糖，采用从臭红菇中分离出的红菇酮萜为稳定剂，所制得的微针贴片其疫苗活性 至少要高出12. 4%，但其成本至少高出4倍，目前还不宜常规化。
[0024] 以10只体重约20kg的年龄在7周左右的雌性猪为实验对象，其中5只作为实验 对象接种疫苗，另外5只不接种作为对照组。将本实施例中得到的蓝耳病疫苗微针贴片按 压在猪的左臀部，按压时尽量使微针垂直刺入猪皮肤，按压时间2分钟，使可溶性疫苗微针 顶端的疫苗完全释放到猪皮肤中，完成经皮给药。两周后重复一次上述给药。并在第二次 给药前一天从猪尾静脉抽血并获得血清，通过ELISA方法测定血清中针对蓝耳病疫苗的特 异性IgGl抗体的滴度。实验结果是，对照组通过上述制备的蓝耳病疫苗微针贴片接种的实 验猪血清中的特异性IgGl抗体的平均滴度滴度为61og2,对照组特异性IgGl抗体的平均滴 度滴度为01〇g2。说明通过本发明所述的可溶性高分子微针贴片用于猪蓝耳病疫苗的给药 成功，效果显著。
[0025] 实施例3
[0026] -种便于动物疫苗给药的微针贴片，所述微针贴片包括可溶性微针基底和可溶性 微针针体；所述可溶性微针针体载有目标药物，其制备材料包括由水溶性生物可降解的高 分子材料；所述尚分子材料为重均分子量为2000-300000的聚乙稀醇；所述制备材料还包 括稳定剂，该稳定剂为海藻糖；所述目标药物的载药方式为尖端载药；所述微针贴片是边 长为IOmm的方形，共有100个微针，相邻微针之间的间距是0. 6_ ;所述微针针体的形状为 圆锥形或类圆锥形，该微针针体长度为600 μ m，底径为500 μ m。
[0027] 本发明所述的一种便于动物疫苗给药的微针贴片的制备方法，所述制备方法包括 以下步骤：取狂犬疫苗与疫苗佐剂配制疫苗质量百分数为〇. 5%的疫苗溶液；取18g聚乙烯 醇、12g海藻糖、30g水混合，在90°C下加热搅拌，完全溶解后抽真空去除气泡，制得聚乙烯 醇质量分数为30%，海藻糖质量分数为20 %的高浓度溶液；将疫苗溶液涂在微针模板上， 抽真空15min后，回收多余的疫苗溶液，继续在真空环境干燥20min，待疫苗溶液沉积到微 针顶端；将高浓度溶液覆盖到上述载有疫苗溶液的微针模板上（注：贴片基底会与微针针 体的下段一块成形），回收多余的高浓度溶液，再次抽真空Ih后，放置于20°C通风橱干燥 上，固化成型后将其转移到厚度Imm的贴片上，再次冷冻干燥0. 5h脱水，在温度为15°C，湿 度10% RH下的密闭空间中进行封装，得微针贴片。
[0028] 以5只体重约IOkg的年龄在7周左右的雌性犬为实验对象。将本实施例中得到 的狂犬疫苗微针贴片按压在犬的左下腹部，按压时尽量使微针垂直刺入皮肤，按压时间2 分钟，使可溶性疫苗微针顶端的疫苗完全释放到犬皮肤中，完成经皮给药。两周后重复一次 上述给药。并在第二次给药前一天从静脉抽血并获得血清，测定血清中针对链球菌的特异 性IgGl抗体平均滴度。实验结果是，对照组通过上述制备的狂犬疫苗微针贴片接种的实验 犬血清中的特异性IgGl抗体的平均滴度滴度为41og2,对照组特异性IgGl抗体的平均滴度 滴度为01〇g2。说明通过本发明所述的可溶性高分子微针贴片用于狂犬疫苗给药成功，效果 显著。
[0029] 效果验证
[0030] 1、微针皮肤试验
[0031] 预先准备未脱毛的平整的新鲜猪皮，取上述制得的载负荧光模型药物磺酰罗丹明 溶液的聚乙烯醇微针贴片，将微针针尖对准猪皮表层垂直刺入，用手按压微针贴片的背面， 按压的时间为2min，然后取下作用后的微针贴片，可在光学显微镜和荧光显微镜下观察作 用后的猪皮。在光学显微镜下可观察到，作用后的猪皮表面有100个清晰的红色的针孔，其 他部分皮肤表面完好，红色针孔为微针贴片的可溶性微针针体顶端载负的紫红色模型药物 磺酰罗丹明溶液所留，表明微针贴片的可溶性微针针体可有效地刺穿猪皮表层，在皮下溶 解并且将可溶性微针顶端载负的模型药物磺酰罗丹明溶液释放到猪皮之中。同样的，在荧 光显微镜下可观察到，作用后的猪皮表面有100个清晰地发出红色荧光的针孔，其他部分 显示黑色，说明红色荧光的针孔为微针贴片的可溶性微针针体顶端载负的紫红色模型药物 磺酰罗丹明溶液所留，表明微针贴片的可溶性微针针体可有效地刺穿猪皮表层，在皮下溶 解并且将可溶性微针顶端载负的模型药物磺酰罗丹明溶液释放到猪皮之中。
[0032] 2、微针皮下溶解动力学
