专利名称：二甲氧基多西紫杉醇的结晶形式及其制备方法
技术领域：
本发明涉及二甲氧基多西紫杉醇(dimethoxy docetaxel)或(2R， 3S)-3_叔丁氧基羰基氨基-2-羟基-3-苯基丙酸4-乙酰氧基-2 α -苯甲酰氧 基-5 β，20-环氧-1-羟基-7 β，10 β - 二甲氧基-9-氧代-11-紫杉烯-13 α -基酯 (4~acetoxy-2α -benzoyloxy-5β ,20-epoxy-l-hydroxy-7β ,10 β -dimethoxy-9-oxotax-ll-en-13α -yl(2R,3S)-3-tert-butoxycarbonylamino-2-hydroxy-3-phenylpropionate) 的结晶形式，以及它们的制备方法。
背景技术：
(2R，3S) -3-叔丁氧基羰基氨基_2_羟基_3_苯基丙酸4_乙酰氧基_2 α -苯甲酰 氧基-5 β，20-环氧-1-羟基-7 β，10 β - 二甲氧基-9-氧代-11-紫杉烯-13 α -基酯显示 了显著的抗癌和抗白血病特性。(2R，3S) -3-叔丁氧基羰基氨基_2_羟基_3_苯基丙酸4_乙酰氧基_2 α -苯甲酰 氧基-5 β，20-环氧-1-羟基-7 β，10 β - 二甲氧基-9-氧代-11-紫杉烯-13 α -基酯的制 备是根据以下申请中更具体描述的方法进行PCT国际申请WO 96/30355或PCT国际申请 W099/25704。根据在这些申请中的方法，所述产物不是结晶的且没有表征。根据W02005/028462专利申请文本发现了，完全确定了并表征了(2R，3S)_3_叔丁 氧基羰基氨基-2-羟基-3-苯基丙酸4-乙酰氧基-2a_苯甲酰氧基-5 β，20-环氧羟 基-7 β，10 β - 二甲氧基-9-氧代-11-紫杉烯-13 α -基酯的丙酮溶剂化物(称为形式Α)。
发明内容
本发明涉及新的结晶形式，不包括丙酮化物(acetonate)的形式(此为目前唯一 已知的形式)。从物理和化学结构的观点看，本发明目前已经完全表征了某种无水的形式、某种 乙醇化物或异溶剂化物(heterosolvates)和水合形式(hydratedforms)。根据本发明，在(2R，3S) -3-叔丁氧基羰基氨基_2_羟基_3_苯基丙酸4_乙酰 氧基-2 α -苯甲酰氧基-5 β，20-环氧-1-羟基-7 β，10 β - 二甲氧基_9_氧代-11-紫 杉烯-13α-基酯的无水形式中，签定了五种不同形式；在(2R，3S)-3_叔丁氧基羰基氨 基-2-羟基-3-苯基丙酸4-乙酰氧基-2(1-苯甲酰氧基-50，20-环氧-1-羟基-73， 10β-二甲氧基-9-氧代-11-紫杉烯-13 α-基酯的乙醇化物或异溶剂化物中，签定了 四种不同形式；以及在(2R，3S) -3-叔丁氧基羰基氨基-2-羟基-3-苯基丙酸4-乙酰氧 基-2 α -苯甲酰氧基-5 β，20-环氧-1-羟基-7 β，10 β - 二甲氧基-9-氧代-11-紫杉 烯-13 α -基酯的水合物中，签定了两种不同形式。根据下述方法得到所签定的五种无水形式-无水形式B的制备方法包括根据上面提及的专利申请文本中所获得的丙酮形 式或形式A在真空或氮气气氛下在100和110°C之间的温度进行加热。该方法优选地在恢
