一种全灵芝孢子粉去壁微丸的制作方法

文档序号：11239964阅读：1080来源：国知局

本发明涉及一种全灵芝孢子粉去壁微丸以及制备其的方法，属于医药领域。

背景技术：

灵芝孢子粉是灵芝的精华，含丰富的生物活性成分，具有重要的药用保健功能。灵芝孢子粉发挥功效的主要成分是灵芝多糖和灵芝三萜等一系列生物活性物质，这些活性物质包裹在坚硬的孢子壁内，只有将灵芝孢子破壁，有效成分才能释放利用。根据现代分离提取技术，灵芝孢子粉内不同特性的活性物质需要通过不同的提取溶剂萃取出，如通过食品级液态二氧化碳萃取灵芝孢子油，可将不饱和脂肪酸、灵芝三萜等活性成分萃取出来，乙醇萃取可以将三萜类、以及极性中等的活性物质萃取出，热水浸提则主要萃取灵芝的多糖类、多肽类、氨基酸等物质。以上三类物质基本代表了孢子粉包含的所有功效物质，所占比例约为孢子粉的50-60％，剩下40-50％均是不可利用的灵芝孢子壁。

目前灵芝孢子粉利用方面存在下述两大方面问题：

一、传统的灵芝孢子粉通常是破壁之后直接分装成小袋或填充胶囊后使用，其存在的缺陷有：

1，服用1份孢子粉产品，其重量一半是无功效的孢子壁，真正吸收的有效成分仅有一半，吸收利用率低；

2，破壁后孢子粉油性加大，物料发粘，导致包装困难，实际生产中通常需要降低破壁率来减少油分的渗出，或添加辅料如微晶纤维素、淀粉等来提高流动性，孢子粉品质大打折扣；

3，在服用方式上，若直接服用孢子粉，孢子粉具有的特殊口感让一部分人难以接受，且直接服用对胃具有一定刺激性，胃酸对孢子粉还具一定破坏性，影响吸收利用；若直接吞服胶囊，虽然解决了口感的问题，但长期摄入胶囊会增加身体额外的负担。

二、除传统的破壁灵芝孢子粉，为提高孢子粉的利用效率，实际生产经营中还有一些孢子粉深加工产品，常见的是灵芝孢子粉水提取物和灵芝孢子油。孢子粉水提取物主要代表的是灵芝孢子粉中水溶性的活性成分，如多糖、多肽、氨基酸等；灵芝孢子油则包含的是灵芝孢子中脂溶性的功效成分，如亚油酸、亚麻酸、部分三萜等，这些产品均只是片面地利用了孢子粉的功效成分。要想完整地吸收利用孢子粉的全部功效成分，则需要多样产品一起服用。然而，鉴于孢子粉水提取物、孢子油及其他提取物的物性不同，若只是简单地混合，膏状的混合物对于灌装、储运、服用均是个难题、而且极易腐败变质，还需要通过添加防腐剂等成分延长保质期。目前，还没出现可以将孢子粉中所有有效成分高效提取、且融合成一个具备兼具储运方便、服用简单、高效保质、且利用率高的剂型和产品。

最近，一些商家打出了“去壁孢子粉”概念的孢子粉产品，但仔细研究发现，其本质只是将孢子粉的水提取物干燥后的粉末作为“去壁”孢子粉，其提取率一般在20％左右，孢子粉中还剩余30-40％的活性物质没有被利用，因此，并不是真正意义上的去壁灵芝孢子粉。

因此，本发明的目的在于制备一款真正意义上的灵芝孢子粉去壁产品，且剂型优良、存储便利、服用方便，孢子粉的利用率高。

技术实现要素：

为克服现有技术的不足，本发明的目的是提供一种既能包含灵芝孢子粉全部功效成分，又兼具多重优点的全灵芝孢子粉去壁微丸及其制备方法。所制微丸完整保留了孢子粉的全部功效成分，且包装方便，利于服用，携带方便，不被胃酸破坏，吸收利用率大幅提高，整个制备工艺简单易操作。微丸还可通过调节灵芝孢子提取物和灵芝孢子油的质量配比，制成富含多糖、富含三萜等强化型孢子粉去壁系列产品。

