奥氮平半抗原的抗体及其用图
【专利说明】
[0001] 相关申请的交叉引用
[0002] 本申请要求2012年8月21日提交的美国临时申请61/691，572的优先权。
技术领域
[0003] 本发明涉及免疫测定的技术领域，并且具体地涉及结合至奥氮平的抗体，这些抗 体可用于检测奥氮平的免疫测定中。
【背景技术】
[0004] 精神分裂症为一种慢性且使人衰弱的精神疾病，影响了约0. 45% -1%的世界人 口（van0s，J. ;Kapur，S. "Schizophrenia"Lancet2009, 374,635-645)。治疗的主要目 的是实现对精神症状的持续缓解、降低复发的风险和后果并且改善患者机能和总体生活质 量。虽然许多患有精神分裂症的患者能够用可用的抗精神病药物实现症状稳定性，但对药 物的低遵从性是在每日施用的口服药物下复发的常见原因。若干探索不依从性的后果的 研宄（Abdel_Baki，A. ;Ouellet_Plamondon，C. ;Malla，A."PharmacotherapyChallenges inPatientswithFirst-EpisodePsychosis"JournalofAffectiveDisorders2012， 138,S3-S14)显示不按处方服用其药物的患有精神分裂症的患者具有较高的复发率、入院 率和自杀率以及增加的死亡率。据估计，40%至75%患有精神分裂症的患者难以遵从每日 口服治疗方案（Lieberman，J.A. ;Stroup，T.S. ;McEvoy，J.P. ;Swartz，M.S. ;Rosenheck， R.A. ；Perkins,D. 0. ；Keefe,R.S.E. ；Davis,S.M. ；Davis,C.E. ；Lebowitz,B.D. ；Severe, J. ；Hsiao,J.K."EffectivenessofAntipyschoticDrugsinPatientswithChronic Schizophrenia"NewEnglandJournalofMedicine2005,353(12)，1209-1223) 〇
[0005] 治疗药物监测（TDM)是对药物包括抗精神病药物的血清或血浆浓度的量化，以用 于治疗监测和优化。这种监测允许例如识别未遵从其药物方案、未达到治疗剂量、在治疗剂 量下无应答、具有次优耐药性、具有药代动力学药物-药物互相作用或具有导致不适当的 血浆浓度的异常代谢的患者。患者吸收、分布、代谢以及排出抗精神病药物的能力存在相当 大的个体差异。这种不同可由并发疾病、年龄、伴随药物或遗传特性引起。不同的药物制剂 也可影响抗精神病药物的代谢。TDM允许针对个体患者进行剂量优化，改善治疗和功能结 果。TDM还允许处方临床医生确保对处方剂量的依从性且确保达到有效血清浓度。
[0006] 至今，用于确定抗精神病药物的血清或血浆浓度的水平的方法涉及具有UV的 液相色谱（LC)或质谱检测以及放射免疫测定的使用（参见例如，Woestenborghs等 人，1990 年MethodologicalSurveysinBiochemistryandAnalysis中的"Onthe selectivityofsomerecentlydevelopedRIArs" 20 :241-246.AnalysisofDrugs andMetabolites，IncludingAnti-infectiveAgents；Heykants等人，1994 年"The PharmacokineticsofRisperidoneinHumans:ASummary''，JClinPsychiatry55/5,增 干丨J:13-17;Huang等人，1993 年"Pharmacokineticsofthenovelanti-psychoticagent risperidoneandtheprolactinresponseinhealthysubjects''，ClinPharmacolTher 54 :257-268)。放射免疫测定检测利培酮和帕潘立酮之一或二者。在美国专利8, 088, 594 中Salamone等人公开了使用检测利培酮和帕潘立酮二者，但不检测药理学上非活性代谢 物的抗体，用于利培酮的竞争性免疫测定。