一种硫酸头孢喹诺的肺靶向plga微球制剂及其制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及兽用制剂技术领域，特别涉及一种硫酸头孢喹诺的肺靶向PLGA微球 制剂及其制备方法。
【背景技术】
[0002] 头孢喹诺是第1个动物专用第4代头孢菌素类抗生素，因其强抗菌活性、广抗菌谱 和低耐药性而被国内外广泛应用于治疗家畜的呼吸系统疾病。
[0003] 我国对头孢喹诺及其制剂的研究开发相对较晚，目前仅有硫酸头孢喹诺原料药及 其注射剂（混悬注射液、注射粉针剂）获得农业部批准生产和销售许可，与之相匹配的剂型 种类比较少。头孢喹诺口服吸收不好，注射吸收较为迅速，在体内半衰期较短，仅为1~3 小时。为达到有效治疗浓度，需要多次注射给药，给临床应用带来了很大的不便。因此，开 发具有靶向缓释性能的制剂迫在眉睫。
[0004]PLGA肺靶向微球可在肺部被截留，使负载的药物富集于肺部，有效提高药物治疗 水平，大大降低药物对非靶器官的毒副作用；同时，PLGA微球的缓释性能，可使药物达到长 效的目的，进而避免了频繁给药的不便。
[0005] 如何解决家畜用硫酸头孢喹诺普通制剂所存在的局限性，提高其应用价值，深度 开发以其为原料的新制剂，并应用到生产实际中是本发明要解决的问题。
【发明内容】
[0006] 本发明所要解决的技术问题在于提供一种硫酸头孢喹诺的肺靶向PLGA微球制剂 及其制备方法，制剂载药量较高，包封率也大大提高，可以实现药物选择性集中于肺部，提 高药效，减少毒副反应，同时可实现药物在肺部缓慢释放，起到长效的作用。
[0007] 为了达到上述目的，本发明提供了一种硫酸头孢喹诺的肺靶向PLGA微球制剂，其 中，其制备方法为：
[0008] 1)分别称取硫酸头孢喹诺药物和PLGA载体，以探头超声将药物分散到5~20 % 明胶溶液，作为内水相，将PLGA加入到有机溶剂中，涡旋溶解作为油相；
[0009] 2)将所述内水相和所述油相按照体积比为1:7~15混合，探头超声乳化，形成初 乳；
[0010] 3)配制1%PVA水溶液作为外水相，将步骤2)得到的所述初乳与所述外水相按照 体积比1:5~20混合，在2500~5000rpm转速下，以高速剪切机剪切乳化20-30s，形成复 乳；
[0011] 4)将步骤3)得到的所述复乳分散到0. 25%PVA水溶液中，置于磁力搅拌器上低 速搅拌3~5h，挥发除去有机溶剂，然后4000rpm离心5-10min收集微球，用超纯水洗涤微 球三遍，抽滤，冷冻干燥，即得肺靶向PLGA微球制剂。
[0012] 其中，所述步骤1)中硫酸头孢喹诺与PLGA的质量比为：1:5-20。
[0013] 其中，所述肺靶向PLGA微球制剂的粒径范围为7-35um。
[0014] 其中，上述步骤1)中明胶溶液的浓度为10-15%。
[0015] 其中，所述明胶溶液中还含有海藻酸丙二醇酯、瓜尔豆胶、羟甲基纤维素和酪蛋 白酸钠，所述明胶、海藻酸丙二醇酯、瓜尔豆胶、羟甲基纤维素和酪蛋白酸钠的质量比为： 10-15:0. 05-0. 1:0. 01-0. 05 ：0. 03-0. 3:0. 01-0. 1〇
[0016] 其中，所述步骤1)中的有机溶剂为二氯甲烷、乙酸乙酯的混合溶剂，质量比为： 1:0-3:1;或者，所述步骤1)中的有机溶剂为二氯甲烷、乙酸乙酯、乙醚、丙酮的混合溶剂， 质量比为：1-2:0. 1-1 :0? 1-0. 5:0. 2-0. 6。
[0017] 其中，PLGA的浓度为5~30%，所述PLGA中PLA与PGA的聚合比例为：1:0-9:1。
[0018] 其中，步骤3)中1 %PVA水溶液含有1 %NaCl;步骤4)中0.25 %PVA水溶液含有 1 %NaCl〇
[0019] 其中，步骤3)中1%PVA水溶液含有1%NaClU%KCl和1%ZnCl;步骤4)中 0? 25 %PVA水溶液含有 1 %NaCl、1 %ZNCl。
