用于保肝治疗的药物组合物及其制备方法
【专利摘要】本发明提供一种用于治疗肝病、解毒保肝的药物组合物，所述组合物的有效成分为甜菜碱和水飞蓟素，二者重量比为200:7-14，并辅以适量的辅料。本发明的药物组合物中，甜菜碱具有抗脂肪肝、降压、抗肿瘤等作用，水飞蓟素能稳定肝细胞膜，维持肝细胞的完整性，使毒素无法穿透细胞膜破坏肝脏，并能加速合成肝脏细胞的DNA，可预防肝硬化、脂肪肝等症。本发明将甜菜碱与水飞蓟素组合制剂，经试验证明，可治疗肝病，具有解毒保肝作用，且效果优于现有技术。
【专利说明】用于保肝治疗的药物组合物及其制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及药物组合物制备领域，具体地说，涉及一种用于保肝治疗的药物组合 物及其制备方法。
【背景技术】
[0002] 甜菜碱，分子式为C5H11NO2，是一种碱性物质，可从天然植物的根、茎、叶及果实中 提取或采用三甲胺和氯乙酸为原料化学合成。甜菜碱具有维持细胞渗透压，抗肿瘤，降血 压，抗消化性溃疡及胃肠功能障碍，治疗肝脏疾病等功能。
[0003] 水飞蓟素，分子式为C25H22Oltl，为类黄酮联合体，从菊科草本植物水飞蓟果实及种 子中提取。水飞蓟素具有对脂肪氧合酶、过氧化酶的抑制作用。临床上用于肝中毒，肝功能 障碍治疗，抗辐射及降血脂作用。
[0004] 急性肝炎一般不用抗病毒治疗。仅在急性丙型肝炎时提倡早期应用干扰素防止慢 性化，而慢性病毒性肝炎需要抗病毒治疗。抗病毒治疗所用药物包括：
[0005] ①干扰素：重组DNA白细胞干扰素（IFN-a)可抑制HBV的复制。隔天肌注，连续 6个月，仅30?50%患者获得较持久的效果。丙型肝炎的首选药物为干扰素，可与利巴韦 林联合应用。
[0006] ②拉米夫定：是一种合成的二脱氧胞嘧啶核甘类药物，具有抗HBV的作用。口服拉 米夫定，血清HBV-DNA水平可明显下降，服药12周HBV-DNA转阴率达90 %以上。长期用药 可降低ALT，改善肝脏炎症，但HBeAg阴转率仅16?18%，治疗6个月以上，可发生HBV变 异，但仍可继续服用本药，副作用轻可继续服用1?4年。
[0007] ③泛昔洛韦：是一种鸟苷类药物，它的半衰期长，在细胞内浓度高，可以抑制 HBV-DNA的复制。本药副作用轻，可与拉米夫定干扰素等合用提高疗效。
[0008] ④其他抗病药物：如阿昔洛韦、阿德福韦、膦甲酸钠等均有一定抑制HBV的效果。
[0009] 肝病治疗中常用的免疫调节剂包括：
[0010] ①胸腺素a 1(日达仙），具有双向免疫调节作用，可重建原发、继发性免疫缺陷患 者的免疫功能。
[0011] ②胸腺素，参与机体细胞发生免疫反应，诱导T淋巴细胞的分化成熟，放大T细胞 对抗原的反应，调节T细胞各亚群的平衡。
[0012] ③免疫核糖核酸，在体内能诱生干扰素从而增强机体免疫功能。
[0013] 常见的护肝药物主要包括：
[0014] ①促肝细胞生长素，促进肝细胞再生，对肝细胞损伤有保护作用，并能调节机体免 疫功能和抗纤维化作用。
[0015] ③甘草酸二铵（甘利欣），具有较强的抗炎，保护细胞膜及改善肝功能的作用，适 用于伴有谷丙转氨酶升高的慢性迁延性肝炎及慢性活动性肝炎。
[0016] ④腺苷蛋氨酸（思美泰），补充外源性的腺苷蛋氨酸，具有促进黄疸消退和肝功能 恢复的作用。
【发明内容】
[0017] 本发明的目的是提供一种用于治疗肝病、解毒保肝的药物组合物及其制备方法， 特别是用于治疗非酒精性脂肪肝病的药物组合物及其制备方法。