针对特定免疫原开发了竞争性免疫测定中使用 的抗体。IDLabs公司（London，Ontario,Canada)出售针对另一种精神病药物奥氮平的 ELISA，它也利用了竞争格式。使用说明指示测定被设计用于筛选目的并且旨在用于法医或 研宄用途，并且具体地不旨在用于治疗用途。使用说明推荐使用气相色谱/质谱（GC-MS) 来确认所有阳性样品，并且指示所使用的抗体检测奥氮平和氯氮平（见IDLabs公司， "InstructionsForUseDataSheetIDEL-F083"，修订日期 2011 年8月 8 日）。这些方法 中的一些，即HPLC和GC/MS可能是昂贵且劳动密集型的，并且通常仅在具有适当设备的大 型或专业实验室中执行。
[0007] 存在对用于确定抗精神病药物的水平的其它方法的需要，具体地讲是能够在处方 临床医生办公室（在这里可相应地以更加及时的方式调整对个体患者的治疗）和缺乏LC 或GC/MS设备或需要快速测试结果的其它医疗设施中执行的方法。
[0008] 奥氮平为：
【主权项】
1. 一种分离的抗体或其结合片段，所述分离的抗体或其结合片段结合至奥氮平，并且 所述分离的抗体或其结合片段： (i) 是响应于式I的化合物和免疫原性载体的缀合物而生成的；或 (ii) 竞争与响应于式I的化合物和免疫原性载体的缀合物而生成的抗体所结合的表 位相同的表位， 式I :
其中：
卵或 Z-(Y)p-G; R3为H或W-(Y) P-G ;前提条件是R1、R2、R3中的两者必须为H，并且另外的前提条件是 R1、R2和R 3可不同时都为H ; 其中： Z选自由以下组成的组： -N (R4) -、-〇-、-S-、-烷基-、-烷氧基烷基-、-氛基烷基-、-硫代烷基-、-杂烷基-、 烷基羰基_、
其中： W选自由以下组成的组： -C (〇)-、-烷基-、-烷氧基烷基-、-氛基烷基-、-硫代烷基-、-杂烷基-、-烷基幾
R4为H、烷基基团、环烷基基团、芳烷基基团或者取代或未取代的芳基基团； Y为有机间隔基团； G为能够结合至载体的官能连接基团； P为〇或1 ; m 为 1、2、3、4 或 5 ; η 为 1、2、3、4 或 5。
2. 根据权利要求1所述的抗体，其中所述抗体是响应于式I的化合物和免疫原性载体 的缀合物而生成的。
3. 根据权利要求1所述的抗体，其中所述抗体片段选自由Fv、F(ab'）、F(ab'）2、scFv、 微抗体和双抗体片段组成的片段组。
4. 根据权利要求1所述的抗体，其中所述抗体为单克隆抗体。
5. -种测定试剂盒，包含权利要求1所述的抗体。
6. -种测定装置，包含权利要求1所述的抗体。
7. 根据权利要求6所述的测定装置，其中所述装置为侧流测定装置。
8. -种产生结合至奥氮平的抗体的方法，所述方法包括： (i) 选择用于抗体产生的宿主；以及 (ii) 用式I的化合物和免疫原性载体的缀合物接种所述宿主，其中所述宿主产生结 合至奥氮平的抗体， 式I :
卵或 Z-(Y)p-G; R3为H或W-(Y) P-G ;前提条件是R1、R2、R3中的两者必须为H，并且另外的前提条件是 R1、R2和R 3可不同时都为H ; 其中： Z选自由以下组成的组： -N (R4) -、-〇-、-S-、-烷基-、-烷氧基烷基-、-氛基烷基-、-硫代烷基-、-杂烷基-、 烷基羰基_、
其中： W选自由以下组成的组： -C (〇)-、-烷基-、-烷氧基烷基-、-氛基烷基-、-硫代烷基-、-杂烷基-、-烷基幾
R4为H、烷基基团、环烷基基团、芳烷基基团或者取代或未取代的芳基基团； Y为有机间隔基团； G为能够结合至载体的官能连接基团； P为〇或1 ; m 为 1、2、3、4 或 5 ; η 为 1、2、3、4 或 5。
9. 一种产生能够产生结合至奥氮平的单克隆抗体的杂交瘤细胞系的方法，所述方法 包括： (i) 选择用于抗体产生的宿主； (ii) 用式I的化合物和免疫原性载体的缀合物接种所述宿主； (iii) 将来自所述接种宿主的细胞系与持续分裂细胞融合以生成能够产生结合至奥 氮平的单克隆抗体的融合细胞；以及 (iv) 克隆所述融合细胞以便获得杂交瘤细胞系， 式I :
