶轮将空气或氧与水混合，或者水可被喷洒到空气中以提高其氧含量。另外，市场上的其他系统将空气或氧注入到水中并且使水/气体经历大规模涡旋。水中氧的自然存在水平通常是不超过10ppm(百万分率)，这被认为是100%的溶解氧的水平。在某些装置上的测试已示出在理想条件下，所述装置能够向上达到大约20ppm或水的自然氧水平的两倍。在某些实施方式中，氧水平可能甚至更高。
[0171]在本文所公开的某些实施方式中，本发明的富含气体的流体提供了抗炎益处。本文所公开的某些实施方式涉及包含以下物质的治疗组合物:本发明的富含气体的流体以及任选的至少一种另外的治疗剂，如药物、金属、肽、多肽、蛋白、核苷酸、碳水化合物或糖基化蛋白、脂肪(包括油或蜡)或预防或减轻与炎症相关的病症或疾病的至少一个症状的其他药剂。
[0172]此外，本文所公开的某些实施方式包括涉及创伤的炎症的治疗组合物和方法。创伤护理期望的是改善皮下组织的健康和外观。诸如刀伤、擦伤或水疱的损伤诱导的创伤或诸如外科切口或造口(ostomiess)的手术诱导的创伤需要局部的治疗来补救受影响的区域并防止进一步的皮肤损害。如果创伤没有正确处理，则可能会导致进一步的皮肤刺激，如炎症，并且可能导致二次感染和受治疗者的进一步的不舒适。
[0173]本文提供的【具体实施方式】涉及如本文所定义的扩散器处理的治疗性流体，所述流体包括:流体主材料；扩散到该主材料中的输注材料；和任选地在该主材料中分散的至少一种治疗剂，其中该输注材料包括在该主流体中的氧微泡，其中大多数的微泡在尺寸上小于0.2微米或者优选地小于0.1微米。在某些实施方式中，在输注的流体主材料中的溶解氧水平可保持在大气压下大于约30ppm持续至少13小时。在其他具体的实施方式中，在输注的流体主材料中的溶解氧水平可保持在大气压下大于40ppm持续至少3小时。
[0174] 在另外的实施方式中，输注的流体主材料还包括盐水溶液。在其他的实施方式中，输注的流体主材料在大气压下于密封容器内保持至少约20ppm到约40ppm的溶解氧水平持续至少100天、优选至少365天的时间。在某些实施方式中，输注的流体主材料可具有大气压下至少50ppm的溶解氧水平。
[0175]在某些实施方式中，输注的流体主材料在氧已扩散到其中之后对通过它的激光束发光表现出瑞利散射持续选择的时间段。
[0176]表A说明了在用富含氧的盐水溶液处理的愈合创伤和在本发明的富含气体的富含氧的盐水溶液的样品中进行的各种分压测量。
[0177]表A
【权利要求】
1.一种用于治疗炎症的方法，其包括给需要其的受治疗者施用治疗有效量的电动改变的含水流体，所述电动改变的含水流体适合于改变细胞膜的结构或功能至足以提供对受治疗者的细胞中的细胞内信号转导的调节，其中炎症或至少一种炎症症状被治疗或减轻。
2.如权利要求1所述的方法，其中所述电动改变的含水流体的改变包括将所述流体暴露于流体动力诱导的、局部化的电动效应。
3.如权利要求2所述的方法，其中暴露于所述局部化的电动效应包括暴露于电压脉冲和电流脉冲的至少一种。
4.如权利要求2所述的方法，其中将所述流体暴露于流体动力诱导的、局部化的电动效应包括将所述流体暴露于用来产生所述流体的装置的诱导电动效应的结构部件。