[0018] 为了实现本发明目的，本发明的一种用于保肝治疗的药物组合物，所述组合物的 有效成分为甜菜碱和水飞蓟素，二者重量比为200:7-14 (优选二者重量比为100:5-6,更优 选二者重量比为20:1)，并辅以适量的辅料。所述辅料包括但不限于蔗糖、微粉硅胶、微晶纤 维素、羧甲基淀粉钠、羟丙甲纤维素、果冻粉、柠檬酸、山梨酸钾、脱脂奶粉、香精、色素、砂糖 等。
[0019] 本发明的药物组合物为散剂、粉剂、丸剂或胶体制剂等剂型。
[0020] 前述药物组合物的制备方法为：将甜菜碱、水飞蓟素、蔗糖和/或微粉硅胶粉碎后 混合，制粒。
[0021] 前述药物组合物的制备方法为：将甜菜碱、水飞蓟素、微晶纤维素、羧甲基淀粉钠 和/或羟丙甲纤维素混合，加入适量水，搅拌，制成丸剂。
[0022] 前述药物组合物的制备方法为：将甜菜碱、水飞蓟素、砂糖和果冻粉混合，制成糖 粉，然后边搅拌边向50-60°C水中加入糖粉，升温至85-95°C，加入预先用水溶解的脱脂奶 粉，沸腾后5-10分钟，再加入山梨酸钾，停止加热，待温度降至60-75°C，加入溶解好的柠檬 酸、色素、香精，趁热用100目滤网过滤，冷却后得胶体制剂。
[0023] 优选地，前述药物组合物的制备方法为：将甜菜碱、水飞蓟素、砂糖和果冻粉混合， 制成糖粉，然后边搅拌边向60°C水中加入糖粉，升温至90°C，加入预先用水溶解的脱脂奶 粉，沸腾后10分钟，再加入山梨酸钾，停止加热，待温度降至75°C，加入溶解好的柠檬酸、色 素、香精，趁热用100目滤网过滤，冷却后得胶体制剂。
[0024] 本发明还提供所述药物组合物在制备治疗肝病、解毒保肝药物中的应用。
[0025] 本发明具有以下优点：
[0026] 甜菜碱能有效地防止高脂肪饮食所诱导的非酒精性脂肪肝，改善肝功能，其机制 可能与抑制HMGB1/TLR4信号传导通路有关。非酒精性脂肪性肝病（non-alcoholicfatty liverdisease，NAFLD)是以肝细胞脂肪变性和脂肪蓄积为病理特征的临床综合征，目前临 床尚无完全有效的药物治疗。甜菜碱可促进含硫氨基酸的代谢，可以保护肝脏活性。通过 研究甜菜碱作用机制，发现其具有防止酒精性肝损伤进展及治疗的潜力。实验表明，将大鼠 用液体乙醇喂食6周，升高大鼠体内血清甘油三酯和TNF-a水平，谷丙转氨酶和谷草转氨 酶活动性，以及肝脏脂质堆积。肝脏氧自由基的清除能力降低，⑶14、TNF-a、C0X-2和iNOS 的mRNA表达被显著诱导。这些由乙醇引起的变化能够被甜菜碱有效地抑制。酒精喂养大 鼠的肝S-腺苷甲硫氨酸、半胱氨酸和谷胱甘肽的水平显著减少，给予甜菜碱，这些指标显 著增加。揭示其潜在的酒精性肝病的治疗价值。甜菜碱对酒精性肝损伤的保护作用可能是 通过改善受损的含硫氨基酸代谢的抗氧化功能引起。
[0027]水飞蓟素是存在于苦蓟萃取物中主要的活性成分，包括水飞蓟宾（Silybin)、异水 飞蓟宾（Isosilybin)、水飞蓟亭（Silychristin)和水飞蓟宁（Silydianin)等四种同分异 构体，其中水飞蓟宾含量为50?70%。水飞蓟素通过阻碍有害毒素进入，并帮助从肝细胞 去除这些物质从而保护肝脏细胞、稳定肝细胞膜，并具有使受损肝细胞再生的功能。与其他 生物类黄酮一样，水飞蓟具有强力抗氧化作用，可保护肝细胞免受自由基破坏，其功效远胜 于维生素E。另外，水飞蓟素能够促进蛋白质合成和抗肝纤维化。目前，国际上用水飞蓟素 可有效治疗酒精引起的肝纤维化；对酒精性脂肪肝的疗效可达70% ;对酒精性肝硬化合并 糖尿病者，水飞蓟可有效逆转胰岛素抵抗；用拉米夫定加水飞蓟治疗乙肝，可在短时间内使 肝功能恢复正常，弥补了拉米夫定的不足。
[0028] 本发明的药物组合物具有保护肝细胞膜、促进受损肝细胞合成DNA和结构蛋白、 免疫调节和抗肝纤维化等多种药理作用，提供了一种疗效确切，安全方便，副作用小的药物 制剂。
