专利名称：B－环雌甾三烯二醇硫酸酯的制作方法
背景技术：
基本上纯的和低毒性的天然存在的雌激素组合物例如妊马雌酮(PREMARIN，共轭的马科雌激素)的用途已经成为缓轻雌激素缺乏妇女绝经综合征，骨质疏松/骨质减少和其它激素相关失调的综合征治疗的优选药物。天然存在的雌激素组合物的雌激素成分通常鉴定为雌甾酮，马烯雌甾酮，马萘雌甾酮，17-β-雌甾酮，二氢马萘雌甾酮和17-β-二氢马萘雌甾酮的硫酸酯(美国专利2834712)。雌激素组合物通常用基本上中性的大约6.5-7.5的pH的有机酸或无机酸的碱金属盐缓冲或稳定。脲也曾经被用作稳定剂(美国专利3608077)。美国专利4154820中讨论了加入抗氧化剂来稳定合成的共轭雌激素和使用三(羟基甲基)氨基甲烷(TRIS)的pH控制不能防止水解。
这里所公开的化合物之一，5，7，9-雌三烯-3β，17β-二醇3-硫酸酯钠盐是妊马雌酮(共轭的马科雌激素)最小的成分。
本发明描述根据本发明，提供具有下面式I的雌激素试剂
其中A和B各自独立地是
R是SO3-X+；X+是碱金属，碱土金属，铵，含有1-6个碳原子的烷基铵，各烷基中含有1-6个碳原子的二烷基铵，各烷基中含有1-6个碳原子的三烷基铵或者各烷基中含有1-6个碳原子的四烷基铵；前提是A或B至少一个是
碱金属盐包括钠盐和钾盐，特别优选的是钠盐。碱土金属盐包括钙盐和镁盐。合适的烷基包括甲基，乙基，丙基，丁基，戊基和己基，优选的烷基是甲基和乙基。基团中存在多于一个烷基时，其可以是相同或不同的。优选的三烷基铵盐是三甲基铵盐和三乙基铵盐。
本发明盐优选纯度大于1％。
因为5，7，9-雌三烯-3β，17β-二醇3-硫酸酯钠盐是妊马雌酮(共轭的马科雌激素)的最小成分，本发明也提供了纯度大于的1％的5，7，9-雌三烯-3β，17β-二醇3-硫酸酯钠盐，和主要由5，7，9-雌三烯-3β，17β-二醇3-硫酸酯钠盐构成的化合物。
本发明也提供了主要由具有下式的化合物构成的物质的组合物。
其中A和B各自独立地是
R是SO3-X+；X+是碱金属，碱土金属，铵，含有1-6个碳原子的烷基铵，各烷基中含有1-6个碳原子的二烷基铵，各烷基中含有1-6个碳原子的三烷基铵或者各烷基中含有1-6个碳原子的四烷基铵；前提是A或B至少一个是
本发明另外提供对需要的哺乳动物提供雌激素治疗的方法，包括对所述哺乳动物给与有效量的具有下面结构式的化合物
其中A和B各自独立地是
R是SO3-X+；X+是碱金属，碱土金属，铵，含有1-6个碳原子的烷基铵，各烷基中含有1-6个碳原子的二烷基铵，各烷基中含有1-6个碳原子的三烷基铵或者各烷基中含有1-6个碳原子的四烷基铵；前提是A或B至少一个是
根据本发明，治疗包括治疗存在的症状，使症状改善或者提供症状的减轻和抑制包括抑制和防止症状的恶化或发展。
本发明进一步提供含有式I的化合物的组合物。特别是提供了含有至少1％式I的化合物的组合物。本发明的一个方面提供了其中唯一的雌激素试剂是式I的化合物的组合物。本发明的实施方案包括其中唯一的活性化合物是式I的化合物的组合物。在这些实施方案中可以包括其它赋形剂和载体，但是没有另外的活性物质。
本发明还提供了制备上述化合物的方法。提供了制备5，7，9-雌三烯-3，17-二醇3，17-二硫酸酯盐(即其中A和B各自独立地是硫酸酯盐)的方法，包括a)将合适的5，7，9-雌三烯-3，17-二醇-3，17-二硫酸酯转化为药学可接受盐，b)将5，7，9-雌三烯-3，17-二醇-3，17-二硫酸酯的药学可接受盐转化为合适的5，7，9-雌三烯-3，17-二醇-3，17-二硫酸酯的不同的药学可接受盐，或者c)直接将合适的5，7，9-雌三烯-3，17-二醇转化为5，7，9-雌三烯-3，17-二硫酸酯的期望的药学可接受盐。
