一种纳米复合胶束及其制备方法和应用与流程

本申请涉及一种纳米复合胶束及其制备方法和应用，属于材料领域。

背景技术：

磁共振成像技术现已成为一种重要的医学诊断手段，可有效检测组织坏死、局部缺血和各种恶性病变如肿瘤。具有灵敏度高、图像清晰、检查无创伤等优点。随着磁共振成像在临床肿瘤诊断的广泛应用，人们希望能够通过磁共振成像实现对肿瘤早发现及转移灶追踪。但是，目前临床用造影剂都缺乏对肿瘤及其转移灶的特异性，并且长时间使用可能会引起肝肾毒性。因此迫切需要开发出精准靶向型造影剂，提高其特异性，降低毒副作用。

神经肽y受体被发现在多种肿瘤细胞及转移灶上有高表达，因此其高选择性的配体被偶联在纳米粒子表面，实现了对乳腺癌等肿瘤的靶向诊断与治疗。但是，纳米粒子作为一种外源性的物质，在体内循环过程中不可避免地会被巨噬细胞的“调理作用”清除，导致靶点造影剂有效浓度降低，大大阻碍了基于纳米载体的造影剂在生物医学方面的应用。

技术实现要素：

根据本申请的一个方面，提供了一种纳米复合胶束，该纳米复合胶束在实现肿瘤部位主动靶向造影的同时，能够显著降低巨噬细胞对造影剂的吞噬，减少造影剂在肝肾等部位的累积，降低毒副作用，提高安全性。

所述纳米复合胶束包括：纳米胶束、靶分子和自主肽；

所述纳米胶束由高分子材料组成，内部包覆有内水相；

所述靶分子和自主肽偶联于纳米胶束表面。

可选地，所述纳米复合胶束包括：

纳米胶束，所述纳米胶束内部包覆有超顺磁氧化铁、四氧化三锰、三氧化二钆中的一种或多种；

靶分子，所述靶分子偶联于所述纳米胶束表面，且能与癌细胞表面抗原或受体发生特异性相互作用的抗体或配体；

自主肽，所述自主肽分子与靶分子同时偶联于纳米胶束表面，能够避免纳米胶束被巨噬细胞吞噬，且与靶分子之间互不影响功能。

可选地，所述靶分子与神经肽y受体具有高的亲和性。所述“高的亲和性”是指所述靶分子与神经肽y受体的亲和性ic50≤1.0nm，较佳地ic50≤0.1nm，更佳地ic50≤0.01nm。

可选地，所述靶分子可与选自下组的癌细胞高特异性结合：乳腺癌、肾癌、卵巢癌、胃癌、脑癌等。

可选地，所述内水相与所述纳米胶束的质量比为1：10-100。

可选地，所述内水相与所述纳米胶束的质量比上限选自1:10、1:23.8、1:24或1:100；下限选自1:10、1:23.8、1:24或1:100。

可选地，所述高分子材料为生物可降解的高分子材料，选自聚乙二醇-聚乳酸(peg-pla)、聚乙二醇-二硬脂酰磷脂酰乙醇胺(peg-dspe)、聚乙二醇-聚乳酸-羟基乙酸共聚物(peg-plga)、聚乙二醇-聚己内酯(peg-pca)、牛血清蛋白粒子(bsa)、人血清白蛋白粒子(自主肽)、壳聚糖(cs)或其组合。

可选地，所述高分子材料的数均分子量为1000-20000。

可选地，所述高分子材料选自聚乙二醇-聚乳酸、聚乙二醇-二硬脂酰磷脂酰乙醇胺、聚乙二醇-聚乳酸-羟基乙酸共聚物、聚乙二醇-聚己内酯、牛血清蛋白粒子、人血清白蛋白粒子、壳聚糖中的至少一种；

所述内水相选自超顺磁氧化铁、四氧化三锰、三氧化二钆中的至少一种；

所述靶分子选自[d-arg25]-npy、[d-his26]-npy、[d-arg25,d-his26]-npy、[arg6,pro34]pnpy、[asn6,pro34]pnpy、[cys6,pro34]pnpy、[phe6,pro34]pnpy、[arg7,pro34]pnpy、[d-his26,pro34]npy、[phe7,pro34]pnpy、[pro30,nle31,bpa32,leu34]npy(28-36)、[pro30,nal32,leu34]npy(28-36)、[pro30,nle31,nal32,leu34]npy(28-36)、bibo3304、pd160170、ly366258、j-104870、ly366258、j-104870、ly357897、j-115814中的至少一种；

