够扩增双突变株Neo ncmicl-3 K0。
[0110] 图2-A:该图是质粒pNcMic3K0-DHFR的示意图。该具有11，312个碱基对的质粒 包含侧翼为与处于基因 ncmic3侧翼的序列同源的区域（5HR-NcMic3和3HR-NcMic3)的选 择基因DHFR、氨苄青霉素抗性基因（Amp)以及允许其线性化的限制位点Not I。
[0111]图2-B:该图是质粒pNcMiclKO-CAT-GFP的示意图。该具有10, 069个碱基对的质 粒包含侧翼为与处于基因ncmicl侧翼的序列同源的区域（3HR-NcMicl和5HR-NcMicl)的 选择基因CAT-GFP、氨苄青霉素抗性基因（Amp)以及允许其线性化的限制位点Kpn I。
[0112] 图3-A:该图显示了在犬新孢子虫野牛株NCl中和在突夺株Neo ncmic3 KO中分 别获得的PCR产物的电泳图谱，其中使用表1I中的第1、2或3号PCR引物组，其相应于SEQ ID NO:5 至 SEQ ID NO:10。
[0113] 图3-B:该图显示了在犬新孢子虫野牛株NCl中和在突夺株Neo ncmic3 KO中分 别获得的PCR产物的电泳图谱，其中使用表1I中的第4、5、6或7号PCR引物组，其相应于 SEQ ID NO:11 至 SEQ ID NO:16。
[0114] 图4-A:该图图解说明了通过免疫荧光法来讲行的在犬新孢子虫野牛株NCl中蛋 白NcMIC3的检测的分析，其中使用特异地识别蛋白NcMIC3的抗体。在直接光下（图像A) 或在荧光下（图像B)显现同一个显微镜视野。
[0115]图4-B:该图图解说明了通过免疫荧光法来讲行的在犬新孢子虫突变株Neo ncmic3 KO中蛋白NcMIC3的检测的分析，其中使用特异地针对蛋白NcMIC3的抗体。在直接 光下（图像A)或在荧光下（图像B)显现同一个显微镜视野。
[0116] 图5:该图显示了在犬新孢子虫野牛株NCl中、在突夺株Neo ncmic3 KO中和在突 变株Neo ncmicl-3 KO中分别获得的PCR产物的电泳图谱，其中使用表VII中的第1至12 号PCR引物组，其相应于SEQ ID NO:7至16和SEQ ID NO:21至30。
[0117] 图6:该图图解说明了通过免疫荧光法来讲行的在突变株Neo ncmic3 KO(图像A 和B)和Neoncmicl-3 KO(图像C和D)中蛋白GFP的检测的分析，其中使用蛋白CAT-GFP 的荧光特性。在直接光下（上面的图像A和C)或在荧光下（下面的图像B和D)显现同一 个显微镜视野。
[0118] 胤i图7图解说明了在幼鼠的血清中IgM类型的抗鼠弓形体抗体的含量测定。 在血清中IgM类型的抗鼠弓形体抗体的含量测定在幼鼠通过腹膜内途径接受了 20个株系 Toxo micl-3 KO的速殖子后3天（空心灰色正方形）或9天（实心黑色正方形）时进行。 未接受任何株系Toxo micl-3 KO的速殖子的幼鼠用作对照。
[0119] -在横坐标上：对照C57BL/6幼鼠（A)和用株系Toxo micl-3 KO进行接种的 C57BL/6幼鼠⑶的批次，
[0120]-在纵坐标上：在405nm处测量的吸光度值。
[0121] 三只接受了 20个株系Toxo micl-3 KO的速殖子并在9天时处死的幼鼠通过其编 号（4, 5,6)出现在图7中。
[0122] 图8-A:图8-A图解说明了在幼鼠的回肠中干扰素-Y (IFN- Y )的表达的测量。 在幼鼠通过腹膜内途径接受了 20个株系Toxo micl-3 KO的速殖子后9天（实心黑色正方 形）时，通过借助于特异性引物（SEQ ID N0:33至34)对从一段回肠中提取的总RNA进行 定量PCR来测量编码IFN-Y的基因的表达水平。未接受任何株系Toxo micl-3 KO的速殖 子的幼鼠用作对照（空心灰色正方形）。