[0020] 本发明的有益效果是：本发明所制备的微球包封率在60%以上，85%以上的微球 粒径分布在7~35um范围内，因此微球制剂可靶向富集到肺部，有效提高药物的疗效，降 低药物的毒副作用；同时可延长药物在肺部的滞留时间，维持血药浓度平稳，起到长效的作 用。
[0021] 说明书附图
[0022] 图1为本发明载药PLGA微球的表观形态图：(A)载药PLGA微球光学显微镜下放 大100倍；(B)载药PLGA微球光学显微镜下放大400倍；(C)和（D)SEM观察结果；
[0023] 图2为载药PLGA微球体外溶出速率图；
[0024] 图3为单剂量尾静脉注射后，药物在各脏器中的分布图；
【具体实施方式】
[0025] 为了达到上述目的，本发明提供了一种硫酸头孢喹诺的肺靶向PLGA微球制剂，其 中，其制备方法为：
[0026] 1)分别称取硫酸头孢喹诺药物和PLGA载体，以探头超声将药物分散到5~20 % 明胶溶液，作为内水相，将PLGA加入到有机溶剂中，涡旋溶解作为油相；
[0027] 2)将所述内水相和所述油相按照体积比为1:7~15混合，探头超声乳化，形成初 乳；
[0028] 3)配制1%PVA水溶液作为外水相，将步骤2)得到的所述初乳与所述外水相按照 体积比1:5~20混合，在2500~5000rpm转速下，以高速剪切机剪切乳化20-30s，形成复 乳；
[0029] 4)将步骤3)得到的所述复乳分散到0? 25%PVA水溶液中，置于磁力搅拌器上低 速搅拌3~5h，挥发除去有机溶剂，然后4000rpm离心5-10min收集微球，用超纯水洗涤微 球三遍，抽滤，冷冻干燥，即得肺靶向PLGA微球制剂。
[0030] 其中，所述步骤1)中硫酸头孢喹诺与PLGA的质量比为：1:5-20。
[0031] 其中，所述肺靶向PLGA微球制剂的粒径范围为7-35um。
[0032] 其中，上述步骤1)中明胶溶液的浓度为10-15%。
[0033] 其中，所述明胶溶液中还含有海藻酸丙二醇酯、瓜尔豆胶、羟甲基纤维素和酪蛋 白酸钠，所述明胶、海藻酸丙二醇酯、瓜尔豆胶、羟甲基纤维素和酪蛋白酸钠的质量比为： 10-15:0. 05-0. 1:0. 01-0. 05 ：0. 03-0. 3:0. 01-0. 1〇
[0034] 其中，所述步骤1)中的有机溶剂为二氯甲烷、乙酸乙酯的混合溶剂，质量比为： 1:0-3:1 ;或者，所述步骤1)中的有机溶剂为二氯甲烷、乙酸乙酯、乙醚、丙酮的混合溶剂， 质量比为：1-2:0. 1-1 :0? 1-0. 5:0. 2-0. 6。
[0035] 其中，PLGA的浓度为5~30%，所述PLGA中PLA与PGA的聚合比例为：1:0-9:1。
[0036] 其中，步骤3)中1 %PVA水溶液含有1 %NaCl;步骤4)中0. 25 %PVA水溶液含有 1 %NaCl〇
[0037] 其中，步骤3)中1 %PVA水溶液含有1 %NaCl、1 %KCl和1 %ZnCl;步骤4)中 0? 25 %PVA水溶液含有 1 %NaCl、1 %ZnCl。
[0038] 一、头孢喹诺肺靶向微球的特性考察
[0039] I. 1微球外观形态观察
[0040] PLGA微球的表观形态是通过光学显微镜和扫描电镜来观察的。
[0041] 光学显微镜观察前的样品处理方法：称取适量微球粉末，分散到一定体积的生理 盐水中，玻璃棒蘸取一滴到载玻片上，将盖玻片自液滴一侧轻轻盖上，置于显微镜下观察即 可。
[0042] 扫描电镜观察前的样品处理方法：在样品台上粘贴好双面导电胶，用牙签蘸取微 球样品粉末后，在导电胶上轻轻滚几下，使少量微球粉末沾到导电胶上，吹风机吹掉未粘住 的样品后，喷金处理，上机观察。
[0043] 1. 2微球粒径测量
[0044] 微球药物含量测定方法的建立及微球载药性能检测
[0045] 色谱工作条件
[0046] 色谱柱：AgilentC18 柱（150mmX4. 6mm，5ym)
[0047] 流动相：乙腈-高氯酸钠溶液（12 :88)
[0048] UV检测波长：