一种双层包衣的口服结肠靶向制剂及制备方法和用途与流程

本发明涉及一种双层包衣的口服结肠靶向制剂及其制备方法和用途，属于医药技术领域，尤其涉及一种双层包衣的治疗炎症性肠病的口服结肠靶向制剂及其制备方法和用途。

背景技术：

炎症性肠病的主要临床症状为腹痛、腹泻、血便、里急后重等。炎症性肠病常反复发作，其病程较长，分为急性期和缓解期。急性期患者腹泻次数明显增多，显著影响患者日常生活，此时要求药物治疗能迅速抑制炎症反应，减少腹泻的发生，缓解期要求药物重在维持肠道炎症持续缓解状态，推迟下一次急性发作的时间。

当前治疗炎症性肠病的药物制剂主要包括，常规口服制剂、灌肠制剂以及较为先进的口服结肠靶向制剂。常规口服制剂的药物主要在胃及小肠释放，药物在结肠部位的浓度较低，疗效不佳，并且药物经小肠吸收入血，易导致副作用的发生。灌肠制剂可使药物的释放浓集于结肠，但给药不便，患者依从性差。口服结肠靶向制剂可使药物大部分在结肠释放，减少了小肠吸收，并且给药方便，是当前市场上治疗炎症性肠病的先进剂型，但仍存在一些问题亟待克服。

当前口服结肠靶向制剂的药剂学设计主要包括三大类。一是采用酶触型材料包衣制备口服结肠靶向制剂。细菌在人体消化道内分布广泛，尤其以结肠部位为主，该类制剂的酶触型包衣材料可以在结肠菌群的作用下破坏分解，使得药物得以在结肠部位释放，发挥结肠靶向作用。但炎症性肠病时，患者肠道内菌群多有改变，致使酶触型包衣材料的降解速率出现不同程度的变化而导致药物的释放速率不可控。二是利用缓控释材料制备口服结肠靶向制剂。如彼得斯安（pentasa）将治疗药物美沙拉嗪掺入到水不溶性的乙基纤维素微颗粒中，乙基纤维素作为一种半透膜，药物在胃肠道转运过程中，于小肠和结肠不断释放。目前的研究表明，约有50%的药物能够在结肠内释放，表明该制剂可发挥部分的靶向作用，结肠靶向的效果仍有待提高。三是采用ph值依赖型材料包衣制备口服结肠靶向制剂。正常生理状态下人体消化道的ph值在不同部位有较大差异。人体胃内ph值约为0.9-1.5，近端小肠ph值从5.5-7.0，至末端回肠逐渐升到6.5-7.5，回肠到盲肠ph值略降到5.5-7.5，至远端结肠和直肠上升至6.1-7.5。胃肠道的这种ph值特征，促进了ph值依赖型口服结肠靶向制剂的开发。如广泛使用的亚沙可（asacol）是一种丙烯酸树脂s100单层包衣的美沙拉嗪片，该包衣材料在ph<7时不溶解，ph>7时才可溶。亚沙可在胃内酸性环境下不释放药物，当药物抵达末端回肠和结肠ph>7的环境中时，包衣膜溶解，药物大量释放，发挥良好的结肠靶向作用。该类制剂靶向作用显著，但其靶向功能的实现是基于正常生理状态下胃肠道ph值的特征设计的，针对炎症性肠病特殊的病理特点，我们认为该药剂学设计仍存在较大缺陷：有研究表明，炎症性肠病急性期时，部分患者的结肠ph值会发生显著降低直至酸性（ph2.3-5.5），与正常生理状态下的弱碱性显著不同，呈现出患者病情越严重ph值越低的情况，并且此时急性期患者普遍腹泻次数显著增多，药物在结肠肠道内不易停留。尽管未见文献报道，但根据简单的药剂学知识可知，该类制剂中溶于碱性环境的包衣材料此时无法溶解，会导致药物在结肠部位的释放受到明显抑制，降低其应有的结肠靶向作用，加之炎症性肠病急性期腹泻次数的增多，更进一步导致药物在结肠浓度的降低，最终影响治疗效果。

技术实现要素：

针对当前ph值依赖型材料包衣制备的口服结肠靶向制剂，其溶于碱性环境的包衣材料在炎症性肠病特殊酸性环境下无法溶解，导致药物溶出受阻的问题，本发明提供了一种新型的双层包衣的治疗炎症性肠病的口服结肠靶向制剂及其制备方法。

本发明的又一个目的是提供了该口服结肠靶向制剂在制备治疗炎症性肠病药品中的应用。

本发明的目的是通过以下技术方案来实现的：

首先将治疗炎症性肠病的药物采用常规技术直接或与适宜的赋型剂混合后制备载药丸芯或载药片芯，其次对制得的载药丸芯或载药片芯采用一种双层包衣方案进行包衣，最后将所得双层包衣产物采用药剂常规技术制备片剂、颗粒剂、胶囊剂等口服剂型，即得治疗炎症性肠病的双层包衣口服结肠靶向制剂。