5.如权利要求1所述的方法，其中所述至少一种炎症症状涉及选自由以下组成的组中的至少一种病症:过敏、哮喘、湿疹、类风湿性关节炎、发热、烧伤或其他创伤、微生物感染、接触刺激性皮炎、脂溢性皮炎、昆虫咬伤、昆虫螫伤、晒伤、蕈样肉芽肿病、坏疽性脓皮症、毒常春藤、有毒漆树、红斑痤疮、眼睛炎症、青光眼、干眼、红眼、眼红斑痤疮、睑缘炎、睑板腺炎、角膜炎、结膜充血、眼睑充血等、移植物抗宿主病、慢性支气管炎、特应性皮炎、荨麻疹、过敏性鼻炎、过敏性结膜炎、多发性硬化病、腱炎、脑中的慢性炎症、气道炎性疾病、慢性炎性肠病、春季结膜炎、嗜酸性粒细胞肉芽肿、银屑病、脓毒性休克、溃疡性结肠炎、心肌再灌注损伤和脑再灌注损伤、慢性肾小球肾炎、动脉粥样硬化、内毒素性休克和成人型呼吸窘迫综合征。
6.如权利要求1所述的方法，其中所述至少一种炎症症状选自由以下组成的组:痒、水肿、疼痛、瘙痒、温度 增加、功能损失、发红、鳞屑、起疱、色素沉着过度和色素沉着不足。
7.如权利要求1所述的方法，其中所述电动改变的含水流体包括富含氧的水。
8.如权利要求1所述的方法，其中所述电动改变的含水流体调节施用部位的一氧化氮的局部水平或细胞水平。
9.如权利要求1所述的方法，其中所述电动改变的含水流体促进选自由以下组成的组的至少一种细胞因子在施用部位局部降低:IL-1 β、IL-8、TNF-a和TNF-β。
10.如权利要求1所述的方法，还包括通过用其他抗炎剂同时或辅助治疗受治疗者来协同或非协同性地抑制或减少炎症。
11.如权利要求10所述的方法，其中所述其他抗炎剂包括类固醇。
12.如权利要求11所述的方法，其中所述类固醇包括糖皮质激素类固醇。
13.如权利要求12所述的方法，其中所述糖皮质激素类固醇包含布地奈德或其活性衍生物。
14.如权利要求1所述的方法，还包括组合治疗，其中将至少一种另外的治疗剂施用给患者。
15.如权利要求14所述的方法，其中所述至少一种另外的治疗剂选自由以下组成的组:短效β2_激动剂、长效β2_激动剂、抗胆碱能药、皮质类固醇、全身性皮质类固醇、肥大细胞稳定剂、白三烯改性剂、甲基黄嘌呤、β 2-激动剂、沙丁胺醇、左旋沙丁胺醇、吡布特罗、阿福特罗、福莫特罗、沙美特罗；抗胆碱能药，包括异丙托铵和噻托铵；皮质类固醇，包括倍氯米松、布地奈德、氟尼缩松、氟替卡松、莫米松、曲安西龙、甲基泼尼松龙、泼尼松龙、泼尼松；白三烯改性剂，包括孟鲁司特、扎鲁司特和齐留通；肥大细胞稳定剂，包括色甘酸钠和奈多罗米；甲基黄嘌呤，包括茶碱；组合药物，包括异丙托铵和沙丁胺醇、氟替卡松和沙美特罗、布地奈德和福莫特罗；抗组胺剂，包括羟嗪、苯海拉明、氯雷他定、西替利嗪和氢化可的松；免疫系统调节药物，包括他克莫司和吡美莫司；环孢菌素；硫唑嘌呤；麦考酚酸酯；以及它们的组合。
16.如权利要求14所述的方法，其中所述至少一种另外的治疗剂为TSLP和/或TSLPR拮抗剂。
17.如权利要求16所述的方法，其中所述TSLP和/或TSLPR拮抗剂选自由下列组成的组:对TSLP和TSLP受体特异性的中和抗体、可溶性TSLP受体分子和TSLP受体融合蛋白，包括TSLPR免疫球蛋白Fe分子或编码多于一种受体链的组分的多肽。
18.如权利要求1所述的方法，其中改变细胞膜的结构或功能包括改变膜相关蛋白的构象、配体结合活性或催化活性。
19.如权利要求18所述的方法，其中所述膜相关蛋白包括选自由以下组成的组中的至少一种:受体、跨膜受体、离子通道蛋白、细胞内附着蛋白、细胞黏着蛋白、整联蛋白等。
20.如权利要求19所述的方法，其中所述跨膜受体包括G蛋白偶联受体(GPCR)。
21.如权利要求20所述的方法，其中所述G蛋白偶联受体(GPCR)与G蛋白α亚基相互作用。
