本发明属于靶向抗癌药物领域，涉及一种二十二碳六烯酸偶联多西紫杉醇靶向药物的制备方法。
背景技术：
多西紫杉醇，又叫多西他赛，是以紫杉树中的化学物质紫杉醇为基础而合成出来的一种紫杉烷类抗肿瘤药物，其作用机制与紫杉醇相似，即促进微管蛋白聚合，抑制微管解聚，抑制细胞分裂，从而破坏肿瘤细胞的有丝分裂。多西紫杉醇可用于治疗各种癌症，尤其适用于局部晚期乳腺癌和非小细胞肺癌。但是多西紫杉醇的水溶性极小，目前临床使用的多西紫杉醇都用吐温-80溶解，而吐温-80具有溶血性，且黏性大，会让患者产生过敏反应。因此，开发水溶性多西紫杉醇制剂至关重要。
二十二碳六烯酸，简称dha，属于n-3多不饱和脂肪酸，是人体必需的脂肪酸。人体自身不能合成dha，因此只能通过外界来获得dha，其主要来源是鱼油。近年来，研究发现dha具有抗肿瘤作用，且可以增加药物抑制肿瘤细胞生长，抑制肿瘤转移。作为化合物的前体物及能量来源，肿瘤细胞的生长需要大量的dha。研究表明dha受体在恶性肿瘤细胞中过量表达，dha被肿瘤细胞大量吸收，这为dha靶向药物的制备提供了依据和基础。
本发明所制备的二十二碳六烯酸偶联多西紫杉醇抗癌药物，提高了其生物利用度，还将抗癌药物的水溶性提高，减小了临床使用的副作用。同时由于二十二碳六烯酸的靶向作用及抗肿瘤作用，该药物的抗癌效果也有所增强。该合成药物为抗癌药物分子靶向治疗提供了一个新方向。
技术实现要素：
本发明的目的是提供一种二十二碳六烯酸偶联多西紫杉醇靶向药物的制备方法。
本发明是通过以下技术方案实现的：一种二十二碳六烯酸偶联多西紫杉醇靶向药物的制备方法：
(1)多西紫杉醇-二十二碳六烯酸的制备：将多西紫杉醇、4-二甲基氨基吡啶、1,3-二环己基碳二亚胺、dha混合并溶于二氯甲烷中，使用磁力搅拌器在室温下搅拌，反应过程中通入氮气保护。反应完成后用乙醚稀释，将反应混合物分别用盐酸水溶液、水、水饱和氯化钠进行清洗，收集清洗液。
(2)多西紫杉醇-二十二碳六烯酸的干燥：无水硫酸钠充分吸水是一个漫长的过程，本试验利用无水硫酸钠干燥反应物，将无水硫酸钠加入到反应溶液中，干燥反应物。
(3)多西紫杉醇-二十二碳六烯酸的分离：采用硅胶柱层析法分离dtx-dha。将硅胶于浓盐酸中浸泡24h后，不断加蒸馏水冲洗直至检验无氯离子为止，然后在110℃烘箱中活化2h。活化后的硅胶加氯仿浸泡并搅拌均匀，然后倾入层析柱中，并于上端铺一层脱脂棉。填充好的层析柱静置24h后，轻敲柱壁，以除气泡，再用淋洗剂走柱子。将干燥好的反应物过硅胶柱纯化得到产物。
优选的，步骤(1)中加入的二十二碳六烯酸为2％-10％。
优选的，步骤(1)中加入的多西紫杉醇、4-二甲基氨基吡啶、1,3-二环己基碳二亚胺、dha的反应时间为2-3h。
优选的，步骤(1)中加入的多西紫杉醇为1％-5％。
优选的，步骤(1)中4-二甲基氨基吡啶与1,3-二环己基碳二亚胺的混合物的含量比为1:3-1:4。
优选的，步骤(1)中dha与多西紫杉醇的混合物中两种化合物的含量比为1:2-1:3。
优选的，步骤(2)中清洗反应物所用的盐酸浓度为4％-6％。
优选的，步骤(3)中填充好的硅胶柱用2-3倍柱体积淋洗剂走柱子。
优选的，步骤(3)中洗脱剂采用正己烷：乙酸乙酯＝1:3-1:4。
本发明的有益效果：
1.本发明试验条件温和，操作简单，无任何复杂的合成和除杂过程。
2.本发明将药物结构进行修饰，提高了药物的生物利用度。
3.本发明将多西紫杉醇制成水溶性制剂，克服了多西紫杉醇水溶性低的缺点，可以减小由于有机溶剂带来的副作用，有利于其推广使用。
4.本发明使用二十二碳六烯酸作靶标，二十二碳六烯酸作为人类所需的必须脂肪酸，不会产生任何副作用，且由于其本身具有抗癌效果，可协同增强多西紫杉醇的抗癌作用，这为该药物的推广使用提供了科学依据。
具体实施方式
实施例1