所述的双层包衣方案具体为：（1）将酸性下溶解近中性及碱性下溶胀的包衣材料采用常规分散技术制备内层衣包衣液，备用。（2）将酸性下不溶解近中性及碱性下溶解的包衣材料采用常规分散技术制备外层衣包衣液，备用。（3）将适量的内层衣包衣液喷洒在载药丸芯或载药片芯上。（4）将适量的外层衣包衣液喷洒在已包内层衣的载药丸芯或载药片芯上。

本发明所述的常规分散技术，包括水分散体技术和有机溶剂分散技术，水分散体包衣的能耗较低，有利于节约生产成本，并且用水分散体包衣液代替有机溶剂包衣液，有利于安全生产和环境保护，优选分散技术为水分散体技术。

本发明所述的酸性下溶解近中性及碱性下溶胀的内层包衣材料，其优选材料为丙烯酸树酯e100、丙烯酸树酯epo。丙烯酸树酯e100是一种甲基丙烯酸丁酯-甲基丙烯酸二甲胺基乙酯-甲基丙烯酸甲酯共聚物，丙烯酸树酯epo是其微粉化物，二者在ph值<5时能快速溶解，在ph值>5时不溶解，但能发生溶胀，具有渗透性。丙烯酸树酯e100适用于有机溶剂分散技术制备有机溶剂包衣液，丙烯酸树酯epo适用于水分散体技术制备水分散体包衣液。

本发明所述的酸性下不溶解近中性及碱性下溶解的外层包衣材料，其优选材料为丙烯酸树酯l30d-55、丙烯酸树酯l100-55、丙烯酸树酯l100。丙烯酸树酯l30d-55是一种甲基丙烯酸和丙烯酸乙酯的阴离子共聚物的水分散体，丙烯酸树酯l100-55是丙烯酸树酯l30d-55的喷雾干燥物，二者在ph值<5.5时不溶，在ph值>5.5时能逐渐溶解。丙烯酸树酯l100是甲基丙烯酸和甲基丙烯酸甲酯的阴离子共聚物，其在ph值<6时不溶，在ph值>6时能逐渐溶解。这三种包衣材料均可采用水分散体技术制备水分散体包衣液，并且丙烯酸树酯l100-55、丙烯酸树酯l100还可采用有机溶剂分散技术制备有机溶剂包衣液。

外层衣采用酸性下不溶解近中性及碱性下溶解的材料包衣，同时调节外层包衣液的用量控制外层衣的包衣厚度，该外层衣包衣方案的目的在于避免外层衣在胃内酸性环境下的破坏，但使其能够在小肠末端的近中性及碱性环境下实现溶解完全。内层衣采用酸性下溶解近中性及碱性下溶胀的材料包衣，同时调节内层包衣液的用量控制内层衣的包衣厚度，该内层衣包衣方案的目的在于使内层衣在结肠中性及碱性环境下能逐渐溶胀，水分不断渗入，但在结肠酸性环境下能够迅速溶解。该外层衣包衣方案和内层衣包衣方案结合使用后，具有如下效果：药物口服后在胃内因外层衣的保护不会释放，药物继续下行至小肠，此时外层衣逐渐溶解至小肠末端溶解完全，药物因内层衣的保护释药受限，药物继续下行至结肠，此时内层衣根据结肠病理ph环境的变化对药物的释放具有缓释和速释两种调节行为：（1）炎症性肠病缓解期时，结肠肠道内为近中性或碱性环境，此时内层衣可以逐渐溶胀但不溶解，水分不断渗入载药丸芯或载药片芯，导致药物溶解并通过内层衣溶胀层逐渐溶出至肠道，发挥缓释作用。（2）炎症性肠病急性期时，结肠肠道内ph值下降，此时内层衣可快速溶解，导致药物迅速溶出，提高病灶部位的药物浓度，发挥速释作用，并相应减少了急性期腹泻对未释放药物的排出。

与现有的治疗炎症性肠病的口服结肠靶向制剂相比，本发明所述结肠靶向制剂不仅具有结肠靶向的作用，而且其突出优势在于，采用的双层包衣方案，使本发明所述口服结肠靶向制剂不仅符合炎症性肠病缓解期维持治疗对药物缓释的需求，还能在炎症性肠病急性期结肠ph值发生明显下降时快速释药，符合炎症性肠病急性期的迅速改善对药物速释的需求。

