本发明属于药物领域，尤其涉及一种药物组合物及其制备方法及应用。
背景技术：
：目前，我国环境问题十分严重，企业污染排放总量仍在持续增加，致使江河污染程度居高不下，城市空气处于较重污染水平，食品中的农药和合成添加剂等经常超标。喝不干净的水，呼吸不洁净的空气，吃不安全的食品，都会对身体健康造成危害，而体内首当其冲的脏器便是肝脏，导致化学性肝损伤，诱发肿瘤甚至癌症。面对恶劣的环境污染，每个人生活中或多或少已经接触到污染或正在接受污染中，正因为如此，不能轻视对肝脏的养护，肝脏受损百病生，健康大厦顷刻坍塌，提前预防控制化学性肝损伤是唯一出路，肝损伤一旦发生，很难逆转。肝损伤的保护目前已是一个全球性的严峻课题。化学性肝损伤,是由化学性肝毒性物质所造成的肝损伤。这些化学物质包括酒精、环境中的化学毒物及某些药物。作为人体重要解毒器官的肝脏，具有肝动脉和肝静脉双重血液供应。化学物质可通过胃肠道门静脉或体循环进入肝脏进行转化，因此肝脏容易受到化学物中的毒性物质损害。大自然和人类工业生产过程中均存在一些对肝脏有毒性的物质，称为"亲肝毒物"，这些毒物在人群中普遍易感，潜伏期短，病变的过程与感染的剂量直接相关，可引起肝脏不同程度的肝细胞坏死、脂肪变性、肝硬化和肝癌。肝脏对体内外诸多有毒物质具有很强的生物转化及解毒功能，化学毒物损伤肝脏的机制主要有脂质变性、脂质过氧化反应及胆汁淤积反应等。目前已从多方面探讨了肝损伤的发生机制，研制开发了膜保护剂、抗脂质过氧化剂及免疫调节剂等保护肝脏药物，但疗效尚不满意，且有毒副作用。相较于西药，中药具有毒副作用小的优势，而中医学认为肝损伤是在人体正气不足基础上，湿热疫毒侵于血分所致，其病因为机体禀赋薄弱、素体亏虚、正气不足，外感湿热疫毒之邪，其发病机理是由于“湿热疫毒”乘机体正虚而入，蕴伏于肝，损伤肝脾，继而及肾。其病位在肝，涉及脾、肾、胃、等脏器。“见肝之病，知肝传脾，当先实脾”。如何从味中药中筛选出几种具有协同增效的药物入药是中药治疗化学性肝损伤需要解决的技术难题。技术实现要素：本发明提供一种药物组合物，本发明的药物组合物包括如下原料制备得到：枳椇子、葛根、丹参、女贞子、白芍、甘草。本发明的药物组合物采用水煎煮即可得到，提取方法简单。本发明药物组合物中，各原料得到的各提取物具有较好的协同作用，能够显著的提高人体的免疫力，对化学性肝损伤有辅助保护功能。同时本发明的还提供了一种药物组合物的制备方法及该药物组合物的应用。为达到上述目的，本发明所采取的解决方案是：具体方法如下：一种药物组合物，包含枳椇子、葛根、丹参、女贞子、白芍、甘草。所述组合物，包含以下重量份的原料：所述组合物，包含以下重量份的原料：所述的组合物可以制备成胶囊、丸剂、片剂、颗粒剂。所述的组合物中还可以加入常规的药物赋形剂，如溶剂、崩解剂、矫味剂、填充剂、着色剂。所述的组合物在制备防治化学性肝损伤的保健品、药品中的用途。一种药物组合物的制备方法，包括以下步骤：取枳椇子、葛根、丹参、女贞子、白芍、甘草，加水浸泡，煎煮，滤过，滤液备用；所得滤液浓缩得得浸膏。本品配方基于中医药理论与现代药理研究相结合而设计的配方，选用枳椇子、葛根、丹参、女贞子、白芍、甘草为主要原料制成的对化学性肝损伤具有辅助保护功能的保健食品，主要适用于有化学性肝损伤危险者。配方中，枳椇子解酒毒、止烦渴、利二便，为君，葛根为臣，增强枳椇解酒功效，同时生津、止烦渴。肝脏为解生瘀血，佐以丹参、女贞子，丹参活血，肝藏血，女贞子、白芍滋补阴血，白芍同时有止痛之功。肝病易累及脾胃，以甘草补脾益气，调和诸味，为本方之使，本方以解毒活血，补血健脾论治来达到对化学性肝损伤有保护作用的保健功效。本发明组合物有益的技术效果：(1)本发明组合物对化学性肝损伤有保护作用。(2)本发明所述的组合物质量可控，使用安全。(3)本发明所述的组合物及其制备的药酒适合于工业生产。