所述自主肽序列包括gnykcevteltregetiielk、gnytcevtelkregetiielk、gnytcekteltregetiielk、gnytcevteltregetiielk、gnytkevteltregetiielk、gnytcevtelkregetiielk、gnytcevteltregktiielk中的至少一种。

可选地，所述超顺磁氧化铁为纳米超顺磁氧化铁。

可选地，所述靶分子、所述自主肽和所述纳米胶束的质量比为1：0.1-1：3-100。

可选地，所述靶分子、所述自主肽和所述纳米胶束的质量比为1：0.1-1：3-30。

可选地，所述靶分子、所述自主肽和所述纳米胶束的质量比为1：0.25-0.75：5-20。

优选地，所述靶分子、所述自主肽和所述纳米胶束的质量比为1：0.25-0.5：8-15。

可选地，所述纳米复合胶束的粒径为10-500nm。

可选地，所述纳米复合胶束的粒径为50-500nm。

可选地，所述纳米复合胶束的粒径为40-300nm。

优选地，所述纳米复合胶束的粒径为100-250nm。

优选地，所述纳米复合胶束的粒径为40-140nm。

本申请的另一方面，提供了所述的纳米复合胶束的制备方法，其特征在于，所述方法至少包括：将含有高分子材料、内水相、自主肽和靶分子的混合液偶联反应，得到所述纳米复合胶束。

可选地，所述偶联反应选自羧基与氨基的缩合反应、巯基与马来酰亚胺的加成反应或亲和素与生物素的非共价结合。

可选地，所述方法至少包括：

1)提供包含纳米胶束和靶向分子、自主肽的混合液；

2)将所述靶分子、自主肽与所述纳米胶束进行偶联反应，得到所述纳米复合胶束。

可选地，步骤1)所述靶分子，所述自主肽和所述纳米胶束的质量比为1：0.25-0.75：5-20，较佳地1：0.25-0.5：8-15。

可选地，步骤1)所述纳米胶束经活化剂活化预处理。

可选地，所述活化剂选自下组：n-羟基琥珀酰亚胺、(1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐)、或其组合。