附图说明：

图1常规制丸工艺及辅料不影响药物的快速溶出

图2不同包衣增重的内层衣在酸性环境下不影响药物的溶出

图3内层衣包衣增重的提高抑制了中性环境下药物的溶出

图4外层衣包衣增重的提高抑制了中性环境下药物的溶出

具体实施方式

实施例1

一种双层包衣的5-氨基水杨酸口服结肠靶向胶囊剂的制备方法，包括如下步骤。

（1）、5-氨基水杨酸载药丸芯的制备。

作为本发明的一种优选技术方案，按重量份数比称取载药丸芯的原辅料5-氨基水杨酸1份、稀释剂微晶纤维素4份、粘合剂羧甲基纤维素钠0.05份，将上述原辅料混合均匀，加入适量纯化水作润湿剂制备软材。采用挤出滚圆法制备5-氨基水杨酸载药丸芯，挤出速率32hz，滚圆速率35hz，滚圆时间5min。

（2）、5-氨基水杨酸载药丸芯包内层衣。

量取适量纯化水，按重量份数比依次加入乳化剂十二烷基硫酸钠0.1份、助乳化剂硬脂酸0.15份和丙烯酸树脂epo1份，高剪切匀化机匀化30min，直至形成清亮的胶体溶液，最后将剩余的纯化水缓慢加入至上述胶体溶液中，搅拌均匀，配制包衣液中聚合物含量为10%（质量比，下同）的胶体溶液，即得内层衣包衣液。

使用流化床包衣技术对5-氨基水杨酸载药丸芯进行内层包衣，雾化压力1.2bar、供液泵转速2r/min、风机频率30hz、进风温度35℃、物料温度25℃。5-氨基水杨酸载药丸芯内层衣包衣增重45%，适当干燥，控制含水量在3%以下。

（3）、5-氨基水杨酸包衣微丸包外层衣。

按重量份数比称取增塑剂柠檬酸三乙酯0.1份、抗粘剂滑石粉0.5份、丙烯酸树脂l30d-551份，备用。将适量纯化水加入至丙烯酸树脂l30d-55中，充分搅匀，备用。依次将柠檬酸三乙酯、滑石粉加入至剩余的纯化水中，匀浆机匀化10min，将其加入至丙烯酸树脂l30d-55溶液中，充分搅拌，并经40目筛网过滤，即得包衣液中聚合物含量为16%的外层衣包衣液。

使用流化床包衣技术对包有内层衣的5-氨基水杨酸包衣微丸进行外层包衣。雾化压力为1.5bar、供液泵转速3r/min、风机频率32hz、进风温度36℃、物料温度30℃，5-氨基水杨酸包衣微丸外层衣包衣增重20%，适当干燥，避免粘连。

（4）、将所得双层包衣的5-氨基水杨酸微丸填装胶囊，即得双层包衣的5-氨基水杨酸口服结肠靶向胶囊剂。

实施例2

一种双层包衣的5-氨基水杨酸口服结肠靶向片剂的制备方法，包括如下步骤。

（1）、5-氨基水杨酸载药片芯的制备。

作为本发明的一种优选技术方案，按重量份数比称取载药片芯的原辅料5-氨基水杨酸1份、稀释剂微晶纤维素3份、粘合剂羧甲基纤维素钠0.01份，将上述原辅料混合均匀，加入适量纯化水作润湿剂制备软材。制备的软材过24目筛制粒、烘干、整粒、加5%滑石粉、混匀，8mm冲模压片得5-氨基水杨酸载药片芯。

（2）、5-氨基水杨酸载药片芯包内层衣。

按重量份数比称取增塑剂柠檬酸三乙酯0.1份、抗粘剂滑石粉0.5份、丙烯酸树脂e1001份，备用。将异丙醇与水搅拌混合，配置浓度为85%（体积比）的溶液，然后将丙烯酸树脂e100分批缓慢加入溶液中，充分搅拌，形成清亮溶液，备用。将滑石粉和柠檬酸三乙酯在异丙醇中预先匀化，然后加入至上述配置好的丙烯酸树脂e100溶液中，充分搅拌，并经40目筛网过滤，即得包衣液中聚合物含量为13%的内层衣包衣液。

使用锅包衣技术对5-氨基水杨酸载药片芯进行包衣，将适量载药片芯置倾角为40°包衣锅内，调整转速为65r/min，鼓入30℃的热风，调整雾化压力为1.2bar，5-氨基水杨酸载药片芯包衣增重35%，适当干燥，控制含水量在3%以下。

（3）、5-氨基水杨酸包衣片包外层衣。

按重量份数比称取增塑剂柠檬酸三乙酯0.1份、抗粘剂滑石粉0.5份、丙烯酸树脂l1001份，备用。将抗粘剂滑石粉和增塑剂柠檬酸三乙酯加入适量的95%乙醇中，用匀浆机匀化10min后加入至已溶于适量的95%乙醇的丙烯酸树酯l100的溶液中，充分混合，即得包衣液中聚合物含量为6%的外层衣包衣液。

使用锅包衣技术对包有内层衣的5-氨基水杨酸包衣片进行包衣，将适量包有内层衣的5-氨基水杨酸片芯置倾角为45°包衣锅内，调整转速为65r/min，物料温度30℃，雾化压力1.5kg/cm²。5-氨基水杨酸片外层衣包衣增重10%，适当干燥，避免粘连。