本发明的技术方案是：将灵芝孢子粉先后用食品级液态二氧化碳、95％、75％、50％浓度乙醇、水提取，提取物按比例混合均匀后，与0.5％-5重量％的海藻酸钠溶液混合均匀，滴入0.5-5重量％的氯化钙水溶液中，形成海藻酸钙微球；形成的微球浸泡1-240分钟后取出，纯净水清洗干净后干燥，即得到全灵芝孢子粉去壁微丸。

海藻酸钠，是从海带、巨藻中提取的天然高分子化合物，具有很好的生物粘附性以及相容性，广泛应用于食品、医药、日化等行业。海藻酸钠携带阴离子，可以与二价阳离子如钙离子、锌离子等反应生产不溶性的海藻酸凝胶微丸，整个反应条件温和，非常适宜于大分子生物活性物质的吸附和包埋。形成的海藻酸凝胶微丸，在碱中溶胀，而在水及酸中不溶胀，因此可以避免活性物质被酸解破坏、减少某些成分对胃部的刺激，同时还可实现活性成分的包裹、传递和缓释，提高吸收利用率。

具体而言，本发明提供一种制备全灵芝孢子粉去壁微丸的配方及其方法。所述全灵芝孢子粉去壁微丸的活性成分为包埋在微丸壳内的灵芝孢子粉的二氧化碳萃取物、乙醇提取物和水提取物，其中所述二氧化碳萃取物、乙醇提取物以及水提取物的重量比例为3-4∶1∶3-4。其中所述微丸壳由海藻酸凝胶形成。并且，所述全灵芝孢子粉去壁微丸通过包括下述步骤的方法制备：

(1)在25-45℃，25-35mpa条件下，用食品级液态二氧化碳萃取灵芝孢子粉，收集获得二氧化碳萃取物(即孢子油)，分离得到滤渣1；

(2)将滤渣1分别用1-15倍重量的95％乙醇、75％乙醇、50％乙醇在60℃先后萃取1-5小时，收集获得乙醇提取物，分离得到滤渣2；

(3)将滤渣2最后用1-20倍重量的热水在100℃萃取1-4小时，收集获得热水提取物；

(4)将步骤(1)-(3)的萃取产物和提取物合并，与0.5％-5重量％的黏度为20-800cps的海藻酸钠水溶液混合，一边搅拌一边以液滴的形式，滴到0.5-5重量％的氯化钙水溶液中，形成球形微丸，所形成的球形微丸在0.5-5重量％的氯化钙水溶液中浸泡1-240分钟后，取出，在蒸馏水中清洗干净后，干燥，得到全灵芝孢子粉去壁微丸。

以上步骤(1)-(3)先后进行，保证了孢子粉中所有活性物质根据极性从低到高的顺序被充分萃取出来，将步骤(1)-(3)的萃取物质合并，即代表孢子粉除孢子外壳后的所有有效成分，在此称为“全灵芝孢子粉提取物”。根据孢子粉中二氧化碳萃取物、乙醇提取物以及水提取物的含量比例，也可直接取提前制备好的三种提取物，按3-4∶1∶3-4的比例配比后制备成“全灵芝孢子粉提取物”，以此还原孢子粉中功效物质的天然比例。其中，步骤(1)得到的二氧化碳萃取物为孢子油，步骤(3)的孢子粉热水提取物在本发明中也称为“孢子粉水提取物”。为了与步骤(1)得到的“孢子油”区分，以下将步骤(2)和(3)的孢子粉乙醇提取物和水提取物合称为孢子粉提取物。换言之，在本说明书中，术语“孢子粉提取物”是指通过上述步骤(2)和(3)得到的乙醇提取物和水提取物的混合物；术语“全灵芝孢子粉提取物”是指通过上述步骤(1)(2)(3)得到的孢子油(即，二氧化碳萃取物)、乙醇提取物和水提取物的混合物。

