>[0061]
[0062] 注：与对照组比较*P < 0. 05**P < 0. 01
[0063] 实验结果表明：实验结束时，各给药组大鼠血压与对照组相比明显降低，且有显著 性差异（p〈0. 01)。各组实验前后的血压比较显示，本发明组合物降低血压幅度大于单纯使 用丹参素、丹参酚酸A或丹参酚酸B。表明本发明药物组合物对原发性高血压肾病大鼠的血 压有一定降低作用。
[0064] 5. 2本发明对原发性高血压肾病大鼠尿液中尿微量白蛋白、尿@2微球蛋白含量的 影响，见表4。
[0065] 表4对高血压肾病大鼠尿液尿微量白蛋白、尿β 2微球蛋白含量的影响（J ±:S)
[0068] 注：与对照组比较*Ρ < 0· 05#P < 0· 01
[0069] 实验结果表明：本发明药物组合物可明显减低高血压肾病大鼠尿微量白蛋白和尿 β 2微球蛋白的含量，与空白组比较有显著性差异（p〈0. 01)。本发明药物组合物降低尿微 量白蛋白和尿β2微球蛋白的幅度大于丹参素、丹参酚酸A或丹参酚酸B作用，表明本发明 药物组合物对原发性高血压肾病大鼠的肾脏有一定保护作用。
[0070] 5. 3本发明对原发性高血压肾病大鼠血液中血肌酐和尿素氮的影响，见表5。
[0071] 表5本发明对原发性高血压肾病大鼠血肌酐和尿素氮的影响:(_f 土 S):
[0073] 注：与模型组比较 *P < 0· 05**P < 0· 01
[0074] 结果表明：本发明药物组合物可明显减低高血压肾病大鼠血肌酐和尿素氮的含 量，与空白组比较有显著性差异（P〈〇. 01)。本发明药物组合物降低血肌酐和尿素氮的幅度 大于丹参素、丹参酚酸A或丹参酚酸B作用，表明本发明药物组合物对原发性高血压肾病大 鼠的肾脏有一定保护作用。
[0075] 实验三、本发明组合物对肾小球肾炎的治疗作用
[0076] 1.实验动物SD大鼠130只，雌雄各半，体重180_220g，购自中国科学院上海实验 动物中心。新西兰白兔8只，购自西安市迪乐普生物资源开发有限公司。
[0077] 2.实验药物本发明6组组合物药物成分由大连美仑生物技术有限公司提供。实验 前按相应量用〇. 5 %羧甲基纤维钠配成60ml，备用，丹参素、丹参酚酸B和丹参酚酸A配制 浓度基本与组合物六浓度相同。
[0078] 3.实验方法
[0079] (1)制备兔抗大鼠胸腺细胞血清取无菌的SD大鼠6只，处死，小心摘取大鼠胸腺 和肝脏。将肝脏用PBS缓冲液冲洗干净后制成肝粉待用；另将胸腺置于PBS缓冲液中，冲洗 2-3次，小心分离、去除其表面的淋巴结和血管，置200目不锈钢网筛上，用解剖针轻轻划破 胸腺游离出胸腺细胞，用PBS缓冲液冲洗，收集胸腺细胞悬液，离心10min，用PBS缓冲液重 制2 X IOVml的胸腺细胞悬液，按体积比1 :2混合胸腺细胞悬液和弗氏完全佐剂，充分混 匀，以混合后的悬液作为大鼠胸腺细胞免疫抗原液。将大鼠胸腺细胞免疫抗原液多点注射 于8只新西兰白兔背部皮下，每只兔子注射3ml。常规饲养2周后，兔耳缘静脉注射2 X IO7/ ml的胸腺细胞悬液，每只注射I. 5ml。7d后心脏抽取兔子血液，收集兔血清。用免疫扩散法 测抗兔抗大鼠胸腺细胞血清效价为I :160-1 :320。兔抗大鼠胸腺细胞血清于56°C、30min 灭活后，分别用同个体大鼠肝粉吸附以去除非特异性抗体，室温离心30min，弃去肝粉，收集 兔抗大鼠胸腺细胞血清，-20°C保存备用。
[0080] ⑵慢性肾小球肾炎大鼠模型的制备取健康SD大鼠110只，适应性喂养3天后，收 集尿液，检测尿蛋白，结果均为阴性。随即分为正常对照组、模型组、组合物一、组合物二、组 合物三、组合物四、组合物五、组合物六、丹参素组、丹参酚酸A组和丹参酚酸B组，每组10 只。除正常对照组大鼠尾静脉注射2ml生理盐水外，其余组大鼠一次性尾静脉注射兔抗大 鼠胸腺细胞血清2ml。
[0081] (3)给药方法及测定指标注射兔抗大鼠胸腺细胞血清6天后，随即分为模型组、组 合物一、组合物二、组合物三、组合物四、组合物五、组合物六、丹参素组、丹参酚酸A组和丹 参酚酸B组。用纯水配制所需药物60ml，组合物一至六组、丹参素组、丹参酚酸A组和丹参 酚酸B组分别灌胃给予相应药物体积均为10ml/kg，空白对照组和模型组灌胃给予等体积 的0. 5%羧甲基纤维钠，每日给药一次，连续给药4周。末次给药24小时后，腹主动脉取血， 分别测定IL-6、IL-8和TNF-α水平，解剖肾脏，进行病理学考察。
