1.一种猪繁殖与呼吸综合征活疫苗用稀释液,其特征在于每1000ml pH=7的磷酸盐缓冲液中包含:桑叶多糖1-8g、云芝多糖0.1-5g、地黄多糖1-5g和胸腺五肽0.1-5g。
2.根据权利要求1所述的一种猪繁殖与呼吸综合征活疫苗用稀释液,其特征在于每1000ml pH=7的磷酸盐缓冲液中包含:桑叶多糖2-6g、云芝多糖0.5-2g、地黄多糖1-3g和胸腺五肽0.5-1g。
3.根据权利要求1或2所述的一种猪繁殖与呼吸综合征活疫苗用稀释液,其特征在于所述桑叶多糖的制备包括以下步骤:
(1)将桑叶粉碎后过70-100目筛,得桑叶粉末,置于干燥环境中贮存备用;
(2)将步骤(1)中所得桑叶粉末按料液比1:20-50g/ml加入75-85℃水中浸提100-120min,每间隔20-30min搅拌一次;
(3)对步骤(2)中浸提完毕的料液进行过滤,收集滤液;对所得滤液进行减压浓缩得浓缩液,减压浓缩条件为:温度50-60℃,转速50r/min,真空度600-700mmHg;
(4)向步骤(3)中所得浓缩液中加入无水乙醇,于4℃冰箱中醇沉20-24h后,以5000-6000 r/min的转速离心15-20min,收集不溶物;
(5)利用无水乙醚对步骤(4)中所得不溶物浸洗5-8次,再加入蒸馏水,离心,收集澄清液;
(6)对步骤(5)中所得澄清液进行真空冷冻干燥,得桑叶多糖。
4.根据权利要求1或2所述的一种猪繁殖与呼吸综合征活疫苗用稀释液,其特征在于所述云芝多糖的制备包括以下步骤:
a. 将干燥的云芝碎片置于90-100℃水中煮提9-10h,过滤,收集滤液;
b.将步骤a中所得滤液浓缩至原体积的1/2,再加入3-4倍体积的95%乙醇,置于25-27℃环境中静置沉淀20-24h,得沉淀液;
c.将步骤b中所得沉淀液3000-4000r/min的转速离心15-20min,将所得沉淀物置于常温下干燥,即得云芝多糖。
5.根据权利要求1或2所述的一种猪繁殖与呼吸综合征活疫苗用稀释液,其特征在于所述地黄多糖的制备包括以下步骤:
A.称取地黄,按液固比30-40:1加入蒸馏水,加热至90-110℃,浸提2-3h,过滤,收集滤液;
B.将步骤A中所得滤液浓缩至原体积的1/3-1/2,用sevag试剂法除去蛋白,上清液加氯仿离心,水层加80%-90%乙醇沉淀,沉淀物分别用丙酮和乙醇洗涤2 次,真空干燥得地黄多糖。
6.根据权利要求1或2所述的一种猪繁殖与呼吸综合征活疫苗用稀释液,其特征在于所述pH=7的磷酸盐缓冲液的制备方法如下:
d.称取下列原料组分:氯化钠6-10g、氯化钾0.05-0.5g、磷酸氢二钠1-1.2g、磷酸二氢钾0.05-0.5g、氯化钙0.05-0.2g和六水氯化镁0.05-0.2g,混合均匀备用;
e.向步骤d中所得原料组分的混合物中加入1000mL的双蒸水,充分溶解后,在116℃条件下高压灭菌30min,即得pH=7的磷酸盐缓冲液。