（4）、将所得双层包衣的5-氨基水杨酸包衣片常规包装，即得双层包衣的5-氨基水杨酸口服结肠靶向片。

实施例3

一种双层包衣的氧化苦参碱口服结肠靶向胶囊剂的制备方法，包括如下步骤。

（1）、氧化苦参碱载药丸芯的制备。

作为本发明的一种优选技术方案，按重量份数比称取载药丸芯的原辅料氧化苦参碱1份、稀释剂微晶纤维素5份、粘合剂羧甲基纤维素钠0.05份，将上述原辅料混合均匀，加入适量纯化水作润湿剂制备软材。采用挤出滚圆法制备氧化苦参碱载药丸芯，挤出速率35hz，滚圆速率36hz，滚圆时间6min。

（2）、氧化苦参碱载药丸芯包内层衣。

量取适量纯化水，按重量份数比依次加入乳化剂十二烷基硫酸钠0.1份、助乳化剂硬脂酸0.15份和丙烯酸树脂epo1份，高剪切匀化机匀化30min，直至形成清亮的胶体溶液，最后将剩余的纯化水缓慢加入至上述胶体溶液中，搅拌均匀，配制包衣液中聚合物含量为8%的胶体溶液，即得内层衣包衣液。

使用流化床包衣技术对氧化苦参碱载药丸芯进行包衣，雾化压力1.5bar、供液泵转速3r/min、风机频率32hz、进风温度38℃、物料温度30℃，氧化苦参碱载药丸芯包衣增重15%，适当干燥，控制含水量在3%以下。

（3）、氧化苦参碱包衣微丸包外层衣。

按重量份数比称取增塑剂柠檬酸三乙酯0.1份、抗粘剂滑石粉0.5份、丙烯酸树脂l30d-551份，备用。将适量纯化水加入至丙烯酸树脂l30d-55中，充分搅匀，备用。依次将增塑剂柠檬酸三乙酯、抗粘剂滑石粉加入至剩余的纯化水中，匀浆机匀化10min，将其加入至丙烯酸树脂l30d-55溶液中，充分搅拌，并经40目筛网过滤，即得包衣液中聚合物含量为14%的外层衣包衣液。

使用流化床包衣技术对氧化苦参碱包衣微丸进行包衣，雾化压力为1.8bar、供液泵转速3r/min、风机频率30hz、进风温度38℃、物料温度30℃，氧化苦参碱包衣微丸外层衣包衣增重25%，适当干燥，避免粘连。

（4）、将所得双层包衣的氧化苦参碱微丸填装胶囊，即得双层包衣的氧化苦参碱口服结肠靶向胶囊剂。

实施例4

一种双层包衣的甘草次酸口服结肠靶向胶囊剂的制备方法，包括如下步骤。

（1）、甘草次酸载药丸芯的制备。

作为本发明的一种优选技术方案，按重量份数比称取载药丸芯的原辅料甘草次酸1份、稀释剂微晶纤维素3份、粘合剂羧甲基纤维素钠0.04份，将上述原辅料混合均匀，加入适量浓度为35%乙醇作为润湿剂制备软材。采用挤出滚圆法制备甘草次酸载药丸芯，挤出速率35hz，滚圆速率在38hz，滚圆时间4min。

（2）、甘草次酸载药丸芯包内层衣。

量取适量纯化水，按重量份数比依次加入乳化剂十二烷基硫酸钠0.1份、助乳化剂硬脂酸0.15份和丙烯酸树脂epo1份，高剪切匀化机匀化30min，直至形成清亮的胶体溶液，最后将剩余的纯化水缓慢加入至上述胶体溶液中，搅拌均匀，配制包衣液中聚合物含量为8.8%的胶体溶液，即得内层衣包衣液。

使用流化床包衣技术对甘草次酸载药丸芯进行包衣，雾化压力1.6bar、供液泵转速1r/min、风机频率31hz、进风温度37℃、物料温度28℃，甘草次酸载药丸芯包衣增重35%，适当干燥，控制含水量在3%以下。

（3）、甘草次酸包衣微丸包外层衣。

按重量份数比称取增塑剂柠檬酸三乙酯0.1份、抗粘剂滑石粉0.5份、丙烯酸树脂l1001份，备用。将抗粘剂滑石粉和增塑剂柠檬酸三乙酯加入适量的95%乙醇中，用匀浆机匀化10min后加入至已溶于适量的95%乙醇的丙烯酸树酯l100的溶液中，充分混合，即得包衣液中聚合物含量为7.8%的外层衣包衣液。

使用流化床包衣技术对甘草次酸包衣微丸进行包衣，雾化压力1.0bar、供液泵转速3r/min、风机频率30hz、进风温度38℃、物料温度25℃，甘草次酸包衣微丸外层衣包衣增重10%，适当干燥，避免粘连。