具体实施例提供下列实施例，以描述和进一步阐明本发明的某些实施方案和方面，并不能认为其是对本发明范围的限制。实施例实施例1：取250g枳椇子、300g葛根、350g丹参、250g女贞子、250g白芍、150g甘草，第一次加12倍量水浸泡2小时，煎煮2小时，滤过，滤液备用；滤渣加10倍量水，煎煮2小时，滤过，合并滤液，采用减压浓缩设备进行浓缩得浸膏相对密度为1.20～1.25(60℃热测)，减压干燥(70℃，真空度-0.06～-0.08mpa)，即得。实施例2：取200g枳椇子、300g葛根、300g丹参、200g女贞子、200g白芍、100g甘草，第一次加12倍量水浸泡2小时，煎煮2小时，滤过，滤液备用；滤渣加10倍量水，煎煮2小时，滤过，合并滤液，采用减压浓缩设备进行浓缩得浸膏相对密度为1.20～1.25(60℃热测)，减压干燥(70℃，真空度-0.06～-0.08mpa)，即得。实施例3：取400g枳椇子、500g葛根、600g丹参、400g女贞子、400g白芍、300g甘草，第一次加12倍量水浸泡2小时，煎煮2小时，滤过，滤液备用；滤渣加10倍量水，煎煮2小时，滤过，合并滤液，采用减压浓缩设备进行浓缩得浸膏相对密度为1.20～1.25(60℃热测)，减压干燥(70℃，真空度-0.06～-0.08mpa)，即得。实施例4取6.25kg枳椇子、7.50kg葛根、8.75kg丹参、6.25kg女贞子、6.25kg白芍、3.75kg甘草，第一次加12倍量水浸泡2小时，煎煮2小时，滤过，滤液备用；滤渣加10倍量水，煎煮2小时，滤过，合并滤液，采用减压浓缩设备进行浓缩得浸膏相对密度为1.20～1.25(60℃热测)，减压干燥(70℃，真空度-0.06～-0.08mpa)，即得发明组合物的浸膏粉。取1.67kg糊精与配方量的浸膏粉混合均匀，选择以水和不同浓度的50％乙醇制粒、干燥，制粒、整粒，得总产品。实验1、体外实验(组方筛选实验)实验细胞：人肝癌细胞株hepg2细胞株(中国人民解放军军事医学科学院赠予)。hepg2细胞接种于含10％胎牛血清、100u/ml青霉素及100u/ml链霉素的dmem高糖培养基中，于37℃，5％co2饱和湿度细胞培养箱中静置培养，0.25％胰蛋白酶消化传代，取对数生长期的细胞用于实验。实验药物：表1各药物组组方实验方法：取生长状态良好的hepg2细胞以每孔5×104个·ml-1接种于96孔细胞培养板中，每孔100μl，置37℃，5％co2的培养箱内培养，24h后，肝细胞全部贴壁生长，用于实验。实验随机分成7组：空白组、正常对照组、模型组(inh/rfp组)、阳性对照药(联苯双酯组)、药物a组、药物b组、药物c组、药物d组、药物e组。给药方法：空白组无细胞，只加培养基；正常对照组换入正常培养液；模型组加入inh/rfp使其浓度为1μg·ml-1；慈姑提取物组、慈姑组合物组和非慈姑组合物组分别对应加入浓度为500μg·ml-1(以葛根素计)的药物a组、药物b组、药物c组、药物d组、药物e组，阳性对照组加入浓度为50μmol·ml-1的联苯双酯，2h后这五组(药物a组、药物b组、药物c组、药物d组、药物e组和联苯双酯组)再加入浓度为1μg·ml-1的inh/rfp，继续培养24h，每个组设6个平行孔。细胞存活率的检测：取生长状态良好的hepg2细胞以每孔5×104个·ml-1接种于96孔细胞培养板中，每孔100μl，置37℃，5％co2的培养箱内培养24h后，肝细胞全部贴壁生长，用于实验。每孔加入浓度为5g·l-1的mtt溶液，继续培养4h，弃上清，每孔加入150μldmso，摇床震荡10min，放入酶标仪上测定570nm处的光吸收值，重复3次，计算细胞存活率。细胞存活率＝(实验组－空白组)/(正常对照组－空白组)×100％。