）配制以顺序施用，或者可以一起配 制以同时施用。
[0137] 如本文所使用的术语"药学上可接受的载体"表示适合施用至受试者的一种或多 种相容的固体或液体填充剂、稀释剂或者包封物质。药物组合物的组分还能够以使得没有 明显损害希望药效的相互作用的方式互相混合。这种制剂可以常规含有药学上可接受浓度 的盐、缓冲剂、防腐剂、相容的载体、助剂以及任选其他治疗成分。
[0138] 本文描述的组合物可以作为游离碱或作为药学上可接受的盐施用。这种药理学 上以及药学上可接受的盐包括但不限于用下列酸制备的那些：盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、磷 酸、顺丁烯二酸、醋酸、水杨酸、对甲苯磺酸、酒石酸、柠檬酸、甲基磺酸、蚁酸、丙二酸、琥珀 酸、萘磺酸，以及苯磺酸。而且，药学上可接受的盐可以制备为碱金属盐或碱土盐，诸如羧酸 基团的钠盐、钾盐或钙盐。
[0139] 药物组合物还可包含合适的固相或凝胶相载体或者赋形剂。这种载体或者赋形剂 的实例包括但不限于碳酸钙、磷酸钙、各种糖、淀粉、纤维素衍生物、明胶，以及诸如聚乙二 醇的聚合物。
[0140] 合适的缓冲剂包括：乙酸和盐（1-2 % w/v);柠檬酸和盐（1-3 % w/v);硼酸 和盐（0.5-2. 5 % w/v);以及磷酸和盐（0.8-2% w/v)。合适的防腐剂包括苯扎氯铵 (0· 003-0. 03% w/v);氯丁醇（0· 3-0. 9% w/v);对羟苯甲酸（0· 01-0. 25% w/v)和硫柳汞 (0· 004-0. 02% w/v)。
[0141] 合适的液体或者固体药物制剂形式是例如用于吸入的水或盐水溶液、微囊化、蜗 形化（encochleated)、包被在显微金颗粒上、包含在脂质体中（包括pH依赖性控释制剂）、 类脂（Iipidoid)、喷雾的、气雾剂、用于植入入皮肤的丸剂，或者干燥于尖锐的物体上以刮 入皮肤。所述药物组合物还包括颗粒剂、粉剂、片剂、糖衣片剂、（微）胶囊剂、栓剂、糖浆、乳 剂、悬浮液、乳霜、滴剂，或者组合物缓释的制剂，在这些制剂中，如上所述地照例使用赋形 剂和添加剂和/或辅助剂，诸如崩解剂、粘合剂、包衣剂、膨胀剂、润滑剂、调味剂、增甜剂或 者增溶剂。所述药物组合物适合用于多种药物递送系统。关于药物递送方法的简要综述， 参见 Langer，Science 249:1527-1533, 1990 以及 Langer 和 Tirrell，Nature，2004 年 4 月 1 日；428 (6982):487-92。
[0142] 所述组合物可以方便地以单位剂量形式提供，并且可以用药学领域熟知的任何方 法制备。在某些实施方案中，组合物以粉末或颗粒形式而非溶液施用。设想为本发明部分 的颗粒形式的实例在U. S. 2002/0128225中提供。在一些实施方案中，组合物以气雾剂形式 施用。在其他实施方案中，组合物可以是粉末形式的，以在使用前用合适的媒介物、例如无 菌无热原的水配制。
[0143] 此外，本文描述的组合物可以配制作为贮库制剂、定时释放、延迟释放或者持续释 放的递送系统。此类系统可以避免本文描述的组合物的重复施用，增加对受试者和医师的 便利性。此类长效制剂可以用合适的聚合或者疏水性材料（例如作为可接受的油中的乳 液）或者离子交换树脂配制，或者配制作为微溶的衍生物，例如作为微溶的盐。