[0029] 本发明的药物组合物中，甜菜碱具有抗脂肪肝、降压、抗肿瘤等作用，水飞蓟素能 稳定肝细胞膜，维持肝细胞的完整性，使毒素无法穿透细胞膜破坏肝脏，并能加速合成肝脏 细胞的DNA，可预防肝硬化、脂肪肝等症。本发明将甜菜碱与水飞蓟素组合制剂，经试验证 明，可治疗肝病，具有解毒保肝作用，且效果优于现有技术。
【具体实施方式】
[0030] 以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。若未特别指明，实施例 中所用的技术手段为本领域技术人员所熟知的常规手段，所用原料药均为市售商品。
[0031] 实施例1用于保肝治疗的药物组合物（散剂）及其制备方法
[0032] 称取甜菜碱6kg，水飞蓟素210g，蔗糖650g，微粉硅胶140g，粉碎后混合，分装成每 袋7g。
[0033] 实施例2用于保肝治疗的药物组合物（粉剂）及其制备方法
[0034] 称取甜菜碱6kg，水飞蓟素210g，蔗糖650g，微粉硅胶140g，粉碎后混合，制粒，干 燥后分装。
[0035] 实施例3用于保肝治疗的药物组合物（散剂）及其制备方法
[0036] 称取甜菜碱6kg，水飞蓟素210g，鹿糖790g，粉碎后混合，分装成每袋装7g。
[0037] 实施例4用于保肝治疗的药物组合物（粉剂）及其制备方法
[0038] 称取甜菜碱6kg，水飞蓟素210g，蔗糖790g，粉碎后混合，制粒，干燥后分装。
[0039] 实施例5用于保肝治疗的药物组合物（丸剂）及其制备方法
[0040] 称取甜菜碱6kg，水飞蓟素210g，加入微晶纤维素160g、羧甲基淀粉钠280g和羟丙 甲纤维素350g，混合，加入20kg水，搅拌，炼药，在制丸机中制成丸，拉平，干燥，抛光，分装。
[0041] 实施例6用于保肝治疗的药物组合物（丸剂）及其制备方法
[0042] 称取甜菜碱6kg，水飞蓟素420g，加入微晶纤维素160g、羧甲基淀粉钠280g和羟丙 甲纤维素350g，混合，加入22kg水，搅拌，炼药，在制丸机中制成丸，拉平，干燥，抛光，分装。
[0043] 实施例7用于保肝治疗的药物组合物（果冻）及其制备方法
[0044] 本实施例的药物组合物配方为：甜菜碱2kg，水飞蓟素100g，果冻粉230g，水10kg， 糖2. 25kg，山梨酸钾6g，脱脂奶粉200g，柠檬酸33g，香精14. 82g，色素37. 05g。
[0045] 制备方法：1、将甜菜碱、水飞蓟素、砂糖和果冻粉混合均匀后制成糖粉备用。2、水 加热至60°C，加入糖粉，持续搅拌。3、90°C时加入预先溶解的脱脂奶粉，沸腾后10分钟，再 加入山梨酸钾，停止加热。4、温度降至75°C时，加入溶解好的柠檬酸、色素、香精。5、出锅时 用100目滤网过滤掉未完全溶解的果冻粉及砂糖中的杂质。6、趁热灌装封口。
[0046] 实施例8用于保肝治疗的药物组合物（果冻）及其制备方法
[0047] 本实施例的药物组合物配方为：甜菜碱2kg，水飞蓟素120g，果冻粉230g，水10kg， 糖2. 25kg，山梨酸钾6g，脱脂奶粉200g，柠檬酸33g，香精14. 84g，色素37.lg。
[0048] 制备方法：1、将甜菜碱、水飞蓟素、砂糖和果冻粉混合均匀后制成糖粉备用。2、水 加热至60°C，加入糖粉，持续搅拌。3、90°C时加入预先溶解的脱脂奶粉，沸腾后10分钟，再 加入山梨酸钾，停止加热。4、温度降至75°C时，加入溶解好的柠檬酸、色素、香精。5、出锅时 用100目滤网过滤掉未完全溶解的果冻粉及砂糖中的杂质。6、趁热灌装封口。