4复至环境温度前进行至少9小时且不引起化学分解。无水形式B的熔点经DSC确定约为 150°C。所述无水形式 B 的 PXRD 图显示了位于 7. 3,8. 1,9. 8、10. 4、11. 1,12. 7、13. 1,14. 3、 15. 4 和 15. 9士0. 2° 2 θ 的特征峰(characteristic line)。-无水形式C通过如下得到在水中使丙酮化物形式A或无水形式B熟化 (maturation)，接着在至多50°C的温度干燥，并且在环境温度保持在0和5% RH(相对湿 度)之间。无水形式C的熔点经DSC确定约为146°C。所述无水形式C的PXRD图显示了位 于 4. 3,6. 8,7. 4,8. 7,10. 1,11. 1、11. 9,12. 3、12. 6 和 13. 1 士0. 2° 2 θ 的特征峰。在各种无 水形式中，无水形式C是在本发明所述所有形式中最不稳定的。在相对湿度大于5%的情况 下，其变为水合形式。-无水形式D由以下方法得到第一种方法在油中(特别是Miglyol)对形式A 进行结晶化，接着用烷烃(例如庚烷)洗涤；第二种制备方法是在PH 3. 5的聚山梨酯80、乙 醇和水的混合物(优选为25/25/50的混合物)中对(2R，3S) -3-叔丁氧基羰基氨基_2_羟 基-3-苯基丙酸4-乙酰氧基-2 α -苯甲酰氧基-5 β，20-环氧羟基_7 β，10 β - 二甲氧 基-9-氧代-11-紫杉烯-13 α -基酯的溶液进行结晶化约48小时。无水形式D的熔点经 DSC确定约为175°C (参照
图1)，并且发现该形式的熔点是所有分离的无水形式中最高的。 所述无水形式D的PXRD图(参照图2)显示了位于3. 9,7. 7,7. 8,7. 9,8. 6,9. 7、10. 6、10. 8、 11. 1和12. 3士0. 2° 2 θ的特征峰。无水形式D的FTIR光谱显示了位于979、1072、1096、 1249、1488、1716、1747、3436士 IcnT1 的特征谱带(characteristic band)(参见图 3)。在 本发明所述所有形式中，无水形式D是最稳定的无水形式。-无水形式E如下获得在环境温度，将所述丙酮化物形式或形式A在乙醇中熟 化，然后形成乙醇化物形式中间体，随后将所述乙醇化物形式中间体在氮气气氛下进行去 溶剂化(desolvate)；或者对所述丙酮溶剂化物或形式A在约100°C进行加热2小时。无 水形式E的熔点经DSC确定约为157°C。所述无水形式E的PXRD图显示了位于7. 1、8. 1、 8. 9、10. 2、10. 8、12. 5、12. 7、13. 2、13. 4 和 13. 9士0. 2° 2 θ 的特征峰。-无水形式F如下得到在120°C且在氮气气氛下对乙醇/水异溶剂化物进行去溶 剂化24小时然后在0% RH且在环境温度维持在干燥环境中。无水形式F的熔点经DSC确 定约为1480C ο所述无水形式F的PXRD图显示了位于4. 4,7. 2,8. 2,8. 8,9. 6、10. 2、10. 9、 11. 2、12. 1 和 12. 3士0. 2° 2 θ 的特征峰。所鉴定的四种结晶形式为乙醇化物或异溶剂化物的形式-乙醇化物形式B如下获得在环境温度，使无水形式B维持在乙醇_蒸气-饱和 (an ethanol-vapour-saturated environment)中。乙酉享U^Hg B 的 PXI D 图