[0082] 4.结果
[0083] (1)本发明对慢性肾小球肾炎大鼠血清IL-6、IL-8和TNF- α的影响
[0084] 表6本发明对慢性肾小球肾炎大鼠血清IL-6、IL-8和TNF- α的影响（± 5 )
[0087] 注：各组与模型组比较*Ρ〈0. 05广P〈0. 01
[0088] 结果表明：模型组大鼠血清IL-6、IL-8和TNF-α水平较正常对照组显著升高 (Ρ〈0. 01)，表明造模成功。本发明药物组和毛蕊异黄酮组、黄芪甲苷组、黄芪多糖组大鼠血 清IL-6、IL-8和TNF- α水平低于模型组（ρ〈0. 05或Ρ〈0. 01)，本发明药物组可降低IL-6含 量水平，表明各给药组在一定程度上均可以改善血清细胞因子水平；另外，同等剂量下，本 发明药物组优于单纯丹参素组、丹参酚酸A组和丹参酚酸B组。
[0089] (3)病理学检查
[0090] 正常对照组：大鼠肾小球轮廓、结构清晰，形态正常；
[0091] 模型组：大鼠肾小管明显肿胀，有充血，管腔变窄，部分可见蛋白管形，肾小球体积 增大，可见炎细胞浸润；
[0092] 各给药组：大鼠肾小球结构未见明显异常，肾小球毛细管有轻微肿胀，基底膜稍有 增厚，炎细胞浸润不明显。
[0093] 5.结论实验结果证实，各给药组对慢性肾小球肾炎大鼠均有较好地治疗作用，具 体表现在降低血清炎症因子水平和改善病理学特征方面。
[0094] 实验四、本发明组合物对免疫性肝纤维化大鼠的保护作用
[0095] 1.实验动物SD大鼠，清洁级，110只，雌雄各半，体重180-220g，购自中国科学院上 海实验动物中心。
[0096] 2.实验药物本发明6组组合物药物成分由大连美仑生物技术有限公司提供。实验 前按相应量用〇. 5 %羧甲基纤维钠配成60ml，备用，丹参素、丹参酚酸B和丹参酚酸A配制 浓度基本与组合物六浓度相同。
[0097] 3.实验方法取SD大鼠110只，除其中10只大鼠做为正常对照组外，其余大鼠腹腔 注射0. 5ml/只猪血清，每周2次，连续给药6周，制备大鼠肝纤维化模型，模型成功后，随机 分为模型组和肾康注射液组方一、二、三、四、五、六组、丹参素组、丹参酚酸B组和丹参酚酸 A组，每组各10只，各组分别灌胃给予相应药物体积均为10ml/kg，空白对照组和模型组灌 胃给予等体积的〇. 5%羧甲基纤维钠，每日给药一次，连续给药4周。
[0098] 4.观察指标及检测方法
[0099] (1)末次给药后，禁食12h，称重，用3. 5%水合氯醛lOml/kg腹腔注射麻醉，心脏采 血，分离血清，_20°C冻存，然后取肝右叶相同部位肝组织二块，一块4%多聚甲醛固定，石蜡 包埋，切片，做HE染色。
[0100] (2)用生化分析仪测定血清肝功能指标，用免疫组化方法检测肝组织TGF-β 1的 表达情况。HE染色后对纤维增生程度进行分期，0级：无纤维化；1级：纤维结缔组织局限于 汇管区或有汇管区扩大，有向小叶扩大倾向；2级：纤维结缔组织进入小叶2/3及有1级同 样改变；3级：纤维结缔组织进入肝小叶中央静脉周围并有2级同样改变；4级：纤维结缔组 织在全小叶多区弥漫性增生，假小叶形成，并有3级同样改变。
[0101] 5.实验结果
[0102] (1)大鼠病理形态改变正常对照组大鼠肝脏具有正常的肝小叶结构，肝细胞形态 大小正常，肝小叶结构正常，无炎性细胞浸润。模型组大鼠肝细胞坏死及炎细胞浸润明显， 肝小叶结构正常，肝细胞索排列紊乱，小叶呈散在性坏死，胶原纤维增生明显，并可见厚薄 不一的纤维分隔包绕肝小叶，肝细胞再生和假小叶形成。各给药组肝脏组织内炎性细胞浸 润、肝细胞坏死和纤维组织增生程度均较模型组大鼠减轻，有部分纤维分割肝小叶，但未见 完整的假小叶形成，肝组织再生不明显。病理分级结果见表7。
[0103] 表7本发明对肝纤维化大鼠病理结果的影响
[0104]
[0105] (2)本发明组合物对大鼠肝脏TGF-β 1含量的影响，见