[0144] 许多类型的释放递送系统是本领域普通技术人员已知并且可获得的。它们包括： 基于聚合物的系统，诸如聚乳酸和聚乙醇酸、葡聚糖颗粒、聚酐和聚己内酯；为脂类的 非聚合物系统，包括固醇（诸如胆固醇、胆固醇酯和脂肪酸）、中性脂（诸如，甘油单酯、甘油 二酯和甘油三酯），或者类脂；水凝胶释放系统；硅胶系统；基于肽的系统；蜡质涂层、使用 常规粘合剂和赋形剂的压制片剂，部分融合植入剂等等。此外，可以使用基于泵的硬件递送 系统，其中一些适用于植入。
[0145] 还可以用适当的生物相容且可生物降解的赋形剂材料来实现控释。这些实现缓 释的聚合物材料可以是用于产生颗粒的任何合适的聚合物材料，包括但不限于不可生物降 解的/不可生物降解和生物可降解的/生物可降解的聚合物。这种聚合物已经在现有技 术中非常详细的描述，并且包括但不限于葡聚糖颗粒、聚酰胺类、聚碳酸酯类、聚亚烷 基类、聚亚烷基二醇、聚氧烷撑、聚亚烷基对苯二酸酯、聚乙烯醇、聚乙烯醚、聚乙烯酯、聚乙 烯基卤化物、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙醇酸交酯、聚硅氧烷、聚氨酯及其共聚物、烷基纤维素、 羟烷基纤维素、纤维素醚、纤维素酯、硝化纤维素、丙烯酸酯和甲基丙烯酸酯的聚合物、甲基 纤维素、乙基纤维素、羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、羟丁基甲基纤维素、乙酸纤维素、 丙酸纤维素、乙酸丁酸纤维素、醋酞纤维素、羧乙基纤维素、三乙酸纤维素、纤维素硫酸钠、 聚（甲基丙烯酸甲酯）、聚（甲基丙烯酸乙酯）、聚（甲基丙烯酸丁酯）、聚（甲基丙烯酸异 丁酯）、聚（甲基丙烯酸己酯）、聚（甲基丙烯酸异癸酯）、聚（甲基丙烯酸月桂酯）、聚（甲 基丙烯酸苯酯）、聚（丙烯酸甲酯）、聚（丙烯酸异丙酯）、聚（丙烯酸异丁酯）、聚（丙烯酸 十八酯）、聚乙烯、聚丙烯聚（乙二醇）、聚（环氧乙烷）、聚（对苯二甲酸乙二酯）、聚（乙烯 醇）、聚（乙酸乙烯酯）、聚氯乙烯聚苯乙烯、聚乙烯吡咯啶酮、透明质酸，以及硫酸软骨素。 在一个实施方案中，所述缓释聚合物是嵌段共聚物，诸如聚（乙二醇）（PEG)/聚（乳酸-羟 基乙酸共聚物）（PLGA)嵌段共聚物。
[0146] 不可生物降解的聚合物的实例包括乙烯乙酸乙烯酯、聚（甲基）丙烯酸、聚酰胺， 及其共聚物和混合物。
[0147] 生物可降解的聚合物的实例包括合成聚合物，例如葡聚糖颗粒、乳酸和乙醇 酸的聚合物、聚酐、聚（邻）酯类、聚氨酯、聚（丁酸）、聚（戊酸）、聚（己内酯）、聚（羟基 丁酸酯）、聚（丙交酯-乙交酯）共聚物和聚（丙交酯-己内酯）共聚物，以及天然聚合物， 诸如海藻酸盐和其他的多聚糖，包括葡聚糖和纤维素、胶原，其化学衍生物（化学基团的取 代、添加，例如，烷基化、烯化、羟化、氧化，以及由本领域内技术熟练人员按惯例做出的其他 修改）、白蛋白和其他亲水性蛋白、玉米醇溶蛋白和其他醇溶蛋白以及疏水性蛋白，及其共 聚物和混合物。通常，这些材料通过酶促水解或者在体内暴露于水，通过表面或者整体腐蚀 而降解。前述材料可以单独使用，作为物理混合物（掺混物）使用，或者作为共聚物使用。 优选的聚合物是聚酯、聚酐、聚苯乙烯及其掺混物。
[0148] 将有效量的本文描述的组合物施用至需要这种治疗的受试者。有效量是导致病 症、疾病或疾患，或者所述病症、疾病或疾患的症状得到所需改善的那些量。
[0149] 有效剂量范围从lng/kg体重至100mg/kg体重，或者从100ng/kg体重至50mg/kg 体重，或者从1 μ g/kg体重至10mg/kg体重，取决于施用方式。或者，有效剂量可以范围从 每4平方厘米面积的细胞3微克至14毫克。绝对量将取决于多种因素（包括施用是否和 其他治疗方法一起进行，剂量数以及个体患者参数，包括年龄、身体状况、大小和体重），并 且可以用常规实验确定。一种可能的有用剂量是符合合理医学判断的最高安全剂量。