[0033] 按照实施例1中的步骤制备200个微针贴片，每个微针贴片面积Icm2有10 X 10个 微针，针体长度700 μ m，间距0. 5mm ;每个微针贴片载负模型药物磺酰罗丹明溶液的质量是 0.2mg。每十个微针贴片一组，一共20组。按照实施例2中的皮肤试验步骤，将上述微针贴 片插入相同实验条件的猪皮，每组微针按压时间不同，1组按压时间IOs后取下，2组按压时 间是20s，3组按压时间是30s，依次类推，第20组按压时间是200s。在皮肤实验之后，检测 每一片给药之后的的猪皮肤上的有效给药率，即皮肤上沉积的药物占微针贴片总载药量的 百分比，结果如表1所示。
[0034] 表1 :不同按压时间的有效给药率
[0035]
【主权项】
1. 一种便于动物疫苗给药的微针贴片，其特征在于，所述微针贴片包括可溶性的贴片 基底和阵列分布在贴片基底上的可溶性的微针针体；所述微针针体在其顶端载有目标药 物，该微针针体的制备材料包括水溶性的生物可降解的高分子材料。
2. 根据权利要求1所述的一种便于动物疫苗给药的微针贴片，其特征在于，所述高分 子材料为聚乙烯醇、聚羧甲基纤维素、硫酸软骨素、聚乳酸聚乙醇酸共聚物、蚕丝蛋白、糊 精、透明质酸、明胶中一种或几种。
3. 根据权利要求1所述的一种便于动物疫苗给药的微针贴片，其特征在于，所述动物 疫苗为蓝耳疫苗、猪瘟疫苗、口蹄疫疫苗、犬咳疫苗、犬六联疫苗、狂犬疫苗、牛流行热疫苗、 炭疽疫苗、牛布鲁氏杆菌疫苗，羊痘苗、伪狂犬病疫苗、猪瘟兔化弱毒疫苗、猪肺疫弱毒疫 苗、猪丹毒氢氧化铝菌苗、仔猪红痢菌苗、猪链球菌氢氧化铝菌苗、猪喘气病疫苗中的一种 或几种。
4. 根据权利要求1所述的一种便于动物疫苗给药的微针贴片，其特征在于，所述制备 材料还包括稳定剂，该稳定剂为蔗糖、红菇酮萜、葡萄糖、海藻糖、壳聚糖中一种或几种。
5. 根据权利要求1所述的一种便于动物疫苗给药的微针贴片，其特征在于，所述目标 药物的载药方式为将药物涂抹在微针针体顶端的外表、混匀在微针针体顶端或集中在微针 针体顶端。
6. 根据权利要求1所述的一种便于动物疫苗给药的微针贴片，其特征在于，所述微针 贴片是边长为2-50mm的方形，共有1-10000个微针，相邻微针之间的间距是0. 2-5mm。
7. 根据权利要求1所述的一种便于动物疫苗给药的微针贴片，其特征在于，所述微针 针体的形状为圆锥形或类圆锥形，该微针针体长度为200-3000 μ m，底径为100-1500 μ m。
8. -种如权利要求1所述的便于动物疫苗给药的微针贴片的制备方法，其特征在于， 所述制备方法包括以下步骤：按质量百分比将5% -50%的高分子材料、0% -50%的稳定 剂与余量的水混合，在40°C -KKTC下搅拌溶解；溶解完全后抽真空去除气泡，得到高浓度 溶液，密封；按计量要求，配制浓度范围0. l-l〇〇〇mg/ml的疫苗溶液；取疫苗溶液0. 01-5ml 涂在微针模板上，抽真空〇. 5 -6 Om i η后，回收多余的疫苗溶液，继续在真空环境干燥 0. 5-60min，待疫苗溶液沉积到微针顶端；取高浓度溶液0. 01-5ml涂到上述载有疫苗溶液 的微针模板上，再次抽真空l_300min ;冷冻干燥5-600min，干燥后脱模，在温度为15-25°C， 湿度10% -30% RH下的密闭空间中进行封装，得微针贴片。
【专利摘要】本发明属于给药设备技术领域，具体来说，涉及一种便于动物疫苗给药的微针贴片及其制备方法。所述微针贴片包括可溶性的贴片基底和阵列分布在贴片基底上的可溶性的微针针体；所述微针针体在其顶端载有目标药物，该微针针体的制备材料包括由水溶性的生物可降解的高分子材料。与现有技术相比，本发明所述的便于动物疫苗给药的微针贴片在接种疫苗时不会引起动物的惧怕反应，易于给药，操作方便，不需要对接种人员培训；单人即可完成接种疫苗工作，效率高；完成疫苗接种时不需额外对动物进行标记；一次性使用，避免了交叉感染的可能性；所用材料可生物降解，无医疗垃圾产生；制作方法简单经济；产品无需冷藏保存或真空保存等；运输方便。
【IPC分类】A61M37-00, A61K9-70, A61K39-12, A61P31-14
【公开号】CN104706626
【申请号】CN201510131662
【发明人】郭新东, 王淇磊, 陈洋
【申请人】北京化工大学
【公开日】2015年6月17日
【申请日】2015年3月25日