；模型组：肾小球萎 缩，肾小管明显扩张，近曲小管和远曲小管上皮细胞均有明显浊肿和变性发生，肾间质纤维 组织增生，并有慢性炎细胞浸润；各给药组：肾小球轻微充血，结构未见异常，肾小管有轻 微扩张，无明显炎细胞浸润。
[0056] 6.结论结果证实，各给药组对慢性肾衰均有较好地治疗作用，具体表现在改善血 肌酐、尿素氮、血清白蛋白和病理学特征方面。
[0057] 实验二、本发明组合物对肾小球肾炎的治疗作用
[0058] 1.实验动物SD大鼠250只，雌雄各半，体重180-220g，购自中国科学院上海实验 动物中心。新西兰白兔8只，购自西安市迪乐普生物资源开发有限公司。
[0059] 2.实验药物本发明10组组合物药物成分均有由大连美仑生物技术有限公司提 供，实验前均用〇. 5%羧甲基纤维钠配成4mg/ml溶液（大黄酸、大黄素、黄芪多糖、黄芪甲苷 组浓度和组合物十相同）。
[0060] 3.实验方法
[0061] (1)制备兔抗大鼠胸腺细胞血清取无菌的SD大鼠6只，处死，小心摘取大鼠胸腺 和肝脏。将肝脏用PBS缓冲液冲洗干净后制成肝粉待用；另将胸腺置于PBS缓冲液中，冲洗 2-3次，小心分离、去除其表面的淋巴结和血管，置200目不锈钢网筛上，用解剖针轻轻划破 胸腺游离出胸腺细胞，用PBS缓冲液冲洗，收集胸腺细胞悬液，离心10min，用PBS缓冲液重 制2 X IOVml的胸腺细胞悬液，按体积比1 :2混合胸腺细胞悬液和弗氏完全佐剂，充分混 匀，以混合后的悬液作为大鼠胸腺细胞免疫抗原液。将大鼠胸腺细胞免疫抗原液多点注射 于8只新西兰白兔背部皮下，每只兔子注射3ml。常规饲养2周后，兔耳缘静脉注射2 X IO7/ ml的胸腺细胞悬液，每只注射I. 5ml。7d后心脏抽取兔子血液，收集兔血清。用免疫扩散法 测抗兔抗大鼠胸腺细胞血清效价为I :160-1 :320。兔抗大鼠胸腺细胞血清于56°C、30min 灭活后，分别用同个体大鼠肝粉吸附以去除非特异性抗体，室温离心30min，弃去肝粉，收集 兔抗大鼠胸腺细胞血清，-20°C保存备用。
[0062] ⑵慢性肾小球肾炎大鼠模型的制备取健康SD大鼠，适应性喂养3天后，收集尿 液，检测尿蛋白，结果均为阴性。随即分为正常对照组、模型组、组合物一、组合物二、组合 物三、组合物四、组合物五组、组合物六组、组合物七组、组合物八组、组合物九组、组合物十 组，每组15只。除正常对照组大鼠尾静脉注射2ml生理盐水外，其余组大鼠一次性尾静脉 注射兔抗大鼠胸腺细胞血清2ml。
[0063] (3)给药方法及测定指标注射兔抗大鼠胸腺细胞血清6天后，组合物一至十组分 别灌胃给予相应药物l〇ml/kg，空白对照组和模型组灌胃给予等体积的0. 5%羧甲基纤维 钠溶液，每日给药一次，连续给药4周。末次给药24小时后，腹主动脉取血，分别测定IL-6、 IL-8和TNF- α水平，解剖肾脏，进行病理学考察。
[0064] 4.结果
[0065] (1)本发明对慢性肾小球肾炎大鼠血清IL-6、IL-8和TNF- α的影响
[0066] 表2本发明对慢性肾小球肾炎大鼠血清IL-6、IL-8和TNF- α的影响< f ±Ο
[0069] 注：各组与模型组比较*P〈0. 05广P〈0. 01
[0070] 结果表明：模型组大鼠血清IL-6、IL-8和TNF-α水平较正常对照组显著升高 (Ρ〈0. 01)，表明造模成功。本发明药物组大鼠血清IL-6、IL-8和TNF-α水平低于模型组 (P〈0. 05或P〈0. 01)，本发明药物组可降低IL-6含量水平，表明各给药组在一定程度上均可 以改善血清细胞因子水平。
[0071] (3)病理学检查正常对照组大鼠肾小球轮廓、结构清晰，形态正常；模型组大鼠肾 小管明显肿胀，有充血，管腔变窄，部分可见蛋白管形，肾小球体积增大，可见炎细胞浸润； 各给药组大鼠肾小球结构未见明显异常，肾小球毛细管有轻微肿胀，基底膜稍有增厚，炎细 胞浸润不明显。
[0072] 5.结论实验结果证实，各给药组对慢性肾小球肾炎大鼠均有较好地治疗作用，具 体表现在降低血清炎症因子水平和改善病理学特征方面。
[0073] 实验三、考察本发明药物对高血压肾病的治疗作用
[0074] 1.实验动物自发性高血压大鼠120只，雌雄各半，体重180_220g，购自中国科学院 上海实验动物中心。