可选地，所述方法至少包括：

a-1)提供第一混合液和第二溶液；其中，

所述第一混合液包含有机溶剂、造影剂纳米复合胶束和生物可降解的高分子材料；

所述第二溶液包含水溶剂和乳化剂；

a-2)在搅拌条件下，混合所述第一混合液和所述第二溶液，得到第二混合液；

a-3)过夜搅拌处理所述挥发有机溶剂处理所述第二混合液，得到所述胶束溶液；其中，过夜搅拌为搅拌8-16小时。

可选地，所述方法至少包括：

a-11)提供第一混合液和第二溶液；其中，

所述第一混合液包含有机溶剂、内水相和生物可降解的高分子材料；

所述第二溶液包含水溶剂和乳化剂；

可选地，所述内水相选自超顺磁氧化铁、四氧化三锰、三氧化二钆中的至少一种；

a-12)在搅拌条件下，混合所述第一混合液和所述第二溶液，得到第二混合液；

a-13)超声细胞粉碎处理所述第二混合液，得到复乳液；

a-14)搅拌处理所述复乳液，以去除剩余有机溶剂，得到所述纳米复合胶束。

在另一优选例中，在步骤a-12)之前还包括如下步骤：

a-1-1)将所述第一混合液进行超声处理；

a-1-2)将所述第二溶液进行超声处理。

在另一优选例中，步骤a-14)之后还任选地包括如下步骤：

a-15)任选地利用pva将剩余的乳化剂去除；

a-16)离心处理前述步骤所得产物，去上清液。

可选地，所述有机溶剂选自下组：二氯甲烷、三氯甲烷、乙醇、丙酮、乙醚、乙酸乙酯中的至少一种。

可选地，所述水溶剂选自下组：水、pbs中的至少一种。

可选地，所述乳化剂选自下组：胆酸钠、span80、pluronicf68、dextram70中的至少一种。

可选地，所述第一混合液中，所述内水相和生物可降解的高分子材料的质量比为0.01:1-0.1:1。

可选地，所述第二混合液中，所述乳化剂和生物可降解的高分子材料的质量比为1:1-5:1。

可选地，步骤a-12)所述搅拌的搅拌速度为50-500rpm。

可选地，步骤a-13)所述超声细胞粉碎处理的处理功率为300-1000w，较佳地500-800w。

可选地，步骤a-13)所述超声细胞粉碎处理的处理时间为30-1000s，较佳地60-500s。

可选地，所述方法至少包括：

(a1)获得靶分子-高分子材料复合物和自主肽-高分子材料复合物；

(a2)将所述靶分子-高分子材料复合物和自主肽-高分子材料复合物以及高分子材料混合于有机溶剂中，然后加入含有内水相的溶液，得到混合溶液；

(a3)将步骤(a2)中所述混合溶液加入到水溶剂中，搅拌，除去溶剂，过滤，得到所述纳米复合胶束。

可选地，所述步骤(a1)包括：将含有端羧基的高分子材料经过活化，然后分别与靶分子或自主肽混合，搅拌，透析，得到靶分子-高分子材料复合物或自主肽-高分子材料复合物。

可选地，步骤(a1)中所述活化过程中采用的活化剂选自n-羟基琥珀酰亚胺、(1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐)中的至少一种；

所述靶分子与羧基高分子材料的摩尔比为1:1；

所述自主肽与羧基高分子材料的摩尔比为1:1。

可选地，步骤(a2)中所述有机溶剂选自二氯甲烷、三氯甲烷、乙醇、丙酮、乙醚、乙酸乙酯中的至少一种；

所述内水相的溶液中溶剂选自二氯甲烷、三氯甲烷、乙醇、丙酮、乙醚、乙酸乙酯中的至少一种。

可选地，步骤(a2)中所述内水相的溶液的浓度为1mg/ml。

可选地，步骤(a3)中所述水溶剂选自水、pbs中的至少一种。

可选地，步骤(a3)中所述搅拌的时间为3～8分钟，速率为50-900rpm。

可选地，步骤(a3)中所述搅拌的时间为3～8分钟，速率为50-500rpm。

可选地，所述方法至少包括：

(b1)提供第一混合液和第二溶液；其中，

所述第一混合液包含有机溶剂、内水相、靶分子、自主肽和高分子材料；

所述第二溶液包含水溶剂和乳化剂；

(b2)在搅拌条件下，混合所述第一混合液和所述第二溶液，得到第二混合液；

(b3)超声细胞粉碎处理所述第二混合液，得到复乳液；

(b4)搅拌处理所述复乳液，得到所述纳米复合胶束；

可选地，步骤(b1)中所述有机溶剂选自二氯甲烷、三氯甲烷、乙醇、丙酮、乙醚、乙酸乙酯中的至少一种；

所述水溶剂选自水、pbs中的至少一种。

可选地，步骤(b1)中所述内水相和高分子材料的质量比为0.01:1-0.1:1。

可选地，步骤(b1)中所述乳化剂与高分子材料的质量比为1:1-5:1。

可选地，步骤(b2)中所述搅拌的速度为50-500rpm。

可选地，步骤(b3)中所述超声细胞粉碎处理的条件为：功率为300-1000w，时间为30-1000s。

可选地，步骤(b4)中搅拌的速度为50-500rpm，时间为3-30分钟。

一种精准靶向型造影剂纳米复合物胶束体系，包含本申请中所述纳米复合胶束。

本申请中所述纳米复合胶束为主动靶向且抗巨噬细胞吞噬的纳米复合胶束体系，所述纳米复合胶束包括：

纳米复合胶束，所述纳米复合胶束内含有超顺磁氧化铁、四氧化三锰、三氧化二钆中的一种或多种；和

靶分子，所述靶分子偶联于所述纳米复合胶束表面。

本申请中，“内水相”，是指用于核磁成像的纳米粒子。

本申请中，“自主肽”，是指可以通过与巨噬细胞上高表达的信号调节蛋白α作用，避免巨噬细胞吞噬的多肽。

本发明涉及精准靶向型造影剂的制备及应用。具体地公开一种纳米复合胶束，包括：纳米胶束、造影剂和高分子，其中纳米载体表面偶联有靶分子和自主肽，所述靶分子为能与肿瘤细胞表面神经肽y受体发生特异性相互作用的配体，而自主肽为能够避免巨噬细胞对纳米胶束的调理作用，从而提高肿瘤部位造影剂的浓度，降低对人体其它器官的毒副作用。本发明还具体公开了该复合胶束的制备方法，组合物及其制备方法和应用。