在步骤(4)中，取黏度为20-800cps的海藻酸钠，用蒸馏水溶解成浓度为0.5％-5重量％的海藻酸钠水溶液。海藻酸钠具有与二价阳离子发生凝胶反应的能力，当混合有海藻酸钠的全灵芝孢子粉提取物与氯化钙接触后，迅速在表面形成网状结构的凝胶网络，将全灵芝孢子粉提取物包括在凝胶微丸壳内。

在本发明的制备方法中，对步骤(4)中使用的海藻酸钠没有特别的限定，只要其是黏度满足所限定的范围，并且是食品级或药用级的海藻酸钠即可，并且在室温条件下(例如，20-30℃)使用。一般地，所用的海藻酸钠在室温的黏度可以为200、400或600cps。

在一个优选的实施方案中，步骤(4)中使用的海藻酸钠的黏度为200cps，所用的海藻酸钠水溶液的浓度为0.5或1重量％。

在一个优选的实施方案中，步骤(4)中使用的海藻酸钠的黏度为400cps，所用的海藻酸钠水溶液的浓度为0.5重量％。

在一个优选的实施方案中，步骤(4)中使用的海藻酸钠的黏度为600cps，所用的海藻酸钠水溶液的浓度为1重量％。

步骤(1)-(3)中的孢子油、孢子粉乙醇提取物和水提取物可以按照本领域的常规方法制备。另外，本发明人发现按以下制备方法可以得到提取率较高的孢子油、孢子粉乙醇提取物或水提取物：

更具体地，孢子油的制备方法(即，用液态二氧化碳萃取孢子粉的方法)如下：

1.将破壁灵芝孢子粉放入萃取釜中；

2.泵入液态二氧化碳，保持萃取釜温度40℃，压力28mpa萃取；

3.调节分离室1的温度40℃，压力8mpa，分离室2的温度40℃，压力5mpa；

4.萃取3.5小时，收集萃取出的孢子油，分离残渣1。

孢子粉乙醇提取物的制备方法如下：

1.将以上液态二氧化碳萃取孢子油后残余的破壁灵芝孢子粉残渣1放入提取容器中；

2.加10倍重量的95％乙醇，60℃条件下萃取2小时，过滤；

3.残渣继续用10倍重量的75％乙醇，60℃条件下萃取2小时，过滤；

4.残渣继续用10倍重量的50％乙醇，60℃条件下萃取2小时，过滤；

5.合并3次滤液，浓缩，干燥，粉碎后获得孢子粉乙醇提取物，同时分离残渣2。

孢子粉热水提取物的制备方法如下：

1.将以上乙醇萃取孢子粉后的破壁孢子粉残渣2放入提取容器中；

2.加10倍重量的蒸馏水，100℃条件下萃取2小时，过滤；

3.残渣继续用10倍重量的蒸馏水，100℃条件下萃取2小时，过滤；

4.合并2次滤液，浓缩，干燥，粉碎后获得孢子粉热水提取物(在本发明中也称为“孢子粉水提取物”)。

将以上三种萃取方法制备的所有萃取物混合均匀，即代表了孢子粉内包含的所有有效成分，在此称为“全灵芝孢子粉提取物”，剩余的残渣即孢子粉壁。

在一个优选的实施方案中，步骤(4)中孢子粉乙醇提取物、水提取物和孢子油的混合物与海藻酸钠溶液的重量比例在1∶1至1∶10的范围内，例如，可以为1∶1.5、1∶2、1∶3、1∶10等。

在一个优选的实施方案中，步骤(4)中使用的氯化钙水溶液的浓度可以为1重量％、2重量％、3重量％、或4重量％。球形微丸在氯化钙水溶液中浸泡的时间可以为30分钟、60分钟、120分钟或200分钟。