[0075] 2.实验药物本发明10组药物组合物成分均有由大连美仑生物技术有限公司提 供，实验前均用〇. 5%羧甲基纤维钠配成4mg/ml溶液（大黄酸、大黄素、黄芪多糖、黄芪甲苷 组浓度和组合物十相同）。
[0076] 3.实验方法
[0077] 待测得自发性高血压大鼠尿微量白蛋白为20_200mg/L时为自发性高血压肾病模 型复制成功，剔除不合格大鼠，随机分为组合物一至十组，另取10只做为对照组。各给药组 灌胃给予相应药物0. 5ml/10g，对照组给予等体积的羧甲基纤维钠，每天给药一次，连续给 药4周。
[0078] 4.检测指标
[0079] 4. 1测定血压。给药前，测定大鼠清醒状态下的尾静脉收缩压，实验结束时，再次测 定大鼠尾静脉的收缩压，且每次测三次求平均值。
[0080] 4. 2测定各组大鼠尿液中尿微量白蛋白、尿02微球蛋白。实验结束前收集12h尿 液，收集尿液期间禁食，不禁水。
[0081] 4. 3测定血液中血肌酐和尿素氮的含量。实验结束时心脏取血，用济南汉方医疗器 械有限公司生产的全自动生化分析仪测定血肌酐和尿素氮。
[0082] 5实验结果
[0083] 5. 1组合物对自发性高血压肾病大鼠血压的影响，见表3。
[0084] 表3本发明组合物对实验前后自发性高血压肾病大鼠血压的影响（Γ 士S)
[0086] 注：与对照组比较 *P < 0· 05 **P < 0· 01
[0087] 实验结果表明：实验结束时，各给药组大鼠血压与对照组相比明显降低，且有显著 性差异（p〈0. 01)。表明本发明药物组合物对原发性高血压肾病大鼠的血压有一定降低作 用。
[0088] 5. 2本发明对原发性高血压肾病大鼠尿液中尿微量白蛋白、尿@2微球蛋白含量的 影响，见表4。
[0089] 表4对高血压肾病大鼠尿液尿微量白蛋白、尿β2微球蛋白含量的影响:(JdrS):
[0090]
[0091] 注：与对照组比较*P < 0. 05 < 0. 01
[0092] 实验结果表明：本发明药物组合物可明显减低高血压肾病大鼠尿微量白蛋白和尿 β 2微球蛋白的含量，与空白组比较有显著性差异（p〈0. 01)。表明本发明药物组合物对原 发性高血压肾病大鼠的肾脏有一定保护作用。
[0093] 5. 3本发明对原发性高血压肾病大鼠血液中血肌酐和尿素氮的影响，见表5。
[0094] 表5本发明对原发性高血压肾病大鼠血肌酐和尿素氮的影响（f 士S)
[0097] 注：与模型组比较 *P < 0· 05 < 0· 01
[0098] 结果表明：本发明药物组合物可明显减低高血压肾病大鼠血肌酐和尿素氮的含 量，与空白组比较有显著性差异（P〈〇. 01)。表明本发明药物组合物对原发性高血压肾病大 鼠的肾脏有一定保护作用。
[0099] 实验四、考察本发明药物的抗肿瘤作用
[0100] 1.实验动物BALB/C小白鼠120只，雌雄各半，体重18-22g，购自中国科学院上海 实验动物中心。
[0101] 2.实验药物本发明10组药物组合物成分均有由大连美仑生物技术有限公司提 供，实验前均用〇. 5%羧甲基纤维钠配成4mg/ml溶液（大黄酸、大黄素、黄芪多糖、黄芪甲苷 组浓度和组合物十相同）。鼠肝癌细胞株H22由陕西中医学院药理学研究室惠赠。
[0102] 3.实验方法
[0103] 建立肿瘤模型自种鼠腹腔内小心抽出接种H22细胞株的腹水，转移接种到另一只 小鼠腹腔，传代三次。取接种H22细胞株并传代三次的小鼠，无菌条件下用5ml注射器抽吸 出l-2ml牛奶状、较粘稠的腹水，先用0. 4%苔盼蓝染色，细胞计数板，计活细胞率>90%，然 后以灭菌D-Hanks液稀释调整肿瘤细胞浓度为I. 0 X IO7个/ml。在其余小鼠右前肢腋窝和 皮下接种调好浓度的肿瘤细胞，〇. 15ml/只。
[0104] 给药方法建立模型72小时后，将实体瘤小鼠随机分为10组，即羧甲基纤维钠对照 组、组合物一、组合物二、组合物三、组合物四、组合物五组、组合物六、组合物八、组合物九 组、组合物十组，每组10只。各给药组灌胃给于相应药物0. 5ml/10g，羧甲基纤维钠对照组 给予等体积的羧甲基纤维钠，每天一次，连续给药2周。每天记录小鼠死亡数，并称量不同 给药组小鼠体重。