[0123]-在横坐标上：对照C57BL/6幼鼠（A)和用株系Toxo micl-3 KO进行接种的 C57BL/6幼鼠⑶的批次，
[0124]-在纵坐标上：" IFN-y /HPRT"比例。
[0125] 三只接受了 20个株系Toxo micl-3 KO的速殖子并在9天时处死的幼鼠通过其编 号（4, 5,6)出现在图8-A中。
[0126]图8-B:图8-B图解说明了在幼鼠的回肠中白介素-12(d40亚基)(IL_12p40)的表 达的测量。在幼鼠通过腹膜内途径接受了 20个株系Toxo micl-3 KO的速殖子后9天（实 心黑色正方形）时，通过借助于特异性引物（SEQ ID N0:31至32)对从一段回肠中提取的总 RNA进行定量PCR来测量编码IL-12p40的基因的表达水平。未接受任何株系Toxo micl-3 KO的速殖子的幼鼠用作对照（空心灰色正方形）。
[0127]-在横坐标上：对照C57BL/6幼鼠（A)和用株系Toxo micl-3 KO进行免疫刺激的 C57BL/6幼鼠⑶的批次，
[0128]-在纵坐标上："IL-12p40/HPRT" 比例。
[0129] 三只接受了 20个株系Toxo micl-3 KO的速殖子并在9天时处死的幼鼠通过其编 号（4, 5,6)出现在图8-B中。
[0130] Ml-M9图解说明了在幼鼠的肠中Toxo micl-3 KO的速殖子的存在的检测。在 幼鼠通过腹膜内途径接受了 20个株系Toxo micl-3 KO的速殖子后9天时，通过在肠切片 上的免疫组织学来进行Toxo micl-3K0的速殖子的存在的检测。借助于抗-SAG-I的兔多 克隆抗体和与异硫氰酸荧光素相偶联的抗兔二抗来进行免疫标记。
[0131] 对于第4号（B)和第6号（D)幼鼠的肠显示出检测到鼠弓形体micl-3 KO的速殖 子。速殖子在第4号幼鼠（B)的肠肌中以白色点的形式出现。
[0132] 第4号（C)和第6号（E)幼鼠的肠绒毛和肠肌的细胞的细胞核被Hoechst标记并 且以白色点的形式出现。
[0133]图10:图10图解说明了通过在幼鼠的回肠中表面抗原SAG-I的表达而证明的鼠 弓形体的存在。
[0134] 由从一段回肠中提取的总RNA开始而获得的cDNA用作通过借助于特异性引物 (SEQ ID NO: 37至38)的PCR来扩增SAG-I的模板。在通过腹膜内途径接受了 20个株系 Toxo micl-3 KO的速殖子（V)后3天（Tl)或9天（T2)时，处死幼鼠。未接受任何株系 Toxo micl-3K0的速殖子的幼鼠用作对照（NV)。将PCR产物放置在琼脂糖凝胶上。
[0135] 还从鼠弓形体野生株的基因组DNA开始（RH)和从突变株Toxo micl-3 KO的基因 组DNA开始（KO)扩增了 SAG-I。所述扩增产物用作SAG-I扩增产物的大小的参照。
[0136] 幼鼠通过其编号（1，2, 3,4, 5,6)出现在图10中。
[0137] 凰11:图11图解说明了在幼鼠的肠中小隐孢子虫卵囊的计数。从置于含糖溶液 中的肠研磨物的提取物开始，在Thoma池中进行小隐孢子虫卵囊的数目的点计。所述肠来 自：
[0138] -用500, 000个小隐孢子虫寄生虫进行攻击且在用小隐孢子虫进行攻击之前3天 通过腹膜内途径接受了 20个株系Toxo micl-3 KO的速殖子的幼鼠（实心黑色正方形），或
[0139] -用500, 000个小隐孢子虫寄生虫进行攻击且未接受任何株系Toxo micl-3 KO的 速殖子的幼鼠（空心灰色正方形）。
[0140] 在用小隐孢子虫进行感染后6天时，处死幼鼠。
[0141]-在横坐标上：用单独的小隐孢子虫进行感染的（C. p)或用Toxomicl-3KO然后 小隐孢子虫进行感染的（T. g+C. p)C57BL/6幼鼠的批次，
[0142] _在纵坐标上：在肠中小隐孢子虫卵囊的总数目。