另外，本领域技术人员应该理解，还可以在制备过程中通过调节各提取物质量配比，以制成富含多糖、或富含三萜的强化型孢子粉去壁系列产品。当二氧化碳萃取物、乙醇提取物以及水提取物按3-4∶1∶3-4的重量比例配比时，基本上能够还原天然灵芝孢子的成分状态，同时这样的混合物去除了孢子壁，有利于吸收利用。灵芝孢子粉水提取物富含灵芝多糖，灵芝孢子粉乙醇提取物富含灵芝三萜类化合物，当增加灵芝孢子粉水提取物的添加比例，可以配制得到富含多糖的强化型孢子粉去壁系列产品；当增加灵芝孢子粉醇提取物的添加比例，可以配制得到富含三萜的强化型孢子粉去壁系列产品。同时，本领域技术人员应该理解，当灵芝孢子油的质量分数增加时，灵芝孢子粉提取物和灵芝孢子油的混合物成丸性降低，不利于微丸成型。本发明对灵芝孢子粉提取物和灵芝孢子油的质量配比没有特别限定，本领域技术人员能够根据应用的需要，合理调节灵芝孢子粉提取物和灵芝孢子油的质量配比。但优选地，以基本上还原天然灵芝孢子的成分状态的二氧化碳萃取物∶乙醇提取物∶水提取物为3-4∶1∶3-4(重量比)进行配制，这样得到的去壁微丸产品的生物利用度提高。例如，在本发明的全灵芝孢子粉去壁微丸中，包埋在微丸壳内的活性成分中二氧化碳萃取物(即灵芝孢子油)∶乙醇提取物∶水提取物(重量比)可以为3.6∶1∶3.6，3.5∶1∶3.8，4∶1∶3.3等。本领域技术人员可以在3-4∶1∶3-4的重量比例范围内对二氧化碳萃取物(即灵芝孢子油)、乙醇提取物：和水提取物的含量进行合理调整。并且，本领域技术人员能够理解，在制备富含多糖、或富含三萜的强化型孢子粉去壁系列产品时，包埋在微丸壳内的活性成分中二氧化碳萃取物(即灵芝孢子油)∶乙醇提取物∶水提取物(重量比)不受上述限制，可以为3.6∶1∶12，1∶2.5∶1等，并且本领域技术人员可以根据实际产品需要对上述重量比例进行适当的调整。

综上所述，本发明提供下述技术方案：

1.一种全灵芝孢子粉去壁微丸，其活性成分为包埋在微丸壳内的灵芝孢子粉的二氧化碳萃取物(即灵芝孢子油)、乙醇提取物和水提取物，其中所述二氧化碳萃取物、乙醇提取物以及水提取物的重量比例为3-4∶1∶3-4。