5，7，9-雌三烯-3，17-二醇-3，17-二硫酸酯可以通过用合适的碱中和酸而转化为药学可接受盐，所述合适的碱是例如碱金属碳酸盐，碱土金属碳酸盐或伯、仲、叔或季胺的碳酸盐。碱金属或碱土金属盐可以通过使用合适的碱金属氢化物例如氢化钠，氢化钾或氢化锂制备。
合适的5，7，9-雌三烯-3，17-二醇-3，17-二硫酸酯的药学可接受盐通过置换，通过离子交换树脂或者通过双降解(转移)而转化为不同的药学可接受盐。用强碱置换弱碱可以用来例如使用合适的碱例如氢氧化物将胺盐转化为碱金属盐或碱土金属盐。例如三烷基胺盐例如三乙基胺盐可以通过用碱金属氢氧化物例如氢氧化钠水溶液处理而转化为碱金属盐例如钠盐。置换可以用离子交换树脂进行。或者可以通过双降解将一种盐转化为另一种盐，例如碱土金属盐例如钙盐可以用碱金属盐置换。例如5，7，9-雌三烯-3，17-二醇-3，17-二硫酸酯的钙盐可以溶解于水后加入例如碳酸钠。不溶性碳酸钙然后沉淀出，得到期望的5，7，9-雌三烯-3，17-二醇-3，17-二硫酸酯的钠盐。
期望的5，7，9-雌三烯-3，17-二醇-3，17-二硫酸酯的药学可接受盐可以通过直接转化合适的5，7，9-雌三烯-3，17-二醇来制备。可以通过使其与合适的胺三氧化硫复合物，例如与三烷基胺三氧化硫(例如三乙基胺三氧化硫复合物)反应以得到相应的三烷基胺盐(例如三乙基胺盐)来进行。如果需要，这种盐然后转化为如上所述的本发明另一种盐。
本发明还提供了制备5，7，9-雌三烯-3，17-二醇-3-硫酸酯盐或5，7，9-雌三烯-3，17-二醇-17-硫酸酯盐(即其中A和B之一是硫酸酯盐和另一个是氢的化合物)的方法，包括a)将合适的5，7，9-雌三烯-3，17-二醇-单硫酸酯转化为药学可接受盐，b)将合适的5，7，9-雌三烯-3，17-二醇-单硫酸酯的药学可接受盐转化为5，7，9-雌三烯-3，17-二醇-单硫酸酯的不同的药学可接受盐，c)将相应的5，7，9-雌三烯-3-醇，17-酮-3-硫酸酯盐或5，7，9-雌三烯-17-醇，3-酮17硫酸酯盐转化为期望的5，7，9-雌三烯-3，17-二醇-3-硫酸酯盐或5，7，9-雌三烯-3，17-二醇-17-硫酸酯盐，d)将5，7，9-雌三烯-3，17-二醇转化为期望的5，7，9-雌三烯-3，17-二醇-单硫酸酯的期望的药学可接受盐，e)将相应的17保护的5，7，9-雌三烯-3，17-二醇-3-硫酸酯盐或3保护的5，7，9-雌三烯-3，17-二醇-17-硫酸酯盐去保护，或者f)通过转化将合适的5，7，9-雌三烯-3，17-二醇-单硫酸酯的药学可接受盐的一种立体异构体转化为另一种异构体。
可以通过类似于上文描述的方法进行合适的5，7，9-雌三烯-3，17-二醇-单硫酸酯向药学可接受盐的转化和合适的5，7，9-雌三烯-3，17-二醇-单硫酸酯的药学可接受盐向5，7，9-雌三烯-3，17-二醇-单硫酸酯的不同的药学可接受盐的转化。
5，7，9-雌三烯-3-醇，17-酮单硫酸酯盐可以通过用合适的还原剂例如LiBH4还原而转化为期望的5，7，9-雌三烯-3，17-二醇-单硫酸酯盐。邻近甲基的空间影响将引起一些还原剂优先提供17β化合物。这些可以通过转化而转化为相应的α化合物，例如通过MITSUNOBU转化。
