一种治疗子宫肌瘤的中药组合物及其制备方法和用图_4

文档序号:9295079阅读:来源:国知局
吡喃葡萄糖式(methyl- -D-glucopyranoside),色氨酸(tryptophane),葡 萄糖(glucose)及庶糖(sucrose)。还含绿原素(chlorogenic acid),3-咖啡酰奎宁酸 (3-caffeoylquinic acid),3_ 对香豆酷查宁酸(3-p-coumaroylquinic acid),3_ 阿魏酷 奎宁酸(3-feruloylquinic acid),甘油三油酸酯(triolein)。又从桃仁中分离到2种蛋 白质成分PR-A和PR-B,有强的抗炎镇痛药理活性。桃仁油富含不饱和脂肪酸,主要为油酸 (oleic acid)和亚油酸(linoleic acid)。
[0055] 鸡内金:性味:味甘;性平。归经:脾;胃;肾;膀胱经。功效:健脾消食;涩精止 遗;消癥化石。主治:消化不良;饮食积滞;呕吐反胃;泄泻下痢;小儿疳积;遗精;遗尿; 小便频数;泌尿系结石及胆结石;癥瘕经闭;喉痹乳蛾;牙疳口疮。用法用量:内服:煎汤, 3-10g;研末,每次1.5-3g;或入丸、散。外用:适量,研末调敷或生贴。药理作用:1.对人 体胃功能的影响。2.加速放射性锶的排泄。3.对小鼠肠胃推进功能的影响。4.抗癌作 用:体外试验;鸡内金有抑制肿瘤细胞的作用。口服本品后,胃液分泌量、酸度和消化能力 均提高,胃运动加强,排空率加快,催泌作用甚至强于肉粉,作用途经似是经消化吸收后进 入血液内,通过体液因素而兴奋胃壁的神经肌肉装置。化学成分:鸡内金含胃激素(胃激素 ventriculin),角蛋白(keratin),微量胃蛋白酶(pepsin),淀粉酶(diastase),多种维生 素。出生4-8星期的小鸡砂囊内膜还含有胆汁三烯(bilatriene)和胆绿素的黄色衍生物, 并含赖氨酸(lysaine),组氨酸(histidine),精氨酸(arginine),谷氨酸(glutamic acid) 天冬氨酸(aspartic acid),亮氨酸(leucine),苏氨酸(threonine),丝氨酸(serine),甘 氨酸(glycine),丙氨酸(methionine),异亮氨酸(isoleucine),酿氨酸(tyrosine),苯丙 氨酸(phenylalanine),脯氨酸(proline),色氨酸(tryptophane)等18种氨基酸及错、?丐、 铬、钴、铜、铁、镁、猛、钥、铅、锌等微量元素。
[0056]方中生黄芪、生山药益气健脾、扶助正气为君,生三棱、生莪术、当归、生桃仁活血 化瘀、消癥散结为臣,知母凉润为佐,既可济生芪之热,又可滋肾水之枯,生鸡内金健脾益 胃、软坚散结为使,全方体现了扶正袪邪兼顾,消癥瘕而不伤正,益气血而不碍癥瘕消除的 宗旨。在上述组方原则的基础上,所属领域技术人员能根据常识能进行常规的替换、减少 和/或增加。
[0057]实施例(根据需要补充)
[0058] 实施例1
[0059] 生黄芪30、生山药30、当归12、三棱10、莪术10、知母6、桃仁4. 5、鸡内金3。
[0060] 取以上原料药,去除杂质和非药用部分,提取挥发油,挥发油用环糊精包合,备 用。再加水煎煮2次,每次煎煮2小时,合并煎液,滤过,煎液浓缩至40-60°C测相对密度为 1. 05-1. 15的清膏,待冷至室温,加乙醇使含醇量为50-70%,搅匀,冷藏24-72小时,取上清 液,过滤,滤液回收乙醇,浓缩至45-60°C测相对密度1. 20-1. 40的浸膏,取浸膏和挥发油, 经过常规工序直接或间接加入药学上可接受的赋型剂制成胶囊剂。