2.根据第1项所述的全灵芝孢子粉去壁微丸，其由包括下述步骤的方法制备：：

(1)在25-45℃，25-35mpa，用食品级液态二氧化碳萃取灵芝孢子粉，收集获得的二氧化碳萃取物，该二氧化碳萃取物为孢子油，分离得到滤渣1；

(2)将滤渣1分别用1-15倍重量的95％乙醇、75％乙醇、50％乙醇在60℃先后萃取1-5小时，收集获得乙醇提取物，分离得到滤渣2；

(3)将滤渣2最后用1-20倍重量的热水在100℃萃取1-4小时，收集获得热水提取物；

3.根据第2项所述的全灵芝孢子粉去壁微丸，其中步骤(4)中，合并后的步骤(1)-(3)的产物混合物与海藻酸钠水溶液的重量比为1∶1至1∶10。

4.根据第2项所述的全灵芝孢子粉去壁微丸，其中步骤(4)中，合并后的步骤(1)-(3)的萃取产物与海藻酸钠水溶液的重量比为1∶1.5、1∶2、1∶3或1∶10。

5.根据第2项所述的全灵芝孢子粉去壁微丸，其中步骤(4)中所用的海藻酸钠在室温的黏度为200、400或600cps。

6.根据第2项所述的全灵芝孢子粉去壁微丸，其中步骤(4)中使用的海藻酸钠水溶液的浓度为0.5重量％或1重量％。

7.根据第2项所述的全灵芝孢子粉去壁微丸，其中步骤(4)中使用的海藻酸钠的黏度为200cps，所用的海藻酸钠水溶液的浓度为0.5或1重量％。

8.根据第2项所述的全灵芝孢子粉去壁微丸，其中步骤(4)中使用的海藻酸钠的黏度为400cps，所用的海藻酸钠水溶液的浓度为0.5重量％。

9.根据第2项所述的全灵芝孢子粉去壁微丸，其中步骤(4)中使用的海藻酸钠的黏度为600cps，所用的海藻酸钠水溶液的浓度为1重量％。

10.根据第2项所述的全灵芝孢子粉去壁微丸，其中步骤(4)中使用的氯化钙水溶液的浓度为1重量％、2重量％、3重量％或4重量％，并且所述球形微丸在氯化钙水溶液中浸泡的时间为30分钟、60分钟、120分钟或200分钟。

11.根据第2项所述的全灵芝孢子粉去壁微丸，其呈球形或近球形，直径为2.9-3.3mm。

12.根据第2项所述的全灵芝孢子粉去壁微丸，其在胃液中保持原状，在肠液中2-3小时后溶胀直至崩解。

13.根据第2项所述的全灵芝孢子粉去壁微丸，其中孢子粉利用率为95％以上。

14.根据第2项所述的全灵芝孢子粉去壁微丸，其中包埋在微丸壳内的活性成分中二氧化碳萃取物(即灵芝孢子油)∶乙醇提取物∶水提取物(重量比)为3.6∶1∶3.6。

15.根据第2项所述的全灵芝孢子粉去壁微丸，其中包埋在微丸壳内的活性成分中二氧化碳萃取物(即灵芝孢子油)∶乙醇提取物∶水提取物(重量比)为3.5∶1∶3.8。

16.根据第2项所述的全灵芝孢子粉去壁微丸，其中包埋在微丸壳内的活性成分中二氧化碳萃取物(即灵芝孢子油)∶乙醇提取物∶水提取物(重量比)为4∶1∶3.3。

本发明的有益效果是：

1.本发明的方法在真正意义上实现孢子粉去壁，将孢子粉中所有功效物质完整保留并集中于一个剂型，摒弃无用孢子壁。功效物质比例由50％左右提高到95％以上(含微量海藻酸钙)，解决了普通孢子粉功效物质利用率低的问题；

2.在孢子粉的等效利用上，服用本发明去壁微丸约1g即可达到服用2g孢子粉的效果，服用量减半；

3.灵芝孢子油包埋于微丸内，解决了普通破壁孢子粉中孢子油外渗导致的氧化变质的问题；

4.所制微丸物理韧性好，流动性佳，解决了破壁孢子粉孢子油渗出引起的物料发粘、不易包装的问题；

5.微丸易于吞服，解决了口服粉末引起的口感差问题；

6.所制备微丸对孢子粉来源的活性物质承载能力强，微丸在模拟的人工胃液中稳定、肠液中崩解释放，解决了普通破壁孢子粉存在的胃刺激及被胃液分解的问题。

除还原孢子粉原有比例的功效成分，还可以通过调节各提取物的比例，制备成富多糖、富三萜等的强化型灵芝孢子粉去壁微丸制剂。

附图说明

从下面结合附图的详细描述中，本发明的上述特征和优点将更明显，其中：

图1显示本发明实施例2制备的去壁微丸在模拟胃液的0.1mol/l盐酸溶液(hcl，ph1.0)(a)和模拟肠液的磷酸盐缓冲液(pbs，ph7.4)(b)中溶胀3小时的照片。

图2显示本发明实施例2制备的去壁微丸在模拟胃液的0.1mol/l盐酸溶液(hcl，ph1.0)(a)和模拟肠液的磷酸盐缓冲液(pbs，ph7.4)(b)中溶胀12小时的照片。