5，7，9-雌三烯-3，17-二醇可以通过类似于上面描述的方法直接转化为期望的5，7，9-雌三烯-3，17-二醇单硫酸酯的期望的药学可接受盐。
为了制备期望的5，7，9-雌三烯-3-醇，17-酮单硫酸酯盐，必须保护第二个羟基。这可以通过常规方法使用最终要被去除以提供产物的合适的保护基来实现。
为了保护较小反应性的17羟基，可能需要首先保护3羟基。例如3羟基可以用第一保护基团保护，然后用第二保护基团保护17羟基。然后3羟基可以转化为期望的硫酸盐。在这一转化之前或同时可以通过使用将要用硫酸酯基团置换第一保护基团的试剂来去除第一保护基团。然后可以去除第二保护基团以提供期望的产物。或者可以在3羟基转化为硫酸酯盐的同时去除第二保护基团。
本发明还提供了通过化学方法制备的式I的化合物，特别是根据上面描述的方法制备的那些化合物。本发明还提供了通过这样的方法可获得的式I的化合物。
本发明的化合物可以从容易获得的起始物制备。下面的方案给出本发明代表性化合物的制备。例如5，7，9-雌三烯-3β，17β-二醇3-硫酸酯钠盐(7)可以根据方案I从3β-羟基-5，7，9-雌三烯-17-酮制备。3β-羟基-5，7，9-雌三烯-17-酮可以根据D.Banerjee，Ind.Chim.Belge，Suppl.2435(1959)制备。方案I
5，7，9-雌三烯-3β，17β-二醇3-硫酸酯钠盐(7)也可以如方案II所示通过二醇(8)的选择性硫酸化而制备。二醇(8)可以通过用还原剂例如硼氢化钠还原17-酮而从(1)制备。方案II
5，7，9-雌三烯-3β，17β-二醇3-硫酸酯钠盐(7)也可以如方案III所示通过用还原剂例如硼氢化钠还原3β-羟基-5，7，9-雌三烯-17-酮3-硫酸酯钠盐(10)而制备。
方案III
5，7，9-雌三烯-3α，17β-二醇3-硫酸酯钠盐(17)也可以根据方案IV根据标准文献技术制备。3α-羟基的引入可以通过用大的还原剂例如三叔丁氧基氢化锂铝还原3-酮(14)而实现。方案IV
5，7，9-雌三烯-3α，17β-二醇3-硫酸酯钠盐(17)也可以根据方案V根据标准文献技术制备。方案V
5，7，9-雌三烯-3β，17α-二醇3-硫酸酯钠盐(32)的制备如方案VI所示可以根据标准文献技术制备。方案VI
可以通过3β-醇的立体化学转化制备具有3α，17α-构型的本发明化合物。例如在用来有效地将(26)转化为(27)以提供3α，17α-立体化学的条件下处理化合物(30)的3β-羟基。本发明化合物17-位羟基的硫酸盐化作用可以通过保护的3-羟基或3-酮基实现。
如下面描述的其中评价作为本发明代表性化合物的5，7，9-雌三烯-3β，17β-二醇的体外和体内标准药物学试验方法所示，本发明化合物是雌激素性的。
雌激素受体结合开始的评价测定了5，7，9-雌三烯-3β，17β-二醇对制备成可溶性细胞提取物(胞质)的人雌激素受体(hER-α)的竞争结合性质。在此标准药物学试验方法中，证明5，7，9-雌三烯-3β，17β-二醇没有特异性结合活性。但是，当使用全细胞试验方法分析雌激素受体结合时，清楚地证明特异性结合。该试验方法表明5，7，9-雌三烯-3β，17β-二醇的IC50是2.3×10-8。与雌甾酮，马烯雌甾酮和去氢马烯雌甾酮的Ki相比较分别是51、67和375nM。