本申请中涉及一种新型精准靶向型造影剂纳米胶束体系，在实现肿瘤部位主动靶向造影的同时，能够显著降低巨噬细胞对造影剂的吞噬，减少造影剂在肝肾等部位的累积，降低毒副作用，提高安全性。

本申请的另一方面，提供了一种靶向型造影剂纳米复合胶束，其特征在于，包含所述的纳米复合胶束、根据所述的方法制备得到的纳米复合胶束中的至少一种。

本申请的又一方面，提供了一种制品，其特征在于，包含所述的纳米复合胶束、根据所述的方法制备得到的纳米复合胶束中的至少一种。

本申请中，所有涉及数值范围的条件均可独立地选自所述数值范围内的任意中间范围。

本申请中，如无特别说明，所有涉及数值范围的条件均包含端点值。

应理解，在本发明范围内中，本发明的上述各技术特征和在下文(如实施例)中具体描述的各技术特征之间都可以互相组合，从而构成新的或优选的技术方案。限于篇幅，在此不再一一累述。

本申请能产生的有益效果包括：

本申请中的纳米复合胶束，有效增强t2或t1磁共振成像效果，在实现肿瘤部位主动靶向造影的同时，能够显著降低巨噬细胞对造影剂的吞噬，减少造影剂在肝肾等部位的累积，降低毒副作用，提高安全性；制备方法简单。

附图说明

图1为实施例1提供的复合物tem图；

图2为实施例1提供的细胞吞噬图；

图3为实施例1提供的复合物磁共振成像图；

图4为实施例3提供的复合物磁共振成像图。

具体实施方式

下面结合实施例详述本申请，但本申请并不局限于这些实施例。

如无特别说明，本申请的实施例中的原料和溶剂均通过商业途径购买，其中，纳米超顺磁氧化铁的购买厂家为上海阿拉丁试剂有限公司，规格为15-30nm；

四氧化三锰的购买厂家为北京德科岛金科技有限公司，规格为40-60nm；

三氧化二钆的购买厂家为北京德科岛金科技有限公司，规格为30-50nm；

靶分子的购买厂家为南京肽业生物有限公司，规格为95％；

自主肽的购买厂家为南京肽业生物有限公司，规格为95％；

peg-pla的购买厂家为上海阿拉丁试剂有限公司，规格为95％；

peg-dspe的购买厂家为上海阿拉丁试剂有限公司，规格为95％；

peg-plga的购买厂家为上海阿拉丁试剂有限公司，规格为95％；

bsa的购买厂家为上海阿拉丁试剂有限公司，规格为99％；

人血清白蛋白粒子(alb)的购买厂家为上海阿拉丁试剂有限公司，规格为99％；

实施例中搅拌操作的仪器名称为标准型磁力搅拌器，厂家为德国ika，型号为mrstandard。

实施例1

[cys6,pro34]pnpy-peg-pla、gnykcevteltregetiielk-peg-pla材料的合成

步骤如下：

在室温下将摩尔比为1:1:1.5的cooh-peg-pla、nhs、edc混合活化2小时后加入1摩尔比的[cys6,pro34]pnpy或gnykcevteltregetiielk，在室温下搅拌48小时后，用分子量为5000的透析袋透析48小时后冻干保存，分别得到gnykcevteltregetiielk-peg-pla和[cys6,pro34]pnpy-peg-pla。[cys6,pro34]pnpy-peg-pla&gnykcevteltregetiielk-peg-pla与peg-pla复合的负载超顺磁氧化铁材料c1的合成

步骤如下：

(1)取[cys6,pro34]pnpy-peg-pla，gnykcevteltregetiielk-peg-pla及peg-pla质量比为4：1：100的混合物共25毫克溶于2毫升丙酮，加入到1毫升超顺磁氧化铁(1毫克每毫升)的丙酮溶液中混合均匀；