[0049] 实施例9用于保肝治疗的药物组合物（果冻）及其制备方法
[0050] 本实施例的药物组合物配方为：甜菜碱3kg，水飞蓟素120g，果冻粉230g，水12kg， 糖2. 25kg，山梨酸钾6g，脱脂奶粉200g，柠檬酸33g，香精17. 84g，色素44. 60g。
[0051] 制备方法：1、将甜菜碱、水飞蓟素、砂糖和果冻粉混合均匀后制成糖粉备用。2、水 加热至50°C，加入糖粉，持续搅拌。3、85°C时加入预先溶解的脱脂奶粉，沸腾后5分钟，再加 入山梨酸钾，停止加热。4、温度降至60°C时，加入溶解好的柠檬酸、色素、香精。5、出锅时用 100目滤网过滤掉未完全溶解的果冻粉及砂糖中的杂质。6、趁热灌装封口。
[0052] 实施例10用于保肝治疗的药物组合物（果冻）及其制备方法
[0053] 本实施例的药物组合物配方为：甜菜碱2. 5kg，水飞蓟素160g，果冻粉230g，水 10kg，糖2. 25kg，山梨酸钾6g，脱脂奶粉200g，柠檬酸33g，香精15. 38g，色素38. 45g。
[0054] 制备方法：1、将甜菜碱、水飞蓟素、砂糖和果冻粉混合均匀后制成糖粉备用。2、水 加热至55°C，加入糖粉，持续搅拌。3、95°C时加入预先溶解的脱脂奶粉，沸腾后8分钟，再加 入山梨酸钾，停止加热。4、温度降至70°C时，加入溶解好的柠檬酸、色素、香精。5、出锅时用 100目滤网过滤掉未完全溶解的果冻粉及砂糖中的杂质。6、趁热灌装封口。
[0055] 对比例1:参考CN101933900A，其公开了一种用于防治禽类肝病的复方制剂及其 制备方法
[0056] 具体如下：
[0057]复方制剂的组成：水飞蓟素25% (W/V)，甜菜碱1. 6% (W/V)，乙醇3% (V/V)，月 桂醇硫酸钠〇. 06% (W/V)，丙三醇10% (V/V)，枸橼酸钠2% (W/V)，尼泊金丙酯0. 03% (W/ V)，纯化水加至100%。
[0058]制法：
[0059] 1、先将枸橼酸钠溶入27ml纯化水中，再加入水飞蓟素、甜菜碱、乙醇和月桂醇硫 酸钠，搅拌得混合物A;
[0060] 2、取60ml纯化水，加入尼泊金丙酯，加入溶解后放置至室温，再加入丙三醇，搅拌 得混合物B;
[0061] 3、将溶液B倒入溶液A中，搅拌混匀后，用纯化水定容至100ml，得到混合物C;
[0062]4、将混合物C通过高压均质机在IOOMPa压力下进行均质化，通过2次循环均质后 得到粒径为5-500nm的水飞蓟素-甜菜碱混悬液。
[0063] 实验例：对非酒精性脂肪肝病的影响
[0064]非酒精性脂肪性肝病（non-alcoholicfattyliverdisease，NAFLD)是以肝细胞 脂肪变性和脂肪蓄积为病理特征的临床综合征，目前临床尚无完全有效的药物治疗。本发 明具有保护肝细胞膜、促进受损肝细胞合成DNA和结构蛋白、免疫调节和抗肝纤维化等多 种药理作用。本研究采用高脂饮食建立大鼠NAFLD模型，验证其治疗NAFLD大鼠的疗效及 作用机制。
[0065] 1材料与方法
[0066]I. 1 一般材料：成年雄性SD大鼠130只，体质量180_220g，购自北京维通利华实验 动物中心，许可证号：SCXK(京）2012-0001。熊去氧胆酸片由上海信谊药业有限公司提供。 谷丙转氨酶（GPT)、谷草转氨酶（GOT)、三酰甘油（TG)和总胆固醇（TC)试剂盒购自南京建 成生物工程研究所，肿瘤坏死因子（TNF-a)和白细胞介素-8(IL-8)试剂盒购自上海森雄 科技实业有限公司。
[0067] 1. 2 方法