[0061] 实施例2
[0062] 生黄芪20、生山药15、当归12、生三棱5、生莪术10、知母6、生桃仁9、生鸡内金5。
[0063] 取以上原料药,去除杂质和非药用部分,加水煎煮3次,每次煎煮1. 5小时,合并煎 液,滤过,煎液浓缩至40-60°C测相对密度为1.05-1. 15的清膏,待冷至室温,加乙醇使含醇 量为50-70%,搅匀,冷藏24-72小时,取上清液,过滤,滤液回收乙醇,浓缩至45-60°C测相 对密度1. 20-1. 40的浸膏,取浸膏,经过常规工序直接或间接加入药学上可接受的赋型剂 制成口服液。
[0064] 实施例3
[0065] 黄芪14、山药14、当归8、生三棱10、生莪术10、知母12、桃仁9、鸡内金10。
[0066] 取以上原料药,去除杂质和非药用部分,提取挥发油,备用。再加水煎煮3次,每 次煎煮1. 5小时,合并煎液,滤过,煎液浓缩至40-60°C测相对密度为1. 05-1. 15的清膏,待 冷至室温,加乙醇使含醇量为50-70%,搅匀,冷藏24-72小时,取上清液,过滤,滤液回收乙 醇,浓缩至45-60°C测相对密度1. 20-1. 40的浸膏,取浸膏和挥发油,经过常规工序直接或 间接加入药学上可接受的赋型剂制成片剂。
[0067]实施例4
[0068] 生黄芪30、山药15、当归8、三棱5、莪术3、知母6、生桃仁9、生鸡内金3。
[0069] 取上述本发明中药组合物原料药,用5倍量60%乙醇加热提取3次,每次1小时, 滤过,合并滤液;减压回收乙醇,浓缩至相对密度为1. 15~1. 20流浸膏;加水制成每lml含 相当于〇. 5g药材的溶液,搅匀,静置48小时,滤过;滤液通过大孔树脂柱,先用水洗脱;弃 去水洗液,再用70%乙醇洗脱,合并乙醇溶液;减压浓缩,真空干燥,即得本发明中药组合 物的干浸膏;取本发明中药组合物的干浸膏,加入常规辅料,按常规制剂工艺或步骤,制成 注射剂。
[0070] 实施例5
[0071] 黄芪10、山药30、当归12、三棱10、莪术3、知母12、桃仁4. 5、鸡内金5。
[0072] 取上述本发明中药组合物原料药,用7倍量60%乙醇加热提取2次,每次2小时, 滤过,合并滤液;减压回收乙醇,浓缩至相对密度为1. 15~1. 20流浸膏;加水制成每lml 含相当于〇. 5g药材的溶液,搅匀,静置24小时,滤过;滤液通过大孔树脂柱,先用水洗脱; 弃去水洗液,再用40%乙醇洗脱,合并乙醇溶液;减压浓缩,真空干燥,即得干浸膏;取干浸 膏,加入常规辅料,按常规制剂工艺或步骤,制成颗粒剂。
[0073] 实施例6
[0074] 黄芪18、山药16、当归10、三棱8、莪术7、知母10、桃仁7、鸡内金7
[0075] 取以上原料药,去除杂质和非药用部分,加水煎煮3次,每次煎煮1. 5小时,合并煎 液,滤过,煎液浓缩至40_60°C测相对密度为1.05-1. 15的清膏,待冷至室温,加乙醇使含醇 量为50-70%,搅匀,冷藏24-72小时,取上清液,过滤,滤液回收乙醇,浓缩至45-60°C测相 对密度1. 20-1. 40的浸膏,取浸膏,经过常规工序直接或间接加入药学上可接受的赋型剂 制成口服液。
[0076] 实施例7
[0077] 生黄芪15、生山药15、当归10、生三棱9、生莪术9、知母10、生桃仁9、生鸡内金10