（4）、将所得双层包衣的甘草次酸微丸填装胶囊，即得双层包衣的甘草次酸口服结肠靶向胶囊剂。

实施例5

一种双层包衣的甘草酸二铵口服结肠靶向颗粒剂的制备方法，包括如下步骤。

（1）、甘草酸二铵包衣颗粒内芯的制备。

作为本发明的一种优选技术方案，按重量份数比称取载药丸芯的原辅料甘草酸二铵1份、稀释剂微晶纤维素4份、粘合剂羧甲基纤维素钠0.05份，将上述原辅料混合均匀，加入适量浓度为85%乙醇作为润湿剂，采用快速搅拌制粒法制备甘草酸二铵颗粒内芯，60℃干燥，整粒，取16目-60目之间颗粒。

（2）、甘草酸二铵包衣颗粒内芯包内层衣。

量取适量纯化水，按重量份数比依次加入乳化剂十二烷基硫酸钠0.1份、助乳化剂硬脂酸0.15份和丙烯酸树脂epo1份，高剪切匀化机匀化30min，直至形成清亮的胶体溶液，最后将剩余的纯化水缓慢加入至上述胶体溶液中，搅拌均匀，配制包衣液中聚合物含量为8.7%的胶体溶液，即得内层衣包衣液。

使用流化床包衣技术对甘草酸二铵包衣颗粒内芯进行包衣，雾化压力为0.8bar、供液泵转速2r/min、风机频率32hz、进风温度38℃、物料温度30℃。甘草酸二铵包衣颗粒内芯包衣增重25%，适当干燥，控制含水量在3%以下。

（3）、甘草酸二铵包衣颗粒包外层衣。

按重量份数比称取增塑剂柠檬酸三乙酯0.1份、抗粘剂滑石粉0.5份、浓度为4%的氢氧化钠0.3份、丙烯酸树脂l100-551份，备用。将丙烯酸树脂l100-55分次缓慢加入到适量纯化水中，充分搅拌后缓慢加入氢氧化钠并继续搅拌30min，随后依次加入增塑剂柠檬酸三乙酯和抗粘剂滑石粉，充分混合并经40目筛网过滤，即得包衣液中聚合物含量为30%的外层衣包衣液。

使用流化床包衣技术对甘草酸二铵包衣颗粒进行包衣，雾化压力1.4bar、供液泵转速2r/min、风机频率32hz、进风温度36℃、物料温度35℃。甘草酸二铵包衣颗粒外层衣包衣增重35%，适当干燥，避免粘连。

（4）、将所得双层包衣的甘草酸二铵颗粒整粒包装，即得双层包衣的甘草酸二铵口服结肠靶向颗粒剂。

实施例6

一种双层包衣的甘草酸二钾口服结肠靶向片剂的制备方法，包括如下步骤。

（1）、甘草酸二钾载药片芯的制备。

作为本发明的一种优选技术方案，按重量份数比称取载药丸芯的原辅料甘草酸二钾1份、稀释剂微晶纤维素5份、粘合剂羧甲基纤维素钠0.06份，将上述原辅料混合均匀，加入适量浓度为40%乙醇作为润湿剂制备软材。制备的软材过24目筛制粒、烘干、整粒、加5%滑石粉、混匀，8mm冲模压片得甘草酸二钾载药片芯。

（2）、甘草酸二钾载药片芯包内层衣。

按重量份数比称取增塑剂柠檬酸三乙酯0.1份、抗粘剂滑石粉0.5份、丙烯酸树脂e1001份，备用。将异丙醇与水搅拌混合，配置浓度为85%的溶液，然后将丙烯酸树脂e100分批缓慢加入溶液中，充分搅拌，形成清亮溶液，备用。将滑石粉和柠檬酸三乙酯在异丙醇中预先匀化，然后加入至上述配置好的丙烯酸树脂e100溶液中，充分搅拌，并经40目筛网过滤，即得包衣液中聚合物含量为15%的内层衣包衣液。

使用锅包衣技术对甘草酸二钾载药片芯进行包衣，将适量甘草酸二钾载药片芯置倾角为40°包衣锅内，调整转速为55r/min，鼓入35℃的热风，调整雾化压力为1.6bar，甘草酸二钾载药片芯包衣增重10%，适当干燥，控制含水量在3%以下。

（3）、甘草酸二钾包衣片包外层衣

按重量份数比称取增塑剂柠檬酸三乙酯0.1份、抗粘剂滑石粉0.25份、丙烯酸树脂l100-551份，备用。将丙烯酸树脂l100-55溶于浓度为95%的乙醇溶液中并加入增塑剂柠檬酸三乙酯，充分搅拌。将抗粘剂滑石粉加入至剩余的乙醇溶剂中，用高剪切匀浆机充分匀化8min后将其缓慢加入至l100-55的溶液中，充分搅拌并经40目筛网过滤，即得包衣液中聚合物含量为6%的外层衣包衣液。