(2)将步骤(1)得到的混合溶液逐滴加入到2毫升去离子水中，搅拌5分钟(300rpm)，在37摄氏度下旋转蒸发去除丙酮；

(3)将步骤(2)中得到的溶液过0.22微米的亲水滤膜后得到胶束，标记为c1。

实施例2

[cys6,pro34]pnpy-peg-pla及gnykcevteltregetiielk-peg-pla材料的合成

步骤如下：

在室温下将摩尔比为1:1:1.5的cooh-peg-pla、nhs、edc混合活化2小时后加入1摩尔比的[cys6,pro34]pnpy或gnykcevteltregetiielk，在室温下搅拌48小时后，用分子量为5000的透析袋透析48小时后冻干保存，得到[cys6,pro34]pnpy-peg-pla或gnykcevteltregetiielk-peg-pla。

[cys6,pro34]pnpy-peg-pla&gnykcevteltregetiielk-peg-pla与peg-pla复合的四氧化三锰材料的c2合成

步骤如下：

(1)取[cys6,pro34]pnpy-peg-pla，gnykcevteltregetiielk-peg-pla及peg-pla质量比为4：1：100的混合物共25毫克溶于2毫升丙酮，加入到1毫升四氧化三锰(1毫克每毫升)的丙酮溶液中混合均匀；

(2)将步骤(1)得到的混合溶液逐滴加入到2毫升去离子水中，搅拌5分钟，在37摄氏度下旋转蒸发去除丙酮；

(3)将步骤(2)中得到的溶液过0.22微米的亲水滤膜后得到胶束，标记为c2。

实施例3

[cys6,pro34]pnpy-peg-pla及gnykcevteltregetiielk-peg-pla材料的合成

步骤如下：

在室温下将摩尔比为1:1:1.5的cooh-peg-pla、nhs、edc混合活化2小时后加入1摩尔比的[cys6,pro34]pnpy或gnykcevteltregetiielk，在室温下搅拌48小时后，用分子量为5000的透析袋透析48小时后冻干保存，得到[cys6,pro34]pnpy-peg-pla或gnykcevteltregetiielk-peg-pla。

[cys6,pro34]pnpy&gnykcevteltregetiielk-peg-pla与peg-pla复合的负载三氧化二钆材料的c3合成

步骤如下：

(1)取[cys6,pro34]pnpy-peg-pla，gnykcevteltregetiielk-peg-pla及peg-pla质量比为4：1：100的混合物共25毫克溶于2毫升丙酮，加入到1毫升三氧化二钆(1毫克每毫升)的丙酮溶液中混合均匀；

(2)将步骤(1)得到的混合溶液逐滴加入到2毫升去离子水中，搅拌5分钟，在37摄氏度下旋转蒸发去除丙酮；

(3)将步骤(2)中得到的溶液过0.22微米的亲水滤膜后得到胶束，标记为c3。

实施例4

本实施例中合成化合物c4～c24，具体的反应条件如表1所示，具体的操作与实施例1相同。

表1

实施例5

本实施例中合成化合物c25～c29，具体的反应条件如表2所示，具体的操作与实施例1相同。

表2

实施例6

本实施例中合成化合物c30～c32，具体的反应条件如表3所示，具体的操作与实施例1相同。

表3

实施例7

本实施例中合成化合物c33～c38，具体的反应条件如表4所示，具体的操作与实施例1相同。

表4

实施例8

[cys6,pro34]pnpy-peg-pla&gnykcevteltregetiielk-peg-pla与peg-pla复合的负载超顺磁氧化铁材料c39的合成

步骤如下：

1)提供第一混合液和第二溶液；其中，

所述第一混合液包含有机溶剂(丙酮，2毫升)、内水相(超顺磁氧化铁，1毫克每毫升，1毫升，溶剂为丙酮)、靶分子([cys6,pro34]pnpy)、自主肽(gnykcevteltregetiielk)和高分子材料(peg-pla)；

所述第二溶液包含水溶剂(pbs，2毫升)和乳化剂(胆酸钠，2毫克)；

其中，所述靶分子、自主肽和高分子材料的质量比为4：1：100，共计为25毫克；

2)在搅拌条件下(300rpm)，混合所述第一混合液和所述第二溶液，得到第二混合液；

3)超声细胞粉碎处理(600w，100s)所述第二混合液，得到复乳液；

4)搅拌处理(300rpm，24h)所述复乳液，得到所述纳米复合胶束，记为c39。

实施例9形貌表征

对实施例1至8中制备的各复合物c1～c39进行形貌表征；表征方法：透射电子显微扫描仪器：feitecnaif20。

表征结果，典型的如图1所示，对应实施例1中制备得到的[cys6,pro34]pnpy-peg-pla&gnykcevteltregetiielk-pla-peg与pla-peg复合的负载超顺磁氧化铁材料c1的tem图。

