本发明涉及中药制剂领域，具体涉及一种抗肿瘤虎杖复方制剂及其制备方法。
背景技术：
肿瘤是一种常见病、多发病，是机体在各种致瘤因素作用下，局部组织的细胞在基因水平上失掉了对其生长的正常调控，导致异常增生而形成的新生物。中药抗肿瘤是一条有效的途径，传统中医药对肿瘤的治疗作用逐渐成为抗肿瘤研究的热点，并取得了较大进步。
中药虎杖为蓼科植物虎杖的干燥根和根茎，主要产于江西、四川、江苏、山东等地，其性微寒、味微苦，归肝、胆、肺经，具有清热解毒、化痰止咳、利湿退黄、散瘀止痛的功效。虎杖中主要含有蒽醌、二苯乙烯类化合物等多种成分，其中蒽醌类衍生物，以游离型为主，有大黄素、大黄素甲醚、大黄酚等成分，具有抗菌、保肝、泻下、抗癌等功能；而二苯乙烯类化合物主要包括白藜芦醇以及虎杖苷(白藜芦醇苷)，具有抗肿瘤、降血脂、抑制血小板聚集、调节脂蛋白代谢、保肝、抗氧化、抑菌等多种药理作用。
技术实现要素：
为解决上述问题，本发明提供了一种抗肿瘤虎杖复方制剂及其制备方法，具有解毒散结、活血祛瘀、益气养阴，杀伤癌细胞、抑制癌细胞生长、控制病情发展、提高免疫功能、预防肿瘤的作用。该药大多采用天然成分、服用安全，无明显副作用，经多年临床观察未见病人有不良反应，适合患者长期服用。
为实现上述目的，本发明采取的技术方案为：
一种抗肿瘤虎杖复方制剂，由以下重量份的原料制备而成：
虎杖提取物30-50份、硒麦芽粉10-20份、蚕蛹蛋白粉5-10份、金樱子5-10份、葛仙米发酵粉5-10份、山核桃树皮5-10份、橄榄叶提取物10-15份、黄药子5-10份、螺旋藻冻干粉5-10份、甜菜根提取物10-15份、血橙提取物10-15份、莪术6-10份、三尖杉提取物15-20份、刺五加10-20份、黄芪10-20份、蛇麻草7-13份、缬草5-10份。
其中，所述虎杖提取物通过以下步骤制备所得：
s1、将洗净的虎杖根茎和根切块后，加入3-8倍水，按质量百分比为2-3％的比例加入纤维素酶，按质量百分比为1-2％加入β-葡萄糖苷酶，30-50℃下酶解1-2h，过滤，得酶解液；
s2、在所得的酶解液中加入6-10倍体积的90％乙醇溶液，处理1-3分钟，固液分离后，回收乙醇溶液，浓缩，使得提取物呈稠膏状，再用水饱和正丁醇对提取物萃取3次，回收溶剂后，冷冻干燥，得虎杖提取物。
其中，所述蚕蛹蛋白粉通过以下步骤制备所得：
s1、将洗净沥干后的蚕蛹送入蒸汽触蒸，蒸汽触蒸分为三个阶段，第一阶段保持压力为6-9mpa、温度65-95摄氏度、时间5-6小时，第二阶段保持压力为9-11mpa、温度95-115摄氏度、时间10-12小时，第三阶段保持压力为3-5mpa、温度70-90摄氏度、时间7-8小时；
s2、将蒸汽触蒸完成的蚕蛹经超临界二氧化碳萃取脱脂，得到脱脂蛹蛋白；
s3、调入乙醇进行梯度搅拌洗涤，洗涤后上层高位抽出乙醇洗液及蛹皮层，回收乙醇，下层离心得到蚕蛹浓缩蛋白；
s4、按蚕蛹浓缩蛋白质量百分比为0.5-2％的比例加入中性蛋白酶，30-50℃下酶解0.5-2h，过滤，得酶解液；
s5、将所得的酶解液迅速冷冻后再自然解冻，使酶解液中的淀粉老化沉淀；收集上清液，剩余部分离心，收集离心液体合并于上清液中；
s6、加入2-3倍体积的复合酸溶液，连接臭氧发生器臭氧处理去腥，然后减压汽提浓缩去除酸和腥臭味，冷冻干燥，得蚕蛹蛋白粉。