(1)多西紫杉醇-二十二碳六烯酸的制备：将多西紫杉醇、4-二甲基氨基吡啶、1,3-二环己基碳二亚胺、dha混合并溶于二氯甲烷中，使用磁力搅拌器在室温下搅拌反应2h，反应过程中通入氮气保护。反应完成后用乙醚稀释，将反应混合物分别用盐酸水溶液、水、水饱和氯化钠进行清洗，收集清洗液。
(2)多西紫杉醇-二十二碳六烯酸的干燥：无水硫酸钠充分吸水是一个漫长的过程，本试验利用无水硫酸钠干燥反应物，将无水硫酸钠加入到反应溶液中，干燥反应物40h。
(3)多西紫杉醇-二十二碳六烯酸的分离：采用硅胶柱层析法分离dtx-dha。将硅胶于浓盐酸中浸泡24h后，不断加蒸馏水冲洗直至检验无氯离子为止，然后在110℃烘箱中活化2h。活化后的硅胶加氯仿浸泡并搅拌均匀，然后倾入层析柱中，并于上端铺一层脱脂棉。填充好的层析柱静置24h后，轻敲柱壁，以除气泡，再用淋洗剂走柱子。将干燥好的反应物过硅胶柱(洗脱剂正己烷：乙酸乙酯＝1:3)纯化得到产物。
实施例2
(1)多西紫杉醇-二十二碳六烯酸的制备：将多西紫杉醇、4-二甲基氨基吡啶、1,3-二环己基碳二亚胺、dha混合并溶于二氯甲烷中，使用磁力搅拌器在室温下搅拌反应3h，反应过程中通入氮气保护。反应完成后用乙醚稀释，将反应混合物分别用盐酸水溶液、水、水饱和氯化钠进行清洗，收集清洗液。
(2)多西紫杉醇-二十二碳六烯酸的干燥：无水硫酸钠充分吸水是一个漫长的过程，本试验利用无水硫酸钠干燥反应物，将无水硫酸钠加入到反应溶液中，干燥反应物48h。
(3)多西紫杉醇-二十二碳六烯酸的分离：采用硅胶柱层析法分离dtx-dha。将硅胶于浓盐酸中浸泡24h后，不断加蒸馏水冲洗直至检验无氯离子为止，然后在110℃烘箱中活化2h。活化后的硅胶加氯仿浸泡并搅拌均匀，然后倾入层析柱中，并于上端铺一层脱脂棉。填充好的层析柱静置24h后，轻敲柱壁，以除气泡，再用淋洗剂走柱子。将干燥好的反应物过硅胶柱(洗脱剂正己烷：乙酸乙酯＝1:4)纯化得到产物。
实施例3
(1)多西紫杉醇-二十二碳六烯酸的制备：将多西紫杉醇、4-二甲基氨基吡啶、1,3-二环己基碳二亚胺、dha混合并溶于二氯甲烷中，使用磁力搅拌器在室温下搅拌反应2h，反应过程中通入氮气保护。反应完成后用乙醚稀释，将反应混合物分别用盐酸水溶液、水、水饱和氯化钠进行清洗，收集清洗液。
(2)多西紫杉醇-二十二碳六烯酸的干燥：无水硫酸钠充分吸水是一个漫长的过程，本试验利用无水硫酸钠干燥反应物，将无水硫酸钠加入到反应溶液中，干燥反应物40h。
(3)多西紫杉醇-二十二碳六烯酸的分离：采用硅胶柱层析法分离dtx-dha。将硅胶于浓盐酸中浸泡24h后，不断加蒸馏水冲洗直至检验无氯离子为止，然后在110℃烘箱中活化2h。活化后的硅胶加氯仿浸泡并搅拌均匀，然后倾入层析柱中，并于上端铺一层脱脂棉。填充好的层析柱静置24h后，轻敲柱壁，以除气泡，再用淋洗剂走柱子。将干燥好的反应物过硅胶柱(洗脱剂正己烷：乙酸乙酯＝1:3)纯化得到产物。
实施例4
(1)多西紫杉醇-二十二碳六烯酸的制备：将多西紫杉醇、4-二甲基氨基吡啶、1,3-二环己基碳二亚胺、dha混合并溶于二氯甲烷中，使用磁力搅拌器在室温下搅拌反应3h，反应过程中通入氮气保护。反应完成后用乙醚稀释，将反应混合物分别用盐酸水溶液、水、水饱和氯化钠进行清洗，收集清洗液。
(2)多西紫杉醇-二十二碳六烯酸的干燥：无水硫酸钠充分吸水是一个漫长的过程，本试验利用无水硫酸钠干燥反应物，将无水硫酸钠加入到反应溶液中，干燥反应物48h。
(3)多西紫杉醇-二十二碳六烯酸的分离：采用硅胶柱层析法分离dtx-dha。将硅胶于浓盐酸中浸泡24h后，不断加蒸馏水冲洗直至检验无氯离子为止，然后在110℃烘箱中活化2h。活化后的硅胶加氯仿浸泡并搅拌均匀，然后倾入层析柱中，并于上端铺一层脱脂棉。填充好的层析柱静置24h后，轻敲柱壁，以除气泡，再用淋洗剂走柱子。将干燥好的反应物过硅胶柱(洗脱剂正己烷：乙酸乙酯＝1:4)纯化得到产物。