显示了位于7. 3,7. 8,8. 8,10. 2,12. 6,12. 9,13. 4,14. 2、14. 7和 15. 1 士0. 2° 2 θ 的特征峰。-乙醇化物形式D如下获得在环境温度，使无水形式D维持在乙醇_蒸气-饱和 环境中。所述乙醇化物形式D的PXRD图(参照图4)显示了位于3.8、7.5、7.7、8.4、9.4、 10. 3、10. 5、11. 1、11. 5 和 11. 9士0. 2° 2 θ 的特征峰。-乙醇化物形式E如下获得在环境温度，使丙酮化物形式A在乙醇中熟化。所述 乙醇化物形式E的PXRD图(参照图5)显示了位于7. 1,8. 1、8. 8、10. 2、10. 7、12. 5、13. 2、 13. 4、13. 9 和 14. 2士0. 2° 2 θ 的特征峰。-乙醇/水异溶剂化物形式F如下获得使形式B维持在最少量乙醇中回流，缓慢冷却并在环境温度和环境相对湿度中分离。所述乙醇/水异溶剂化物形式F的PXRD图显 示了位于 4. 4,7. 2,8. 2,8. 3,8. 8,9. 6,10. 3,10. 9,11. 2 和 12. 2士0. 2° 2 θ 的特征峰。两种结晶形式鉴定为水合形式-一水合物的形式C如下获得在环境温度，使无水形式C维持在含有至少10% 相对湿度的环境中。所述一水合物形式C的PXRD图显示了位于4. 3,6. 8,7. 4,8. 6,10. 1、 11. 1、11. 9、12. 2、12. 6 和 13. 3士0. 2° 2 θ 的特征峰。- 二水合物的形式C如下获得在环境温度，使无水形式C维持在含有至少60%相 对湿度的环境中。所述二水合物形式C的PXRD图显示了位于4. 2,6. 9,7. 5,8. 4,9. 9、10. 9、 11. 7、12. 3、12. 6 和 13. 2士0. 2° 2 θ 的特征峰。制备了形式B的其他、非乙醇化物，例如，特别是与下述溶剂所获得那些溶剂化
物二氯甲烷、二异丙醚、正丙醇、异丙醇、甲苯、甲基异丁基甲酮、四氢呋喃、二甲基甲酰胺、 乙酸乙酯等。本发明将通过以下实施例进行更完整地描述，所述实施例不应认为是限制本发明。实验分析条件差示扫描量热法(Differential Scanning Calorimetry, DSC)本测量方法在Τ. Α.仪器DSC2010热分析仪中进行。对样品进行25°C至225°C的 程序升温且加热速率为5°C/分钟。将产物置于波纹铝盒(crimpedaluminium capsule)中 且待分析的产物的量在2和5mg之间。在烘箱室中使用速率为55mL/分钟的恒定氮气气氛 (nitrogen sweeping)。粉末X-射线衍射(Powder X-Ray Diffraction, PXRD)该分析在配备有反射模式Bragg-Brentano聚焦几何(θ -2 θ )装置的 Panalytical X'Pert Pro衍射仪中进行。将待分析的产物在单晶硅上沉积为薄层的形式。 铜阳极电子管(45kV/40mA)提供入射辐射Cu Kal (λ= 1.5406人)。使用Sollers狭缝仪 校准光线，Sollers狭缝仪改善平行度和限制散射的可变狭缝。该设备还包括X’Celerator 检测器。谱图记录特征如下所述2至30° 2 θ的扫描、100至500秒每步(步长为0.017° ) 的计数时间。傅里叶变换红外(FourierTransform InfraRed, FTIR)光谱测定法:使用Nicolet Nexus光谱仪分析固体样品。该分析通过衰减全反射(attenuated total reflectance, ATR)使用Thermo公司的Smart Orbit配件(单反射金刚石晶体ATR 配件)来进行。扫描的光谱范围在4000和400CHT1之间，其分辨率为2CHT1且累积扫描数量 为20。