使用锅包衣技术对甘草酸二钾包衣微丸进行包衣，将适量甘草酸二钾包衣微丸置倾角为50°包衣锅内，调整转速为75r/min，鼓入36℃的热风，调整雾化压力为2bar，甘草酸二钾包衣微丸包衣增重35%，适当干燥，避免粘连。

（4）、将所得双层包衣的甘草酸二钾包衣片常规包装，即得双层包衣的甘草酸二钾口服结肠靶向片。

以上所述的6个实施例中选用的治疗药物均为已被证实治疗炎症性肠病有效的化学药物及经本发明人验证有效的中药单体，发明人证实有效的中药单体成分还包括苦参碱、甘草酸单铵、甘草酸单钾等结构类似，药理作用强度略有差异的其他单体成分。

体外溶出试验评价包衣效果。

以双层包衣的氧化苦参碱口服结肠靶向胶囊剂为例，体外评价本发明所述双层包衣技术方案的结肠靶向效果及在结肠酸性环境下药物速释、中性及弱碱性环境下药物缓释的技术进步，优选包衣增重范围。

采用实施例3所述制备方法，制备氧化苦参碱载药丸芯、不同包衣增重（%，质量比，下同）的单包内层衣的氧化苦参碱微丸、不同包衣增重的氧化苦参碱双层包衣微丸，以《中国药典》2015版第四部溶出度测定法第二法对上述微丸在不同ph值溶出介质中药物的溶出速率和程度进行测定，优选符合本发明目的的包衣增重范围。

试验例1、药物从载药丸芯中释放的溶出度实验。

精密称取氧化苦参碱载药丸芯1.0g，置于纯化水中，桨法100r/min，温度：（37±0.5）℃，在设定的各时间点分别取2ml溶出液，并以相应溶出介质进行补液，采用hplc法测定溶出液中氧化苦参碱的浓度，计算并绘制累积溶出曲线，见图1所示，药物从载药丸芯溶出10min可达80%，15min可达90%，可见常规制丸工艺及辅料不影响药物的快速溶出。

试验例2、不同包衣增重的单包内层衣的氧化苦参碱微丸在酸性环境下的药物溶出度实验。

精密称取不同包衣增重的单包内层衣的氧化苦参碱微丸1.0g，置于模拟胃液（0.1mol/l的盐酸溶液）中，桨法100r/min，温度：（37±0.5）℃，在设定的各时间点分别取2ml溶出液，并以相应溶出介质进行补液，采用hplc法测定溶出液中氧化苦参碱的浓度，计算并绘制累积溶出曲线，见图2所示，包衣增重在10%~50%范围内的，药物能从载药丸芯中快速溶出。可见在该内层衣包衣增重范围内，酸性环境下药物的溶出呈明显的速释效果，该结果符合内层衣在酸性环境下快速溶解的设计目的。

试验例3、不同包衣增重的单包内层衣的氧化苦参碱微丸在中性环境下的药物溶出度实验。

精密称取不同包衣增重的单包内层衣的氧化苦参碱微丸1.0g，置于模拟肠液（ph6.8的磷酸缓冲液）中，桨法100r/min，温度：（37±0.5）℃，在设定的各时间点分别取2ml溶出液，并以相应溶出介质进行补液，采用hplc法测定溶出液中氧化苦参碱的浓度，计算并绘制累积溶出曲线，见图3所示，随着包衣增重的提高，药物的溶出速率逐渐降低，呈明显的缓释效果，与本发明的设计目的一致。其原因在于中性及碱性环境下内层衣不溶解但可逐渐溶胀，随着包衣增重的提高，溶胀层逐渐增厚，药物虽可通过溶胀层扩散至溶出介质中，但其溶出速率显著受到抑制。试验结果表明，5%包衣增重下，30min时药物自微丸已释放80%，缓释效果不明显，在15%~45%包衣增重范围内，所述微丸都具有不溶程度的缓释效果。

试验例4、外层衣不同包衣增重的氧化苦参碱双层包衣微丸在中性环境下的药物溶出度实验。

精密称取固定内层衣的包衣增重为15%，外层衣不同包衣增重的氧化苦参碱双层包衣微丸1.0g，置于模拟肠液（ph6.8的磷酸缓冲液）中，桨法100r/min，温度：（37±0.5）℃，在设定的各时间点分别取2ml溶出液，并以相应溶出介质进行补液，采用hplc法测定溶出液中氧化苦参碱的浓度，计算并绘制累积溶出曲线，见图4所示，随着外层衣包衣增重的提高，药物的溶出速率逐渐降低，这是因为外层衣材料在ph>6时可逐渐溶解，外层衣越厚，其溶解需要的时间越长。考虑到药物在小肠的转运时间一般为4~6小时，根据试验结果，当内层衣包衣增重在15%时，外层衣包衣增重在20%~35%范围内，药物于4~6小时时间段的溶出低于40%，表明此时大部分药物的溶出将在结肠完成。