[0068] 1. 2.INAFLD大鼠模型的建立：大鼠适应性饲养3d，随机分为13组：模型组、阳性 对照组、实施例1组、实施例2组、实施例3组、实施例4组、实施例5在组、实施例6组、实施 例7组、实施例8组、实施例9组、实施例10组和对比例1组，每组10只。其中模型组喂饲 基础饲料，实施例1-10组分别灌胃给予l〇〇mg/kg的按照本发明实施例1-10方法制备的药 物组合物。阳性对照组灌胃给药熊去氧酸60mg/kg，对比例1组灌胃给药复方制剂IOOmg/ kg，模型组灌胃羧甲基纤维素混悬液，1次/d。第6周末次给药后，禁食不禁水1晚后，眼眶 取血后处死大鼠，取肝组织制成肝匀浆。
[0069] 1. 2. 2实验指标测定：按试剂盒说明检测血清中GPT、G0T、TG及TC，将制备的肝组 织匀浆液，于4°C，离心半径8cm，3500r/min离心lOmin，取上清液再离心lOrain，采用酶联 免疫吸附法测定肝匀浆中TNF-a和IL-8水平。
[0070] 1. 3统计学处理：应用SPSS11. 5软件进行统计分析，计量资料以平均数土标准差 (X土s)表示，采用方差分析，P〈〇. 05为差异显著，有统计学意义。
[0071] 2结果见表1。
[0072] 表1 13组大鼠血清生化指标的比较（X土s)
[0073]
【权利要求】
1. 用于保肝治疗的药物组合物，其特征在于，所述组合物的有效成分为甜菜碱和水飞 蓟素，二者重量比为200:7-14,并辅以适量的辅料。
2. 根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于，所述组合物中甜菜碱和水飞蓟素 的重量比为100:5-6。
3. 根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于，所述组合物中甜菜碱和水飞蓟素 的重量比为20:1。
4. 根据权利要求1-3任一项所述的药物组合物，其特征在于，所述辅料包括但不限于 蔗糖、微粉硅胶、微晶纤维素、羧甲基淀粉钠、羟丙甲纤维素、果冻粉、柠檬酸、山梨酸钾、脱 脂奶粉、香精、色素、砂糖。
5. 根据权利要求1-3任一项所述的药物组合物，其特征在于，所述组合物为散剂、粉 齐U、丸剂或胶体制剂。
6. 权利要求5所述药物组合物的制备方法，其特征在于，将甜菜碱、水飞蓟素、蔗糖和/ 或微粉硅胶粉碎后混合，制粒。
7. 权利要求5所述药物组合物的制备方法，其特征在于，将甜菜碱、水飞蓟素、微晶纤 维素、羧甲基淀粉钠和/或羟丙甲纤维素混合，加入适量水，搅拌，制成丸剂。
8. 权利要求5所述药物组合物的制备方法，其特征在于，将甜菜碱、水飞蓟素、砂糖和 果冻粉混合，制成糖粉，然后边搅拌边向50-60°C水中加入糖粉，升温至85-95°C，加入预先 用水溶解的脱脂奶粉，沸腾后5-10分钟，再加入山梨酸钾，停止加热，待温度降至60-75°C， 加入溶解好的柠檬酸、色素、香精，趁热用100目滤网过滤，冷却后得胶体制剂。
9. 根据权利要求8所述的制备方法，其特征在于，将甜菜碱、水飞蓟素、砂糖和果冻粉 混合，制成糖粉，然后边搅拌边向60°C水中加入糖粉，升温至90°C，加入预先用水溶解的脱 脂奶粉，沸腾后10分钟，再加入山梨酸钾，停止加热，待温度降至75°C，加入溶解好的柠檬 酸、色素、香精，趁热用100目滤网过滤，冷却后得胶体制剂。
10. 权利要求1-5任一项所述药物组合物在制备治疗肝病、解毒保肝药物中的应用。
【文档编号】A61K31/205GK104306370SQ201410508802
【公开日】2015年1月28日 申请日期:2014年9月28日 优先权日:2014年9月28日
【发明者】刘逆夫, 袁秀菊, 李亚丹, 龚云 申请人:株洲千金药业股份有限公司