具体实施方案实施例1进行两组溶出实验将约550mg (2R，3S) _3_叔丁氧基羰基氨基_2_羟基_3_苯基 丙酸4-乙酰氧基-2 α-苯甲酰氧基-5 β，20-环氧-1-羟基-7 β，10 β-二甲氧基-9-氧 代-11-紫杉烯-13 α-基酯溶解在14g Sasol的Miglyol 812 Neutral油中。在环境温度 以500rpm速度磁力搅拌24小时。
一周后，将样品真空过滤并用庚烷洗涤。每个样品通过PXRD分析以确认所得到的 形式。在过滤后，得到300和350mg之间的无水形式D。实施例2将约3g(2R，3S)-3_叔丁氧基羰基氨基-2-羟基-3-苯基丙酸4-乙酰氧 基-2 α -苯甲酰氧基-5 β，20-环氧-1-羟基-7 β，10 β - 二甲氧基_9_氧代-11-紫杉 烯-13 α -基酯溶解在50mL乙醇+50mL pH 3. 5的聚山梨酯80的混合物中。将IOOmL水加 入到前述的混合物中并使整个混合物均勻化。在环境温度贮存48小时后，出现了无水形式 D的晶体。过滤回收，得到的结晶产物的量约为2. 45g。比较稳定性研究在丙酮溶剂化物形式A和无水形式D之间进行。在制备形式A和 D之后并且在将所述形式维持在40°C —个月之后，立即进行PXRD分析的比较，得到以下结 果-形式A部分去溶剂化,生成了丙酮溶剂化物形式A和无水形式B的混合物。-形式D在40°C维持一个月后检测不到变化。
权利要求
(2R，3S) 3 叔丁氧基羰基氨基 2 羟基 3 苯基丙酸4 乙酰氧基 2α 苯甲酰氧基 5β，20 环氧 1 羟基 7β，10β 二甲氧基 9 氧代 11 紫杉烯 13α 基酯的结晶形式，不包括丙酮化物的形式。
2.根据权利要求1的形式，其特征在于它们是(2R，3S)-3-叔丁氧基羰基氨基-2-羟 基-3-苯基丙酸4-乙酰氧基-2 a-苯甲酰氧基-5 β，20-环氧-1-羟基_7 β，10 β - 二甲 氧基-9-氧代-11-紫杉烯-13 α -基酯的无水形式。
3.根据权利要求2的(2R，3S)-3-叔丁氧基羰基氨基-2-羟基-3-苯基丙酸4-乙酰 氧基-2 α -苯甲酰氧基-5 β，20-环氧-1-羟基-7 β，10 β - 二甲氧基_9_氧代_11_紫杉 烯-13 α-基酯的无水形式B，其通过PXRD图表征显示了位于7. 3、8. 1、9. 8、10. 4、11. 1、 12. 7、13. 1、14. 3、15. 4 和 15. 9士0. 2° 2 θ 的特征峰。
4.根据权利要求2的(2R，3S)-3-叔丁氧基羰基氨基-2-羟基-3-苯基丙酸4-乙酰 氧基-2 α -苯甲酰氧基-5 β，20-环氧-1-羟基-7 β，10 β - 二甲氧基_9_氧代-11-紫 杉烯-13 α -基酯的无水形式C，其通过PXRD图表征显示了位于4. 3,6. 8,7. 4,8. 7,10. 1、11.1、11. 9、12. 3、12. 6 和 13. 1 士0. 2° 2 θ 的特征峰。
5.根据权利要求2的(2R，3S)-3-叔丁氧基羰基氨基-2-羟基-3-苯基丙酸4-乙酰 氧基-2 α -苯甲酰氧基-5 β，20-环氧-1-羟基-7 β，10 β -二甲氧基-9-氧代_11_紫杉 烯-13 α -基酯的无水形式D，其通过PXRD图表征显示了位于3. 9,7. 7,7. 8,7. 9,8. 6,9. 7、 10. 6、10. 8、11. 1 和 12. 3士0. 2° 2 θ 的特征峰。