体外其转染试验方法在该标准药物学试验方法中，hER-α在用腺-2x-ERE-tk-荧光素酶传染的中国仓鼠卵巢(CHO)细胞中超表达，腺-2x-ERE-tk-荧光素酶是雌激素应答报告基因构建体，细胞暴露给不同浓度(10-12-10-5M)的5，7，9-雌三烯-3β，17β-二醇24小时。细胞也暴露给10-9M17β雌二醇。处理24小时后，细胞裂解并对细胞提取物测定荧光素酶活性。结果表明5，7，9-雌三烯-3β，17β-二醇具有大约30nM的EC50。使用类似试验方法，先前数据表明对于雌甾酮的EC50是5.6nM。
体内向子宫活性用0.2和2mg/kg剂量的5，7，9-雌三烯-3β，17β-二醇处理发育未全的大鼠三天(S.C.)，同时另外组的大鼠(n＝6)分别用0.5μg乙炔基雌二醇和赋形剂处理作为正对照和负对照。用两种浓度5，7，9-雌三烯-3β，17β-二醇处理的大鼠子宫重量增加，表明3β-羟基-5，7，9-雌三烯-17-酮是雌激素性的。
这些标准药物学试验方法的结果证明本发明化合物是雌激素性的。
以在标准药物学试验方法中得到的结果为基础，本发明化合物用于提供卵巢切除或绝经之后的雌激素替代治疗，用于减轻与雌激素缺乏相关的症状，包括血管舒缩综合征，例如热潮红，和其它与绝经相关的症状，例如阴道萎缩，阴道炎，可以引起尿频次数增加、失禁和尿痛的低位尿道的萎缩性变化。本发明的化合物用于防止骨减少和抑制或治疗骨质疏松。本发明化合物是心脏保护性的，用于治疗动脉粥样硬化，局部缺血疾病和高血压。当用雌激素对绝经后妇女治疗以预防骨质疏松时和对于男性当使用雌激素治疗时，这些心血管保护性质是非常重要的。另外，本发明化合物用于抑制泌乳和预防和治疗流行性腮腺炎睾丸炎。
本发明的化合物可以单独用作唯一的治疗剂或者可以与其它试剂结合使用，例如其他的雌激素，孕激素或者/和雄性激素。
本发明的化合物可以单独配制或者与给药的药物载体一起配制，由化合物的溶解性和化学特性决定配制比例，选择给药途径和标准药物学操作。药物载体可以是固体或液体。
固体载体包括一种或多种物质，它们也可以用作矫味剂，润滑剂，增溶剂，悬浮剂，填充剂，助流剂，压制助剂，粘合剂或片剂崩解剂；其也可以是制胶囊材料。在粉末剂中，载体是一种研细的固体，其与研细的活性成分混合。在片剂中，活性成分与具有必需的压缩性质的载体以合适的比例混合并且压制成期望的形状和大小。粉末剂和片剂优选含有最多99％的活性成分。合适的固体载体包括例如磷酸钙，硬脂酸镁，滑石粉，糖，乳糖，糊精，淀粉，明胶，纤维素，甲基纤维素，羧甲基纤维素钠，聚乙烯吡咯烷酮，低熔点蜡和离子交换树脂。
液体载体用于制备溶液，悬浮液，乳液，糖浆，酏剂和加压的组合物。活性成分可以溶解于或悬浮于药学可接受的液体载体，例如水，有机溶剂，两者的混合物或者药学可接受油或脂肪。液体载体可以含有其它合适的药学添加剂，例如加溶剂、乳化剂、缓冲剂、防腐剂、甜味剂、矫味剂、悬浮剂、增稠剂、着色剂、粘度调节剂、稳定剂或渗透压调节剂。用于口服和肠胃外给药的液体载体的合适的例子包括水(部分含有上述添加剂，例如纤维素衍生物，优选羧甲基纤维素钠溶液)，醇(包括一元醇和多元醇，例如乙二醇)及其衍生物，卵磷脂和油(例如精制花生油和椰子油)。对于肠胃外给药，载体还可以是油性的酯例如油酸乙酯和肉豆蔻酸异丙酯。在形成肠胃外给药的组合物的无菌液体中使用无菌液体载体。用于加压组合物的液体载体可以是卤化烃或者其它药学可接受抛射剂。
液体药物组合物是无菌溶液或悬浮液，可以通过例如肌内，腹膜内或皮下注射来应用。无菌溶液也可以静脉内给药。本发明化合物也可以以液体或固体组合物形式口服给药。
