一种光热治疗肿瘤的主动靶向纳米球及其制备方法与应用
【技术领域】
[0001]本发明涉及医药，特别是一种光热治疗肿瘤的主动靶向纳米球及其制备方法与应用。
【背景技术】
[0002]肿瘤组织的病理生理特征与正常组织存在显著不同，主要表现为肿瘤部位血管渗透性强，大分子药物、载体等可通过渗透和滞留增强效应(即EPR效应)穿透血管内皮细胞进入肿瘤组织，可长时间、高浓度蓄积在肿瘤部位。纳米粒(Nanoparticles，NPs)，包括纳米球和纳米囊，是将药物分子负载或包裹到纳米材料，利用纳米载体的靶向性、缓释性和肿瘤部位的EPR效应，通过静脉注射的方式将纳米粒输送到肿瘤部位，实现高效靶向治疗的目的。NPs已成为现代给药系统研究的热点，在生物医学领域具有非常大的应用前景。主动靶向给药系统是用修饰的药物载体作为“导弹”，将药物定向地运送到靶区浓集发挥药效的药物传递系统。主动靶向给药系统因其靶向性较强、毒副作用小，越来越受到医药界的重视，目前研究较多的是肿瘤靶向给药系统。
[0003]近年来提出的近红外光介导的光热治疗，能够对肿瘤组织进行定点清除并且对正常组织具有较低的毒副作用，为肿瘤的治疗提供了新的方法。最新报道的半导体硫化铜(Cu2 XS)纳米粒子，制备工艺简单、成本低廉、并且具有突出的光热稳定性和良好的生物相容性，成为了当今纳米医学领域研究的热点。
[0004]目前，通过纳米载体负载Cu2XS纳米粒子和化疗药物，并通过肿瘤靶向分子修饰形成主动靶向药物转运系统，特别是在肿瘤热化治疗药物中的应用尚未见公开报道。
【发明内容】
[0005]针对上述情况，为克服现有技术之缺陷，本发明之目的就是提供一种光热治疗肿瘤的主动靶向纳米球及其制备方法与应用，可有效解决现有肿瘤治疗药物副作用大、治疗效果不佳的问题。
[0006]本发明解决的技术方案是，该主动革El向纳米球是由肿瘤革El向分子、硫化铜纳米粒子和化疗药物构成，所述的肿瘤靶向分子为叶酸；所述的硫化铜为聚维酮或柠檬酸修饰后的一种；所述的化疗药物为多西他赛(DTX)，其制备方法是:
1)合成硫化铜纳米粒子:称取0.4-0.6mmoL CuCl2溶解于8~12mL浓度为0.2g/mL的聚维酮(PVP)溶液中，磁力搅拌下形成淡蓝色溶液；另将1.2-1.8mmoL Na2S溶解于8~12mL超纯水，成Na2S溶液，将淡蓝色溶液和Na2S溶液合并，180°C水浴反应12h，1200r/min离心lOmin，得黑绿色沉淀物，黑绿色沉淀物用40~60mL乙醇洗3次，60°C真空干燥，成硫化铜纳米粒子(PVP-Cu2 XS)；
2)制备被动靶向纳米球:称取6~9mg硫化铜纳米粒子(PVP-Cu2XS)溶于含有壳聚糖的醋酸溶液8~12mL中，醋酸溶液质量浓度为1%，醋酸溶液中壳聚糖的含量为2mg/mL，室温搅拌1.5h，成PVP-Cu2 XS溶液；另称取4~6mg多西他赛(DTX)溶于4~6mL甲醇，加入到PVP-Cu2 XS溶液中，搅拌30min，注入3.2-4.8mL三聚磷酸钠(TPP)，搅拌2.5h，400w探超40次，1200r/min离心30min，除去上清液，即成被动革巴向纳米球(DTX-Cu2 xS_NPs)；
3)制备主动革E向纳米球:称取1.6-2.4mg叶酸(FA)加入4~6mL步骤(2)制备的DTX-Cu2xS-NPs,再加入8~12mg的1-乙基_(3_ 二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐(EDC -HC1)，室温避光搅拌lh，得黄色纳米混悬液，1200r/min离心30min，除去上清液，即得主动靶向纳米球(FA-DTX-Cu2 xS-NPs )。
[0007]本发明制备的主动靶向纳米球(FA-DTX-Cu2 xS_NPs)有效用于光热治疗肿瘤，实现主动靶向纳米球(FA-DTX-Cu2 xS-NPs)在制备光热治疗肿瘤药物中的应用。
[0008]本发明是以肿瘤靶向分子作为靶弹头，结合硫化铜光热转换特性，实现肿瘤热化疗联合靶向治疗，有效克服了肿瘤治疗药物副作用大、治疗效果不佳的问题，方法稳定可靠，所得产品性能稳定，使用方便，效果好，易操作，原料来源丰富，成本低，副作用小，能有效抑制肿瘤细胞的增殖，是肿瘤靶向治疗中药物上的创新，经济和社会效益巨大。
【附图说明】
[0009]图1为本发明水溶性硫化铜光照时间-温度变化图。
【具体实施方式】
[0010]以下结合实施例对本发明的【具体实施方式】作详细说明。
[0011]本发明在具体实施中，可由以下实施例给出。
[0012]实施例1
本发明在具体实施中，由以下步骤实现:
1)合成硫化铜纳米粒子:称取0.4mmoL CuCl2溶解于8mL浓度为0.2g/mL的聚维酮(PVP)溶液中，磁力搅拌下形成淡蓝色溶液；另将1.2mmoL Na2S溶解于8mL超纯水，成Na2S溶液，将淡蓝色溶液和Na2S溶液合并，置于反应釜中，180°C水浴反应12h，1200r/min离心1min,得黑绿色沉淀物，黑绿色沉淀物用40mL乙醇洗3次，60°C真空干燥，成硫化铜纳米粒子(PVP-Cu2XS)；