试验例5、外层衣不同包衣增重的氧化苦参碱双层包衣微丸在酸性环境下的药物溶出度实验。

精密称取试验例4中采用的氧化苦参碱双层包衣微丸1.0g，置于模拟胃液（0.1mol/l的盐酸溶液）中，桨法100r/min，温度：（37±0.5）℃，在设定的各时间点分别取2ml溶出液，并以相应溶出介质进行补液，采用hplc法测定溶出液中氧化苦参碱的浓度，试验结果见表1所示，试验结果表明，外层衣包衣增重≥10%时，药物溶出显著受到抑制，表明此时的外层衣膜较为完整，能防止内层衣在酸性环境下的溶解及其导致的药物溶出。

表1外层衣不同包衣增重的氧化苦参碱双层包衣微丸在酸性环境下药物的溶出。

综合上述试验例1至5，可知，通过优化内层衣和外层衣的包衣增重，本发明所述双层包衣微丸能够实现以下发明目的：外层衣防止微丸在胃内溶解，进入小肠后外层衣逐渐溶解，至小肠末端溶解完全，微丸进入结肠后，遇酸性环境内层衣快速溶解，药物迅速释放，遇中性或碱性环境内层衣逐渐溶胀，药物逐渐释放。考虑到药物在胃肠道内的停留时滞，以及内外层包衣在中性及碱性环境下随着包衣增重的提高，均可降低药物的溶出速率，综合上述试验结果，本发明所述双层包衣微丸优化后的内层衣包衣增重范围为15%~45%，外层衣包衣增重范围为10%~35%，当内层衣增重较少时外层衣包衣增重应适当提高，反之亦然。将该双层包衣的氧化苦参碱微丸填装普通胶囊，即得双层包衣的氧化苦参碱口服结肠靶向胶囊剂。

我们采用上述溶出度实验方法考察了实施例2所述内外层衣不同包衣增重下的5-氨基水杨酸包衣片在不同溶出介质中的药物溶出，包衣片优化后的内层衣包衣增重范围为10%~35%，外层衣包衣增重范围为10%~35%，片剂优化后内层衣包衣增重相比微丸略有下降，是因为相同质量的载药片芯比表面积小于载药丸芯，影响药物溶出，内层衣膜的厚度降低，避免溶出受限。将该双层包衣的5-氨基水杨酸包衣片常规包装，即得双层包衣的5-氨基水杨酸口服结肠靶向片。

我们采用上述溶出度实验方法考察了实施例5所述内外层衣不同包衣增重下的甘草酸二铵包衣颗粒在不同溶出介质中的药物溶出，包衣颗粒优化后的内层衣包衣增重范围为20%~45%，外层衣包衣增重范围为10%~35%。将所得双层包衣颗粒的甘草酸二铵颗粒整粒包装，即得双层包衣的甘草酸二铵口服结肠靶向颗粒剂。

经计算，优化包衣增重范围内的制剂原辅料配比为治疗炎症性肠病的药物2%~20%，酸性下溶解近中性及碱性下溶胀的内层包衣材料10%~30%，酸性下不溶解近中性及碱性下溶解的外层包衣材料9%~26%，其他辅料24%~79%。

药效学试验评价结肠靶向制剂的治疗作用。

本研究受国家自然科学基金（资助号：81403170）资助，发明人在研究过程中，采用两种经典的炎症性肠病动物模型，研究本发明所述口服结肠靶向制剂结肠靶向制剂相比普通口服制剂的疗效是否提高，动物结肠损伤是否得到进一步改善，以证明本发明的实用性。

试验例6、双层包衣的氧化苦参碱口服结肠靶向胶囊剂对葡聚糖硫酸钠（dss）诱导的小鼠溃疡性结肠炎（uc）的治疗作用。

按照实施例3的制备方法制备双层包衣的氧化苦参碱口服结肠靶向胶囊剂，内层衣包衣增重为30%，外层衣包衣增重为20%，备用。因小鼠食道狭窄，因此将胶囊壳去除，取其中的氧化苦参碱双层包衣微丸进行如下药效学试验。

dss购自sigma公司。将小鼠分为4组，每组10只，分别为正常组、模型组、普通给药组和结肠靶向给药组。正常对照组小鼠自由饮用蒸馏水，模型组、普通给药组和结肠靶向给药组小鼠自由饮用每日新制的dss溶液（3%），利用干粉灌胃器每日给予普通给药组小鼠灌胃未包衣的氧化苦参碱载药丸芯适量（相当于氧化苦参碱100mg/kg），给予结肠靶向给药组小鼠灌胃氧化苦参碱双层包衣微丸适量(相当于苦参碱100mg/kg)，连续进行7天。每日记录小鼠体重、大便性状及便血情况。第8天统一颈椎脱臼处死，立即打开小鼠腹腔，取距离肛门1cm处部分远端结肠组织（约3mm厚），4%多聚甲醛固定，常规石蜡包埋，切片，进行he病理染色，按表2评估小鼠结肠组织学损伤程度。将第8日小鼠的体重变化、大便性状和便血情况，按照表3进行dai评分，评估各组小鼠溃疡性结肠炎疾病活动度情况。