其中，所述葛仙米发酵粉通过以下步骤制备所得：
取洗净沥干后的葛仙米置于汽爆罐内，先通入氮气至汽爆罐内压力为0.7-1.5mpa，爆破处理7-23min；然后迅速通入蒸汽至汽爆罐内压力为1.5-2.1mpa，蒸汽爆破处理0.8-2.8min后，按照接种量1.5-1.7％的比例接种微生物发酵剂，保持温度25-35℃，发酵48-54小时后，高温灭菌，喷雾干燥，得葛仙米发酵粉。
其中，所述微生物发酵剂由纳豆菌、酵素菌、谷氨酸棒杆菌按质量比3:2:1混合所得。
其中，所述橄榄叶提取物通过以下步骤制备所得：
取橄榄叶清洗后冷冻干燥，打碎，解冻后室温浓缩至相对密度1.10-1.20，喷雾干燥浓缩液后，进行co2超临界萃取，流体萃取压力为30-50mpa，萃取温度30-40℃，co2流体流量为750-850l/h，萃取时间为3-5h，得橄榄叶提取物。
其中，所述螺旋藻冻干粉通过以下步骤制备所得：
将洗净的螺旋藻经超声破碎处理后置于高压釜中，加入粉体2-3倍的水，通入氮气至高压釜内压力为0.7-1.5mpa，处理8-25min；然后迅速通入蒸汽至高压釜内压力为1.5-2.5mpa，冷冻干燥，得螺旋藻冻干粉。
本发明还提供了上述一种抗肿瘤虎杖复方制剂的制备方法，包括如下步骤：
s1、按上述的配方称取各组分；
s2、将称取的金樱子、山核桃树皮、黄药子、莪术、刺五加、黄芪、蛇麻草、缬草用闪式提取器处理，所得提取液先用武火加热，沸腾后用文火加热1-1.5h，过滤浓缩至1.5g/ml，缓慢加入90-100％乙醇，直至乙醇浓度为55-65％，冷藏8-9小时，2000-4000r/min离心15-25min后倒去上清液，沉淀用去离子水溶解至原体积，用乙醇沉淀2次，乙醇浓度分别为65-75％、75-85％；沉淀用去离子水溶解至原体积，加入1/6-1/5体积10-12％的三氯乙酸溶液，充分混匀后静置4-6h，2000-4000r/min离心15-25min后去沉淀得上清液，将所得上清液抽滤，得提取物；
s3、将所得提取物与虎杖提取物、硒麦芽粉、蚕蛹蛋白粉、葛仙米发酵粉、橄榄叶提取物、螺旋藻冻干粉、甜菜根提取物、血橙提取物和三尖杉提取物混合搅拌均匀后，冷冻干燥，灭菌，按规格装袋，即得制剂。
本发明具有以下有益效果：
通过以自制的虎杖提取物为主药，协同硒麦芽粉、蚕蛹蛋白粉、葛仙米发酵粉、橄榄叶提取物等的作用，具有解毒散结、活血祛瘀、益气养阴，杀伤癌细胞、抑制癌细胞生长、控制病情发展、提高免疫功能、预防肿瘤的作用。该药大多采用天然成分、服用安全，无明显副作用，经多年临床观察未见病人有不良反应，适合患者长期服用。
具体实施方式
为了使本发明的目的及优点更加清楚明白，以下结合实施例对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。
以下实施例中所使用的虎杖提取物通过以下步骤制备所得：
s1、将洗净的虎杖根茎和根切块后，加入3-8倍水，按质量百分比为2-3％的比例加入纤维素酶，按质量百分比为1-2％加入β-葡萄糖苷酶，30-50℃下酶解1-2h，过滤，得酶解液；
s2、在所得的酶解液中加入6-10倍体积的90％乙醇溶液，处理1-3分钟，固液分离后，回收乙醇溶液，浓缩，使得提取物呈稠膏状，再用水饱和正丁醇对提取物萃取3次，回收溶剂后，冷冻干燥，得虎杖提取物。