[0143] 胤!么图12图解说明了在幼鼠的肠中小隐孢子虫卵囊的存在的检测。从置于含 糖溶液中的肠研磨物的提取物开始，在Thoma池中进行小隐孢子虫卵囊的数目的点计。所 述肠来自：
[0144] -用1，000, 000个小隐孢子虫寄生虫进行攻击且在用小隐孢子虫进行攻击之前3 天通过口服途径接受了 20, 000个株系Toxo micl-3 KO的速殖子的幼鼠（实心黑色正方 形），或
[0145] -用1，000, 000个小隐孢子虫寄生虫进行攻击且未接受任何株系Toxo micl-3 KO 的速殖子的幼鼠（空心灰色正方形）。
[0146] 在用小隐孢子虫进行感染后7天时，处死幼鼠。
[0147]-在横坐标上：用单独的小隐孢子虫进行感染的（C. p)或用Toxomicl-3KO然后 小隐孢子虫进行感染的（T. g+C. p)C57BL/6幼鼠的批次，
[0148] _在纵坐标上：在肠中小隐孢子虫卵囊的总数目。
[0149] 图13-A:图13-A图解说明了在源自羔羊和成年绵羊脾脏的单核细胞中白介 素-12(IL-12)的含量测定。在体外用三种不同的鼠弓形体株系感染源自羔羊（灰色三角 形）和成年绵羊（黑色正方形）脾脏的单核细胞样品型野生株（RH)、I型突变株Toxo micl-3 KO(KO)和II型野生株（Pru)。未在体外进行感染的源自羔羊和成年绵羊脾脏的单 核细胞用作对照（M)。
[0150] -在横坐标上："RH":I型鼠弓形体野生株，"K0":株系Toxo micl-3 K0，"Pru":II 型野生株，"M":在没有刺激剂的情况下在体外培养的脾脏细胞（阴性对照），
[0151]-在纵坐标上：IL-12的浓度（IU/ml)。
[0152]图13-B:图13-B图解说明了在源自羔羊和成年绵羊肠系膜淋巴结的单核细胞中 白介素-12(IL-12)的含量测定。在体外用三种不同的鼠弓形体株系感染源自羔羊（灰色 三角形）和成年绵羊（黑色正方形）肠系膜淋巴结的单核细胞样品型野生株（RH)、1型 突变株Toxo micl-3 KO(KO)和II型野生株（Pru)。未在体外进行感染的源自羔羊和成年 绵羊肠系膜淋巴结的单核细胞用作对照（M)。
[0153] -在横坐标上："RH":I型鼠弓形体野生株，"K0":株系Toxo micl-3 K0，"Pru":II 型野生株，"M":在没有刺激剂的情况下在体外培养的脾脏细胞（阴性对照），
[0154] -在纵坐标上：IL-12的浓度（IU/ml)。
[0155] 图13-C:图13-C图解说明了在源自羔羊和成年绵羊脾脏的单核细胞中干扰素 Y (IFNY)的含量测定。在体外用三种不同的鼠弓形体株系感染源自羔羊（灰色三角形）和 成年绵羊（黑色正方形）脾脏的单核细胞样品：1型野生株（RH)、I型突变株Toxo micl-3 KO(KO)和II型野生株（Pru)。未在体外进行感染的源自羔羊和成年绵羊脾脏的单核细胞 用作对照（M)。
[0156] -在横坐标上："RH":I型鼠弓形体野生株，"K0":株系Toxo micl-3 K0，"Pru":II 型野生株，"M" :在没有刺激剂的情况下在体外培养的脾脏细胞（阴性对照），
[0157] -在纵坐标上：IFNy的浓度（ng/ml)。
[0158] 图14:图14图解说明了在其出生后一天时用10 6个Toxo micl-3K0的速殖子进行 免疫刺激的羔羊（批次A-黑色正方形）的体重的演变，相比于未经免疫刺激的对照羔羊 (批次B-灰色圆圈）而言。
[0159] -在横坐标上：在用Toxo micl-3 KO刺激羔羊后经过的时间段（以天表示），
[0160] -在纵坐标上：羔羊的体重（以千克表示）。
[0161] 图15:图15图解说明了在用株系Toxo micl-3 KO的总提取物对在其出生后一 天时用IO6个Toxo micl-3 KO的速殖子进行免疫刺激并在免疫刺激后15天时处死的羔羊 (第1416 - 1418 - 1421和1424号羔羊）或对照羔羊（羔羊1428和142