从图1中可以看出，产物的粒径为100-250nm。

其他样品的测试结果与上述类似，产物的粒径在10-500nm。

实施例10巨噬细胞吞噬实验

对实施例1至8中的样品c1～c39进行巨噬细胞的吞噬实验。典型的如实施例1中产物c1的测试，具体如下。

10⁵个raw264.7小鼠巨噬细胞接种于6孔板中，37摄氏度，5％co2孵育过夜，分别加入200ug/ml的pla-peg负载超顺磁氧化铁材料、[cys6,pro34]pnpypla-peg复合的负载超顺磁氧化铁材料及[cys6,pro34]pnpy-pla-peg&gnykcevteltregetiielk-pla-peg与pla-peg复合的负载超顺磁氧化铁材料，8h后胰酶消化收集细胞，pbs漂洗三遍后重悬细胞，流式细胞仪(厂家为美国bd，型号为facscalibur)分别检查10000个各自巨噬细胞的平均荧光强度，335nm激发，355nm收集信号，结果如图2所示。从图中可以看出自主肽的作用能够有效减少巨噬细胞对于胶束的吞噬。其中，图2中“对照”对应超顺磁氧化铁材料，“胶束”对应pla-peg负载超顺磁氧化铁材料，“靶分子”对应[cys6,pro34]pnpypla-peg复合的负载超顺磁氧化铁材料，“靶分子&自主肽”对应样品c1([cys6,pro34]pnpy-pla-peg&gnykcevteltregetiielk-pla-peg与pla-peg复合的负载超顺磁氧化铁材料)。

其他样品的测试方法与c1的测试方法相同，不同在于样品分别与c2～c39的组分对应(胶束、靶分子、靶分子&自主肽；如c2样品的测试过程中，“对照”对应四氧化三锰，“胶束”对应pla-peg负载四氧化三锰材料，“靶分子”对应[cys6,pro34]pnpypla-peg复合的负载四氧化三锰材料，“靶分子&自主肽”对应样品c2([cys6,pro34]pnpy-pla-peg&gnykcevteltregetiielk-pla-peg与pla-peg复合的负载四氧化三锰材料)。测试结果与上述类似，均得到了自主肽的作用能够有效减少巨噬细胞对于胶束的吞噬的结论。

实施例11

对实施例1至8中的样品c1～c39进行核磁成像测试，典型的如实施例1中样品c1的测试，具体如下。

将所得[cys6,pro34]pnpy&gnykcevteltregetiielk-pla-peg与pla-peg复合的负载超顺磁氧化铁材料按照铁的不同摩尔浓度(0、0.15、0.3、0.6、1.2毫摩尔每升)置于离心管中，按照梯度浓度排列，在磁共振成像仪(厂家为上海纽曼，型号为niumag0.47t)下进行成像，结果如图3所示。材料的t2磁共振成像增强效果明显。

所得材料能够有效增强t2磁共振成像效果。

其他实施例中产品的测试方法与上述相同，测试结果与上述类似，所述产品t2磁共振成像增强效果明显。

实验例12

对实施例1至8中的样品c1～c39进行核磁成像测试，典型的如实施例3中样品c3的测试，具体如下。

将所得[cys6,pro34]pnpy&gnykcevteltregetiielk-peg-pla与peg-pla复合的负载三氧化二钆材料按照钆的不同摩尔浓度(0、0.15、0.3、0.6、1.2、2.4毫摩尔每升)置于离心管中，按照梯度浓度排列，在磁共振成像仪(厂家为上海纽曼，型号为niumag0.47t)下进行成像，结果如图4所示。材料的t1磁共振成像增强效果明显。

所得材料能够有效增强t1磁共振成像效果。

其他实施例中产品的测试方法与上述相同，测试结果与上述类似，所述产品t1磁共振成像增强效果明显。

以上所述，仅是本申请的几个实施例，并非对本申请做任何形式的限制，虽然本申请以较佳实施例揭示如上，然而并非用以限制本申请，任何熟悉本专业的技术人员，在不脱离本申请技术方案的范围内，利用上述揭示的技术内容做出些许的变动或修饰均等同于等效实施案例，均属于技术方案范围内。