所使用的蚕蛹蛋白粉通过以下步骤制备所得：
s1、将洗净沥干后的蚕蛹送入蒸汽触蒸，蒸汽触蒸分为三个阶段，第一阶段保持压力为6-9mpa、温度65-95摄氏度、时间5-6小时，第二阶段保持压力为9-11mpa、温度95-115摄氏度、时间10-12小时，第三阶段保持压力为3-5mpa、温度70-90摄氏度、时间7-8小时；
s2、将蒸汽触蒸完成的蚕蛹经超临界二氧化碳萃取脱脂，得到脱脂蛹蛋白；
s3、调入乙醇进行梯度搅拌洗涤，洗涤后上层高位抽出乙醇洗液及蛹皮层，回收乙醇，下层离心得到蚕蛹浓缩蛋白；
s4、按蚕蛹浓缩蛋白质量百分比为0.5-2％的比例加入中性蛋白酶，30-50℃下酶解0.5-2h，过滤，得酶解液；
s5、将所得的酶解液迅速冷冻后再自然解冻，使酶解液中的淀粉老化沉淀；收集上清液，剩余部分离心，收集离心液体合并于上清液中；
s6、加入2-3倍体积的复合酸溶液，连接臭氧发生器臭氧处理去腥，然后减压汽提浓缩去除酸和腥臭味，冷冻干燥，得蚕蛹蛋白粉。
所使用的葛仙米发酵粉通过以下步骤制备所得：
取洗净沥干后的葛仙米置于汽爆罐内，先通入氮气至汽爆罐内压力为0.7-1.5mpa，爆破处理7-23min；然后迅速通入蒸汽至汽爆罐内压力为1.5-2.1mpa，蒸汽爆破处理0.8-2.8min后，按照接种量1.5-1.7％的比例接种微生物发酵剂，保持温度25-35℃，发酵48-54小时后，高温灭菌，喷雾干燥，得葛仙米发酵粉。
所使用的微生物发酵剂由纳豆菌、酵素菌、谷氨酸棒杆菌按质量比3:2:1混合所得。
所使用的橄榄叶提取物通过以下步骤制备所得：
取橄榄叶清洗后冷冻干燥，打碎，解冻后室温浓缩至相对密度1.10-1.20，喷雾干燥浓缩液后，进行co2超临界萃取，流体萃取压力为30-50mpa，萃取温度30-40℃，co2流体流量为750-850l/h，萃取时间为3-5h，得橄榄叶提取物。
所使用的螺旋藻冻干粉通过以下步骤制备所得：
将洗净的螺旋藻经超声破碎处理后置于高压釜中，加入粉体2-3倍的水，通入氮气至高压釜内压力为0.7-1.5mpa，处理8-25min；然后迅速通入蒸汽至高压釜内压力为1.5-2.5mpa，冷冻干燥，得螺旋藻冻干粉。
实施例1
一种抗肿瘤虎杖复方制剂的制备方法，包括如下步骤：
s1、按重量份称取：虎杖提取物30份、硒麦芽粉10份、蚕蛹蛋白粉5份、金樱子5份、葛仙米发酵粉5份、山核桃树皮5份、橄榄叶提取物10份、黄药子5份、螺旋藻冻干粉5份、甜菜根提取物10份、血橙提取物10份、莪术6份、三尖杉提取物15份、刺五加10份、黄芪10份、蛇麻草7份、缬草5份；
s2、将称取的金樱子、山核桃树皮、黄药子、莪术、刺五加、黄芪、蛇麻草、缬草用闪式提取器处理，所得提取液先用武火加热，沸腾后用文火加热1-1.5h，过滤浓缩至1.5g/ml，缓慢加入90-100％乙醇，直至乙醇浓度为55-65％，冷藏8-9小时，2000-4000r/min离心15-25min后倒去上清液，沉淀用去离子水溶解至原体积，用乙醇沉淀2次，乙醇浓度分别为65-75％、75-85％；沉淀用去离子水溶解至原体积，加入1/6-1/5体积10-12％的三氯乙酸溶液，充分混匀后静置4-6h，2000-4000r/min离心15-25min后去沉淀得上清液，将所得上清液抽滤，得提取物；