22.如权利要求21所述的方法，其中所述G蛋白α亚基包括选自由Ga s、G a a q和Ga 12所组成的组中的至少一种。
23.如权利要求22所述的方法，其中所述至少一种G蛋白a亚基是Gaq。
24.如权利要求1所述的方法，其中改变细胞膜的结构或功能包括改变膜电导率或膜电位。
25.如权利要求24所述的方法，其中调节细胞膜电导率包括调节全细胞电导。
26.如权利要求25所述的方法，其中调节全细胞电导包括调节全细胞电导的至少一种电压依赖性贡献。
27.如权利要求1所述的方法，其中细胞内信号转导的调节包括钙依赖性细胞通信途径或系统的调节。
28.如权利要求1所述的方法，其中细胞内信号转导的调节包括磷脂酶C活性的调节。
29.如权利要求1所述的方法，其中细胞内信号转导的调节包括腺苷酸环化酶(AC)活性的调节。
30.如权利要求1所述的方法，其中细胞内信号转导的调节包括与选自由以下组成的组中的至少一种病症或症状有关的细胞内信号转导的调节:过敏、哮喘、湿疹、类风湿性关节炎、发热、烧伤或其他创伤、微生物感染、接触刺激性皮炎、脂溢性皮炎、昆虫咬伤、昆虫螫伤、晒伤、蕈样肉芽肿病、坏疽性脓皮症、毒常春藤、有毒漆树、红斑痤疮、眼睛炎症、青光眼、干眼、红眼、眼红斑痤疮、睑缘炎、睑板腺炎、角膜炎、结膜充血、眼睑充血等、移植物抗宿主病、慢性支气管炎、特应性皮炎、荨麻疹、过敏性鼻炎、过敏性结膜炎、多发性硬化病、腱炎、脑中的慢性炎症、气道炎性疾病、慢性炎性肠病、春季结膜炎、嗜酸粒细胞肉芽肿、银屑病、脓毒性休克、溃疡性结肠炎、心肌再灌注损伤和脑再灌注损伤、慢性肾小球肾炎、动脉粥样硬化、内毒素性休克和成人型呼吸窘迫综合征。
31.如权利要求1所述的方法，所述方法包括施用给细胞网络或细胞层，并且还包括调节其中的细胞间连接。
32.如权利要求31所述的方法，其中所述细胞间连接包括选自由紧密连接、间隙连接、黏着带和桥粒所组成的组中的至少一种。
33.如权利要求1所述的方法，其中所述细胞网络或细胞层包括选自由肺上皮、支气管上皮和肠上皮所组成的组中的至少一种。
34.如权利要求1所述的方法，其中所述电动改变的含水流体是充氧的，并且其中在所述流体中氧的存在量为大气压下至少8ppm、至少15ppm、至少25ppm、至少30ppm、至少40ppm、至少50ppm或至少60ppm的氧。
35.如权利要求1到34中任一项所述的方法，其中所述电动改变的含水流体包括溶剂化电子和电动改性或带电的氧类中的至少一种。
36.如权利要求35所述的方法，其中所述溶剂化电子或者电动改性或带电的氧类以至少0.01ppm、至少0.lppm、至少0.5ppm、至少lppm、至少3ppm、至少5ppm、至少7ppm、至少lOppm、至少15ppm或至少20ppm的量存在。
37.如权利要求35所述的方法，其中所述电动改变的充氧的含水流体包括通过分子氧稳定的溶剂化电子。
38.如权利要求1所述的方法，其中改变细胞膜的结构或功能至足以提供对细胞内信号转导的调节的能力在封闭的气密容器中持续至少两个月、至少三个月、至少四个月、至少五个月、至少六个月、至少十二个月或更长的时间。
【文档编号】A61P27/02GK103933567SQ201410108422
【公开日】2014年7月23日 申请日期:2008年10月24日 优先权日:2007年10月25日
【发明者】理查德·L·华森, 安东尼·B·伍德, 格雷戈里·J·阿咸宾 申请人:利发利希奥公司