一种铁筷子挥发油的制备方法及其应用的制作方法
【专利摘要】本发明公开了一种铁筷子挥发油的制备方法及其应用。该制备方法包括：将药材铁筷子粉碎，过筛，采用生物酶进行发酵3~5天；发酵后的原料加入到超临界萃取釜中，以乙醇为夹带剂进行超临界萃取，得到萃取物；萃取物经有机溶剂萃取，即可得到铁筷子挥发油。药理实验表明，所得铁筷子挥发油具有显著的抗菌活性，可应用于日化、医药等领域中。
【专利说明】一种铁筷子挥发油的制备方法及其应用
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种铁筷子挥发油的制备方法及其应用。
【背景技术】
[0002] 苗药铁筷子是腊梅科腊梅属植物腊梅的干燥根，其化学成分主要以挥发油、生物 碱和香豆素类化合物为主。药理研究表明，其具有良好的镇痛消炎及清除自由基等作用，为 民间作治疗风湿痹痛的常用中药材。
[0003] 挥发油是中药中的一类有效成分，在植物界分布广泛，且具有多种药理活性和广 泛的用途。主要应用在各类食品、日化用品中做香精使用，对挥发油的功能性研究尚未有系 统的展开。现在对铁筷子挥发油研究较多的是挥发油的抗氧化和镇痛消炎的活性，而对其 的抗菌活性研究相对较少。因此，对铁筷子挥发油的抗菌作用的研究，有助于对铁筷子挥发 油的深度开发，如食品防腐、日化用品防腐等。
[0004] 经文献检索，未见与本发明相同的的公开文献报道。
【发明内容】
[0005] 本发明的目的在于提供一种铁筷子挥发油的制备方法及应用，该挥发油品质好、 纯度高，且抗菌效果明显。
[0006] 本发明是通过如下技术方案完成的： a. 将药材铁筷子粉碎，过40目筛，加入原料质量1~3%的纤维素酶，喷洒原料质量 0. 5?1倍的醋酸/醋酸钠缓冲溶液，薄膜包裹，于4(T50°C发酵:Γ5天； b. 将发酵后的原料加入到超临界萃取釜中，在萃取压力为15~25MPa、萃取温度为 35?45°C，CO2的流量为2(T30kg/h、浓度为80%的乙醇为夹带剂的条件下萃取2?3h，收集萃 取物； c. 所得萃取物再经有机溶剂萃取2~3次、无水硫酸钠干燥、减压浓缩等步骤，即可得到 铁筷子挥发油。
[0007] 步骤a中所述的纤维素酶的活性为3(T60U/mg。
[0008] 步骤c中所述的有机溶剂为石油醚或乙醚中的任意一种。
[0009] 本发明所得铁筷子挥发油在制备具有抗菌、杀菌作用的药物中的应用 本发明具有如下优点及效果： (1) 本发明技术路线简单可行，条件温和，适宜工业化生产； (2) 本发明提取过程在密闭系统中进行，且操作温度低，因此挥发性成分不易损失，热 不稳定成分及易氧化成分也不会受到破坏。
[0010] 下面将结合【具体实施方式】进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限 于下列实施方式。
[0011]
【具体实施方式】： 实施例1 : 将药材铁筷子粉碎，过40目筛，取原料5kg，加入原料质量1%的纤维素酶(活性为30U/ mg)，喷洒原料质量0. 5倍的醋酸/醋酸钠缓冲溶液，薄膜包裹，于40°C发酵3天；将发酵后 的原料加入到超临界萃取釜中，在萃取压力为15MPa、萃取温度为40°C，CO 2的流量为25kg/ h、浓度为80%的乙醇为夹带剂的条件下萃取2h，收集萃取物；所得萃取物再经石油醚萃取 2次，无水硫酸钠干燥，减压浓缩回收溶剂，即可得到浅黄色的铁筷子挥发油130mL。
[0012] 实施例2: 将药材铁筷子粉碎，过40目筛，取原料5kg，加入原料质量3%的纤维素酶(活性为60U/ mg)，喷洒原料质量1倍的醋酸/醋酸钠缓冲溶液，薄膜包裹，于45°C发酵5天；将发酵后的 原料加入到超临界萃取釜中，在萃取压力为20MPa、萃取温度为35°C，CO 2的流量为20kg/ h、浓度为80%的乙醇为夹带剂的条件下萃取3h，收集萃取物；所得萃取物再经乙醚萃取3 次，无水硫酸钠干燥，减压浓缩回收溶剂，即可得到浅黄色的铁筷子挥发油149mL。
[0013] 实施例3: 将药材铁筷子粉碎，过40目筛，取原料5kg，加入原料质量2%的纤维素酶(活性为50U/ mg)，喷洒原料质量1倍的醋酸/醋酸钠缓冲溶液，薄膜包裹，于50°C发酵4天；将发酵后的 原料加入到超临界萃取釜中，在萃取压力为25MPa、萃取温度为45°C，C0 2的流量为30kg/h、 浓度为80%的乙醇为夹带剂的条件下萃取2. 5h，收集萃取物；所得萃取物再经石油醚萃取 2次，无水硫酸钠干燥，减压浓缩回收溶剂，即可得到浅黄色的铁筷子挥发油138mL。
[0014] 实施例4 :铁筷子挥发油的抑菌效果 1材料 1. 1菌种金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草杆菌和绿脓杆菌。
[0015] 1. 2培养基M-H肉汤培养基加0. 3%的琼脂制成半固体培养基。
[0016] 1.3试品上述方法所制备的铁筷子挥发油。
[0017] 2方法与结果 2.1 MIC的测定采用微量琼脂稀释法测定MIC。将上述所制备的铁筷子挥发油作 1:2~256的倍比水稀释，取2〇μ?加入培养孔中，再分别加入用肉汤琼脂稀释的各菌液（IO7) 20〇μ?，混匀，于37°C培养24h，重复试验一次，结果见表1。
[0018] 表1铁筷子挥发油的最低抑菌浓度试验结果
【权利要求】
1. 一种铁筷子挥发油的制备方法，其特征在于，包括如下步骤： a. 将药材铁筷子粉碎，过40目筛，加入原料质量1~3%的纤维素酶，喷洒原料质量 0. 5?1倍的醋酸/醋酸钠缓冲溶液，薄膜包裹，于4(T50°C发酵:Γ5天； b. 将发酵后的原料加入到超临界萃取釜中，在萃取压力为15~25MPa、萃取温度为 35?45°C，C02的流量为2(T30kg/h、浓度为80%的乙醇为夹带剂的条件下萃取2?3h，收集萃 取物； c. 所得萃取物再经有机溶剂萃取2~3次、无水硫酸钠干燥、减压浓缩等步骤，即可得到 铁筷子挥发油。
2. 根据权利要求1所述的一种铁筷子挥发油的制备方法，其特征在于，步骤a中所述 的纤维素酶的活性为3(T60U/mg。
3. 根据权利要求1所述的一种铁筷子挥发油的制备方法，其特征在于，步骤c中所述 的有机溶剂为石油醚或乙醚中的任意一种。
4. 根据权利要求Γ3所述方法制备的铁筷子挥发油在制备具有抗菌、杀菌作用的药 物中的应用。
【文档编号】A61P31/04GK104274503SQ201410550598
【公开日】2015年1月14日 申请日期:2014年10月17日 优先权日:2014年10月17日
【发明者】刘东锋, 杨成东 申请人:南京帝道农业科技有限公司