表2、结肠组织学损伤评分标准。

表3、dai评分标准。

试验数据及统计学检验结果见表4所示，模型组小鼠的肠炎活动指数dai显著升高，结肠病理损伤严重，普通给药组能抑制肠炎的病理损伤程度和活动指数，与普通给药组相比，结肠靶向给药组更进一步缓解肠炎，降低肠炎活动指数，改善结肠组织结构。

表4、各组小鼠dai与结肠组织学损伤评分。

注：与普通给药组比较，*p<0.05。

试验例7、双层包衣的5-氨基水杨酸口服结肠靶向胶囊剂对2,4,6-三硝基苯磺酸（tnbs）诱导小鼠克罗恩氏病（cd）的治疗作用。

按照实施例1的制备方法制备双层包衣的5-氨基水杨酸口服结肠靶向胶囊剂，内层衣包衣增重为20%，外层衣包衣增重为15%，备用。因小鼠食道狭窄，因此将胶囊壳去除，取其中的5-氨基水杨酸双层包衣微丸进行如下药效学试验。

tnbs购自sigma公司。将小鼠分为4组，每组10只，分别为正常组、模型组、普通给药组和结肠靶向给药组。模型组、普通给药组和结肠靶向给药组小鼠经肛门小心注入tnbs50%乙醇溶液（体积比），剂量0.72mgtnbs/20g小鼠，正常组小鼠小心注入等体积生理盐水，各组均将小鼠倒置30秒后再放入鼠笼中。造模当天利用干粉灌胃器给予普通给药组小鼠灌胃未包衣的5-氨基水杨酸载药丸芯适量（相当于5-氨基水杨酸200mg/kg），给予结肠靶向给药组小鼠灌胃5-氨基水杨酸双层包衣微丸适量(相当于5-氨基水杨酸200mg/kg)，连续给药7天，期间对观察小鼠状态，记录体重变化，第8天统一颈椎脱臼处死，取小鼠结肠肉眼观察肠黏膜有无损伤、充血水肿及溃疡，对结肠进行大体评分，另取距肛门1cm处结肠组织，4%多聚甲醛固定，常规石蜡包埋，切片，进行he病理染色，进行组织学损伤评分。

大体观察评分标准：无溃疡与炎症形成为0分，局部充血无溃疡1分；1处溃疡不伴充血或肠壁增厚2分；1处溃疡伴炎症3分；多于2处溃疡伴炎症4分；多于2处溃疡和/或炎症范围1cm5分；溃疡和/或炎症大于2cm6分；病变范围每增加1cm计分加1。

结肠组织学损伤评分标准：采用fedorak积分标准评分：无溃疡为0分、黏膜局部溃疡1分、多发性溃疡2分、溃疡融合或弥漫性3分，损伤深度限于黏膜1分、侵犯黏膜及黏膜下层2分、全层壁受损3分，两者相加总分最小为0，最大为6。

试验数据及统计学检验结果见表5所示，结果表明模型组小鼠的结肠受到明显损伤，普通给药组能改善小鼠结肠炎症，与普通给药组相比，结肠靶向给药组能进一步缓解结肠肠炎，改善结肠组织结构。

表5各组小鼠大体评分与结肠组织学损伤评分。

注：与普通给药组比较，*p<0.05。

试验例6、7所述动物模型是经典的炎症性肠病动物模型，包括溃疡性结肠炎和克罗恩氏病。由药效学试验结果可知，当治疗药物氧化苦参碱和5-氨基水杨酸采用双层包衣方法制备成结肠靶向微丸后，相同给药剂量下，与不包衣的载药丸芯相比，结肠损伤显著减轻，表明按照本发明所述双层包衣方案制备的结肠靶向制剂能够提高药物在结肠的浓度，增强药物的疗效。

试验例6、7采用的氧化苦参碱双层包衣微丸和5-氨基水杨酸双层包衣微丸仅是验证治疗效果的代表性示例，根据药剂学和药理学知识可知，将治疗药物简单替换为其他药物或将微丸简单替换为颗粒或片或其他给药形式，采用本发明所述双层包衣方法双层包衣后都能获得结肠靶向的效果，增强药物的疗效。将本发明所述结肠靶向制剂根据临床治疗要求的剂量，进行分装，即可制得治疗炎症性肠病的药品。