2)制备被动革E向纳米球:称取6mg硫化铜纳米粒子(PVP-Cu2XS)溶于含有壳聚糖的醋酸溶液SmL中，醋酸溶液质量浓度为1%，醋酸溶液中壳聚糖的含量为2mg/mL，室温搅拌
1.5h，成PVP-Cu2 XS溶液；另称取4mg多西他赛(DTX)溶于4mL甲醇，加入到PVP-Cu2 XS溶液中，搅拌30min，注入3.2mL三聚磷酸钠(TPP)，搅拌2.5h，400w探超40次，1200r/min离心30min，除去上清液，即成被动靶向纳米球(DTX-Cu2 xS_NPs)；
3)制备主动靶向纳米球:称取1.6mg叶酸(FA)加入4mL步骤(2)制备的DTX-Cu2 xS_NPs中，再加入Smg的1-乙基-(3- 二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐(EDC.HCl)，室温避光搅拌lh，得黄色纳米混悬液，1200r/min离心30min，除去上清液，即得主动革El向纳米球(FA-DTX-Cu2xS-NPs)0
[0013]实施例2
本发明在具体实施中，也可由以下步骤实现:
I)合成硫化铜纳米粒子:称取0.5mmoL CuCl2溶解于1mL浓度为0.2g/mL的聚维酮(PVP)溶液中，磁力搅拌下形成淡蓝色溶液；另将1.5mmoL Na2S溶解于1mL超纯水，成Na2S溶液，将淡蓝色溶液和Na2S溶液合并，置于反应釜中，180°C水浴反应12h，1200r/min离心1min,得黑绿色沉淀物，黑绿色沉淀物用50mL乙醇洗3次，60°C真空干燥，成硫化铜纳米粒子(PVP-Cu2XS)；
2)制备被动靶向纳米球:称取7.5mg硫化铜纳米粒子(PVP-Cu2 XS)溶于含有壳聚糖的醋酸溶液1mL中，醋酸溶液质量浓度为1%，醋酸溶液中壳聚糖的含量为2mg/mL，室温搅拌
1.5h，成PVP-Cu2 XS溶液；另称取5mg多西他赛(DTX)溶于5mL甲醇，加入到PVP-Cu2 XS溶液中，搅拌30min，注入4mL三聚磷酸钠(TPP)，搅拌2.5h，400w探超40次，1200r/min离心30min，除去上清液，即成被动靶向纳米球(DTX-Cu2 xS_NPs)；
3)制备主动靶向纳米球:称取2mg叶酸(FA)加入5mL步骤(2)制备的DTX-Cu2xS_NPs中，再加入1mg的1-乙基-(3- 二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐(EDC.HCl)，室温避光搅拌lh，得黄色纳米混悬液，1200r/min离心30min，除去上清液，即得主动革El向纳米球(FA-DTX-Cu2xS-NPs)0
[0014]实施例3
本发明在具体实施中，也可由以下步骤实现:
1)合成硫化铜纳米粒子:称取0.6mmoL CuCl2溶解于12mL浓度为0.2g/mL的聚维酮(PVP)溶液中，磁力搅拌下形成淡蓝色溶液；另将1.8mmoL Na2S溶解于12mL超纯水，成Na2S溶液，将淡蓝色溶液和Na2S溶液合并，置于反应釜中，180°C水浴反应12h，1200r/min离心1min,得黑绿色沉淀物，黑绿色沉淀物用60mL乙醇洗3次，60°C真空干燥，成硫化铜纳米粒子(PVP-Cu2XS)；
2)制备被动革E向纳米球:称取9mg硫化铜纳米粒子(PVP-Cu2XS)溶于含有壳聚糖的醋酸溶液12mL中，醋酸溶液质量浓度为1%，醋酸溶液中壳聚糖的含量为2mg/mL，室温搅拌
1.5h，成PVP-Cu2 XS溶液；另称取6mg多西他赛(DTX)溶于6mL甲醇，加入到PVP-Cu2 XS溶液中，搅拌30min，注入4.8mL三聚磷酸钠(TPP)，搅拌2.5h，400w探超40次，1200r/min离心30min，除去上清液，即成被动靶向纳米球(DTX-Cu2 xS_NPs)；
3)制备主动靶向纳米球:称取2.4mg叶酸(FA)加入6mL步骤(2)制备的DTX-Cu2 xS_NPs中，再加入12mg的1-乙基-(3- 二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐(EDC.HCl)，室温避光搅拌lh，得黄色纳米混悬液，1200r/min离心30min，除去上清液，即得主动革El向纳米球(FA-DTX-Cu2xS-NPs)0
[0015]上述制备的主动靶向纳米球(FA-DTX-Cu2 xS_NPs)可有效用于肿瘤热化疗联合靶向治疗，实现主动靶向纳米球(FA-DTX-Cu2 xS-NPs)在治疗肿瘤热化疗联合靶向药物中的应用。
[0016]以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员，在不脱离本发明方法的前提下，还可以做出若干改进和补充，这些改进和补充也应视为本发明的保护范围。
[0017]本发明的主动靶向纳米球(FA-DTX-Cu2 xS_NPs)作为药物载体可以负载硫化铜和化疗药物，特别是难溶性药物，有效用于制备抗肿瘤药物，采用静脉注射给药、结合980nm近红外激光照射，实现肿瘤热化疗联合治疗。硫化铜具有光热转换特性