图3显示本发明实施例2制备的去壁微丸在不同介质中的溶胀率曲线(溶胀后微球外径与溶胀前干燥微球外径比值，100％)。

具体实施方式

下面参照具体的实施例进一步描述本发明，但是本领域技术人员应该理解，本发明并不限于这些具体的实施例。

实施例1.灵芝孢子粉提取物和孢子油的制备

用于本发明的灵芝孢子粉提取物和孢子油可以按照本领域的常规方法制备，通常选取提取率为15-20％以上的孢子油，5％以上的乙醇提取物，15-20％以上的水提取物用于本发明。如果没有特殊说明，孢子粉的“醇提取物”一般是指孢子粉的乙醇提取物。

另外，本发明人发现按以下制备方法可以得到提取率较高的孢子油、孢子粉醇提取物或水提取物：

孢子油的制备方法(即，用液态二氧化碳萃取孢子粉的方法)如下：

1.将破壁灵芝孢子粉放入萃取釜中；

2.泵入液态二氧化碳，保持萃取釜温度40℃，压力28mpa萃取；

3.调节分离室1的温度40℃，压力8mpa，分离室2的温度40℃，压力5mpa；

4.萃取3.5小时，收集萃取出的孢子油，分离残渣1。

孢子粉乙醇提取物的制备方法如下：

1.将以上液态二氧化碳萃取孢子油后残余的破壁灵芝孢子粉残渣1放入提取容器中；

2.加10倍重量的95％乙醇，60℃条件下萃取2小时，过滤；

3.残渣继续用10倍重量的75％乙醇，60℃条件下萃取2小时，过滤；

4.残渣继续用10倍重量的50％乙醇，60℃条件下萃取2小时，过滤；

5.合并3次滤液，浓缩，干燥，粉碎后获得孢子粉乙醇提取物，同时分离残渣2。

孢子粉热水提取物的制备方法如下：

1.将以上乙醇萃取孢子粉后的破壁孢子粉残渣2放入提取容器中；

2.加10倍重量蒸馏水，100℃条件下萃取2小时，过滤；

3.残渣继续用10倍重量蒸馏水，100℃条件下萃取2小时，过滤；

4.合并2次滤液，浓缩，干燥，粉碎后获得孢子粉热水提取物(在本发明中也称为“孢子粉水提取物”)。

将以上三种萃取方法制备的所有萃取物混合均匀，也可将灵芝孢子油、乙醇提取物以及灵芝孢子粉水提取物按其在孢子粉中的天然比例、即3-4∶1∶3-4(重量比)混合，即代表了孢子粉内包含的所有有效成分，在此统称为“全灵芝孢子粉提取物”，热水萃取后剩余的残渣即孢子粉壁。

用液态二氧化碳萃取孢子粉得到的产物称为孢子油，用乙醇萃取液态二氧化碳萃取后的残渣得到的产物称为孢子粉乙醇提取物，用热水萃取乙醇萃取后的残渣得到的产物称为孢子粉热水提取物(也称为孢子粉水提取物)。为了与孢子油区分，将孢子粉乙醇提取物与孢子粉水提取物的混合物合称为孢子粉提取物。而将孢子油、孢子粉乙醇提取物与孢子粉水提取物合并得到的混合物称为“全灵芝孢子粉提取物”。

实施例2.微丸制备例1

取按照实施例1的方法制备的孢子油4.4g，乙醇提取物1.2g，水提取物4.4g，即全灵芝孢子粉提取物10g，其中孢子油∶乙醇提取物∶水提取物的重量比例约为3.6∶1∶3.6，与20g浓度为0.5重量％、黏度为200cps(室温)的海藻酸钠溶液(黏度为200cps的海藻酸钠购自明月海藻集团)混合并搅拌均匀，待气泡消散，边搅拌边以液滴的形式缓慢滴到浓度为1重量％的氯化钙溶液中，浸泡30分钟后，将微丸取出，用蒸馏水冲洗干净后干燥，得到成品微丸。

所制得的微丸呈球形、近球形，直径为3.0-3.2mm，重量为18.5-19.0mg。