[0078] 取以上原料药,去除杂质和非药用部分,加水煎煮3次,每次煎煮1. 5小时,合并煎 液,滤过,煎液浓缩至45-60°C测相对密度1. 20-1. 40的浸膏,取浸膏,经过常规工序直接或 间接加入药学上可接受的赋型剂制成口服液。
[0079] 实施例8
[0080] 黄芪22、山药20、当10归、三棱7、莪术6、知母8、桃仁6、鸡内金6
[0081] 取上述本发明中药组合物原料药,用7倍量60%乙醇加热提取2次,每次2小时, 滤过,合并滤液;减压回收乙醇,浓缩至相对密度为1. 15~1. 20流浸膏;加水制成每lml 含相当于〇. 5g药材的溶液,搅匀,静置24小时,滤过;滤液通过大孔树脂柱,先用水洗脱; 弃去水洗液,再用40%乙醇洗脱,合并乙醇溶液;减压浓缩,真空干燥,即得干浸膏;取干浸 膏,加入常规辅料,按常规制剂工艺或步骤,制成片剂。
[0082] 实验例
[0083] 实验例1
[0084] 本发明片剂(实施例3)对豚鼠子宫平滑肌雌、孕激素受体(ER、PR)表达的影响
[0085]免疫组织化学染色显示,模型组豚鼠子宫平滑肌细胞ER和PR的阳性表达率明显 高于正常豚鼠。本发明片剂和米非司酮组与模型组比较,平滑肌细胞ER和PR阳性表达显 著下降,其中米非司酮组和本发明片剂高剂量组下降最为明显。见表1。
[0086] 表1.本发明片剂对实验性子宫肌瘤豚鼠子宫平滑肌ER、PR阳性表达率的影响
[0087]
[0088] A :与模型组比较P < 0. 05, %与正常组比较P < 0. 05
[0089] 实验例2 :本发明口服液(实施例6)对大鼠子宫病理组织学变化的影响
[0090] HE染色显示正常组大鼠子宫平滑肌细胞细长,排列整齐,细胞核呈长梭形或杆状。 模型组大鼠子宫内膜腺体大量增生,子宫肌层增厚,出现多发性、局灶性增生,肌纤维纵横 交错界限不清,核较密集肥大,呈活跃的现象,子宫腔内充满分泌液,子宫体显著增大。模型 组大鼠子宫平滑肌层病理改变与人子宫肌瘤病理组织学结构类似。但局灶增生团块周围未 见明显的包膜形成。米非司酮和本发明片剂7.5g生药/ kg剂量组动物子宫内膜层腺体增 生程度、子宫肌层增生的现象以及子宫体增大等变化小于模型组。
[0091] 实验例3:
[0092] 本发明注射液(实施例4)对人乳腺癌细胞的抑制率及IC50值
[0093] 1、实验材料:96孔板购自Costar公司;RMPI1640培养基购自Gibco公司;DMEM培 养基购自Gibco公司;McCoy' s5A培养基购自SIGMA公司;新生牛血清购自杭州四季青公 司;喔唑蓝(MTT)购自Amresco公司;DMS0购自Amresco公司。
[0094] 2、实验仪器:超净工作台,苏州净化型号SW-CJ-1FD ;C02培养箱SANYO型号: XD-101 ;酶标仪 BIO-RAD Model NO. 550Serial N0. 16971。
[0095] 3、受试药物及处理方法:实施例4注射液的有效部位,采用DMS0溶解,给药前用完 全培养基配制成所需浓度。阳性对照药物紫杉醇注射液(厂家:海口市制药厂有限公司;批 号:080502)。
[0096] 4、肿瘤细胞株:人卵巢癌细胞A2780、人子宫内膜癌细胞由南京凯基生物科技发 展有限公司提供。
[0097] 二、实验方法
[0098] 实验步骤为:细胞消化、计数、制成浓度为5 X104个/ ml的细
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