6.根据权利要求2的(2R，3S)-3-叔丁氧基羰基氨基-2-羟基-3-苯基丙酸4-乙酰 氧基-2 α -苯甲酰氧基-5 β，20-环氧-1-羟基-7 β，10 β - 二甲氧基_9_氧代_11-紫杉 烯-13 α-基酯的无水形式Ε，其通过PXRD图表征显示了位于7. 1,8. 1、8. 9、10. 2、10. 8、12.5、12. 7、13. 2、13. 4 和 13. 9士0. 2° 2 θ 的特征峰。
7.根据权利要求2的(2R，3S)-3-叔丁氧基羰基氨基-2-羟基-3-苯基丙酸4-乙酰 氧基-2 α -苯甲酰氧基-5 β，20-环氧-1-羟基-7 β，10 β - 二甲氧基_9_氧代_11-紫杉 烯-13 α -基酯的无水形式F，其通过PXRD图表征显示了位于4. 4,7. 2,8. 2,8. 8,9. 6、10. 2、 10. 9、11. 2、12. 1 和 12. 3士0. 2° 2 θ 的特征峰。
8.根据权利要求1的形式，其特征在于它们为(2R，3S)-3-叔丁氧基羰基氨基-2-羟 基-3-苯基丙酸4-乙酰氧基_2 α-苯甲酰氧基-5 β，20-环氧-1-羟基-7 β，10 β-二甲 氧基-9-氧代-11-紫杉烯-13 α -基酯的乙醇化物或异溶剂化物形式。
9.根据权利要求8的(2R，3S)-3-叔丁氧基羰基氨基-2-羟基-3-苯基丙酸4-乙酰 氧基-2 α -苯甲酰氧基-5 β，20-环氧-1-羟基-7 β，10 β - 二甲氧基_9_氧代-11-紫 杉烯-13 α -基酯的乙醇化物形式B，其通过PXRD图表征显示了位于7. 3,7. 8,8. 8、10. 2、 12. 6、12. 9、13. 4、14. 2、14. 7 和 15. 1 士0. 2° 2 θ 的特征峰。
10.根据权利要求8的(2R，3S)-3-叔丁氧基羰基氨基-2-羟基-3-苯基丙酸4-乙酰 氧基-2 α -苯甲酰氧基-5 β，20-环氧-1-羟基-7 β，10 β - 二甲氧基_9_氧代_11-紫杉 烯-13 α -基酯的乙醇化物形式D，其通过PXRD图表征显示了位于3. 8,7. 5,7. 7,8. 4,9. 4、 10. 3、10. 5、11. 1、11. 5 和 11. 9士0. 2° 2 θ 的特征峰。
11.根据权利要求8的(2R，3S)-3-叔丁氧基羰基氨基-2-羟基-3-苯基丙酸4-乙 酰氧基-2 a-苯甲酰氧基-5 β，20-环氧-1-羟基-7 β，10 β - 二甲氧基_9_氧代_11-紫杉烯-13 α-基酯的乙醇化物形式E，其通过PXRD图表征显示了位于7. 1,8. 1、8.8、10. 2、10.7、12. 5、13. 2、13. 4、13. 9 和 14. 2士0. 2° 2 θ 的特征峰。
12.根据权利要求8的(2R，3S)-3-叔丁氧基羰基氨基_2_羟基-3-苯基丙酸4-乙酰 氧基-2 α -苯甲酰氧基-5 β，20-环氧-1-羟基-7 β，10 β - 二甲氧基_9_氧代_11-紫杉 烯-13 α -基酯的乙醇/水异溶剂化物形式F，其通过PXRD图表征显示了位于4. 4、7. 2、8. 2、 8. 3、8. 8、9. 6、10. 3、10. 9、11. 2 和 12. 2士0. 2° 2 θ 的特征峰。
13.根据权利要求1的形式，其特征在于它们为(2R，3S)-3-叔丁氧基羰基氨基-2-羟 基-3-苯基丙酸4-乙酰氧基-2 a-苯甲酰氧基-5 β，20-环氧-1-羟基_7 β，10 β - 二甲 氧基-9-氧代-11-紫杉烯-13 α -基酯的水合物的形式。