细胞培养液中ldh、alt、ast、mda的释放：取对数生长期的hepg2细胞以每孔5×104个·ml-1接种于24孔细胞培养板中，置37℃，5％co2的培养箱内培养24h后，肝细胞全部贴壁生长，用于实验。按上述分组加药，24h后收集上清，按试剂盒说明书步骤测定各组细胞上清液中ast(天门冬氨酸氨基转移酶)、alt(丙氨酸氨基转移酶)、乳酸脱氢酶(ldh)和丙二醛(mda)的活性。表2mtt法测定对损伤hepg2细胞存活率的影响(n＝6)组别药物浓度(μg·ml-1)a值(od)细胞存活率(％)正常组00.993±0.034100.0inh/rfp模型组10.616±0.056##62.0联苯双酯组500.797±0.027**80.3药物a组5000.728±0.862*73.4药物b组5000.737±0.979*74.3药物c组5000.739±0.785*74.5药物d组5000.736±0.376*74.2药物e组5000.734±0.066**78.9注：与正常对照组相比，#p<0.05，##p<0.01；与模型组相比，*p<0.05，**p<0.01如表2所示，与正常对照组比较，inh/rfp模型组的细胞存活率明显降低(p＜0.01)，经药物a组、药物b组、药物c组、药物d组、药物e组和联苯双酯的处理后细胞存活率由62.0％增加到73.4％、74.3％、74.5％、76.2％、78.9％，与损伤模型组相比，均有统计学意义(p＜0.05)，其中药物e组的细胞存活率更接近阳性对照组(联苯双酯)，高于其他药物组合物，说明本发明药物组合物相加保肝效果更好。表3损伤hepg2细胞ldh、alt、ast、mda释放情况(n＝6)注：与正常对照组相比，#p<0.05，##p<0.01；与模型组相比，*p<0.05，**p<0.01由表3所示，hepg2细胞与inh/rfp共同孵育24h后，细胞培养上清液中的ldh、alt、ast和mda水平均较正常对照组明显升高(p＜0.01)，表明造模成功。经药物a组、药物b组、药物c组、药物d组、药物e组和联苯双酯的预处理2h后再与inh/rfp共同孵育，细胞培养上清液中的ldh、alt、ast、mda水平有所下降，均有统计学意义(p＜0.05)，其中药物e组的降低程度好于其他药物组合物，说明本发明药物组合物相加保肝效果更好。实验例2(体内药效试验)实验动物：雄性balb/c小鼠(20～25g)共60只，随机分为6组，按表1所述组方给药。各组小鼠分笼饲养于不锈钢金属笼内，每笼5只，室温调节在(26±2)℃，湿度控制在40％～70％，自由饮食和摄水。实验第一天起各组小鼠按1ml/100g灌胃给药3d(正常组小鼠灌服同体积的蒸馏水)。第4日起开始造模，除正常组外各组小鼠均腹腔注射20％ccl4大豆油溶液0.1ml/100g(首次0.2ml/100g)，2次/周，连续30天。造模期间各组小鼠均按上述实验方法灌胃给药，连续30天，末次给药24h(禁食不禁水12h)后，称量体重，眼球取血0.5-1.0ml，室温静置30min，4℃温度下3000r/min离心15min，取上清液，快速取出肝脏，称重；称取定量的肝组织加入生理盐水制成10％的肝匀浆；采用自动生化分析仪检测血清alt、ast、ldh水平。结果见表4。肝指数＝肝脏重量(mg)/体重(g)表4本发明组合物对肝损伤小鼠肝脏指数的影响注：与正常对照组比较，**p<0.01；与模型组比较，#p<0.05，##p<0.01结论：与对照组比较，模型组的肝指数显著增大，与模型组比较，本发明组合物组的肝指数均显著降低；与对照组比较，模型组alt、ast、ldh活性均显著性，与模型组比较，本发明组合物组alt、ast、ldh活性均降低。本发明的制剂具有减少肝细胞损伤的作用。当前第1页12