一种那西肽含量为12%的那西肽预混剂的制备方法
【专利说明】一种那西肽含量为12%的那西肽预混剂的制备方法
[0001]
技术领域
[0002]本发明涉及兽药预混剂制备领域，具体涉及一种那西肽含量为12%的那西肽预混剂的制备方法。
【背景技术】
[0003]那西肽是一种含硫多肽类抗生素产品，是效果极好的促生长剂，其作为一种新型的兽药预混剂产品，不但能促进畜禽生长，提高饲料效率，而且还具有不易产生耐药性，无残留，对环境影响小，对人畜安全等特点，完全符合人们对饲料添加剂的要求，而且它不仅能广泛应用于畜禽业，还能广泛应用于水产业，具有一定的社会效益和经济效益。但那西肽的一个重要缺陷是其产量低、成本高，现有那西肽的生产工艺中，发酵周期一般在220小时以内，预混剂产品最高含量8%。
【发明内容】
[0004]本发明的目的就是针对上述现有技术中的缺陷，提供了一种能够有效延长发酵周期，提高发酵单位，提高那西肽产生菌菌丝体内那西肽含量的那西肽含量为12%的那西肽预混剂的制备方法。
[0005]为了实现上述目的，本发明提供的技术方案为:一种那西肽含量为12%的那西肽预混剂的制备方法，是在链霉菌发酵生产那西肽的过程中补入了有机氮源。
[0006]本发明所使用的生产菌来源:购于美国ATCC菌种保藏中心的ATCC25421号菌，经过生产菌种筛选后获得保藏号为N1209D的菌种，经中国科学院微生物研宄所鉴定，属于链霉菌(Streptomyces sp.)。
[0007]进一步的，上述的一种那西肽含量为12%的那西肽预混剂的制备方法，所述有机氮源为玉米浆、黄豆饼粉、豆柏粉、酵母粉或棉籽饼粉。
[0008]进一步的，上述的一种那西肽含量为12%的那西肽预混剂的制备方法，包括以下步骤:
1)将那西肽生产菌的斜面种子进行一级种子罐培养，得到一级种子罐培养物；
2)将步骤I)得到的一级种子罐培养物转入二级种子罐培养，得到二级种子罐培养物；
3)将步骤2)得到的二级种子罐培养物转入发酵罐进行发酵，并于10h?180h时，按发酵液体积补入质量体积百分含量为0.5%?5%的有机氮源(有机氮源为玉米浆、黄豆饼粉、豆柏粉、酵母粉或棉籽蛋白粉)，得到发酵液；
4)将步骤3)得到的发酵液经过板框过滤得到菌丝体；
5)将步骤4)得到的菌丝体经过闪蒸干燥制备得到粉末原料；
6)将步骤5)得到的粉末原料加入辅料后得到那西肽含量为12%的那西肽预混剂产品。
[0009]进一步的，上述的一种那西肽含量为12%的那西肽预混剂的制备方法，所述步骤I)中，那西肽生产菌为筛选后的链霉菌streptomyces sp.N1209D ;种子罐培养基每10ml组成为:蔗糖2.0g,玉米浆2.5g，蛋白胨lg，硫酸铵0.2g,碳酸钙0.5g，泡敌0.02g,豆油0.3g ;一级种子罐培养条件为:发酵温度29°C，搅拌转数控制150至220 r/min，罐压0.05MPa，按照体积计每分钟通气比为1:1 (v:v:m)，培养48h转入二级种子罐。
[0010]进一步的，上述的一种那西肽含量为12%的那西肽预混剂的制备方法，所述步骤
2)中，二级种子罐培养基与步骤I)的一级种子罐培养基相同，二级种子罐培养条件为:发酵温度29°C，搅拌转数控制150至220 r/min,罐压0.05MPa，按照体积计每分钟通气比为1:1 (v:v:m)，培养24h转入二级种子罐。
[0011]进一步的，上述的一种那西肽含量为12%的那西肽预混剂的制备方法，所述步骤