s3、将所得提取物与虎杖提取物、硒麦芽粉、蚕蛹蛋白粉、葛仙米发酵粉、橄榄叶提取物、螺旋藻冻干粉、甜菜根提取物、血橙提取物和三尖杉提取物混合搅拌均匀后，冷冻干燥，灭菌，按规格装袋，即得制剂。
实施例2
一种抗肿瘤虎杖复方制剂的制备方法，包括如下步骤：
s1、按重量份称取：虎杖提取物50份、硒麦芽粉20份、蚕蛹蛋白粉10份、金樱子10份、葛仙米发酵粉10份、山核桃树皮10份、橄榄叶提取物15份、黄药子10份、螺旋藻冻干粉10份、甜菜根提取物15份、血橙提取物15份、莪术10份、三尖杉提取物20份、刺五加20份、黄芪20份、蛇麻草13份、缬草10份；
s2、将称取的金樱子、山核桃树皮、黄药子、莪术、刺五加、黄芪、蛇麻草、缬草用闪式提取器处理，所得提取液先用武火加热，沸腾后用文火加热1-1.5h，过滤浓缩至1.5g/ml，缓慢加入90-100％乙醇，直至乙醇浓度为55-65％，冷藏8-9小时，2000-4000r/min离心15-25min后倒去上清液，沉淀用去离子水溶解至原体积，用乙醇沉淀2次，乙醇浓度分别为65-75％、75-85％；沉淀用去离子水溶解至原体积，加入1/6-1/5体积10-12％的三氯乙酸溶液，充分混匀后静置4-6h，2000-4000r/min离心15-25min后去沉淀得上清液，将所得上清液抽滤，得提取物；
s3、将所得提取物与虎杖提取物、硒麦芽粉、蚕蛹蛋白粉、葛仙米发酵粉、橄榄叶提取物、螺旋藻冻干粉、甜菜根提取物、血橙提取物和三尖杉提取物混合搅拌均匀后，冷冻干燥，灭菌，按规格装袋，即得制剂。
实施例3
一种抗肿瘤虎杖复方制剂的制备方法，包括如下步骤：
s1、按重量份称取：虎杖提取物40份、硒麦芽粉15份、蚕蛹蛋白粉7.5份、金樱子7.5份、葛仙米发酵粉7.5份、山核桃树皮7.5份、橄榄叶提取物12.5份、黄药子7.5份、螺旋藻冻干粉7.5份、甜菜根提取物7.5份、血橙提取物12.5份、莪术8份、三尖杉提取物17.5份、刺五加15份、黄芪15份、蛇麻草10份、缬草7.5份；
s2、将称取的金樱子、山核桃树皮、黄药子、莪术、刺五加、黄芪、蛇麻草、缬草用闪式提取器处理，所得提取液先用武火加热，沸腾后用文火加热1-1.5h，过滤浓缩至1.5g/ml，缓慢加入90-100％乙醇，直至乙醇浓度为55-65％，冷藏8-9小时，2000-4000r/min离心15-25min后倒去上清液，沉淀用去离子水溶解至原体积，用乙醇沉淀2次，乙醇浓度分别为65-75％、75-85％；沉淀用去离子水溶解至原体积，加入1/6-1/5体积10-12％的三氯乙酸溶液，充分混匀后静置4-6h，2000-4000r/min离心15-25min后去沉淀得上清液，将所得上清液抽滤，得提取物；
s3、将所得提取物与虎杖提取物、硒麦芽粉、蚕蛹蛋白粉、葛仙米发酵粉、橄榄叶提取物、螺旋藻冻干粉、甜菜根提取物、血橙提取物和三尖杉提取物混合搅拌均匀后，冷冻干燥，灭菌，按规格装袋，即得制剂
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以作出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。