本发明化合物也可以以常规栓剂形式直肠或阴道给药。对于鼻内或支气管内吸入或吹入给药，本发明化合物可以配制成含水或部分含水溶液，其然后可以以气雾剂的形式应用。本发明化合物也可以通过使用含有活性化合物和对于活性化合物是惰性的对皮肤是无害的并且使送递试剂通过皮肤全身吸收到血液中的载体的透皮药贴经皮肤给药。该载体可以采取多种形式，例如乳膏，软膏，糊，凝胶和密封装置。乳膏和软膏可以是水包油或油包水型粘的液体或半固体乳液。糊剂由分散在含有合适的活性成分的石油或亲水性石油中的吸收性粉末组成。不同封闭装置可以用来将活性成分释放到血液中，例如包裹有含有活性成分和有或没有载体的药物的半渗透膜，或者含有活性成分的基质。其它封闭装置是文献中已知的。
剂量要求随着所使用的具体组合物，给药途径，出现的症状的严重程度和要治疗的具体患者而不同。根据用标准药物学测定方法中获得的结果，计划的活性化合物的日剂量可以是0.02μg/kg-750μg/kg。一般情况下用小于化合物最佳剂量的小剂量开始治疗。此后增加剂量直到达到所处条件下的最佳效果；口服，肠胃外，鼻或支气管内给药的精确剂量由给药医生凭对各个要治疗的患者的诊断经验确定。优选地，药物组合物是单位剂量形式，例如片剂或胶囊。在这样的形式中，组合物再分成含有合适量的活性成分的单位剂量；单位剂量形式可以是包装的组合物，例如包装的粉末剂，管瓶，安瓿，预装药注射器或者含有液体的囊剂。单位剂量形式可以是例如胶囊或片剂本身，或者可以是包装形式中的合适量的任何这样的组合物。
权利要求
1.具有下式的化合物
其中A和B各自独立地是
R是SO3-X+；X+是碱金属，碱土金属，铵，含有1-6个碳原子的烷基铵，各烷基中含有1-6个碳原子的二烷基铵，各烷基中含有1-6个碳原子的三烷基铵或者各烷基中含有1-6个碳原子的四烷基铵；前提是A或B至少一个是
2. 5，7，9-雌三烯-3β，17β-二醇3-硫酸酯钠盐纯度大于1％。
3.主要由具有下式的化合物构成的物质的组合物
其中A和B各自独立地是
R是SO3-X+；X+是碱金属，碱土金属，铵，含有1-6个碳原子的烷基铵，各烷基中含有1-6个碳原子的二烷基铵，各烷基中含有1-6个碳原子的三烷基铵或者各烷基中含有1-6个碳原子的四烷基铵；前提是A或B至少一个是
4.权利要求3的化合物，其是5，7，9-雌三烯-3β，17β-二醇3-硫酸酯钠盐。
5.对需要的哺乳动物提供雌激素替代治疗或者治疗雌激素缺乏的方法，包括给与所述哺乳动物雌激素量的具有下式的化合物
其中A和B各自独立地是
R是SO3-X+；X+是碱金属，碱土金属，铵，含有1-6个碳原子的烷基铵，各烷基中含有1-6个碳原子的二烷基铵，各烷基中含有1-6个碳原子的三烷基铵或者各烷基中含有1-6个碳原子的四烷基铵；前提是A或B至少一个是
6.对需要的哺乳动物治疗雌激素缺乏相关的血管舒缩综合征的方法，包括给与所述哺乳动物有效量的具有下式的化合物
其中A和B各自独立地是
R是SO3-X+；X+是碱金属，碱土金属，铵，含有1-6个碳原子的烷基铵，各烷基中含有1-6个碳原子的二烷基铵，各烷基中含有1-6个碳原子的三烷基铵或者各烷基中含有1-6个碳原子的四烷基铵；前提是A或B至少一个是
7.权利要求6的方法，其中血管舒缩综合征是热潮红。
8.对需要的哺乳动物治疗或抑制骨质疏松的方法，包括给与所述哺乳动物抗骨质疏松有效量的具有下式的化合物
其中A和B各自独立地是