3)中，发酵罐培养基每10ml组成为:玉米淀粉7g，黄豆饼粉3.2g，硫酸铵0.1g,氯化钠0.25g，硫酸钠0.1g,碳酸钙0.5g，泡敌0.04g，豆油Ig,乳化剂0.06g，淀粉酶为淀粉量的
0.15%，发酵罐培养条件为:发酵温度28°C?32°C，罐压0.03 MPa?0.08MPa，按照体积计每分钟通气比为(I:0.6)?(I:1.2) (v:v:m)，转速80?130r/min ;进入发酵罐后，每8小时取样检测总糖、还原糖、氨氮、菌浓和PH值，48小时后根据化验检查结果进行补糖控制发酵液总糖浓度在3.0%至6.0%之间，通过补盐控制发酵液pH值在6.5至7.5之间；10h?180h时，按发酵液体积补入质量体积百分含量为0.5%?5%的有机氮源(有机氮源为玉米浆、黄豆饼粉、豆柏粉、酵母粉或棉籽蛋白粉)。
[0012]进一步的，上述的一种那西肽含量为12%的那西肽预混剂的制备方法，所述步骤
4)中，板框过滤的具体条件为:箱式隔膜板框压滤机，进料压力小于等于0.8Mp。
[0013]进一步的，上述的一种那西肽含量为12%的那西肽预混剂的制备方法，所述步骤
5)中，闪蒸干燥的具体条件为:进风温度130至170摄氏度，出风温度60至80摄氏度。
[0014]进一步的，上述的一种那西肽含量为12%的那西肽预混剂的制备方法，所述步骤
6)中，根据含量计算加入辅料沸石粉使最终那西肽的含量为12%。
[0015]本发明的有益效果为:本发明提供的一种那西肽含量为12%的那西肽预混剂的制备方法，通过补入有机氮源，有效的延长了发酵周期，提高了发酵单位，提高了那西肽产生菌菌丝体内的那西肽含量，生产出12%的那西肽预混剂。本发明有效的改善了菌丝的状况，使发酵得以继续进行，提高了发酵液的发酵单位58%，提高了原材料的转化率。
【附图说明】
[0016]图1为那西肽生产方法测得的那西肽效价比较结果曲线图。
[0017]其中，横轴为发酵时间，纵轴为那西肽效价。
【具体实施方式】
[0018]实施例1:
本发明所用物料来源:
那西肽生产菌:购于美国ATCC菌种保藏中心的ATCC25421号菌，经过生产菌种筛选后获得保藏号为N1209D的菌种，经中国科学院微生物研宄所鉴定，属于链霉菌(Streptomyces sp.)。
[0019]玉米浆:新疆天玉生物科技有限公司。
[0020]黄豆饼粉:青岛科瑞培养基有限公司，发酵专用豆饼粉。
[0021]豆柏粉:青岛科瑞培养基有限公司，发酵专用豆柏粉。
[0022]酵母粉:河北蠡县北高晃高人饲料加工厂。
[0023]棉籽蛋白粉:新疆石河子市金兰植物蛋白有限公司。
[0024]乳化剂:江苏省海安石油化工厂，均染剂O (平平加25)。
[0025]淀粉酶:诺维信(中国)生物技术有限公司，食品添加剂诺维信-利可来耐高温α -淀粉酶 Supra，(Liquozyme Supra)。
[0026]一种那西肽含量为12%的那西肽预混剂的制备方法，包括以下步骤:
1)将那西肽生产菌的斜面种子进行一级种子罐培养，得到一级种子罐培养物；
其中，那西肽生产菌为筛选后的链霉菌streptomyces sp.N1209D ;种子罐培养基每10ml组成为:蔗糖2.0g,玉米浆2.5g，蛋白胨lg，硫酸铵0.2g,碳酸钙0.5g，泡敌0.02g,豆油0.3g ;一级种子罐培养条件为:发酵温度29°C，搅拌转数控制150至220 r/min，罐压0.05MPa，按照体积计每分钟通气比为1:1，培养48h转入二级种子罐；
2)将步骤I)得到的一级种子罐培养物转入