14.根据权利要求13的(2R，3S)-3-叔丁氧基羰基氨基_2_羟基-3-苯基丙酸4-乙酰 氧基-2 α -苯甲酰氧基-5 β，20-环氧-1-羟基-7 β，10 β - 二甲氧基_9_氧代_11_紫杉 烯-13 α -基酯的一水合物形式C，其通过PXRD图表征显示了位于4. 3、6. 8、7. 4、8. 6、10. 1、11.1、11. 9、12. 2、12. 6 和 13. 3士0. 2° 2 θ 的特征峰。
15.根据权利要求13的(2R，3S)-3-叔丁氧基羰基氨基-2-羟基-3-苯基丙酸4-乙酰 氧基-2 α -苯甲酰氧基-5 β，20-环氧-1-羟基-7 β，10 β - 二甲氧基_9_氧代_11_紫杉 烯-13 α -基酯的二水合物形式C，其通过PXRD图表征显示了位于4. 2,6. 9,7. 5,8. 4,9. 9、 10. 9、11. 7、12. 3、12. 6 和 13. 2士0. 2° 2 θ 的特征峰。
16.制备权利要求3的无水形式B的方法，所述方法如下进行在真空或氮气气氛下在 100和110°C之间的温度对丙酮溶剂化物形式A进行加热，优选地为加热至少9小时，然后 恢复到环境温度。
17.制备权利要求4的无水形式C的方法，所述方法如下进行在水中使丙酮溶剂化物 形式A或无水形式B熟化，接着在至多约50°C干燥，然后维持在环境温度和小于5%的相对 湿度。
18.制备权利要求5的无水形式D的方法，所述方法如下进行在环境温度且在乙醇中 使丙酮溶剂化物形式A熟化，并在氮气或真空干燥。
19.制备权利要求5的无水形式D的方法，所述方法如下进行在环境温度对丙酮溶剂 化物形式A从油中进行结晶化，接着用烷烃洗涤。
20.制备权利要求5的无水形式D的方法，所述方法如下进行在环境温度且在pH3.5 的聚山梨酯80、乙醇和水的混合物(优选为25/25/50的混合物)中对(2R，3S)-3-叔丁氧 基羰基氨基-2-羟基-3-苯基丙酸4-乙酰氧基-2a_苯甲酰氧基-5 β，20-环氧羟 基-7 β，10 β - 二甲氧基-9-氧代-11-紫杉烯-13 α -基酯的溶液进行结晶化约48小时。
21.制备权利要求6的无水形式E的方法，所述方法如下进行使丙酮溶剂化物形式A 在乙醇中熟化，形成乙醇化物形式中间体，所述乙醇化物形式中间体随后在氮气气氛下进 行去溶剂化；或对丙酮溶剂化物形式A在约100°C进行加热2小时然后恢复至环境温度。
22.制备权利要求7的无水形式F的方法，所述方法如下进行在120°C且在氮气气氛 下对乙醇/水异溶剂化物进行去溶剂化24小时，然后维持在0%的相对湿度和环境温度。
全文摘要
本发明涉及二甲氧基多西紫杉醇或4-乙酰氧基-2α-苯甲酰氧基-5β，20-环氧-1-羟基-7β，10β-二甲氧基-9-氧代-11-紫杉烯-13α-基醇的(2R，3S)-3-叔丁氧基羰基氨基-2-羟基-3-苯基丙酸酯的酸酐、溶剂化物和乙醇异溶剂化物和水合物的形式，以及它们的制备方法。
文档编号C07D305/14GK101918385SQ200980102389
公开日2010年12月15日 申请日期2009年1月15日 优先权日2008年1月17日
发明者亚历山大·吉利亚尼, 哈吉特·埃尔马利, 帕斯卡尔·比洛特, 帕特里夏·罗泰斯, 法布里斯·曼金, 莱昂内尔·扎斯克, 马里尔·杜夫雷格尼 申请人:安万特医药股份有限公司