卵或 Z-(Y)p-G; R3为H或W-(Y) P-G ;前提条件是R1、R2、R3中的两者必须为H，并且另外的前提条件是 R1、R2和R 3可不同时都为H ; 其中： Z选自由以下组成的组： -N (R4) -、-〇-、-S-、-烷基-、-烷氧基烷基-、-氛基烷基-、-硫代烷基-、-杂烷基-、 烷基羰基_、
其中： W选自由以下组成的组： -C (〇)-、-烷基-、-烷氧基烷基-、-氛基烷基-、-硫代烷基-、-杂烷基-、-烷基幾
R4为H、烷基基团、环烷基基团、芳烷基基团或者取代或未取代的芳基基团； Y为有机间隔基团； G为能够结合至载体的官能连接基团； P为〇或1 ; m 为 1、2、3、4 或 5 ; η 为 1、2、3、4 或 5。
10. -种检测样品中的奥氮平的方法，所述方法包括： (i) 使样品与用可检测标记物标记的权利要求1所述的抗体接触，其中所述标记抗体 和存在于所述样品中的奥氮平形成标记复合物；以及 (ii) 检测所述标记复合物以便检测所述样品中的奥氮平。
11. 一种用于检测样品中的奥氮平的竞争性免疫测定方法，所述方法包括： (i) 使样品与权利要求1所述的抗体和奥氮平或奥氮平的竞争性结合配偶体接触，其 中用可检测标记物标记所述抗体和所述奥氮平或其竞争性结合配偶体中的一者，并且其中 样品奥氮平与所述奥氮平或其竞争性结合配偶体竞争结合至所述抗体；以及 (ii) 检测所述标记以便检测样品奥氮平。
12. 根据权利要求11所述的方法，其中用所述可检测标记物标记所述奥氮平或其竞 争性结合配偶体。
13. 根据权利要求11所述的方法，其中用可检测标记物标记所述抗体。
14. 根据权利要求11所述的方法，其中在侧流测定装置上执行所述免疫测定，并且将 所述样品施加至所述装置。
15. 根据权利要求10或11所述的方法，还包括检测除了奥氮平之外的一种或多种分 析物的存在。
16. 根据权利要求15所述的方法，其中所述一种或多种分析物为奥氮平之外的抗精 神病药物。
17. 根据权利要求16所述的方法，其中所述奥氮平之外的抗精神病药物选自由以下 组成的组：利培酮、帕潘立酮、喹硫平、阿立哌唑以及它们的代谢物。
18. 根据权利要求10或11所述的方法，其中所述奥氮平的检测为患者对处方奥氮平 治疗的遵从性的指示。
19. 根据权利要求10或11所述的方法，其中所述奥氮平的检测用于确定患者是否应 从口服奥氮平方案转变到可注射抗精神病药方案。
20. 根据权利要求10或11所述的方法，其中所述奥氮平的检测用于确定是否应增大 或减小口服或可注射奥氮平的剂量水平或给药间隔以确保达到或维持有效或安全的药物 水平。
21. 根据权利要求10或11所述的方法，其中所述奥氮平的检测为通过提供达到最小 PK水平的证据而发起奥氮平治疗的辅助手段。
22. 根据权利要求10或11所述的方法，其中所述奥氮平的检测用于确定多种制剂中 或来自多种来源的奥氮平的生物等效性。
23. 根据权利要求10或11所述的方法，其中所述奥氮平的检测用于评估复方用药和 潜在药物-药物相互作用的影响。
24. 根据权利要求10或11所述的方法，其中所述奥氮平的检测为患者应被排除或被 包括在临床试验中的指示且为对临床试验药物要求的遵从性的后续监测的辅助手段。
【专利摘要】本发明公开了一种结合至奥氮平的抗体，该抗体可用于检测样品中的奥氮平，诸如在竞争性免疫测定方法中。该抗体可用于奥氮平的床旁检测所使用的侧流测定装置中，包括在单个侧流测定装置中的阿立哌唑、奥氮平、喹硫平和利培酮的多重检测。
【IPC分类】A61P25-00, A61K38-16, A61K38-02
【公开号】CN104755093
【申请号】CN201380054990
【发明人】E.赫伊霍伦科, B.桑卡兰, T.R.德科里, T.图布斯, L.科特, B.M.雷梅里伊, R.萨特, M.G.多纳胡伊, Y.龚
【申请人】奥索临床诊断有限公司, 詹森药业有限公司
【公开日】2015年7月1日
【申请日】2013年8月20日
【公告号】CA2882595A1, EP2887952A1, US20140057303, WO2014031656A1