R是SO3-X+；X+是碱金属，碱土金属，铵，含有1-6个碳原子的烷基铵，各烷基中含有1-6个碳原子的二烷基铵，各烷基中含有1-6个碳原子的三烷基铵或者各烷基中含有1-6个碳原子的四烷基铵；前提是A或B至少一个是
9.对需要的哺乳动物治疗或抑制动脉粥样硬化的方法，包括给与所述哺乳动物抗动脉粥样硬化有效量的具有下式的化合物
其中A和B各自独立地是
R是SO3-X+；X+是碱金属，碱土金属，铵，含有1-6个碳原子的烷基铵，各烷基中含有1-6个碳原子的二烷基铵，各烷基中含有1-6个碳原子的三烷基铵或者各烷基中含有1-6个碳原子的四烷基铵；前提是A或B至少一个是
10.含有具有下式的化合物和药物载体的药物组合物
其中A和B各自独立地是
R是SO3-X+；X+是碱金属，碱土金属，铵，含有1-6个碳原子的烷基铵，各烷基中含有1-6个碳原子的二烷基铵，各烷基中含有1-6个碳原子的三烷基铵或者各烷基中含有1-6个碳原子的四烷基铵；前提是A或B至少一个是
11.含有至少1％权利要求1-4任一项定义的化合物的药物组合物。
12.权利要求1-4任一项定义的化合物作为药物的用途。
13.权利要求1-4任一项定义的一种化合物在制备为了下面目的的药物中的用途对需要的哺乳动物a)提供雌激素替代治疗或者治疗雌激素缺乏症，b)治疗与雌激素缺乏相关的血管舒缩综合征，c)治疗或抑制骨质疏松，或者d)治疗或抑制动脉粥样硬化。
14.制备5，7，9-雌三烯-3，17-二醇-3，17-二硫酸酯盐的方法，包括a)将合适的5，7，9-雌三烯-3，17-二醇-3，17-二硫酸酯转化为药学可接受盐，b)将5，7，9-雌三烯-3，17-二醇-3，17-二硫酸酯的药学可接受盐转化为5，7，9-雌三烯-3，17-二醇-3，17-二硫酸酯的不同的药学可接受盐，或者c)直接将合适的5，7，9-雌三烯-3，17-二醇转化为5，7，9-雌三烯-3，17-二硫酸酯的期望的药学可接受盐。15.制备5，7，9-雌三烯-3，17-二醇-3-硫酸酯盐或5，7，9-雌三烯-3，17-二醇-17-硫酸酯盐的方法，包括a)将合适的5，7，9-雌三烯-3，17-二醇-单硫酸酯转化为药学可接受盐，b)将合适的5，7，9-雌三烯-3，17-二醇-单硫酸酯的药学可接受盐转化为合适的5，7，9-雌三烯-3，17-二醇-单硫酸酯的不同的药学可接受盐，c)将相应的5，7，9-雌三烯-3-醇，17-酮-3-硫酸酯盐或5，7，9-雌三烯-17-醇，3-酮17硫酸酯盐转化为期望的5，7，9-雌三烯-3，17-二醇-3-硫酸酯盐或5，7，9-雌三烯-3，17-二醇-17-硫酸酯盐。d)直接将5，7，9-雌三烯-3，17-二醇转化为期望的5，7，9-雌三烯-3，17-二醇-单硫酸酯的期望的药学可接受盐，e)将相应的17保护的5，7，9-雌三烯-3，17-二醇-3-硫酸酯盐或3保护的5，7，9-雌三烯-3，17-二醇-17-硫酸酯盐去保护，或者f)通过转化将合适的5，7，9-雌三烯-3，17-二醇-单硫酸酯的药学可接受盐的一种立体异构体转化为另一种异构体。
全文摘要
本发明提供具有式(Ⅰ)的雌激素试剂,其中A和B各自独立地是(a),(b),(c)或(d),R是SO
文档编号A61K31/565GK1255142SQ98804836
公开日2000年5月31日 申请日期1998年4月28日 优先权日1997年5月5日
发明者M·Z·卡甘, P·拉文德拉纳斯, S·M·沙, M·W·温克莱 申请人:美国家用产品公司