[0150] 各种活性剂的递送之间的时间可以用动力学、递送、释放、药剂药效学、药剂药代 学或其任何组合的基本原理合理地确定。或者，各种药剂的递送之间的时间可以通过实验 凭经验确定，以确定何时可以实现最大作用。
[0151] 施用方式
[0152] 施用方式可以是任何医学上可接受的方式，包括：口服施用、舌下施用、鼻内施用、 气管内施用、吸入、眼部施用、局部施用、经皮施用、皮内施用、直肠施用、阴道施用、皮下施 用、静脉内施用、肌内施用、腹膜内施用、胸骨内施用，或者经粘膜施用。此外，施用方式可以 通过体外装置和/或组织穿透电磁装置。
[0153] 所选择的具体方式将取决于所选择的具体活性剂、希望的结果、被治疗的具体病 症，以及实现疗效所需的剂量。一般说来，本文所描述的方法可以使用任何医学上可接受的 施用方式来进行，例如使用产生有效水平的炎性反应改变但不引起临床上不可接受的副作 用的任何方式。
[0154] 根据疾患和施用方式，组合物可以不同的容器、媒介物或制剂提供。例如，对于口 服应用，组合物可以作为舌下片剂、口香糖、漱口剂、牙膏、糖果、凝胶剂、膜剂等等施用；对 于眼部应用，组合物可作为滴眼剂以滴管施用，作为眼膏、眼凝胶剂、眼膜，作为隐形眼镜或 者眼内透镜的被膜，以隐形眼镜贮存液或洗液的方式等等施用；对于局部应用，作为洗液、 软膏、凝胶剂、乳霜、喷雾剂、棉纸、拭子、搽剂等等；对于阴道或者直肠应用，作为软膏、棉 塞、检剂、黏I吴粘着制剂等等。
[0155] 组合物可以通过注射施用，例如通过快速推注注射或者连续输注，通过静脉内、皮 下、肌内、腹膜内、胸骨内途径。用于注射的制剂可以单位剂量形式提供，例如在安瓿或者多 剂容器中，含有添加的防腐剂。组合物可以采取诸如油性或水性媒介物中的悬浮液、溶液或 者乳液的形式，并且可以含有配制剂，诸如悬浮剂、稳定剂和/或分散剂。对于口服施用，组 合物可以通过将组合物与本领域熟知的药学上可接受的载体组合而容易地配制，例如作为 舌下片剂、液体制剂或者口服凝胶剂。
[0156] 对于通过吸入施用，组合物可以气雾剂喷雾形式从加压包或喷雾器方便地递送， 借助合适的推进剂，例如二氯二氟甲烷、三氯氟甲烷、二氯四氟乙烷、二氧化碳或者其他合 适的气体。在加压气雾剂的情况下，可以通过提供阀门以递送计量的量来确定剂量单位。 用于吸入器或者吹入器的例如明胶的胶囊剂和药筒可以配制为含有组合物的粉末混合物 和合适的粉末基底诸如乳糖或者淀粉。用于吸入治疗剂的医疗设备是本领域已知的。在 一些实施方案中，所述医疗设备是吸入器。在其他实施方案中，所述医疗设备是计量吸入 器、碟型吸入器、涡轮吸入器（Turbuhaler)、干粉吸入器（diskus)或者雾化器（spacer)。 在这些实施方案中的某些中，所述吸入器是Spinhaler (Rhone-Poulenc Rorer, West Mailing, Kent)。其他医疗设备是本领域已知的，并且包括Inhale/Pfizer、Mannkind/Glaxo 和 Advanced Inhalation Research/Alkermes。
[0157] 组合物还可以配制成直肠或者阴道组合物，诸如栓剂或者保留灌肠剂，例如含有 常规的栓剂基底，诸如可可脂或者其他甘油酯。
[0158] 其他用途
[0159] 本文描述的突变蛋白可以直接或者间接地用是标记或者产生信号的部分标记，所 述部分例如酶、放射性同位素标记、表位、或者荧光蛋白（诸如，绿色荧光蛋白）。本文描述 的突变蛋白可以与样品或者细胞接触，以例如使用标准免疫印迹法、免疫荧光法、酶免疫分 析法（EIA)、放射免疫测定法（RIA)、荧光能量传递、蛋白质印迹以及其他诊断和检测技术 来确定该样品中或者细胞上是否存在受体。
[0160] 本文描述的突变蛋白还可以经标记以用于体内检测和施用给受试者。受试者可以 例如通过NMR或者其他层析成像手段来成像。例如，粘合剂可以用放射性同位素标记（诸 如，1311、 111111、1231、991^、吁、1251、 3!1、14(：和188肋)、荧光标记（诸如荧光素和若丹明）、核磁共 振活性标记、正电子发射层析成象（"PET"）扫描仪可检测的正电子发射同位素、化学发光 剂（诸如荧光素）和酶标志物（诸如，过氧化物酶或者磷酸酶）来标记。本文描述的突变 蛋白可以用造影剂标记，所述造影剂例如顺磁性剂和铁磁性剂或超顺磁性剂。
[0161] 本文描述的突变蛋白可以偶联至放射性同位素，诸如α辐射源、β辐射源，或者 γ辐射源。放射性同位素的实例包括碘（131I或者125D、钇（9°γ)、镥（ 177Lu)、锕（225Ac)、镨， 或者铋（212Bi或者 213Bi)。结合蛋白可以偶联至生物蛋白、植物源或者细菌源的分子（或 其衍生物），例如，美登素类（例如，美登木醇、其类似物或者DM1)，以及紫杉烷（例如，紫 杉酚或者多西紫杉醇），或者卡奇霉素。美登木醇类似物的实例包括具有经修饰的芳环 (例如，C-19-脱氯、C-20-脱甲氧基、C-20-酰氧基）的那些和具有在其他位置的修饰（例 如，C-9-CH、C-14-烷氧甲基、C-14-羟甲基或者C-14-酰氧基甲基、C-15-羟基/酰氧基、 C-15-甲氧基、C-18-N-脱甲基、4,5-脱氧基）的那些。例如在U.S.6,333,410 中描述了美 登木醇和美登木醇类似物。美登木醇可以使用例如N-琥珀酰亚胺基3-(2-吡啶二硫代）丙 酸酯（又名N-琥珀酰亚胺基4- (2-吡啶二硫代）戊酸酯或者SPP)、4_琥珀酰亚胺基-羰氧 基-a- (2-吡啶二硫代）-甲苯（SMPT)、N-琥珀酰亚胺基3- (2-吡啶二硫代）丁酸酯（SDPB)、 2-亚氨基硫烷盐酸盐或S-乙酰琥珀酸酐偶联。
[0162] 以下实施例仅作为示例说明而提供，并且无意限制本发明的范围。本领域技术人 员将容易地认识到可以改变或者调整许多非关键参数来得到基本上相似的结果。 实施例
[0163] 实施例1 :开发具有改变的结合亲和力的IL-4突变蛋白
[0164] 使用IL-4/IL-13系统测试以下构思：共有细胞因子受体的相对亲和力的操纵可 以产生具有特征性反应性模式的细胞因子。采取两种方法来工程改造 IL-4以更高亲和力 结合至γ。（图Ib)或者IL-13R a 1 (图Ic)。
[0165] 最近已经解析完整的与配体结合的I型和II型受体三元复合物的三维结构。 IL-13具有与IL-4相比相对高的对IL-13Ral亲和力（KD 30nM对KD>lyM)。因此，从 IL-4 和 IL-13 在两种 II 型三元复合物（IL-4/IL-4R a /IL-13R a 1 和 IL-13/IL-4R a / IL_13Ra 1)中的结构来比对IL-4和IL-13的结构。
[0166] IL-4和IL-13的D螺旋在各个复合物中的比对非常接近，D螺旋形成与IL_13Ra 1 的大量接触。三个IL-4D螺旋残基，R121、Y124和S125,在IL-4II型受体三元复合物中形 成与Yc的接触，不同于IL-13中的那些。因此交换这些残基以获得其IL-13位置等效物 (图Ic)，并且形成两种I